血浆与血清八种酶活性测定对比分析

测定酶活性最常用的标本为血清，而分离血清需要较长的时间．用血浆代替血清进行临床常用的分析，可减少样品放置造成的误差[1]．本文观察了临床常用酶（ALT，ASTγ－GT，CK，LDH，HBDH，ALP，ACP）血浆与血清之间的差异．材料和方法一、材料1．标本来源我院门诊体检者，随机抽样．2仪器BeckmanCX7全自动生化分析仪．3试剂ALT、AST、γ－GT，CK、LDH、ALP使用Beckman公司试剂盒；HBDH，ACP使用北京中生公司试剂盒．4抗凝剂肝素钠抗凝每ml血用15U二、方法静脉抽空腹血6ml，分别注入肝素抗凝管（15U／ml血）和普通试管各…     

七种酶的不同批号试剂对血清标本测定结果的比较

目前全自动生化分析仪及半自动生化分析仪已广泛应用于各级医院的临床生化实验室，所以各个实验室都不同程度地开展了血清酶的速率法测定，但其所用试剂购自不同厂家或同一厂家的不同批号．笔者通过对七种酶，即谷丙转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、γ－谷氨酰转换酶（γ－GT）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、α－羟丁酸脱氢酶（α－HBD）及谷草转氨酶（AST）以不同厂家或同一厂家不同批号的试剂来测定，初步比较其测定结果．现将实验结果报告如下．1材科和方法1．1试剂1．1．1ALT试剂盒：北京中生公司，批号95091及9311…     

标本溶血对生化检验结果的影响

目的：探讨标本溶血对生化检验结果的影响。方法：用日立7020全自动生化分析仪检测20份正常人血液标本溶血前和溶血后的谷丙转转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、γ－谷氨酰转肽酶（γ－GT），总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、尿素氮（BUN）、肌肝（CRE）、尿酸（UA）、葡萄糖（Glu）、胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、载脂蛋白－A（APo-A）、载脂蛋白－B（APo-B)、高密度胆蛋白（DHL－C）、钙（Ca)、乳酸脱氢酶（LDH）的值，并进行了比较和统计分析。结果：ATL、AST、ALP、γ－GT、TBIL、DBIL、CRE、GLu,Apo-B、LDH的值在溶血前后有非常显著性差别（P＜0．001），APo-A的值在溶血前后有显著性差别（P＜0．05），其中，ALT、AS、TBIL、DBIL、LDH的值溶血后比溶血测得的值高，ALP、γ－GT、CRE、GLu、APo-A,APo-B的值溶血后比溶血前测得的值低，而TP、ALB、BUN、DHL－C、CHO、TG、Ca、UA的值在溶血前后则无显著性差别（P＞0．05）。结论：溶血对较多的生化检验项目有明显的干扰影响，其机制有多种原因，应尽量避免或减少标本的溶血，使检验结果更准确可靠。     

酶试剂动态零值对测定结果的影响

酶试剂动态零值对测定结果的影响彭毅（重庆市第八人民医院检验科，６３００１５）在许多酶的连续监测法分析中存在着动态零值的影响。所谓动态零值是空白试剂在没有与被测酶作用的情况下，空白吸光度液就发生定向改变而产生的一种假活力值。在酶与底物的反应过程中，这种...     

糜蛋白酶抑制法测定LD1

LDH为H亚基和M亚基所组成的四聚体，H亚基含酸性氨基酸残基较多，M亚基含Arg、LyS等碱性氨基酸残基较多．α-糜蛋白酶可选择性地切断LDH同工酶肽链，使其立体结构改变而失活；其作用位点主要是Ars和Lys残基。我们采用糜蛋白酶抑制法测定LDH1，取得满意效果。材料和方法一、试剂1．糜蛋白酶试剂α-糜蛋白酶（800U／mg）100mg，尿素30g，加pH6．5Tris－HCl至100ml．2．LDH测定试剂北京中生公司产品。二、方法先在BT－224自动生化分析仪上预置下列参数：计算因子4921、波长340nm，温度37℃、延迟时间40s、测定时间15s、测定次数4次…     

γ-GT试剂在四种反应温度中的试剂空白速率

我们发现γ－ＧＴ试剂的空白速率冬季高于夏季，且同一试剂在不同仪器中有明显差别，遂对γ－ＧＴ试剂在不同反应温度中的试剂空白速率作了一组试验。现报告如下。１材料和方法１．１仪器和试剂ＣＯｂａｓＦＡＲＡ离心式自动分析仪。γ－ＧＴ测定试剂盒（底物为Ｌ－γ－谷...     

