荧光标记聚合物胶束在实验性肝癌小鼠体内的靶向效应

目的:证实聚乙二醇-聚乳酸-聚碳酸酯两亲性共聚物胶束的靶向效应,为肿瘤的靶向治疗提供理论依据.方法:将荧光显像剂罗丹明与聚乙二醇-聚乳酸-聚碳酸酯两亲性共聚物胶束键合,通过罗丹明跟踪检测聚乙二醇-聚乳酸-聚碳酸酯两亲性共聚物(罗丹明胶束)在荷H22肝癌的小鼠体内分布情况.荷H22肝癌小鼠随机分为罗丹明胶束注射组和游离罗...     

紫杉醇、顺铂及康莱特对Lewis肺癌细胞株抑制作用的实验研究

目的:研究紫杉醇、顺铂、康莱特单用及联用对Lewis肺癌细胞株的增殖抑制作用。方法:以不同浓度的紫杉醇、顺铂、康莱特单独及联合处理Lewis肺癌细胞株,24小时后MTT法测定细胞生长抑制作用,应用金氏公式进行联合用药分析。结果:紫杉醇、顺铂、康莱特对Lewis肺癌细胞均有不同程度的增殖抑制作用(P<0.05),但当康莱特的浓度增加到20μl/ml时抑制率不再增加,因此联合用药组中康莱特浓度固定为20μl/ml。作用24小时后紫杉醇、顺铂的IC50分别是15.42、2.59。两种或三种药物联用后对Lewis肺癌细胞株的抑制率显著增加,明显高于单一用药组(P<0.05),其中6μg/ml的紫杉醇与15μl/ml的康莱特联用时,其抑制率接近于12μg/ml的紫杉醇单用药;2μg/ml的顺铂与15μl/ml的康莱特联用时,其抑制率接近于4μg/ml的顺铂单用药,但紫杉醇联用顺铂组与三药联用组的作用差异无显著性(P>0.05)。结论:紫杉醇、顺铂能明显抑制Lewis肺癌细胞的增殖,与康莱特联合用药时可产生较好的协同作用,并且能够减少常规化疗药物的用量。     

磁性聚乳酸-羟基乙酸氧化酚砷纳米微粒的制备及其特性

目的:研究磁性聚乳酸-羟基乙酸氧化酚砷纳米微粒(M-PLGA-PAO-NP)的制备工艺,并对纳米粒子进行评价.方法:运用超声乳化-溶剂挥发法制备磁性聚乳酸-羟基乙酸氧化酚砷纳米微粒,通过透射电镜(TEM)观察微粒形态,振动样品磁强计(VSM)确证纳米微粒磁性的存在,并对纳米微粒的平均粒径、载药量、包封率等进行评价.结果:纳米微粒外观呈规则球形,粒径在140～500 nm占总数的80%,载药量为3.2%,包封率为34.2%,药物磁性较好.结论:获得了较满意的磁性聚乳酸-羟基乙酸氧化酚砷纳米微粒制备工艺,其过程简单,粒子性状符合要求.     

吉西他滨纳米载药囊泡控释行为的研究

目的 制备吉西他滨(Gemcitabine)纳米载药囊泡,对其表面形态、粒径分布、微粒结构、体外释放等性能进行评估.方法 以两亲性共聚物聚乙二醇-聚乳酸(PEG-PDLLA)为原料,采用双乳化法制备载药囊泡,Gemcitabine为模型药物.通过电子显微镜观察纳米载药囊泡的形态和结构,用紫外可见分光光度计测定囊泡的载药量、包封率和体外释放量.结果 纳米载药囊泡呈球形或近似球形,具有明显的空心结构,平均粒径为200.6 nm,载药量和包封率分别为4.14%和20.54%,体外释放实验表明该囊泡具有良好的控释特性.结论 以PEG-PDLLA为原料制备的Gemcitabine纳米载药囊泡具有良好的控释性能,为胰腺癌动物体内实验研究提供了可靠的依据.     

