重组腺病毒对烫伤大鼠肝组织核因子-κB活性的调控

目的　探索腺病毒介导IκBα基因对烫伤大鼠肝组织核转录因子NF κB活性的调控作用。　方法　应用重组缺陷型腺病毒载体 (AdIκBα)预处理大鼠 ,烫伤后不同时相点取肝组织 ,提取组织核蛋白 ,与r-3 2 PATP标记的NF κB特异性探针共同反应 ,利用凝胶电泳迁移率改变分析方法(EMSA)检测NF κB/DNA结合活性 ;提取肝组织总RNA ,用RT PCR法检测IL 1β、TNFαmRNA的表达。结果　与正常对照组相比 ,烫伤组致伤后 0 .5hNF κB/DNA结合活性显著增强 ,至伤后 2 4h ,仍保持较强结合活性。AdIκBα预处理组 ,大鼠NF κB/DNA结合活性略高于正常 ,但显著低于烫伤组。RT PCR分析 ,大鼠烫伤后 0 .5h与对照组相比 ,IL 1β、TNFα表达显著升高 ,持续至伤后 2 4h ;AdIκBα预处理组 ,IL β和TNFα表达显著低于烫伤组。 　结论　大鼠严重烫伤后 ,肝组织细胞内NF κB迅速活化 ,IL 1β和TNFα的表达随之显著增强 ;经AdIκBα预处理能显著抑制大鼠严重烫伤后肝组织NF κB的活化 ,并下调IL 1β、TNFα的表达。     

核因子—kB在狼疮肾炎肾组织中的表达及其意义

目的：了解狼疮疮肾炎（ＬＮ）肾组织中核因子（ＮＦ）－ｋＢ的表达并探讨其与ＬＮ肾脏病理改变和肾功能损害的关系。方法以ＮＦ－ｋＢ亚基Ｐ６５单抗为抗体,采用微波免疫组织化学染色（ＡＰＡＡＰ法）检测ＬＮ肾组织ＮＫ－ｋＢ表达,并进一步分析其与肾小球内Ｃ－ｍｙｃ蛋白表达、ＬＮ活动指数、肾脏病理和功能损害的关系。结果狼疮肾炎肾组织中ＮＦ－ｋＢ表达较正常肾组织显著增高,以ＷＨＯⅣ型为最显著。ＮＦ－ｋＢ在肾小球和肾     

NF—kB及其能脏疾病关系研究进展

ＮＦ－ｋＢ是参与基因转录的蛋白质分子，广泛存在于机体各种组织细胞中。当细胞受到外界面素刺激时，胞质内ＮＦ－ｋＢ与抑制蛋白（ＩｋＰｓ）分离并活化，进入细胞核内与ＤＮＡ结合启动基因转录，调节包括细胞因子和炎症介质（如ＩＬ－２、ＩＬ－２ａ、ＩＬ－６、ＩＬ－８，ＶＣＡＭ、ＩＣＡＭ、Ｅ－ｓｅ－ｋｅｃｔｉｎ、ＩＦＮ－β、ＭＣＰ－１、ＲＡＮＴＥＳ等）在内的众多蛋白质表达，从而参与调节组织细胞的生理、病理反应。在     

NF—kB与乳腺癌关系的研究进展（文献综述）

乳腺癌的发病率近年呈逐渐上升趋势，对乳腺癌的病因学研究也成为热点。FN-kB作为一种 转录调节因子，参与细胞地产殖，抑制细胞的凋亡，并被证实和许多肿瘤的形成有关，尤其NF-kB在乳腺癌的发生和发展过程中起很重要的作用。     

神经生长因子对深Ⅱ度烫伤大鼠创面愈合的调控作用

创面愈合的调控一直是烧伤治疗的研究重点，目前有关神经生长因子（nerve growth factor,NGF）对烧伤创面愈合的影响及其机制研究较少。笔者采用不同给药途径观察NGF对创面愈合间的凋控作用。寻求其最佳给药方式，以期为临床应用提供理论依据。     

