人卵巢癌重症联合免疫缺陷小鼠腹腔移植瘤模型的建立及其生物学研究

目的建立人卵巢癌重症联合免疫缺陷小鼠(SCID鼠)移植瘤模型,为研究人腹水型卵巢癌的实验研究提供合适的动物模型。方法将2例卵巢癌患者手术切除标本移植于SCID鼠腹腔,原代移植瘤形成后进行鼠间传代,观察移植瘤的生长、转移及腹水形成情况,做腹水细胞学计数、涂片,检测荷瘤鼠血中肿瘤标记物CA125的浓度,肿瘤作病理学检查。结果成功建立3只原代人卵巢癌SCID鼠移植瘤模型,原代移植成功率为37.5%,自第四代后,移植瘤的传代成功率为100%,随着传代次数的增加,移植瘤的成瘤潜伏期及荷瘤鼠的生存期逐渐缩短,荷瘤鼠血中肿瘤标记物的浓度升高,病理组织学证实:移植瘤保持了原卵巢癌生物学特征。结论成功建立了人卵巢癌SCID鼠移植瘤模型,移植瘤保持了原卵巢癌生物学特征,是研究人卵巢癌较理想的动物模型。     

人免疫重建荷子宫内膜癌SCID小鼠动物模型的建立

目的构建人免疫重建皮下荷人子宫内膜癌移植瘤SCID小鼠模型。方法将SCID小鼠随机分成空白对照组、单纯免疫重建组、荷瘤组及模型组,分别经腹腔注射人淋巴细胞和(或)皮下接种HEC-1B细胞建立相应模型。观察荷瘤鼠成瘤、移植瘤生长及组织学特征;ELISA法检测小鼠血清中人IgG含量,流式细胞术、免疫组化法检测小鼠外周血及脾脏T细胞表型。结果小鼠成瘤率均为100%,但模型组小鼠成瘤潜伏期延长、移植瘤生长受限。单纯免疫重建组及模型组小鼠外周血、脾脏分别可检出人IgG及人T淋巴细胞表型。未发现移植物抗宿主情况,空白对照组、单纯免疫重建组、模型组小鼠体质量无显著差异。结论初步建立了人免疫重建荷人子宫内膜癌SCID小鼠复合模型。     

人胃癌裸鼠原位移植瘤P53 C-erbB-2癌基因 蛋白免疫组化和超微结构的研究

目的：为探讨胃癌的分子发病机制和实验治疗提供理想动物模型。方法：采用显微外科原位移植技术,将47例人胃癌标本移植裸鼠胃黏膜层,观察原位移植成瘤、侵袭和转移,对P53、C-erbB-2、raSP21癌基因的表达及形态学特征。结果：从47例胃癌标本中筛选出人胃腺癌、鳞癌、鳞腺癌三株裸鼠原位移植模型,对三种癌蛋白呈阳性表达,并与肿瘤生长方式、侵袭深度和淋巴结转移有关,超微结构观察移植瘤与来源人胃癌细胞相似。结论：此模型何用于胃癌的分子发病机理、侵袭、转移及实验治疗。     

三株人白血病细胞系/SCID小鼠模型的建立及其生长特性

本文报道了3株人白血病细胞系(HL-60,CEM和J6-1/SCID)小鼠模型的建立及其生长特点。发现人粒细胞白血病细胞系(HL-60)和T淋巴细胞系(CEM)给SCID小鼠静脉或腹腔移植后均发生全身性白血病,外周血可见白血病细胞。J6-1细胞(可能来自恶性淋巴瘤)眼眶后静脉移植后具有恶性淋巴瘤生长特点,在局部形成瘤块(与瘤细胞漏出血管有关),并侵及颌下淋巴结,无全身性播散。由此可见,人白血病细胞/SCID小鼠模型更类似于人类白血病,是进行人类白血病研究新的良好的模型。     