腺苷脱氨酶双试剂测定的全自动分析方法

目的在全自动生化仪上建立双试剂测定腺苷脱氨酶(ADA)活性的方法。方法在全自动生化仪上编写测定程序,孵育时间240s,读空白时间60s,延迟时间30s,连续监测时间120s,主波长340nm,副波长410nm。结果本法试剂稳定,精密度良好,批内CV3.1%,批间CV3.9%,线性范围200U/L,参考范围4～25U/L。结论双试剂全自动分析腺苷脱氨酶,方法设计符合全自动分析条件,精密度高,结果准确。     

2台日立7600生化分析仪6种血清酶测定结果可比性评价

我科于2001年和2006年先后引进2台7600-020E生化分析仪,由于仪器的损耗程度不同,因此测定结果也可能有一定差异。我们参考文献,选取ALT、AST、γGT、ALP、LDH、CK 6种酶进行比对测试。     

血清γ-GT同工酶快速琼脂糖电泳测定法

采用不连续缓冲体系的琼脂糖电泳测定血清γ－GT同工酶的方法。测定正常人血清标本可得到4条区带，其中以γ－GT1含量为最高，约占总酶活性的63％，其余依次为γ－GT3、γ－GT4和γ－GT2。46例γ－GT总酶在100u／L以上的血清标本测定结果显示：肝癌患者血清中γ－GT2含量明显增高，与正常人组对照P＜0．001。另外，急性梗阻性黄疸患者血清γ－GT3含量异常升高。     

经日立-罗氏检测系统量值传递后的新鲜混合血清作临时酶校准品的可行性

目的分析经日立-罗氏检测系统(A系统)量值传递后的新鲜混合血清作临时酶校准品的可行性。方法先用日立-罗氏检测系统将c.f.a.s的酶的量值传递给新鲜混合血清作临时酶校准品,然后用A系统、Roche Modular P分析仪与科华-东菱试剂(B系统)、Dade Dimension RxL分析仪与配套试剂(C系统)、Dade Dimension RxL分析仪与科华-东菱试剂(D系统)、Beckman CX9分析仪与配套试剂(E系统)、Hitachi 7170A分析仪与Randox试剂(F系统)、Olympus 640分析仪与北京中生试剂(G系统)测定50份新鲜血清和临时酶校准品的ALT,AST,CK,LDH,ALP,γ-GT活性,最后用临时酶校准品标示值与测定值之比作为校正因子,校正50份新鲜血清的测定结果,并进行校正前后的结果比较和临时酶校准品互通性分析。结果校正前各检测系统测定结果间有较大的差异(CV4.99%~13.98%),校正后差异变小(CV1.30%~10.34%),其中B,C,E,F系统中ALT,AST,CK,LDH,ALP,γ-GT和D,G系统中ALT,AST,CK与A系统结果偏差明显变小,并且仪器与试剂配套的C,E系统间为各检测系统间最小;但D,G系统中LDH,ALP,γ-GT差异改变不明显。结论采用新鲜混合血清作临时酶校准品有一定的应用价值,但使用前必须进行酶校准品互通性检验,才能保证每项酶的测定结果的准确和可靠。     

酶校准品在血清酶测定结果标准化中的应用

目的研究酶校准品用于校准不同的“仪器/试剂”测定系统时,能否增加各系统间血清酶测定结果的可比性。方法在日立7170A和CX9全自动生化分析仪上用4种不同的试剂分别测定150份不同浓度分布的新鲜血清中的丙氨酸转氨酶(ALT),天门冬氨酸转氨酶(AST),碱性磷酸酶〔(ALP),100份〕,肌酸激酶(CK),γ-谷氨酰转肽酶(GGT),乳酸脱氢酶(LD)等6种酶的活性。同1份标本用4种不同的“仪器/试剂”测定系统进行校准前和校准后测定,比较各测定系统测定前后的均值。结果发现不同的“仪器/试剂”系统间的测定结果存在一定差异(各系统间均值的CV值≥7.0%,其中ALP为27.0%,GGT为17.4%),用统一的酶校准品校准后,各系统间测定结果的差异明显减小(除ALP和GGT的CV值分别为6.6%和5.1%外,其余各项目的CV值均＜5%)。结论统一的某些酶校准品能增加不同的测定系统间结果的可比性。     

