DCs疫苗的制备及动物抑瘤实验研究

目的　为研究疫苗在肿瘤防治领域的应用。方法　选择了以MCA38肿瘤细胞作为体外冲击树状突细胞的肿瘤抗原来源 ,以C57BL/ 6 (H - 2 6)近交系小鼠为实验动物制备树状突细胞疫苗并建立动物实验。结果　树状突细胞疫苗接种组瘤重与对照组相比明显减小 (P <0 0 5 ) ,6 0d无肿瘤生长率明显高于对照组 (P <0 0 5 )。结论　树状突细胞疫苗可有效抑制肿瘤的发生与生长     

绞股蓝总皂甙预防和延缓家兔休克的作用

目的：探讨绞股蓝总皂甙（GPS）对注射内毒素的家兔休克的作用。方法：动物静脉麻醉后,取血测量血小板数、血浆纤维蛋白原含量、凝血酶原时间和NO水平。通过二道生理记录仪测量血压。动物处死后,取血现次测量血小板数、血浆纤维蛋白原含量、凝血酶原时间和NO水平。结果：对照组实验前后各指标没有出现明显的变化（P＞0．05）。内毒素（LPS）组平均动脉血压（MAP）,在实验后4,6h明显低于实验前和对照组（P＜0．01）,实验后血小板数和纤维蛋白原明显低于实验前（P＜0．01）,NO明显高于实验前,凝血酶原时间明显延长。GPS组实验后的NO浓度高于实验前和对照组（P＜0．05）,但低于LPS组实验后的NO浓度（P＜0．05）;实验后血小板数明显低于实验前和对照组（P＜0．01）,但高于实验后LPS组（P＜0．05）;实验后纤维蛋白低于实验前和对照组（P＜0．05）,但高于实验后的LPS组（P＜0．05）;实验后的凝血酶原时间长于实验前和对照组（P＜0．05）,但短于实验后的LPS组（P＜0．05）。结论：绞股蓝总皂甙有预防和延缓家兔休克的作用。     

肺癌化学免疫治疗程序不同时T细胞功能的影响

目的：利用荷瘤动物模型初步探讨化学免疫治疗肺癌时不同程序联合应用对肿瘤生长及T细胞功能的影响，以明确最佳治疗方案。方法：建立C57BL／61Leuwis肺癌荷瘤小鼠动物模型，全身应用卡铂及局部应用TNFα、IFNγ，不同程序联合处理荷瘤鼠，观察小鼠肿瘤生长情况。用同位素掺入法检测脾脏T细胞转化能力及脾细胞对IL-2的应答能力。结果：肿瘤生长速率最小者为先卡铂后细胞因子组（P＜0.001）；其次为卡铂与细胞因子同时组（P＜0．01）；T细胞转化能力最高组为卡铂、细胞因子同时组（P＜0．001）。其他两组升高明显（P＜0．05），脾细胞对IL-2的应答能力以同时治疗组和先细胞因子组最高（P＜0．05）。结论：不同程序的联合方案对机体T细胞功能影响不同；卡铂与细胞因子同时应用为最佳治疗方案。     

