从卡介苗提取的核糖体蛋白的免疫学性质

作者用Nagai等的方法从卡介苗(BCG)的培养滤液中提取核糖体和核糖体亚单位蛋白。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析发现,在70S核糖体和30S亚单位中有一条65KDa蛋白带,为热休克蛋白(HSP)和类S1蛋白。这两种蛋白的分子量均为65KDa,与大肠杆菌的S1蛋白以及耻垢分枝杆菌的类S1蛋白的分子量相似。已知大肠杆菌S1蛋白能使信使RNA(mRNA)准确地与核糖体结合,耻垢分枝杆菌类S1蛋白与多聚尿苷     

基因研究

美国耶鲁大学的Thomas Steitz教授等利用X-射线照射核糖体晶体后,产生的愆射图象去获取其分子的至今为止最精确的三维图型。核糖体晶体是细胞内蛋白质的制造工厂。此项研究发表于8月10日版的《科学》杂志上。该研究小组已获得了核糖体最重要部分的分子结构,显示其大小为240亿分之一的细节。这个图像支持了核糖体的一个组成部分RNA的最重要的自我复制分子之一,组成核糖体的RNA和蛋白质二者形成复杂的结构,它能“读取”细胞内复制的遗传密码,并将这些信息转变成有利用价值的分子。研究者已经绘制出核糖体中能催化化学原材料间聚合反应的一部分。该结构能使我们进一步认识到核糖体在早期就可能已经进化,作为一个生产短链蛋白的“机器”。     

金黄色葡萄球菌的API-STAPH生化鉴定及核糖体分型分析

食源性致病金黄色葡萄球菌的筛查和检测备受关注,传统的生化鉴定方法存在耗时长和灵敏度低等缺陷,本文以原核生物核糖体小亚基为主要研究对象,利用16S核糖体RNA测序和核糖体基因分型技术对46株金黄色葡萄球菌进行了鉴定和分型,结果表明:API-STAPH生化方法鉴定的准确率为93％,而分子生物学鉴定的准确率≥99％;全自动微生物核糖体基因分型系统将46株金黄色葡萄球菌分为22个Ribogroup.上述研究将食源性金黄色葡萄球菌的鉴定上升到“亚型”的高度,16S核糖体RNA测序和核糖体分型技术可为食源性致病菌的风险监测提供有力的技术支持.     

核糖体蛋白参与的核糖体生物合成在癌症中的研究

核糖体是由核糖核酸(RNA)和核糖体蛋白(RP)组装而成的大分子核糖核蛋白(RNP)复合物,在蛋白质生物合成中起关键作用。核糖体生物合成(RB)对调控细胞的呼吸至关重要,影响细胞的生长和增殖。本文主要以细胞质核糖体蛋白(CRP)和线粒体核糖体蛋白质(MRP)为切入点,介绍细胞内的核糖体生物合成过程,以及其在肿瘤发生发展中的异常调控。     

病毒性肝炎

甲型肝炎甲型肝炎病毒(HAV)的生物化学和生物物理特点HAV 是一种典型的肠道病毒,是微小RNA 病毒科成员之一。成熟的病毒颗粒直径约27nm,立体对称,由32个壳微体组成,其浮密度为1.33～1.34g/cm~3,沉降系数为156～160S。     

电离辐照损伤对小鼠脾脏组织核糖体信号通路的影响

目的从比较蛋白质组学的角度,分析电离辐照损伤组小鼠与正常组小鼠脾脏组织差异蛋白质的表达情况,对差异蛋白所涉及的信号通路进行分析,从而阐明电离辐照对小鼠脾脏组织的损伤机制。方法采用5 Gy ~(60)Coγ射线照射小鼠,构建小鼠电离辐照损伤模型,提取电离辐照组小鼠和正常组小鼠的脾脏组织,利用ITRAQ联合LC-MS/MS技术,筛选出两组小鼠脾脏组织的差异蛋白质。结果 KEGG Pathway富集分析共鉴定到17条生物信号通路(P <0. 05),其中富集在核糖体信号通路的差异蛋白质有37个,其中有36个差异蛋白质表达下调,1个差异蛋白质表达上调。这些通路涉及核糖体蛋白、60S核糖体蛋白、40S核糖体蛋白等的多个亚基蛋白,这些蛋白主要参与蛋白质的翻译及核糖体的结构组成等生物过程。结论电离辐照导致小鼠脾脏组织核糖体信号通路所涉及的37个差异蛋白中,有36个差异蛋白表达下调,1个差异蛋白表达上调,导致脾脏组织蛋白质合成障碍是电离辐照损伤的重要机制。     

一例利奈唑胺致儿童黑舌的药品不良反应分析

利奈唑胺是第一个运用于临床的 唑烷酮类抗生素,通过与细菌50S亚基的23S核糖体RNA部分位点结合,阻止形成功能性70S始动复合物,以此来抑制细菌蛋白质的合成[1 ].利奈唑胺被批准用于G+ 球菌感染的治疗,包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引起的社区获得性肺炎以及复杂的皮肤及软组织感染,其抗菌谱还包括一些厌氧菌.利奈唑胺常...     

