整合素α5在胚胎小鼠肾脏发育过程中的表达

目的观察细胞外基质的受体—整合素α5在胚胎小鼠肾脏发育过程中的时空性表达,探讨其在胚胎肾脏发育中的作用。方法采用免疫组织化学（酶组织化学和荧光组织化学）方法观察不同胚龄小鼠肾组织中整合素α5的表达,细胞图像分析技术检测阳性表达的灰度值,体视学技术检测阳性表达的体密度值。结果免疫组化结果显示：胚龄12 d时整合素α5在输尿管芽（UB）周围的生后肾组织有表达。胚龄14 d时整合素α5在生肾区有表达。胚龄16 d和18 d时整合素α5在发育各个阶段的肾小体、肾小管都有一定程度的表达。图像分析和体视学结果显示：整合素α5的表达随着肾脏发育逐渐增强。结论整合素α5在发育各个时期的肾小体、肾小管都有一定程度的表达,且随着肾脏的发育表达逐渐增多。提示整合素α5对肾小体、肾小管的发育都起一定的诱导作用。     

小鼠肾发育过程中肝细胞生长因子及其受体的表达

目的观察肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）及其受体（c-Met）在小鼠肾发育中的时空性表达,探讨其与肾发育的关系。方法采用免疫组织化学技术结合体视学方法对不同胚龄及生后日龄小鼠肾组织HGF和c-Met的表达及其含量变化进行系统观察和定量分析。结果HGF和c-Met在各期的肾小体、皮质肾小管及集合管均有表达,且随胚（日）龄增加在各期肾小体、皮质肾小管及集合管的表达是先增后减。结论推测HGF和c-Met可能对肾各结构的发育以及成熟肾的形态维持起重要作用。     

血管紧张素Ⅱ受体1和受体2在小鼠肾小管发育中的表达

目的探讨血管紧张素Ⅱ受体1（AngiotensinⅡ receptortype 1，AT1R）和受体2（（Angioten．sinⅡreceptor type2，AT2R）在小鼠肾小管发育中的表达及其与肾脏发育的关系。方法采用免疫组织化学方法和体视学方法检测胚龄14、15、16、18天胎鼠及生后1、3天仔鼠肾小管AT1R和AT2R的表达。结果AT1R于胚龄15天开始出现在肾小管，胚龄16天达到高峰，随后表达逐渐减弱，生后3天微量表达；AT2R于胚龄16天开始出现在肾小管，胚龄18天达到高峰，以后表达逐渐减弱，至生后3天基本消失。结论小鼠肾脏发育早期AT1R和AT2R与肾小管的增殖和分化密切相关。     

水通道蛋白-4在小鼠肾脏发育中的表达

目的观察水通道蛋白-4(AQP-4)在小鼠肾脏发育中的表达,探讨其与肾脏发生发育的关系及作用。方法用免疫组织化学(SABC法)显色观察AQP-4从胚龄12 d胎鼠到生后42 d小鼠肾脏的表达部位,用体视学对AQP-4在小鼠肾脏不同发育阶段中的表达进行定量检测。结果AQP-4在胚龄14 d的胎鼠肾脏可见微弱表达,其后随胚(日)龄的增长而增加,到生后1 d达最高,以后无明显变化。AQP-4的表达部位在胚龄14 d、16 d的小鼠为输尿管芽细胞的侧膜和基底膜(侧基底膜),在集合管出现以后则还表达在集合管细胞的侧基底膜。结论AQP-4在生前小鼠水平衡的调节作用比较重要,对生后小鼠主要起辅助作用。     