两亲性聚合物聚乙二醇单甲醚-聚乳酸-β-环糊精的合成、表征及载药性能

以丁二酸酐为连接臂,将不同相对分子质量的聚乙二醇单甲醚-聚乳酸（MPEG-PLA）分别连接到N-(2-氨乙基)胺基-β-环糊精上,制备得4个未见文献报道的不同相对分子质量的两亲性聚乙二醇单甲醚-聚乳酸-β-环糊精(MPEG-PLA-β-CD)。采用FT-IR与¹H NMR对其结构进行表征,采用芘荧光探针光谱法测定其临界胶束浓度(critical micelle concentration,CMC)。并以布洛芬为模型药物初步考察4个聚合物的载药性能。其中MPEG 2K-PLA 6.6K-β-CD具有较小的CMC和较高的载药能力,有望成为良好的药物载体材料。     

键合多西紫杉醇的聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物对前列腺癌PC-3细胞增殖抑制作用

目的研究键合多西紫杉醇(TSD)的聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物(PLA-PEG/TSD)对人前列腺癌细胞PC-3的增殖抑制作用。方法 TSD、PLA-PEG/TSD和聚乳酸-聚乙二醇(PLA-PEG)作用于PC-3细胞,应用MTT法检测各组药物在不同浓度下作用24、48、72 h后PC-3细胞的抑制率,应用流式细胞仪检测PC-3细胞周期变化,应用电镜观察PC-3细胞凋亡的形态学特征。结果 PLA-PEG/TSD和TSD比较,对PC-3细胞的增殖抑制作用相似(P>0.05),并且两组均具有浓度和时间依赖性,随药物浓度和作用时间的增加,抑制率逐渐增高。PLA-PEG和对照组比较,对PC-3细胞的增殖没有影响(P>0.05)。流式细胞仪检测结果显示:PLA-PEG/TSD和TSD两组PC-3细胞明显阻滞于G2/M期,两组相比较差异无统计学意义(P>0.05),与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。电镜观察:PLA-PEG/TSD和TSD两组PC-3细胞凋亡的形态学特征一致。结论 PLA-PEG/TSD与TSD相比较,抑制PC-3细胞增殖的特点和机制相似,PLA-PEG/TSD在治疗前列腺癌方面有研究价值。     

槲皮素对人肺癌细胞和小鼠Lewis肺癌移植瘤细胞增殖的抑制作用及机制探讨

目的：研究槲皮素对人肺腺癌细胞株A549和小鼠Lewis肺癌移植瘤细胞增殖的抑制作用，并探讨其可能的机制。方法：①以不同剂量的槲皮素作用于人肺腺癌细胞株A549，用噻唑蓝(MTT)试验观察槲皮素对人肺癌细胞株增殖的影响。②将移植有Lewis肺癌的ICR小鼠随机分为模型对照组、槲皮素组及顺铂组，均采取腹腔内注射方式给药。给药结束后，测定各组小鼠的瘤重，计算抑瘤率；用免疫组化方法测定肿瘤的增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平。结果：①槲皮素对3．549细胞增殖有明显的抑制作用，对细胞增殖的抑制率呈剂量效应关系。②槲皮素对小鼠Lewis肺癌移植瘤生长有明显的抑制作用，并显著下调小鼠Lewis肺癌移植瘤的PCNA表达水平。结论：槲皮素对人肺腺癌细胞A549和小鼠Lewis肺癌移植瘤细胞增殖有明显的抑制作用，其机制可能与抑制PCNA蛋白的表达有关。     

医用纳米控释系统在肿瘤治疗中的应用

1 引言 纳米控释系统包括纳米粒子(nanoparticles)和纳米胶囊(nanocapsules).它们是粒径10nm到500nm之间的固状胶态粒子,活性组分(药物、生物活性材料等)通过溶解、包裹作用位于粒子内部,或者通过吸附、附着作用位于粒子表面.制备纳米控释系统的载体材料都是高分子化合物,以合成的可生物降解的聚合物体系和天然的大分子体系为主.前者如聚氰基丙烯酸烷基酯、聚乳酸-聚乙醇酸共聚物等,后者如天然的蛋白、明胶、多糖等.制备纳米控释系统的方法主要有以不同单体通过聚合反应制备纳米微粒的乳液聚合和界面聚合技术;以及利用高分子聚合物采用超声乳化-溶剂挥发法制备纳米微粒的技术[1].     