肿瘤坏死因子-α对膀胱癌细胞系中核转录因子kB的表达及对其调控基因的影响

目的：探讨膀胱癌细胞系中核转录因子－kB(NF-kB)及其调控基因的表达以及药物刺激对其的影响。方法：免疫细胞化学检测p65、p50、p52、c-Rel、RelB、IkBα、增殖细胞核抗原（PCNA）的蛋白表达水平，逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）检测p65、p50、p52、c-Rel、RelB、IkBα、CyclinD1、白细胞介素（IL）－8、PCNA的mRNA水平。采用人类肿瘤坏死因子－α（TNF-α，20μg/L）刺激细胞观察检测指标的变化。结果：在EJ、T24细胞系中均见p65、p50、p52、c-Rel、RelB、IkBα、PCNA等的蛋白和mRNA表达，以及CyclinD1、IL－8的mRNA表达，TNF-α(20μg/L）刺激后，NF－kB家族成员的核易位增加，各指标的mRNA表达水平也有不同程度的增强。结论：膀胱癌细胞系中可见NF－kB家族的表达，TNF－α刺激后其调控基因的表达增强。     

核转录因子kB抑制剂对犬体外循环炎性因子的影响

近年来研究证实，体外循环、心脏的缺血再灌注均可促使细胞因子网络失衡。大量的炎性因子及粘附分子过表达并释放到循环中，参与并加剧了心肌缺血再灌注损伤，是手术后并发症发生及死亡的主要原因之一，这些细胞因子的产生与组织细胞中核转录因子kB(NF—kB)的激活有关。吡咯烷二硫氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate，PDTC)为     

核转录因子kB对羊缺血预适应心肌细胞凋亡的影响

2003年1月至2004年3月，本研究对特异性核转录因子KB(NF—kB)抑制剂脯氨酸二硫氨基甲酸酯(ProDTC)对缺血预适应(IPC)心脏保护效应的影响进行观察，并从细胞凋亡角度探讨NF—kB在IPC中的作用。     

洛伐他汀对系膜细胞核因子—kB活性及炎性细胞因子表达的影响

目的：探讨洛伐他汀对脂多糖（LPS）诱导的肾小球系膜细胞（MsC)表达炎性细胞因子的影响及其机制。方法：分别以RT－PCR和凝胶迁移率法（EMSA）的方法观察系膜细胞表达炎性细胞因子白细胞介素（IL）－1-β、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）－α及单核细胞趋化蛋白（MCP）－1mRNA及核因子NF－kB的活化.结果：在洛伐他汀作用下4种细胞因子mRNA的表达均呈不同程度减弱,LPS诱导的MsC NF－kB活化也被抑制,而外加甲羟戊酸及法泥醇则可对抗这种抑制作用。结论：洛伐他汀可以通过抑制系膜细胞NF－kB的活性,降低炎性细胞因子的表达。为进一步认识和评价他汀类药物在肾脏疾病防治中的作用提供了理论及实验依据。     

可调控性人PTEN基因重组腺病毒的构建与表达

目的　体外构建和表达可调控性人抑癌基因PTEN重组腺病毒。方法　将人PTEN基因全长cDNA约 1.4kb经过穿梭载体 ,与可调控性腺病毒载体骨架连接 ,得到重组人PTEN基因腺病毒 (Ad PTEN) ,酶切与聚合酶链反应 (PCR)鉴定后 ,在HEK2 93细胞包装、扩增 ,空斑试验测定病毒滴度 ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)、Westernblot法分别在mRNA、蛋白水平检测PTEN的表达。Ad X TRE βgal病毒作为对照。 结果　构建的Ad PTEN病毒滴度为 1.8× 10 7pfu/ml ,转染前列腺癌细胞株PC 3后RT PCR扩增出特异条带 ( 4 62bp) ,Westernblot检测PTEN蛋白 ( 60×10 3 )有高表达 ,对照病毒转染后未测到PTEN的表达。结论　用体外连接法成功地构建了可调控性人抑癌基因PTEN重组腺病毒载体 ,并得到了正确、特异的表达。     