SCID鼠人源化及视网膜母细胞瘤模型的建立

目的进行SCID鼠的人源化并建立人化SCID鼠视网膜母细胞瘤模型。方法SCID鼠腹腔注射人脐带血单个核细胞(CBMNC)生理盐水悬液。两周后割尾采血,检测其IgG水平。将10只人化的SCID鼠混分为两组,分别于腹股沟皮下注入视网膜母细胞瘤细胞株(SoRb-70),浓度分别为2×106,2×107,然后对肿瘤的发生率及瘤体大小连续观察,并作统计学分析,最后做病理解剖及组织切片观察。结果该实验经腹腔注射移植入SCID小鼠体内的CBMNC可在小鼠体内存活并大量增殖。移植后2～4周,SCID小鼠血清中即可检测到人免疫球蛋白。视网膜母细胞瘤细胞以两个梯度接种人化SCID鼠10只,观察8周,10只SCID小鼠7只致瘤。结论该模型的建立方法科学合理,在一定程度上可模拟人眼视网膜母细胞瘤的生物学行为,为进一步研究其发生发展机制及免疫治疗提供了一种模型。     

人脊索瘤细胞系CM-319的建立及其生物学特性的观察

目的建立人脊索瘤细胞系,为脊索瘤研究提供实验模型。方法取经病理证实的新鲜脊索瘤手术标本(取自于1例42岁男患者行手术切除后的肿瘤),进行体外原代组织块培养。对存活细胞进行形态学观察、组织化学染色、细胞周期检查、染色体分析、电镜观察、异种移植和体外侵袭实验等。结果建成细胞系CM-319,经近两年的体外培养,已连续传代百余次。其形态学表现、组织化学染色、电镜观察和异种移植等均符合脊索瘤细胞特征。细胞倍增时间为33h,细胞周期测定显示:G1期为55.6%,G2期为21.9%,S期为22.5%,G2/G1为1.90。染色体具有亚三倍体核型。异种移植成瘤率100%,具有侵袭性。结论CM-319是一株人脊索瘤细胞系,可用于对脊索瘤的研究。     

人脊索瘤细胞系CM-319的建立及其生物学特性的观察

目的 建立人脊索瘤细胞系，为脊索瘤研究提供实验模型。方法 取经病理证实的新鲜脊索瘤手术标本(取自于1例42岁男患者行手术切除后的肿瘤)，进行体外原代组织块培养。对存活细胞进行形态学观察、组织化学染色、细胞周期检查、染色体分析、电镜观察、异种移植和体外侵袭实验等。结果 建成细胞系CM—319，经近两年的体外培养，已连续传代百余次。其形态学表现、组织化学染色、电镜观察和异种移植等均符合脊索瘤细胞特征。细胞倍增时间为33h，细胞周期测定显示：G1期为55．6％。G2期为21．9％，S期为22．5％，G2／G1为1.90。染色体具有亚三倍体核型。异种移植成瘤率100％，具有侵袭性。结论 CM-319是一株人脊索瘤细胞系，可用于对脊索瘤的研究。     

高成瘤性前列腺癌细胞亚克隆细胞株的制备及其生物学特性的研究

目的:建立人前列腺癌LNCap细胞高成瘤性亚克隆细胞株并探讨其生物学特性.方法:慢病毒载体PGK-luciferase-GFP转染LNCap细胞,稳转株与Matrigel混合注入SCID小鼠皮下,反复消化法原代培养皮下瘤获得亚克隆细胞株,CCK8及Transwell实验检测细胞增殖及迁移力;用亲代LNCap细胞及亚克隆细胞皮下注射SCID小鼠成瘤,观察两组瘤体生长及大小,并用生物活体发光、病理及免疫组织化学检测瘤体情况.结果:与亲代LNCap细胞相比,亚克隆细胞的生长速度增快,迁移力增强,皮下瘤成瘤率增高,荧光信号强度增加,皮下瘤组织切片HE染色镜下可见核分裂相,免疫组织化学AR染色阳性.结论:制备的人前列腺癌亚克隆细胞株其恶性生物行为增加.     