树突状细胞疫苗对大鼠Walker-256肿瘤抑制作用

目的建立Walker-256大鼠种植瘤模型，探讨树突状细胞（DC）疫苗抑制肿瘤生长的机制。方法从大鼠骨髓细胞中利用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和白细胞介素4（IL-4）在体外定向诱导分化出DC，液氮冻融法提取Walker-256肿瘤细胞抗原后刺激DC制备负载抗原的DC疫苗。ELISA法检测培养液中IL-12的浓度。雌性SD大鼠，皮下注射Walker-256肿瘤细胞制备种植瘤模型，成瘤大鼠按照体重配对，分为肿瘤治疗组和肿瘤对照组。10只体重分别相对应的雌性SD大鼠作为正常对照组。肿瘤治疗组大鼠皮下注射负载抗原的DC细胞悬液，肿瘤对照组和正常对照组大鼠皮下注射等量PBS。分别检测大鼠血IL-12浓度和肿瘤最大径。结果得到大量具备典型光镜和电镜形态特征的DC，表达大鼠DC特异性标志OX62、OX6。负载抗原前后DC产生IL-12的水平存在明显差异（P〈0．05）。肿瘤治疗组大鼠肿瘤最大径显著小于肿瘤对照组（P〈0．01）。肿瘤对照组与正常对照组比较，IL-12明显下降（P〈0．05），肿瘤治疗组与肿瘤对照组比较，IL-12明显上升（P〈0．01）。肿瘤治疗组的肿瘤最大径与IL-12呈显著负相关（r=-0．826，P〈0．01）。结论增强Th1介导的抗肿瘤细胞免疫可能是树突状细胞疫苗抑制肿瘤生长的机制之一。     

急性白血病患者血清IL-6、TNF-α检测临床意义的探讨

目的：探讨白细胞介素6（IL－6）肿瘤坏死因子α（TNF－α）水平与急性白血病（AL）发病的关系。方法：采用ELISA双抗体夹心法测定急性淋巴细胞白血病（ALL）和急性髓细胞白血病（AML）患血清IL－6、TNF－α水平。结果：AL患IL－6含量显高于正常对照组（P＜0．01），且ALL又明显高于AML（P＜0．05）；TNF－α也显高于对照组（P＜0．01），但ALL与AML两组间TNF－α水平无明显差异（P＞0．05）。结论：IL－6、TNF－α水平与AL发病，发展有密切相关；IL－6水平与白血病类型有关；而TNF－α水平与白血病类型无关。     

人乳头状瘤病毒16型E6基因转染人外周血树突状细胞的体内抗宫颈癌研究

目的：观察人乳头状瘤病毒（HPV）16型E6基因转染人外周血来源的树突状细胞（DC）制备的疫苗，在严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠体内对人宫颈癌（CaSki）细胞的免疫治疗和免疫保护作用。方法：细胞因子扩增人外周血DC，脂质体（Lipofeetamine）转染HPV16E6制备HPV16E6-DC疫苗。进行致瘤性检测，并观察在SCID小鼠体内疫苗抗人CaSki细胞的免疫保护及对荷瘤小鼠的免疫治疗作用。结果：①ttPV16E6-DC疫苗接种于小鼠体内未见肿瘤形成，脾、肺、肝和肾等器官未出现肿瘤病变。②在免疫治疗组，用HPV16E6．DC疫苗治疗的荷瘤小鼠，肿瘤生长速度较对照组慢，瘤体积小于对照组，瘤重量较对照组明显减轻（P〈0．01）。③在免疫保护组，经HPV16E6-DC疫苗免疫的小鼠，CaSki细胞攻击后，肿瘤潜伏期较对照组明显延长（P〈0．01），瘤体积明显小于对照组，瘤重量也轻于对照组（P〈0．01）。结论：人外周血来源的HPV16E6．I）12疫苗无体内致瘤性。且能在一定程度上抑制人CaSki细胞在SCID小鼠体内的生长，抵抗肿瘤细胞的攻击，对机体具有相应的抗肿瘤免疫治疗及保护作用。     

低剂量辐射增强环磷酰胺对移植肿瘤生长的抑制作用

目的：探讨低剂量辐射（LDR）与环磷酰胺（CP）伍用对肿瘤生长的影响。方法：采用C57BL／6J，小鼠右后肢腓肠肌内接种Lewis肺癌细胞做为肿瘤动物模型。在肿瘤直径达7mm时，给予75mGyX射线全身照射和100mg／kgCP腹腔注射化疗，用游标卡尺隔日测量肿瘤直径，建立肿瘤生长曲线，同时检测了不同治疗措施后小鼠脾脏自然杀伤细胞（NK）、淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）、特异性细胞毒性T细胞（CTL）的杀伤活性。结果：同单纯CP化疗组相比，LDR与CP伍用组的肿瘤直径在治疗后不同时间均明显缩小（P＜0．05～0．01），肿瘤生长速率明显降低；LDR和CP伍用组小鼠的NK、LAK、特异性CTL杀伤活性较单纯CP化疗组明显提高（P＜0．05～0．01）。结论：LDR可通过减轻CP所致的免疫抑制副作用提高机体免疫系统的功能并增强CP的抑瘤作用。     