抗肿瘤因子α-Sarcin的作用机理和核糖体的结构

细胞毒素α-Sarcin 可切断核糖体大rRNA 链3′端的某个部位,使核糖体失活,这一作用机制正在分子水平加以阐明。α-Sarcin(简称 AS)是从一种巨曲霉培养液分离精制而得的抗肉瘤成分,是分子量为17,500的碱性蛋白质,是强细胞毒素。AS对肿瘤细胞增殖的抑制作用特别强,人们猜想这是因为与正常细胞比较,它更容易透过肿瘤细胞膜。通过对无细胞系统的研究,了解到毒素的靶是真核细胞的核糖体,但是 AS使60S 核糖体失活的机制,则完全不得而知。     

p70核糖体蛋白S6激酶抑制剂的研究进展

p70核糖体蛋白S6激酶(p70 ribosomal protein S6 kinase,p70S6K)是一种多功能的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,是AGC家族的重要成员,在m TOR信号通路中起着非常重要的作用。p70S6K与蛋白质的合成、m RNA的加工、葡萄糖的体内平衡以及细胞的生长和凋亡等进程密切相关。研究表明,肿瘤的发生与p70S6K的过度激活有关,因此,p70S6K已成为抗癌药物研发的重要潜在靶点之一。本文对p70S6K的生物学功能、作用机制及相关p70S6K抑制剂结构和研究思路做一综述。     

人甲状腺球蛋白的分离与纯化

甲状腺球蛋白是一种水溶性糖蛋白,分子量66,000道尔顿(~(12)C的1/12),沉降系数19S,它的分子含8—10％的糖类,包括甘露糖、N-L酰氨基葡糖、半乳糖及唾液酸等。早在1899年,A Oswald就用硫酸铵盐析法提取甲状腺蛋白质,1933年M Heidellerger等用醋酸沉淀法进一步纯化甲状腺球     

医药高科技何时走入我们的生活——2004 WHTS第三届“生命之春”高科技与资本论坛

布莱恩·克拉克博士 大分子模拟 技术可以用到生物技术中 蛋白质合成过程中的延伸步骤是在结构方面,诸多了解最为透彻的生物过程之一。延伸因子复合物从核糖体中释放这过程所涉及的多种结构特点都已阐明。信使RNA的解码过程中,氨酸转运RNA,延伸因子EF-TIJ,以及三磷酸鸟音形成三体复合物,与核糖体结合。些三体复合物与延伸因子G—GDP的结构相似性使得我们提出一种看法,即蛋白质和RNA大分子相互模拟的观点。据推     

苯噻唑力复霉素作用机理的初步研究

本文报告苯噻唑力复霉素对细菌生物大分子合成及超微结构的影响。该药可明显抑制³H-尿嘧啶核苷掺入金黄色葡萄球菌209 p和大肠杆菌2281的RNA;对²H-亮氨酸掺入细菌蛋白质仅有轻微抑制;对³H-胸嘧啶核苷掺入细菌DNA无抑制作用。说明其作用机理主要是抑制细菌RNA合成。掺入试验还表明金黄色葡萄球菌对苯噻唑力复霉素有比大肠杆菌更高的敏感性。10倍于MIC浓度的苯噻唑力复霉素能使上述两种细菌超微结构明显改变。胞质失去完整结构,出现空泡,核糖体消失,但胞壁仍保存。     

新霉胺类似物的合成与RNA结合和生物活性评价

为了提高新霉胺对16S rRNA的亲和力，合成了Ⅱ环5位修饰的新霉胺类似物。以新霉素B为原料，经水解，保护，亲核取代，脱保护，叠氮还原多步反应得到氨基或氨基链修饰的新霉胺类似物。用表面等离子共振法测定了所合成的化合物与大肠杆菌（E.coli．）核糖体A位点rRNA（16S RNA）的相互作用。合成了6个Ⅱ环5-位修饰的新霉胺类似物，发现Ⅱ环5位氨基链修饰可以增强化合物对16S RNA的亲和力，其中一些化合物在10^-3M有体外细菌抑制活性。在新霉胺的Ⅱ环5位引入氨基或脂肪胺可以增加与16S RNA的亲和力。Ⅱ环5位上羟基的构型改变对于药物／16S RNA复合物稳定性的影响较低。     

蓖麻毒素A链与底物作用的结构基础及其解毒剂的研究进展

蓖麻毒素是从植物蓖麻籽中分离得到的一种Ⅱ型核糖体失活蛋白,其A链(RTA)为效应链,具有N-糖苷酶活性,通过催化28SrRNA在S/R结构域第4324位脱去一个保守的腺嘌呤,使核糖体60S亚基失活,从而阻断蛋白质合成途径,引起细胞死亡。RTA因其高细胞毒性,常常用于制备免疫毒素药物,尤其在恶性肿瘤的生物治疗上具有诱人的应用前景;或可能被用作恐怖袭击的生物战剂。本文对RTA与底物相互作用的结构信息及其解毒剂进行综述。     