Ⅳ型胶原在胚胎小鼠肾脏发育过程中的表达

目的观察Ⅳ型胶原在胚胎小鼠肾脏发育过程中的表达规律,为阐明Ⅳ型胶原在胚胎肾发育中的生物学功能提供理论依据。方法采用免疫组织化学方法结合体视学方法和western blot技术对不同胚龄小鼠肾组织中的Ⅳ型胶原的表达进行研究。结果胚龄12 d时,在输尿管芽周围没有Ⅳ型胶原的表达。胚龄14 d时,在逗号小体和S小体的基膜上开始出现Ⅳ型胶原的表达。随着肾脏的发育,Ⅳ型胶原表达于各期肾小体的基膜、肾小管基膜、和细胞间质。体视学测量和west-ern blot结果显示Ⅳ型胶原的表达量逐渐增加。结论在胚胎肾发育过程中,Ⅳ型胶原的分布具有一定的时空顺序。在时间上其随着肾脏发生发育增加,在空间上其表达于基膜存在的部位,可能对基膜的发生发育起一定的作用。     

小鼠后肾集合管水通道蛋白表达及其上皮细胞超微结构研究

目的观察小鼠后肾集合管水通道蛋白(AQP)-4的表达及其上皮细胞超微结构变化。方法应用透射电镜、免疫组织化学及图像分析技术观察并检测小鼠后肾不同发育阶段集合管的超微结构及AQP-4表达。结果小鼠胚龄18 d见发育早期集合管主细胞,生后7 d～21 d,其形态结构发育基本完善。A型闰细胞于胚胎18 d出现,B型闰细胞生后21天出现。AQP-4于胚龄14 d始见表达,分布于集合管管壁上皮细胞侧基底细胞膜,随胚龄增加表达逐渐增强,生后1 d达高峰。结论集合管管壁上皮细胞于胚胎时出现,但其形态结构在生后才逐渐完善。AQP-4对小鼠胚胎时期肾水平衡调节可能起重要的作用。     

血管紧张素Ⅱ受体1在小鼠肾脏输尿管芽的表达

目的探讨血管紧张素Ⅱ受体1(AngiotensinⅡreceptor type1,AT1R)在小鼠早期肾脏发育中输尿管芽的表达及其与肾脏发育的关系。方法采用免疫组织化学方法检测胚龄12、14、15、16、18天小鼠肾脏输尿管芽AT1R的含量。结果在胚龄12天,AT1R在输尿管芽有少量表达,胚龄15天到达高峰,胚龄16天AT1R在输尿管芽及其分支中仅有微量表达。结论输尿管芽在小鼠后肾发生发育中有AT1R表达,推测AT1R与诱导输尿管芽分支不断延长有关。     

小鼠肾脏输尿管芽发生发育的体视学研究

目的观察小鼠肾脏发育过程中输尿管芽生长方式及数目变化规律。方法应用免疫组织化学技术结合体视学方法,对胚龄10、12、14、16、18 d胎鼠和生后1、3、5、7 d仔鼠肾脏输尿管芽尖数量和输尿管芽分支次数进行系统观察和定量分析。结果胚龄10 d,未见输尿管芽分支出现;胚龄12 d,输尿管芽及其分支出现,输尿管芽是以二叉分支方式生长;胚龄14 d至生后5 d,输尿管芽不断分支,输尿管芽尖数目不断增加;生后7 d,输尿管芽消失。结论在整个肾脏发育过程中,输尿管芽可发生10～11次分支。     

小鼠肾脏发育中光镜和电镜的体视学分析

目的对小鼠肾脏发育中各组成结构进行体视学测量和分析,以提供小鼠肾发育的基础数据。方法应用光镜和电子显微镜技术结合体视学分析方法对小鼠肾脏发育各阶段的肾脏大体、各部组成、皮质肾小体及集合管上皮主细胞进行了详细观察和体视学测量与分析。结果大体测量：肾脏长度和体积生后1～7d、21～28d增加非常显著（P〈0．01）。光镜测量：皮质体积胚龄18d到生后1d增加非常显著（P〈0．01）;髓质体积生后1～14d、21～28d增加显著（P〈0．05）;内髓生后21d出现,以后体积变化不明显;皮质肾小体体积从胚龄18d到生后40d大约增大30倍。电镜测量：集合管上皮主细胞侧基底细胞膜面密度生后3W内迅速增长,截面积胚龄18d到生后7d增加显著。结论小鼠肾脏各部组成从胚龄18d开始体积迅速增长,到生后28d发育接近成年水平。     