ALT试剂空白OD值、延迟时间与测定结果的关系

表１ＡＬＴ试剂空白ＯＤ值在１．２００１～１．５０００结果分析ＡＬＴ试剂是临床检验常用项目，随着全自动生化仪的广泛运用，偶联法测定ＡＬＴ也在普及。由于ＡＬＴ试剂空白（底物浓度）ＯＤ值不是一个衡定值，随着温度升高、溶解时间延长而降低。延迟时间在ＡＬＴ测定中与试剂空白ＯＤ值及结果有较大的关系。现将我们观察结果报告如下。１材料与方法１．１观察对象日常工作标本１５００例。并用进口定值血清（批号：宝灵曼１９１１６９１１３，靶值１２８单位，以Ａ值简称、１９２０１９０６，靶值５５单位，以Ｂ值简称）作为监控参照。…     

ALT试剂空白OD值、延迟时间与测定结果的关系

ALT试剂是临床检验常用项目,随着全自动生化仪的广泛运用,偶联法测定ALT也在普及.由于ALT试剂空白(底物浓度)OD值不是一个衡定值,随着温度升高、溶解时间延长而降低.延迟时间在ALT测定中与试剂空白OD值及结果有较大的关系.现将我们观察结果报告如下.……     

肝癌γ-谷氨酰转肽酶糖链的凝集素亲和分析

目的：研究肝癌γ－谷近酰转肽酶（γ－GT）糖链结构的变化以寻找新的肝癌标志物。方法：将肝癌组织和癌旁正常肝组织中γ－GT抽提液、肝癌患者血清和正常人血清，分别用ConA和DSA两种固相凝集素柱进行亲和层析，有荧光分光光度法测定各收集管的γ－GT活力并计算不同结合组分的百分比。结果：肝癌组织与癌旁正常肝组织相比，其γ－GT中与ConA柱不结合的组分明显升高，弱结合和强结合的组分显著降低；在DSA柱上则相反，不结合的γ－GT组分显著降低，弱结合和强结合的γ－GT组分显著升高。血清γ－GT分析结果与此相似。结论：肝组织癌变后，其γ－GT的糖链结构发生了明显变化：2天线糖链结构明显减少，3、4天线糖链结构明显增高。提示带多天线糖链结构的γ－GT可能是一种肝癌标志物。     

影响动态零值的因素

动态零值实际上是检测试剂每分钟吸光度的改变量(试剂 A)与计算因数 ( F )的乘积。它是影响酶活性测定的因素之一。笔者对影响动态零值的各种因素予以探讨。1　影响动态零值的各种因素1 .1　试剂盒厂家不同　不同厂家的酶试剂盒 ,测得的动态零值不同。有时同一厂家、不同批号的试剂盒 ,测得的动态零值也不同。各实验室尽量使用同一厂家的酶试剂盒 ,即使更换批号也应做动态零值的测定 ,以便了解试剂盒的质量。1 .2　仪器不同　不同的仪器 ,测得的动态零值不同。这是由于生化分析仪本身比色杯光径和分析波长有偏差 ,以及加量系统和时间控制…     

血清CK-MB活力的免疫抑制速率法及临床应用

本文采用德国B．M生产的CK－MB试剂盒于VITALAB－半自动生化分析仪上自编程序参数，快速测定血清CK－MB活力，收到满意效果。该法具有灵敏、简便、快速、微量等优点，特别适合医院常规和急诊开展CK－MB活力的检测。1材料与方法1．1试剂①CK－MB（NAC－act）试剂盒（德国B．M产品）。②CK总活力测定试剂盒（TRACE产品）。1．2仗器VITALABMICRO半自动生化分析仪（荷兰）。1．3测定方法于半自动生化分析仪上预置参数。波长340urn，温度30C，延迟时间300s，测定时间60s。试剂量500UI．样本量20UI．混合进作量450UI．因数…     