淫羊藿苷通过增强 Fas-FasL 表达活性诱导裸鼠食管癌细胞凋亡

目的：探讨淫羊藿苷（icariin ,ICA ）对裸鼠体内食管癌移植瘤生长的抑制作用,并初步探讨其机制。方法应用M T T方法和Giemsa染色法检测和观察ICA对食管癌细胞Eca‐109和 T E‐13的体外抑制作用。构建裸鼠的食管癌细胞移植性肿瘤模型,分为3组,每组6只。实验组每只裸鼠腹腔注射50 mg／kg ICA ,对照组注射相同体积的生理盐水,阳性对照组腹腔注射2 mg／kg顺铂,每2天1次,共14 d ,每3天测量肿瘤体积,实验结束后称量肿瘤质量;TUNEL染色法观察各组裸鼠肿瘤组织的组织形态变化和凋亡情况;免疫组织化学法对肿瘤组织中 Fas和 FasL蛋白的表达变化进行分析。ELISA 法检测外周血中FasL和IFN‐γ的水平。结果 ICA体外对食管癌细胞Eca‐109和T E‐13的增殖无明显的抑制作用。实验组和阳性对照组裸鼠肿瘤平均体积和质量与对照组比较,差异均有统计学意义（P＜0．05）。TUNEL染色法结果显示,实验组裸鼠的肿瘤组织发生了明显的凋亡,凋亡细胞的数量较对照组明显增加（P＜0．05）。免疫组织化学实验结果表明,与对照组相比,实验组裸鼠肿瘤组织中Fas、FasL的表达明显增加（P＜0．05）。ELISA实验结果显示,实验组裸鼠外周血中FasL和IFN‐γ的水平较对照组明显增高（P＜0．05）。结论 ICA体外对食管癌细胞无明显增殖抑制作用,但是通过Fas的表达、FasL和IFN‐γ的分泌在体内诱导食管癌细胞凋亡,从而发挥抗食管癌的作用。     

功能矫治前伸下颌后髁突钙磷元素的变化

目的：应用X射线能谱分析仪检测功能矫治大鼠前伸下颌后髁突前、中、后部Ca、P元素的代谢情况,以Ca/P的动态变化评价矫治过程中的骨改建情况及功能矫治的远期效果。方法选取5周龄 SD大鼠30只建立下颌前伸动物模型。实验组（15只）：戴用矫治器2周组,戴用矫治器4周组,戴用矫治器6周组;对照组（15只）：自然生长2周组,4周组,6周组。实验结束后取髁突标本检测 Ca、P元素的能谱曲线及 Ca/P变化。结果加力2周时实验组髁突Ca/P较对照组降低（P＜0．05）,随后逐渐升高。4周时实验组与对照组中部Ca/P接近（P＞0．05）;6周时实验组与对照组后部Ca/P接近（P＞0．05）;而前部Ca/P在实验结束时尚未达到对照组水平。结论功能矫治过程中髁突改建呈动态变化趋势,改建速度不尽相同,前部较慢,中后部较快。     