ADAM9在高侵袭转移 MDA －MB －231乳腺癌细胞系中的表达

目的：探讨去整合素金属蛋白酶9（a disintegrin and metalloproteinase 9，ADAM9）蛋白在人乳腺癌细胞系中的表达。方法：提取人正常乳腺上皮细胞 HBL100，人乳腺癌细胞系 MCF －7，ZR －75－1，MDA －MB －231，HCC1937和 Hs578T，小鼠乳腺癌细胞系4T1的总蛋白和总 mRNA，提取细胞的总蛋白和总 RNA 进行蛋白免疫印迹和实时定量 PCR 检测 ADAM9的表达。结果：在人乳腺癌细胞系 MDA －MB －231中 ADAM9蛋白表达最高，在小鼠乳腺癌4T1细胞中 ADAM9表达较低。结论：ADAM9在高侵袭的 MDA －MB －231乳腺癌细胞中高表达。     

表皮生长因子在小鼠肾脏远端小管发育中的表达

目的观察表皮生长因子（EGF）在小鼠肾脏远端小管发育中的表达，探讨其在小鼠肾脏远端小管发育中的作用。方法采用免疫组化、免疫荧光、Western blot技术结合体视学分析方法检测生后1、3、5、6、7、14、21、28和40天小鼠肾脏远端小管EGF的表达特征。结果EGF于生后6d开始出现在肾皮、髓质交界处的远直小管上皮细胞，之后随着日龄的增加其表达量逐渐增加，表达于皮、髓质远直小管，21天同成年鼠表达于远直小管和远曲小管第一段。结论EGF对小鼠肾脏远端小管的分化、生长发育起重要作用。     

胚胎小鼠肾脏发育过程中eNOS表达与细胞凋亡的关系

目的观察胚胎小鼠不同发育阶段肾组织中内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的表达和细胞凋亡的特征,探讨eNOS与细胞凋亡的关系。方法应用原位末端标记（TUNEL）法检测胚胎小鼠肾组织中的细胞凋亡,免疫组织化学方法和体视学方法检测eNOS的表达。结果不同发育阶段的肾组织中均可见到TUNEL染色阳性的细胞,凋亡指数从E14d开始增高,E18d达到高峰。eNOS表达于皮质生肾区、近端小管和远端小管,表达量随着发育逐渐增加。结论细胞凋亡和eNOS的表达在小鼠肾脏胚胎发育过程中具有重要的作用,细胞凋亡与eNOS的表达有一定的相关性。     

siRNA下调表达HDGF对HepG2细胞增殖能力及ADAM9表达的影响

目的：探讨HDGF基因特异性siRNA对肝癌细胞系HepG2的增殖能力及ADAM9基因表达的影响.方法：设计并合成HDGF基因特异性的siRNA干扰序列,瞬时转染HepG2细胞.实时荧光定量PCR检测HDGF和ADAM9 mRNA的表达变化;MTT法观察细胞增殖能力的变化.结果：转染48h时HDGF和ADAM9的基因表达抑制最为明显,分别为阴性对照组表达量的7％和5％（P＜0.05）.转染48h时HepG2细胞增殖能力受到明显抑制（P＜0.05）.结论：HDGF siRNA能够显著抑制HDGF和ADAM9基因的表达,降低HepG2细胞的增殖能力.     