紫杉醇mPEG-PLGA纳米粒的制备及其抗肿瘤作用研究

目的 探讨负载紫杉醇的聚乙二醇单甲醚-聚乳酸-乙醇酸(mPEG-PLGA)亲性嵌段共聚物纳米粒及其对肝癌H22细胞的体内抗肿瘤作用.方法 采用界面沉积法制备紫杉醇mPEG-PLGA纳米粒(Ptx-Nps);应用透射电镜表征纳米粒的形态;粒径分析仪测其粒径及Zeta电位;研究mPEG在共聚物中的含量及紫杉醇投药量对纳米粒的影响;考察纳米粒对昆明小鼠肝癌H22的疗效和过敏实验.结果 Ptx-Nps成球型,粒径为纳米级(＜120 nm),均带负电荷(适合于静脉注射),与紫杉醇注射液(Ptx)相比,Ptx-Nps对肝癌H22的抑制作用比Ptx好.结论 采用界面沉积法制备的纳米粒在紫杉醇投药量为1%,mPEG含量为4%时包封率最佳,本研究为开发紫杉醇新型静脉注射制剂提供了实验依据,mPEG-PLGA共聚物可成为抗肿瘤药物的理想新型载体.     

塞来昔布对Lewis肺癌细胞增殖及移植瘤的抑制作用

目的:探讨选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对Lewis肺癌细胞株增殖及小鼠皮下移植瘤的影响。方法:常规培养Lewis肺癌细胞,实验分为对照组和塞来昔布用药组。MTT法检测细胞增殖水平,损伤修复实验检测细胞迁移能力;将Lewis肺癌细胞接种于12只C57BL/6小鼠皮下,对照组隔日腹腔注射生理盐水;塞来昔布用药组隔日腹腔注射塞来昔布30 mg/kg,24 d后处死,计算抑瘤率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测移植瘤组织中VEGF mRNA表达水平,同时酶联免疫检测小鼠血清中MMP-9浓度。结果:塞来昔布对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用呈时间-剂量依赖性效应(P<0.05)。20μmol/L塞来昔布组细胞迁移速度(0.37±0.03)μm/h明显减慢,与对照组(3.17±0.22)μm/h相比具有显著性差异(P<0.01);在体实验显示,塞来昔布具有明显的抑制Lewis肺癌移植瘤增殖的作用,同时能抑制移植瘤组织中VEGF表达、降低血清MMP-9浓度。结论:塞来昔布可以显著抑制Lewis肺癌细胞的增殖与迁移能力,且对Lewis肺癌移植瘤有明显抑制作用。     

PEG修饰的大黄酸偶联物的合成及紫杉醇纳米胶束的制备

抗肿瘤药物紫杉醇(PTX)在水中的溶解度低,其临床制剂Taxol^®所使用的增溶剂Cremophor EL毒副作用大,影响其临床治疗效果。本研究设计PEG修饰羧甲基壳聚糖并接枝大黄酸,合成了两亲性mPEG-羧甲基壳聚糖-大黄酸(CRmP)偶联物,作为PTX的递送载体材料,并制备了载PTX的CRmP纳米胶束(PTX/CRmP纳米胶束)。利用红外光谱(FT-IR)和核磁共振氢谱(¹H NMR)对CRmP偶联物进行结构表征。通过动态激光粒径仪(DLS)和原子力显微镜(AFM)对PTX/CRmP纳米胶束的粒径与形态进行表征。通过MTT法评估CRmP偶联物和PTX/CRmP纳米胶束对MCF-7细胞的细胞毒性,结果显示,CRmP偶联物具有良好的安全性;随给药时间的延长,PTX/CRmP纳米胶束在相同药物浓度下表现出优于Taxol^®的体外抗肿瘤活性。     