核糖体蛋白S3a在肿瘤细胞增殖分化和凋亡调控作用的研究概况

目的综述核糖体蛋白S3a在肿瘤细胞增殖分化和凋亡调控作用的研究进展。方法参阅近几年国内外相关文献,对核糖体蛋白S3a的结构、功能及其异常表达对肿瘤细胞增殖分化和凋亡的调控等方面的进展进行归纳总结。结果与结论核糖体蛋白S3a除了在蛋白质合成中起重要作用外,还有独特的核糖体外功能。其在多种肿瘤细胞中高表达,通过调控癌基因和抑癌基因的表达可影响肿瘤细胞的增殖分化与凋亡。     

正常人外周血单核细胞基因表达谱的建立及临床意义

目的:建立正常人外周血单核细胞的基因表达谱,探讨颅内动脉瘤的差异基因,为研究颅内动脉瘤的发病机制及其可能的基因治疗打下基础。方法:分别抽提60例正常人和颅内动脉瘤患者外周血单核细胞的RNA,基因芯片技术检测其外周血中的基因表达情况。结果:在基因芯片所检测的共14112个基因中,有7749个基因在正常人外周血单核细胞中呈阳性表达,表达数量较多的基因分别是:细胞信号和传递蛋白表达类、代谢相关类、离子通道和运输蛋白、结构运动类基因。表达水平位于前3位的基因分别是核糖体蛋白L41(RPL41)、核糖体蛋白S3A(RPS3A)和核糖体蛋白L23A(RPL23A)基因。与正常人外周血阳性基因比较,颅内动脉瘤患者得到85个差异基因,其中KPNA4基因与信号传导、蛋白质转运过程功能有关,基因表达明显上调;SPG3A基因与核苷酸结合功能相关,基因表达明显下调。结论:建立了正常人外周血的基因表达谱,KPNA4基因和SPG3A基因可能与颅内动脉瘤形成和发展有关。     

细菌亚单位结构——核蛋白体菌苗研究的进展(综述)

核蛋白体又称核糖体(Ribosome)系一种核糖蛋白颗粒,为细胞的亚显微粒,直径10～20毫微米。核蛋白体是细胞合成蛋白质的组成单位,是由RNA和蛋白质所组成。不同生物体的细胞内核蛋白体,按照不同核糖核酸的信息,产生不同的蛋白质,因而生成了各生物不同的遗传特征。免疫球蛋白的合成是需要由信息核糖核酸来传递信息的。     

苦瓜籽核糖体失活蛋白的分离纯化及抗氧化活性的研究

目的改进苦瓜籽核糖体失活蛋白的提取工艺 ,并对其抗氧化活性进行研究。方法苦瓜籽经粉碎 ,50mmol/L乙酸抽提 ,硫酸铵沉淀 ,经阳离子交换及凝胶柱色谱等步骤进一步纯化后 ,测定所得两种核糖体失活蛋白的理化性质。结果纯化后得到一种分子量为 2 9.6kD的蛋白质和一种小分子量蛋白质 ,两者在无细胞系统中抑制50 %蛋白质合成浓度分别为 4 .3× 1 0 - 6 、1 .4× 1 0 - 6 mol/L ,含糖量分别为 4 .83 %、1 .82 % ,类超氧化物歧化酶 (SOD)活性分别为 79.0 5、1 7.2 5u/mg。阳性对照纯品SOD活性为 1 2 67u/mg。结论从苦瓜籽中分离纯化出两种不同分子量的核糖体失活蛋白均为糖蛋白质 ,且具有一定的抗氧化活性     

核糖体展示小分子抗体的研究进展

核糖体展示技术是由Plückthun实验室[1]在多聚核糖体展示技术[2]的基础上改进而来的一种利用功能性蛋白相互作用进行筛选的新技术,它将正确折叠的蛋白及其mRNA同时结合在核糖体上,形成mRNA-核糖体-蛋白质三聚体,使目的蛋白的基因型和表型联系起来,可用于抗体及蛋白质文库选择、蛋白质体外改造等。运用此技术已成功筛选到一些与靶分子特异结合的高亲和力蛋白质,包括抗体、多肽、酶等,是蛋白质筛选的重要工具。1核糖体展示技术的基本原理及特点核糖体展示技术通过聚合酶链反应(PCR)扩增DNA文库,同时引入T7启动子、核糖体结合位点及茎-…     

应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱源后衰变技术鉴定蛋白质

目的应用源后衰变(PSD)技术结合数据库检索鉴定二维蛋白质电泳(2DE)胶上的蛋白质斑点。方法 用已知多肽(ACTH)18~39肽段和TPA被胰酶降解后的1个肽段建立了PSD-MALDI-TOF-MS方法。结果应用已建立的PSD-MALDI-TOF-MS法分别将2DE分离后胶上的2个未知蛋白质斑点鉴定为40S核糖体蛋白S12和dnaK抑制蛋白。结论PSD技术在蛋白质组学研究中有较大的应用前景。