人结肠鳞癌直肠鳞腺癌裸小鼠原位移植高转移模型的建立及超微结构的研究

我们在建立了人结直肠腺癌裸鼠原位移植肝转移模型的基础上,又将临床极罕见的人结肠鳞癌、直肠鳞腺癌新鲜组织成功地原位移植裸鼠,在国际上首次建立了一株人结肠鳞癌裸鼠原位移植高转移模型ＨＣＡ－ＨＭＮ－３和一株人直肠鳞腺癌裸鼠原位移植高转移模型ＨＲＡ－ＨＭＮ－４,移植瘤的生物学特性稳定。本文报告原位移植瘤的生长、侵袭和转移及超微结构特征。１　材料与方法１－１　实验动物　ＢＡＬＢ／Ｃ－ｎｕ／ｎｕ裸小鼠由中国医学科学院肿瘤医院实验动物室提供,鼠龄３～５周、体重１７～２０克,在ＳＰＦ（Ｓｐｅｃｉｆｉｐａｔｈｏ…     

非功能性胰岛细胞瘤的超声诊断

目的：提高对非功能性胰岛细胞的认识和诊断水平。方法：对20例非功能性胰岛细胞瘤病例进行回顾性总结。结果：非功能性胰岛细胞临床表现无特异性,超声等影像学检查出率高,但特异性诊断正确率低,彩色多普勒超声检查显示83．3％的瘤体血供丰富,病理检查恶性胰岛细胞瘤的比例达75．0％,免疫组织化学染色检测显示非功能胰岛细胞瘤大多具有分泌功能,结论：提高对非功能性胰岛细胞瘤的声像图及病理方面的认识是术前作出正确诊断的关键。     

无功能性胰岛细胞肿瘤16例诊疗分析

目的：总结胰腺无功能性胰岛细胞肿瘤的诊治经验。方法：回顾分析近10年我院收治的16例无功能性胰岛细胞肿瘤的临床资料。男性5例，女性11例。平均年龄41．9岁。肿瘤位于胰头7例(44％)、胰颈部1例(6％)、胰体尾8例(50％)。良性5例(31．3％)，低度恶性6例(37．5％)，恶性5例(31．3％)。术前得到影像学定性诊断者7例(43．8％)，得到定位诊断13例(81．3)％。结果：14例接受了手术治疗。手术方式分别有肿瘤切除术、胰体尾切除术及肿瘤 部分胰腺切除术。主要并发症为胰瘘5例(35．7％)、腹腔脓肿2例(14．3％)、假性囊肿形成1例(7．1％)，无手术死亡，均获痊愈。结论：胰岛细胞肿瘤临床少见，易误诊和误治。CT和B超对定性和定位诊断准确率不高。加强对本病的认识并不断积累经验是诊断的关键。选择合理的手术方式和妥善的术后处理是预防并发症的关键。     

Targeting tumor-associated macrophages in an orthotopic murine model of diffuse malignant mesothelioma