脐血树突状细胞介导的食管癌疫苗抗肿瘤免疫预防实验研究

目的用杂交瘤技术制备脐血树突状细胞（DC）和食管癌细胞的融合疫苗,观察其在体内诱导抗肿瘤免疫反应。方法分离脐血CD34^＋干细胞并诱导扩增为成熟DC,并与EC109细胞经聚乙二醇（PEG）法融合;免疫磁珠法筛选EC109-DC;重建SCID小鼠免疫功能;体内保护抗肿瘤免疫保护实验。结果①融合疫苗可体外生长,形状以不规则形为主,核仁大、细胞边缘可见突起;②重建SCID小鼠免疫功能实验中PBL组均检测到人IgG的存在,与PBS组相比较有显著意义（P〈0．05）;③在免疫保护中,经融合瘤苗免疫的小鼠,肿瘤潜伏期较对照组明显延长（P〈0．05）,肿瘤大小和肿瘤重量均明显小于对照组（P〈0．05）。结论①重建SCID小鼠免疫功能实验中PBL组均检测到人IgG的存在,提示免疫重建成功;②融合瘤苗对EC109细胞的攻击有明显的抵抗作用。     

水蛭桃仁汤对实验性肝纤维化鼠血清Ⅰ、Ⅲ型前胶原水平的影响

目的研究水蛭桃仁汤对实验性肝纤维化鼠血清Ⅰ、Ⅲ型前胶原水平的影响。方法采用放免法（RIA）测定水蛭桃仁汤对日本血吸虫性早期肝纤维化小白鼠体内细胞因子的作用。结果水蛭桃仁汤具有明显的降解PC-Ⅲ型纤维的作用，胶原纤维明显减少，血清PC-Ⅲ含量显著下降（P＜0．001）。血清PC-I型前胶原有所下降，但与对照组比较无显著差异（P＞0．05）。中药能有效的预防实验动物血清PC－I型前胶原含量增加（P＜0．05）。但不能阻止血清PC-Ⅲ型增加（P＞0．05）。用药后动物血清中肿瘤坏死因子α（TNF－α）及白细胞介素6（IL－6）低于实验对照组。结论提示桃仁水蛭煎剂能有效地促进实验性肝纤维化的吸收与分解，有一定的临床价值。     

高钾饮食抗家兔血管内膜增生

目的：研究高钾饮食对血管损伤后内膜增生的抑制作用。方法：用新西兰白兔制成主动脉内皮损伤模型。实验动物分成3组：空白对照组（n=20）、对照组（n＝20）、治疗组（n=20，添加钾剂饲入：3％KCl100ml/天）。每组动物分两批于本后7天、30天处死，取腹主动脉下端作实验数据测定。结果：高钾饮食可有效升高血钾水平，治疗组服钾7天至术后30天血K+水平较空白组和对照组显著升高（P＜0.05或＜0．01）。血管条3H－TdR掺入量对照组较空白组明显升高（P＜0．05），治疗组较对照组明显下降（p＜0．05）。血管平滑肌钙含量术后7天治疗组和对照组均明显升高，尤以对照组为甚，30天后治疗组降到空白组水平，但对照组水平仍较高（P＜0．05）。新生内膜面积和内膜/中膜面积比治疗组明显低于对照组（术后7天P＜0．05，术后30天P＜0．05）。结论：高钾饮食对血管损伤后内膜增生具有明显抑制作用，提示高钾饮食对于防治球囊成形术后血管再狭窄的发生具有潜在临床应用前景。     

成石胆汁在胆囊癌致病因素中的作用

目的：探讨人的成石胆汁潜在致癌性，阐明胆结石与胆囊癌的内在关系，为胆结石的治疗提供科学的依据。方法：通过Ames试验及细胞二阶段转化实验，分别检测18例胆固醇结石患者胆汁的肿瘤启动性（即致突性）和促癌性。结果Ames实验结果表明，胆固醇结石患者的胆汁与正常对照组相比差异无显著意义，但可明显增加BALB／c3T3细胞转化灶的形成（P＝0．0233）尤其是无症状胆石组也表现明显的促癌活性（P＜0．05）。结论成石胆汁本身具有潜在促癌性，这一特性在胆囊癌的发病过程中起着重要的作用，为胆囊癌的病因学研究提供了直接证据。     