天南星抗肿瘤的初步研究

目的观察天南星的抗肿瘤作用。方法体内实验:建立小鼠H22肝癌皮下移植模型,灌胃给予天南星粉,2次/d,监测小鼠体质量,检测肿瘤体积、质量以及免疫器官指数,评价天南星对肿瘤生长的影响;体外实验:采用MTT法测定天南星水煎液对lewis肺癌细胞生长的影响。结果体内试验:在本实验剂量下(100g/L),与对照组比较,天南星灌胃可使肿瘤生长减慢,抑瘤率为34.7%,给药期间不影响小鼠生长状态,胸腺指数和肝脏指数略微降低,脾脏指数升高;体外实验:天南星水煎液在实验剂量下对lewis肺癌细胞生长无影响。结论天南星有抗肿瘤作用,其抗肿瘤作用不是直接细胞毒作用。     

内折香茶菜素D抗肿瘤作用的研究

目的:研究内折香茶菜素D(以下简称内折素D)对动物移植性肿瘤的作用以及对机体免疫状态的影响。方法:以动物移植性肿瘤艾氏腹水癌(ECA),肉瘤S180,肝癌(HCA),Lewis肺癌为模型,以5_Fu为阳性对照组,以生理盐水为阴性对照组,观察12.5 mg/kg和25 mg/kg内折素D的抗肿瘤作用,并采用小鼠溶血素实验和小鼠迟发性变态反应实验观察内折素D对机体免疫状态的影响。结果:内折素D与阴性对照组相比在体外对ECA肿瘤细胞有较强的杀伤力,在体内对S180实体型和腹水型肿瘤,HCA实体型和腹水型肿瘤以及Lewis肺癌实体型肿瘤均有较强的抑制作用,与阳性对照组相比,对机体免疫状态无明显影响。结论:内折素D具有较强的抗肿瘤作用,且对机体免疫状态无明显影响。     

TGF-β_1抑制剂灯盏花素对肿瘤诱导的小鼠免疫抑制的逆转作用

目的:观察灯盏花素对肿瘤诱导的小鼠免疫抑制的影响。方法:小鼠脾脏细胞体外培养观察灯盏花素对淋巴细胞增殖和淋巴细胞因子分泌的的影响;lewis肺癌荷瘤小鼠迟发型变态反应、血清淋巴细胞因子水平及CD8+T细胞对lewis肺癌的细胞毒作用检测灯盏花素对小鼠免疫抑制的逆转作用。结果:灯盏花素体外对刀豆蛋白(ConA)诱导的小鼠脾脏细胞增殖有增强作用,能抑制转化生长因子β1(TGF-β1)和白细胞介素4(IL-4),促进的干扰素λ(IFN-λ)和白细胞介素2(IL-2)。体内灯盏花素能逆转荷瘤小鼠迟发型变态反应、血清淋巴细胞因子水平及CD8+T细胞对lewis肺癌的无能作用,并一定程度抑制肿瘤生长。结论:灯盏花素作为TGF-β1抑制剂对肿瘤诱导的小鼠免疫抑制有逆转作用。     

金荞麦Fr4对小鼠lewis肺癌细胞MMP-9、TIMP-1蛋白表达的影响

目的 探讨金荞麦提取物Fr4对小鼠lewis肺癌组织基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase，MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitors of metallproteinase，TIMP-1)蛋白表达的影响。方法 利用C57／BL6小鼠移植性肿瘤lewis肺癌模型，观察金荞麦Fr4对小鼠lewis肺癌生长的影响；利用免疫组织化学SP法研究金荞麦Fr4对lewis肺癌中MMP-9、TIMP-1表达的影响。结果 金荞麦Fr4在400mg／kg剂量时可明显抑制C57／BL，6小鼠lewis肺癌生长；金荞麦Fr4可下调MMP-9的表达，但不影响TIMP-1的活性。结论 金荞麦提取物Fr4具有明显的抗肿瘤作用，分子机制可能与下调MMP-9的表达有关。     