Tumors are a mixture of neoplastic and host stromal cells, which establish a microenvironment that contributes to tumor progression. In this study, the contribution of tumor-associated macrophages (TAMs) to tumor growth and metastasis was examined using an orthotopic, immunocompetent murine model of diffuse malignant peritoneal mesothelioma. The expression profile of cytokines and chemokines in solid tumors was consistent with a M2-polarized, TAM-mediated immunosuppressive microenvironment. TAMs were targeted using liposome-encapsulated clodronate (CLIP). Exposure of tumor spheroids to CM-DiI-labeled CLIP in situ confirms targeting of macrophages and not mesothelioma cells. Intraperitoneal (i.p.) delivery of CLIP produced apoptosis in tumor spheroids and solid tumors in contrast to delivery of liposome-encapsulated PBS or PBS. Mice received an i.p. injection of mesothelioma cells with CLIP delivered i.p. every 5 days. This treatment protocol produces a 4-fold reduction in the number of tumors, a 17-fold reduction in the relative tumor burden, and a 5-fold reduction in invasion and metastasis when compared with mice exposed to liposome-encapsulated PBS or PBS. Following transplantation of tumor spheroids and treatment with CLIP, mice showed a 4-fold reduction in the number of tumors and a 15-fold reduction in relative tumor burden. Mice bearing established tumors showed a 2-fold reduction in the number of tumors and relative tumor burden when exposed to half the previous dose of CLIP delivered by repeated i.p. injection. These reductions in tumor burden are statistically significant and identify TAMs as an important host-derived cell that contributes to growth, invasion, and metastasis in diffuse malignant peritoneal mesothelioma.     

Endothelial progenitor cells' "homing" specificity to brain tumors

Current treatment of malignant glioma brain tumors is unsatisfactory. Gene therapy has much promise, but target-specific vectors are needed. Endothelial progenitor cells (EPCs) have in vivo homing specificity to angiogenic sites and are thus potential vehicles for site-specific gene therapy. However, reports of EPCs "homing" to intracranial solid tumors are lacking. We investigated EPCs' "homing" specificity using a murine intracranial glioma model. EPCs, derived from human cord blood, were labeled with a fluorogenic agent CFSE and intravenously injected into SCID mice bearing orthotopic gliomas. At 7-14 days after EPC injection, mouse brains and other vital organs were examined for distribution of transplanted EPCs. As controls, CFSE-labeled human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) and EPCs were intravenously injected into matched glioma SCID mice (HUVEC control groups) and nontumor SCID mice (nontumor-bearing control groups), respectively. Fluorescence image analysis revealed that systemically transplanted EPCs 'homed' to brain tumors with significantly higher specificity as compared to other organs within the experimental group (P<0.001) and to anatomically matched brain sections from the control groups (P<0.001). Our study demonstrates EPCs' in vivo tropism for intracranial gliomas, with potential for cell delivery of brain tumor spatial-specific gene therapy.     

Modulation of tumor growth by inhibitory Fc(gamma) receptor expressed by human melanoma cells

The efficacy of anti-tumor IgG reflects the balance between opposing signals mediated by activating and inhibitory Fc(gamma) receptors (Fc(gamma)Rs) expressed by effector cells. Here, we show that human malignant melanoma cells express the inhibitory low-affinity Fc(gamma) receptor Fc(gamma)RIIB1 in 40% of tested metastases. When melanoma cells were grafted in nude mice, a profound inhibition of Fc(gamma)RIIB1 tumor growth that required the intracytoplasmic region of the receptor was observed. IgG immune complexes (ICs) may be required for this inhibition, since sera from nude mice bearing tumors contained IgG that decreased the proliferation of Fc(gamma)RIIB1-positive cells in vitro, and tumor development of Fc(gamma)RIIB1-positive melanoma lines was not inhibited in antibody-defective severe combined immunodeficiency (SCID) mice. Passive immunization of SCID mice with anti-ganglioside G(D2) antibody resulted in significant inhibition of growth of Fc(gamma)RIIB1-positive tumors in an intracytoplasmic-dependent manner. Altogether, these data suggest that human melanoma cells express biologically active inhibitory Fc(gamma)RIIB1, which regulates their development upon direct interaction with anti-tumor antibodies. Therefore, Fc(gamma)R expression on human tumors may be one component of the efficacy of antibody-mediated therapies, and Fc(gamma)R-positive tumors could be the most sensitive candidates for such treatments.     