锌对烫伤大鼠肝脏金属硫蛋白的影响

OBJECTIVE: To investigate the changes in liver metallothionein (MT) in scalded rats. METHODS: The scalded rats in deficient zinc condition were fed with diets containing zinc 4 micrograms/g, 10 micrograms/g, and 80 micrograms/g respectively. The changes in serum zinc, liver zinc and liver MT were observed. RESULTS: The serum zinc decreased, liver zinc and MT increased. The higher diet zinc levels were, The higher serum zinc, liver zinc and MT became. The correlation analysis showed that the changes between liver zinc level and liver MT was positive relationship(r = 0.85, P < 0.01). CONCLUSION: Serum zinc decrease, liver zinc increase after burn. This is connect with increment of MT synthesis in liver, zinc is inducer to MT. It can improve synthesis of liver MT.     

锌对烫伤大鼠肝脏金属硫蛋白的影响

目的　探讨烫伤大鼠补锌后金属硫蛋白（ Ｍｅｔａｌｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ Ｍ Ｔ） 的变化。方法　观察了 Ｓ Ｄ 大鼠在缺锌状态下烫伤,进食缺锌（４μｇ／ｇ） 、低锌（１０μｇ／ｇ） 、高锌（８０μｇ／ｇ） 三种含锌量不同饲料,其血清锌、肝脏锌、肝 Ｍ Ｔ 的变化。结果　血清锌下降,肝脏锌、肝脏 Ｍ Ｔ 升高,含锌量越大,血清锌、肝脏锌、肝脏 Ｍ Ｔ 越高。高锌组最明显,肝脏 Ｍ Ｔ 高出低锌组９ 倍（ Ｐ＜ ０ ．０１） 。相关分析表明,肝脏锌与肝 Ｍ Ｔ 的变化呈正相关（ ｒ ＝ ０８５ , Ｐ＜ ０ ．０１） 。结论　烫伤后血清锌下降肝脏锌增加,与肝脏 Ｍ Ｔ 合成增多有关;锌是 Ｍ Ｔ 的诱导剂,促进 Ｍ Ｔ 的合成。     

锌对烫伤大鼠肝脏金属硫蛋白的影响

目的探讨烫伤大鼠补锌后金属硫蛋白(Metallothionein MT)的变化。方法观察了SD 大鼠在缺锌状态下烫伤,进食缺锌(4μg/g)、低锌(10μg/g)、高锌(80μg/g)三种含锌量不同饲料,其血清锌、肝脏锌、肝 MT 的变化。结果血清锌下降,肝脏锌、肝脏 MT 升高,含锌量越大,血清锌、肝脏锌、肝脏 MT 越高。高锌组最明显,肝脏 MT 高出低锌组9倍(P<0.01)。相关分析表明,肝脏锌与肝 MT 的变化呈正相关(r=0.85,P<0.01)。结论烫伤后血清锌下降肝脏锌增加,与肝脏 MT 合成增多有关;锌是 MT 的诱导剂,促进 MT 的合成。     