机动车驾驶员心血管功能状况调查

为了解机动车驾驶员心血管功能的状况，对长途客货驾驶员与机关工作人员（对照组）进行血压、心血管功能的测试。结果：驾驶员收缩压与舒张压均值明显高于对照组（P＜0．01），且高血压检出率也高于对照组（P＜0．05）。驾驶脉率明显高于对照组（P＜0．05），心搏出量低于对照组（P＜0．01），心肌耗氧指数、冠状动脉灌注区、总血管外周阻力、全血还原粘度明显高于对照组（P＜0．05或P＜0．01）。提示机动车驾驶员心血管功能明显降低。     

精制蛇毒复方胶囊对胃癌术后患者的临床效果观察

目的：观察精制蛇毒复方胶囊治疗胃癌术后患者的临床疗效。方法：60例病例随机分两组。治疗组30例,口服精制蛇毒复方胶囊,每次4粒,每日3次。对照组30例,辨证施治,口服中药汤剂。疗程为2个月。治疗前后观察：临床症状、生存质量、血液流变学指标、免疫指标、生存期及复发转移率。结果：治疗组与对照组均能改善患者脘腹疼痛、腹胀等症状（P＜0．05）;两组均能提高患者生存质量（P＜0．05）：治疗组能明显降低患者高纤维蛋白原和高血浆粘度（分别为P＜0．01、P＜0．05）,而对照组无明显降低作用（P＞0．05）,治疗组两组之间比较存在明显差异（上述两指标分别为P＜0．01、P＜0．05）;治疗组平均生存期32．7月,对照组25．2月,两组有明显差异（P＜0．05）;生存率治疗组高于对照组,分别为76．7％和60％（P＜0．05）;治疗组复发转移8例（26．7％）,对照组13例（43．3％）,治疗组复发转移率低于对照组（P＜0．05）;两组治疗前后T细胞亚群和NK细胞指标均无明显变化。结论：精制蛇毒复方胶囊对改善胃癌椁后患者临床症状、提高生存质量、改善高粘血症、延长生存期、延缓肿瘤复发转移具有一定的疗效,值得进一步研究和应用。     

重组人白介素10对离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响

目的：观察重组人白介素10(rhIL-10)对血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响。方法：离体培养大鼠胸主动脉VSMC并分别接受不同浓度rhIL-10,肿瘤坏死因子（TNF－α），血小板源性生长因子（PDGF－BB）的刺激，采用MTS／PES法确定VSMC的增殖状态并与对照组比较。结果：与对照组相比，TNF－α和PDGF－BB均对VSMC增殖具有明显的刺激作用（P＜0．05）。单独应用rhIL-10对血管平滑肌细胞生长没有影响。在TNF－α和PDGF－BB分别刺激下，rhIL-10均可抑制VSMC的生长（P＜0．05）。结论：rhIL-10可抑制细胞因子和生长因子诱导的VSMC增殖。     

抑制锌指蛋白139对胃癌原位移植裸鼠肿瘤细胞凋亡的影响

目的：以人胃癌细胞株 SGC7901原位移植的裸鼠模型为研究对象,探讨抑制锌指蛋白139（ZNF139）对肿瘤生长和凋亡的影响及机制。方法建立 SGC7901原位移植裸鼠胃癌模型。合成针对 ZNF139的小干扰 RNA 质粒,分为实验组、阴性质粒组和空白对照组进行瘤内注射。检测各组肿瘤生长情况;MTT 法检测细胞活性,流式细胞术测定肿瘤细胞的凋亡率,RT －PCR 和 Western blot 方法检测裸鼠胃癌组织中 ZNF139、Bax、Bcl －2基因的表达。结果与空白对照组和阴性对照组相比,实验组肿瘤生长受到明显抑制,肿瘤体积、重量均低于两对照组（P ＜0．05）。 MTT 结果显示,实验组肿瘤细胞活性明显低于空白对照组和阴性对照组（P ＜0．05）。流式细胞术显示,实验组裸鼠胃癌细胞的凋亡率明显高于空白对照组和阴性对照组（P ＜0．05）。 RT －PCR 和 Western blot 结果显示,与阴性对照组和空白对照组比较,实验组肿瘤组织 ZNF139、Bcl －2的表达下调,Bax 的表达升高（P ＜0．05）。结论抑制 ZNF139基因可以通过降低肿瘤细胞活性、促进凋亡抑制裸鼠原位移植瘤的增长,其机制与 ZNF139基因对 Bax、Bcl －2基因的调控有关。     