包载多西他赛的聚合物胶束抑制小鼠乳腺癌转移作用研究

目的 考察包载多西他赛的聚合物胶束抑制小鼠乳腺癌转移效果。方法 采用薄膜分散法制备两种包载多西他赛（docetaxel,DTX）的聚合物胶束：普通胶束（DSPE-mPEG₂₀₀₀-Micelles,DM）和含聚乙二醇维生素E琥珀酸酯（D-α-tocopheryl polyethylene glycol 1000 succinate,TPGS₁₀₀₀）的聚合物胶束（TPGS₁₀₀₀/DSPE-mPEG₂₀₀₀-Micelles,TDM）。评价胶束包封率、载药量、粒径和zeta电位。采用尾静脉注射4T1/Luc细胞建立小鼠肺转移模型,评价胶束治疗后的肺部肿瘤生物发光强度和结节数量。结果 所制备的载多西他赛聚合物胶束包封率>85%,载药量约为3%,粒径约为20 nm,zeta电位约为 -4 mV,且TDM包封率和载药量更高,粒径更小。两种聚合物胶束均可降低乳腺癌肺转移模型小鼠肺部肿瘤生物发光强度、减少肺部结节数量,且TDM作用更强。结论 含TPGS₁₀₀₀的包载多西他赛的聚合物胶束TDM具有较好的抑制小鼠乳腺癌转移的作用。     

灯盏花素对小鼠lewis肺癌放射治疗致机体损害的保护作用

目的:观察灯盏花素对小鼠lewis肺癌放射治疗致机体损害的保护作用。方法:将lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠皮下和肺,成瘤后采用灯盏花素联合放疗治疗小鼠,观察肿瘤大小、外周血象、骨髓细胞数、脾细胞中细胞毒T淋巴细胞(CTL)活性、及小鼠存活时间。结果:与未治疗组比较,治疗组均有不同比例的肿瘤生长减慢,但仅单独放疗组骨髓细胞和外周血细胞数减少、脾细胞中CTL活性降低。实验结束时,灯盏花素联合放疗治疗小鼠存活时间最长,单独放疗组虽比未治疗组小鼠存活时间稍长,但无统计学差异。结论:单独放疗对荷瘤小鼠生命延长无实际意义,灯盏花素能保护放疗对机体的损害,与放疗有协同治疗肿瘤作用。     

皂角刺抗肿瘤的初步研究

目的观察皂角刺水煎液的体内外抗肿瘤作用。方法体内实验:建立小鼠背部皮下移植性实体肿瘤H22荷瘤动物模型,灌胃给药后测定肿瘤体积、质量及免疫器官指数;体外实验:用MTT法测定皂角刺对小鼠lewis肺癌细胞的影响。结果体内实验:在本实验剂量下(0.3mL/g),与模型对照组比较,皂角刺组肿瘤生长减缓,抑瘤率为38.37%,胸腺指数、脾脏指数均增高;体外实验:实验所用浓度的皂角刺水煎液呈剂量依赖性抑制小鼠lewis肺癌细胞生长。结论皂角刺有一定抗肿瘤作用,其机制可能与细胞毒和提高机体免疫作用有关。     

琼脂扩散盒法检测抗癌药物对人癌克隆原细胞集落形成的影响

本文采用改良琼脂扩散盒法测定冬凌草甲素、高三尖杉酯碱及三种已知抗癌药物环磷酰胺、5-氟脲嘧啶和顺铂对人癌克隆原细胞集落形成的影响。初步显示高三尖杉酯碱对肺癌和乳腺癌、冬凌草甲素对肝癌可能有抑制作用。试验结果表明,采用本法进行抗癌药物活性测定较为稳定可靠,对需经代谢活化的药物也能作出合适的效果评价。     

透明质酸包裹的木犀草素胶束制备及其对小鼠肺癌移植瘤的抑制作用

目的:评估木犀草素胶束经透明质酸包裹后的肿瘤靶向性.方法:采用逆相蒸发法制备透明质酸包裹的木犀草素胶束(HA-LE-MC),以包封率和粒径为优化指标对处方进行筛选,测定其表观形态、载药量、包封率和粒径,最后进行了肺癌移植瘤小鼠活体成像实验与体内抗肿瘤实验.结果:泊洛沙姆407(F127)与双十烷基二甲基溴化铵(DDAB...