谷氨酸受体拮抗剂在严重烧伤大鼠脑组织中的作用

目的 探讨烧伤后谷氨酸对脑组织的影响及谷氨酸受体拮抗剂的作用。方法 采用30％TBSAⅢ度烧伤大鼠模型,伤后2、6、12和24h测定了脑水含量、脑组织K^ 、Na^ 、Ca^2 、Mg^2 和-氧化氮(NO)代谢产物NO2^-／NO3^-浓度,在光镜和电镜下进行形态学和组织化学研究。结果 烧伤后脑水含量升高,脑组织Na^ 、Ca2^ 、NO2^-／NO3^-浓度高于对照组;脑内ATP酶减少;电镜观察毛细血管内皮细胞、神经细胞及胞浆部分线粒体肿胀,毛细血管壁出现胞饮泡。给予谷氨酸受体拮抗剂D-2-氨基-7-磷庚酸脂(D—AP7),可使脑水含量、脑组织Na^ 、Ca^2 、NO2^-／NO3^-浓度降低,毛细血管壁胞饮泡减少,神经细胞肿胀减轻。结论 烧伤后脑微血管通透性增加、组织细胞有缺血性改变和水肿发生。烧伤后脑组织形态及代谢变化与谷氨酸过量释放有关。兴奋毒性作用通过其受体介导,谷氨酸受体拮抗剂D—AP7可减轻烧伤后脑损伤。     

大鼠烫伤后补锌对血清、组织中锌、钙离子的影响

目的观察大鼠烫伤及补锌对血清、组织中锌(Zn2+)、钙(Ca2+)离子的影响.方法背部15%深Ⅱ°烫伤大鼠随机分为N组(正常进食组,饲料含Zn2+40 μg/g)、W组(创面补锌组,饲料含Zn2+40μg/g,同时创面涂银锌霜,含Zn2+761.1μg/g)、H组(口饲补锌组,饲料含Zn2+80μg/g);分别于伤后1、3、7天活杀大鼠,留取标本检测.结果烫伤后第1天N组、W组血清Zn2+明显降低,而后回升,伤后7天接近伤前水平;而H组伤后明显升高.N组、W组血清Ca2+伤后降低,H组上升.伤后第1、3天各组肝脏Zn2+均呈上升趋势,以H组最明显(P＜0.01).N、W组肝脏Ca2+均升高,H组低于伤前和N、W组(P＜0.01).烫伤后各组骨Zn2+均呈递减趋势,以N组降低幅度最大,明显低于H组(P＜0.01).伤后N、W组骨Ca2+逐渐下降,N组第7天明显低于H组(P＜0.05).伤后第1天,N、W组烫伤皮肤Zn2+下降,H组明显升高,第3、7天,各组皮肤Zn2+均逐渐上升,以W组最明显.各组烫伤皮肤中Ca2+均呈大幅度递增(P＜0.01),其中以N组最明显;W组明显低于N组(P＜0.01).结论烫伤后血清、骨骼Ca2+含量降低;肝脏、烫伤皮肤Ca2+含量增加,可能与Ca2+体内异常分布、细胞内钙超载有关;口饲补Zn2+主要提高血清、肝脏Zn2+,降低肝组织Ca2+含量,创面补Zn2+主要增加烫伤皮肤Zn2+,降低烫伤皮肤Ca2+含量,Zn2+可能具有减轻细胞内钙超载的作用.     

胰岛素对烫伤大鼠肝脏氧自由基损伤的保护作用

目的 了解大鼠严重烫伤后早期应用胰岛素对肝脏氧自由基损伤的保护作用.方法 雄性SD大鼠84只,随机分为正常组、盐水组、胰岛素组,每组各28只.后2组大鼠在背部造成30%TBSAⅢ度烫伤,伤后立即腹腔注射等渗盐水40 ml/kg或皮下注射胰岛素3 U/kg.伤后6、12、24、48 h,检测盐水组和胰岛素组大鼠肝脏总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)及血清丙氨酸转氨酶(ALT)含量,同时检测肝脏胞间黏附分子1(ICAM-1),光学显微镜下观察肝细胞形态学改变.正常组大鼠亦作相应检测.结果 与正常组比较,盐水组大鼠伤后6 h肝脏T-AOC、SOD明显降低,ROS明显升高(P＜0.05或P＜0.01);伤后12～48 h血清ALT及ICAM-1均高于正常组(P＜0.01).伤后24 h,胰岛素组大鼠肝脏T-AOC、SOD分别为(386±75)、(210±39)U/g,较盐水组(124±18)、(111±9)U/g明显升高(P＜0.01);ROS为(154±29)U/g,较盐水组(351±41)U/g明显降低(P＜0.01).伤后48 h,胰岛素组大鼠血清ALT及肝脏ICAM-1与盐水组比较呈下降趋势(P＜0.01).组织病理学结果显示,胰岛素可减轻烫伤后肝细胞损伤程度.结论 严重烫伤后早期用胰岛素干预,可增强大鼠肝脏抗氧化损伤能力,对肝脏有保护作用.     