卵巢上皮性肿瘤患者血管内皮生长因子检测的临床意义

目的：检测卵巢上皮性肿瘤患者血清血管内皮生长因子（VEGF）的水平变化并探讨其临床意义。方法：应用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测正常健康妇女（正常组，25例），卵巢良性上皮性肿瘤妇女（良性组，43例），交界性上皮性肿瘤妇女（交界组，14例）和恶性上皮性肿瘤妇女（恶性组，39例）外周血中VEGF的水平，结果：恶性组VEGF水平明显高于交界组，良性组和正常组（P＜0．01），交界组VEGF水平明显高于良性组和正常组（P＜0．05），良性组与正常组VEGF水平之间无明显差异（P＞0．05），恶性组临床分期晚（Ⅲ，Ⅳ期）的患者VEGF水平明显高于临床分期早的患者（I，Ⅱ期，P＜0．01），手术后VEGF水平明显低于手术前（P＜0．01），并且与术中切除的干净程度有关（P＜0．05），交界组手术后VEGF水平也明显低于手术前（P＜0．05），而良性组手术前后VEGF水平明显高于临床分期早的患者（I，Ⅱ期，P＜0．01），手术后VEGF水平明显低于手术前（P＜0．01），并且与术中切除的干净程度有关（P＜0．05），交界组手术后VEGF水平也明显低于手术前（P＜0．05），而良性组手术前后VEGF水平无明显差异（P＞0．05），各组VEGF水平分别与肿瘤病理组织学类型，病理分组和患者年龄均无明显关系（P＞0．05），结论：VEGF与卵巢上皮性肿瘤的发生发展密切相关，可能成为反映卵巢上皮性肿瘤恶性行为的重要标志物。     

舌癌术前化疗PCNA、bcl—2、Bax基因表达及临床意义

目的：通过舌癌术前化疗增殖细胞核抗原（PCNA）和细胞凋亡相关基因bcl-2、Bax表达的研究,探讨舌癌的化疗作用机制。方法：对舌乳头状瘤、舌癌和舌癌术前化疗标本共34例,采用免疫组织化学染色技术－酶标链亲和素生物素法（LSAB）染色并进行光镜下观察。结果：PCNA在舌癌中的表达最强,在舌癌术前化疗中的表达明显减弱（P＜0．05）,其与舌乳头状瘤表达相似（P＞0．05）。bcl-2在舌癌术前化疗及舌乳头状瘤中低表达（P＞0．05）,舌癌中表达明显增强（P＜0．05）。Bax在舌癌组和乳头状瘤组中表达有明显差异（P＜0．05）。结论：化疗药物抑制肿瘤生长的可能与抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞程序性死亡有关,提示舌癌术前化疗对肿瘤的预后有重要意义。     

竹叶提取液对小鼠移植性肿瘤生长的抑制作用

目的：探讨竹叶提取液对小鼠移植性肿瘤生长的抑制作用及对免疫功能的影响。方法：观察不同剂量竹叶取液对接种H22－肝癌细胞的小鼠的肿瘤生长和单核巨噬细胞功能的影响，检测小鼠胸腺指数、脾指数的变化。结果：与对照组相比，大、中剂量实验组动物瘤重明显减轻，单核巨噬功能显增强，胸腺（脾）指数显提高（P＜0．05）。结论：竹叶提取液对小鼠移植性肿瘤有明显的抑制作用。