重症联合免疫缺陷鼠腹膜后荷人卵巢癌动物模型的建立

目的探讨在重症联合免疫缺陷(SC ID)鼠体内建立腹膜后荷人卵巢癌动物模型的可行性。方法将处于对数生长期的人卵巢癌细胞株HO8910 1×106个细胞注射于SC ID鼠腹膜后髂血管处,观察荷瘤鼠的生存状态。4周后处死荷瘤鼠,取出病灶,观察其病理组织学特征。结果种植的移植瘤保持了人卵巢癌组织学特征。结论成功建立SC ID鼠腹膜后荷人卵巢癌的动物模型。     

CD147对白血病细胞U937侵袭能力的影响

本研究探讨CD147对白血病细胞U937侵袭能力的影响。将U937细胞按照不同的处理方式分为以下4组：正常U937细胞组（对照组），脂多糖（LPS，50μg/ml）诱导组（LPS组），CD147单克隆抗体（10μg/ml）阻断组（CD147mAb组），LPS诱导及CD147单克隆抗体阻断组（LPS4-CD147mAb组）。使用RT—PCR和流式细胞术分别检测各组中CD147的mRNA和蛋白表达情况；应用RT—PCR和明胶酶谱法分析基质金属蛋白酶（MMP）的表达及活性；采用体外细胞侵袭实验检测细胞运动和侵袭能力的变化；将DAPI标记的U937细胞经尾静脉注入SCID小鼠体内观察细胞在各组织器官中的转移情况。实验结果显示，LPS在体外能够诱导白血病细胞U937表面CD147的表达，同时增强MMP-2和MMP-9的表达、活化和分泌；使用CD147抗体阻断CD147后，MMP-2和MMP-9的分泌及活性下降；U937细胞经LPS诱导后，其体外侵袭能力增强；U937细胞经尾静脉注入SCID小鼠后发生肺部浸润和转移，并检测到CD147、MMP-2和MMP-9的表达增强，CD147抗体在一定程度上能够抑制上述现象。结论：LPS可诱导u937细胞表面CD147分子表达增加，CD147通过上调U937细胞MMP-2和MMP-9的分泌和活性促进U937细胞的侵袭和转移。     

腮腺恶性肿瘤的超声诊断研究

目的：采用二维声像图和彩色多普勒血流显像（CDFI）对33例腮腺恶性肿瘤进行研究,探讨其超声诊断依据。方法：除按常规方法观察肿瘤外,注重在检查中利用探头按压、推移肿瘤,借此感知其质地和活动度、有无压缩改变。并作同侧颈深上淋巴结检查间接协助诊断。结果：声像图显示肿瘤质地坚硬25例、活动度无或欠佳23例,同侧颈深上淋巴结呈转移灶声像图特点者11例（其中9例经病理证实）。超声诊断恶性肿瘤正确率73％。并对9例误诊者进行了分析。结论：超声诊断主要以二维声像图的特点作综合分析,肿瘤质地和活动度以及颈深上淋巴结有无转移在诊断时有一定的价值。CDFI能在声像图上提供肿瘤的血管分布和血流的信息。     

SerpinB9与肿瘤关系及其在皮肤肿瘤领域的研究进展

死亡受体途径和穿孔素/颗粒酶途径是免疫系统杀伤肿瘤细胞的主要机制,SerpinB9是已知的人体中唯一能够抑制颗粒酶B(granzyme B,GrB)水解活性的蛋白。研究表明,肺癌、前列腺癌等肿瘤细胞可通过表达SerpinB9抵抗细胞毒性淋巴细胞通过穿孔素/GrB介导的杀伤作用。在皮肤肿瘤领域,恶性黑色素瘤、鳞状细胞癌及皮肤淋巴肿瘤细胞中均可检测到SerpinB9表达,并通过促进免疫逃逸、抵抗免疫治疗、影响肿瘤微环境等多种途径促进肿瘤进展。此外,已有研究证实SerpinB9抑制剂可抑制恶性黑色素瘤生长,表明SerpinB9可作为潜在的抗肿瘤治疗靶点。本文将对SerpinB9在皮肤肿瘤领域的研究现状进行综述。