蛙皮素对梗阻性黄疸大鼠的肝脏保护性实验研究

目的探讨蛙皮素对梗阻性黄疸大鼠肝脏的保护作用。方法40只Wistar雄性大鼠随机分成4组：正常组、假手术组、阻黄组、阻黄＋蛙皮素治疗组。术后第10天，检测下腔静脉血ALT、BIL-T、LPS值，测定肝脏氧化应激SOD、MDA、GSH、GST水平，光镜观察肝脏组织结构，免疫组化表达肝脏MCP-1。结果蛙皮素降低ALT、LPS水平，减轻肝脏氧化应激，减少汇管区炎症细胞浸润，弱化MCP-1免疫组化阳性表达，对BIL-T无影响。讨论蛙皮素对梗阻性黄疸大鼠肝脏损伤有保护作用，这一结果为l临床治疗胆道梗阻肝脏损害提供一种新的方法。     

补锌对缺锌大鼠烫伤后营养状态的影响

目的 观察补锌对缺锌大鼠烫伤后生长及营养状态的影响。方法 1月龄大鼠进食低锌饲料1周形成锌缺乏状态,造成20％TBsA深Ⅱ度烫伤后,分别改饲低锌、正常锌、高锌饲料。同时设大鼠烫伤前后均进食正常含锌饲料做对照组。用体重变化、累积氮平衡与空肠黏膜、肝、肾、脾、睾丸的DNA和蛋白质含量反映大鼠营养状况。结果补正常及高锌大鼠的体重、食物转化率、累积氮平衡和器官蛋白质含量均优于低锌大鼠,血清锌、血清碱性磷酸酶活性、空肠黏膜、肾、脾、睾丸的DNA含量在补锌后显提高。结论 补锌有助于烫伤后大鼠营养状况的改善,适当加大补锌剂量对提高肾与睾丸的DNA含量优于常量补锌。     

烫伤大鼠肠内毒素移位对淋巴细胞凋亡的影响

目的 探讨烫伤大鼠脾脏和肠系膜淋巴结（mesenteric lymph nodes,MLNs)淋巴细胞凋亡与肠道LPS移位的关系。方法 30％TBSAⅢ度烫伤Wistar大鼠及对照组,取门、腔静脉血用鲎基质显色法定量LPS;脾脏和MLNs切片以TUNEL－POD法染色,应用Cooldccd成象系统、Spot和IPP（Imagine proplus)4.10a软件进行凋亡细胞计数和透射光光密度分析。结果 烫伤后大鼠门、腔静脉血LPS水平显增加（P＜0．01）,伤后6h达峰值;门静脉LPS 3－48h显高于腔静脉（P＜0．01）。TUNEL－POD染色结果,MLNs伤前几乎未见凋亡淋巴细胞,但伤后显增多（P＜0．01）,以3h为明显;脾脏伤前凋亡淋巴细胞多集中在皮质,伤后显减少（P＜0．01）,24h后略有恢复。透射光光密度值分析表明,伤后24h内脾脏凋亡淋巴细胞的光密度值较伤前明显降低（P＜0．01）;伤后48h内MLNs凋亡淋巴细胞光密度值较伤前显增高（P＜0．01）。结论 大鼠严重烫伤早期即发生肠源性LPS血症;肠道移位LPS可诱导MLNs淋巴细胞大量凋亡,脾脏中凋亡淋巴细胞数量显减少,提示大鼠严重烫伤后可能存在脾脏免疫功能异常。