多层螺旋CT胰腺单期最佳扫描时相的研究

目的探讨多层螺旋CT(MSCT)单期增强扫描在对可疑胰腺癌诊断中合理的延迟时间。方法随机选择50例健康志愿者,分为A、B两组。①A组行胰腺动态螺旋CT增强扫描,对比剂总量为120ml,注射流率为2.5ml/s,分别测定腹主动脉、门静脉、胰腺实质及肝脏实质在增强后不同时间点的CT值,得出时间-密度曲线。②B组行移床式、40s、60s双期增强扫描,对比剂总量和流率同上,分别评价40s与60s胰周血管的显示率及显示程度。结果①时间-密度曲线结果提示,腹主动脉、门静脉强化到达峰值平均时间为60s,胰腺实质强化到达峰值时间为50s(50~70s胰腺实质强化基本处于平台期)。肝脏实质强化到达峰值时间为60s(60~80s肝脏实质强化基本处于平台期)。并且有明显的密度差。②对于胰周血管的显示率,40s和60s均为100%。而对于显示程度,60s扫描明显优于40s扫描。结论若对可疑胰腺癌行多层螺旋CT单期增强扫描。以对比剂总量为120ml,注射流率为2.5ml/s,延迟时间定为60s较佳。     

用赋值新鲜血清实现开放检测系统测定结果的溯源性

目的 评价迈瑞(MINDRAY)BS-400全自动生化分析仪(简称BS-400)和重新赋值的迈瑞常规生化复合校准品以及北京中生试剂组成的开放检测系统(简称开放检测系统),实现酶活性测定结果溯源性的可行性.方法 在BS-400上使用北京中生试剂和迈瑞原装配套试剂:丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH).以迈瑞原装配套试剂检测混合血清作为量值传递载体,用其校准BS-400和使用北京中生试剂ALT、AST、GGT、ALP、CK,LDH组成的检测系统,对迈瑞常规生化复合校准品重新赋值,并以赋值后的迈瑞常规生化复合校准品、北京中生试剂ALT、AST、GGT、ALP、CK、LDH及BS-400组成开放检测系统,与迈瑞配套检测系统作样本比对实验.结果 两套不同检测系统作样本比对实验,二者所测结果相关性良好,相关系数(r)>0.99,比对实验结果在医学决定水平处的系统误差均低于允许误差.结论 用赋值新鲜血清作为量值传递载体,实现开放检测系统测定酶活性的结果具有溯源性和可比性.     

急性有机磷农药中毒患者血清酶学变化与病情及预后的相关性研究

目的探讨急性有机磷农药中毒（AOPP）患者血清酶学变化与病情及预后的关系。方法150例AOPP患者于入院1、3、5、7、14d抽取空腹静脉血，测定血清肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同功酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）／丙氨酸氨基转移酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）和γ-谷氨酰转肽酶（GGT）水平，并将结果与50例健康志愿者进行对照。结果AOPP患者血清CK、LDH、CK-MB、AST、ALT均有不同程度的升高，ALP及GGT均降低。所有酶学指标随病情的改善而呈恢复趋势。结论血清酶学变化可以作为判断急性有机磷农药中毒患者病情及预后的指标，酶学极度改变者，常提示预后不良。     

谷氨酸脱氢酶监测在肝移植中的应用

目的　探讨谷氨酸脱氢酶(GLD)在肝移植术中及术后早期对供肝冷、热缺血及再灌注损伤程度的判断价值以及对肝移植预后的评估作用。方法　对 18例原位肝移植患者及 18例腹腔其他器官移植患者从下腔静脉阻断至术毕每 0. 5h一次,术后每日晨一次连续 30d测定患者血清GLD、ALT、AST、LDH、γGT、ALP的活性。结果　在新肝移植后 (下腔静脉开放 ) 20min~3h内,GLD、AST、ALT、LDH都出现一明显上升又回落过程,其相互间的相关性良好,而与γGT、ALP不相关。其中以GLD上升幅度最大,且峰值出现较早,GLD的上升幅度变化率与ALT、AST、LDH变化率有显著性差别(P<0. 001)。GLD的平均变化率是LDH的 6. 7倍。肝移植术后预后良好组GLD的升高平均值为 169. 6U/L,预后不良组为 1 719. 6U/L。术后GLD>800U/L的 4例肝移植患者,平均生存期为 19. 5d。结论　血清GLD可作为肝移植早期判断供肝损伤程度的有效指标,其敏感性、特异性显著高于ALT、AST、LDH。肝移植术后患者血清GLD水平剧增示预后不良。