生后小鼠肾脏皮质发育过程中的细胞增殖

目的 :观察小鼠出生后肾脏皮质发育过程中增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)的表达特征 ,探讨出生后小鼠肾脏皮质发育过程中细胞增殖的规律。 方法 :应用免疫组织化学技术检测小鼠出生后 1、 3、 7、 14、 2 1、 2 8和 70天肾脏皮质PCNA的表达。结果 :小鼠出生后 1～ 70天 ,皮质中的生肾区、肾小体、肾小管及髓放线中PCNA阳性细胞的表达具有一定的规律 ,早期PCNA阳性表达丰富 ,随着肾脏发育逐渐成熟而表达减弱直至消失 ,在成年鼠肾脏皮质中 ,没有检测到PCNA阳性细胞。结论 :出生后小鼠肾脏皮质中的生肾区、肾小体、肾小管及髓放线的细胞增殖规律是由高逐渐降低的 ,直至成年完全停止。     

分化型甲状腺癌中ADAM9的表达及其与临床病理因素的关系

目的探讨分化型甲状腺癌中金属蛋白酶解离素9（ADAM9）的表达和临床病理因素的关系。方法采用免疫组化SABC法,检测了42例分化型甲状腺癌组织中ADAM9的表达。结果分化型甲状腺癌中ADAM9的阳性率为64.3%。伴有颈淋巴结转移的甲状腺癌中ADAM9阳性率为80.0%,显著高于无颈淋巴结转移的甲状腺癌（50.0%）,P〈0.05;累及或超出甲状腺被膜的甲状腺癌中ADAM9阳性率为100.0%,明显高于肿块限于甲状腺内的甲状腺癌（57.1%）,P〈0.05;ADAM9表达与病理分型和TNM分期无关,P〉0.05。结论 ADAM9在分化型甲状腺癌的侵袭转移中可能起着重要作用。ADAM9表达水平可以作为判定甲状腺癌侵袭转移的客观指标。     

细胞增殖与凋亡在小鼠生后肾脏髓质发育过程中的意义

观察小鼠出生后肾脏髓质发育过程中增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)的表达及细胞凋亡的特征,探讨出生后小鼠肾脏髓质发育过程中细胞增殖与凋亡的规律及其关系。应用免疫组织化学技术和原位末端标记法(TUNEL法)分别检测小鼠出生后1、3、7、14、21、28和70天肾脏髓质中的增殖细胞及凋亡细胞。结果显示,(1)小鼠出生后肾脏髓质发育中PCNA阳性细胞的表达具有一定的规律,早期PCNA阳性表达丰富,随着肾脏发育逐渐成熟而表达减弱;(2)在细胞增殖的同时也存在着细胞凋亡现象,细胞凋亡指数于生后第7天达到高峰,以后表达逐渐减弱。细胞增殖与凋亡在小鼠生后肾脏髓质发育的整个过程中普遍存在,早期细胞增殖旺盛,增殖高峰之后出现凋亡高峰,晚期两者活动均减弱。     

食管鳞状细胞癌组织中去整合素-金属蛋白酶17mRNA表达的临床病理意义

 目的　探讨去整合素-金属蛋白酶17（ADAM17）mRNA在食管鳞状细胞癌中表达及其与临床病理因素的相关性。方法　采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）半定量检测50例食管鳞状细胞癌及对应的正常食管黏膜中ADAM17 mRNA的表达。结果　50例食管鳞状细胞癌及对应的正常食管黏膜中ADAM17 mRNA的表达量分别为0.937±0.241、0.225±0.077,食管鳞状细胞癌组明显高于正常食管组（t＝-19.899,P＜0.01）。食管鳞状细胞癌中ADAM17 mRNA表达与淋巴结转移（t＝-4.703,P＜0.01）、TNM分期有相关性（t＝-2.652,P＜0.05）,与性别、年龄及组织学分级无相关性（t＝0.299、t＝-0.907、t＝-3.163,均P＞0.05）。结论　ADAM17 mRNA在食管鳞状细胞癌中高表达,在食管鳞状细胞癌的发生、侵袭转移中起重要作用,对判断食管鳞状细胞癌患者预后有一定的价值。