腺苷及腺苷A1受体在小鼠肾小球系膜细胞收缩中的作用

目的:观察腺苷A1受体(A1AR)在小鼠肾小球系膜细胞的表达,探讨腺苷和A1AR是否参与肾小球系膜细胞的收缩。方法:采用分样筛法提取原代小鼠肾小球系膜细胞,CCK8试剂盒检测细胞增殖,免疫荧光染色和Western blot观察A1AR在系膜细胞中的表达,每2min拍照动态观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激30min前后细胞面积的变化,对比腺苷、A1AR激动剂、A1AR抑制剂对细胞收缩的影响。结果:腺苷对系膜细胞的增殖无明显影响,A1AR主要表达于小鼠肾小球系膜细胞的胞浆中。腺苷和A1AR激动剂刺激48h后,系膜细胞在接触AngⅡ30min后的收缩反应显著增强,面积变化值分别达到8947±3658pixels和9813±1640pixels,显著大于正常对照组(4268±2131pixels,P<0.05);而使用A1AR抑制剂刺激48h后,系膜细胞的收缩反应有减弱趋势。结论:小鼠系膜细胞存在A1AR表达,腺苷及A1AR是调节系膜细胞收缩的重要机制。     

腺苷A1受体拮抗剂对异氟烷心肌保护作用的影响

目的 :调查异氟烷改善缺血后心肌功能的作用是否与腺苷A1受体有关。方法 :5组 (n =8)离体大鼠心脏Langendorff法灌注。全心缺血 2 0min ,再灌注 12 0min。记录分析应用异氟烷和 (或 )腺苷A1受体拮抗剂(DPCPX)后再灌注期舒张末期压 (EDP)、左室发展压 (DP)、室内压最大上升速率 (LV +dp/dtmax)和室内压最大下降速率 (LV dp/dtmin)的变化。结果 :异氟烷明显降低再灌注期EDP ;增强DP、LV +dp/dtmax和LV dp/dtmin的恢复(P <0 0 5 )。缺血前或缺血后给予DPCPX不能减弱异氟烷的保护作用 (P >0 0 5 )。结论 :异氟烷增强离体大鼠心脏缺血后的功能恢复 ,腺苷A1受体不参与异氟烷引起的心肌保护过程     

腺苷A2受体在特发性肺纤维化中的作用机制

特发性肺纤维化(IPF)是一种致命的慢性肺病,目前尚无一种治疗措施可以对其有完全的缓解.近年来研究表明,腺苷在IPF的发病过程中有重要意义.腺苷作为"抑制性代谢产物"的一种,其在炎症反应方面可进行自我限制,具有良好的修复机制.腺苷受体家族中A2最为强大,参与了多种炎症反应,可通过介导肺泡巨噬细胞中P38MAPK信号转导通路调控IL-6的表达,进而促进IPF的发生发展过程,提示腺苷A2受体可作为特发性肺纤维化治疗的新靶点.故此,本研究拟简析腺苷A2受体在IPF的发病机制.     

腺苷A1受体在妊娠期高血压以及子痫前期中的作用

目的 探讨腺苷A1受体(A1R)在妊娠期高血压以及子痫前期发病机制中的作用.方法 取剖宫产分娩的妊娠期高血压(n=6)、子痫前期(n=14)和正常对照(n=15)产妇胎盘组织,采用免疫荧光检测A1R在胎盘组织中的表达部位,蛋白质印迹法检测A1R在胎盘中的表达量.建立常氧、缺氧(8、24、48、72 h)以及缺氧复氧(8 h)滋养细胞模型,运用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测A1R在细胞中的表达情况,Transwell和蛋白质印迹法检测加入A1R拮抗剂8-环戊基-1,3-二丙基黄嘌呤(DPCPX)后对缺氧的胎盘滋养细胞侵袭性和蛋白激酶A(PKA)表达的影响.结果 A1R在胎盘表面的滋养细胞以及内皮细胞中均有表达.与正常胎盘比较,A1R在轻度和重度子痫前期胎盘组织中表达升高(P＜0.01).A1R在体外胎盘滋养细胞缺氧模型中的表达随着缺氧时间的延长而逐渐升高(P＜0.05).胎盘滋养细胞缺氧模型中滋养细胞的侵袭能力较正常组下降(P＜0.01),PKA表达下降(P＜0.05);加入拮抗剂DPCPX可以增强滋养细胞的侵袭性(P＜0.05),同时上调PKA的表达水平(P＜0.05).结论 缺氧程度的增加可以使A1R表达升高,A1R在胎盘滋养细胞中的作用机制可能与调节PKA相关.     

甘草的镇静催眠作用

甘草浸膏小鼠腹腔注射(ip)的LD_(50)为2.2g/kg。注入甘草浸膏50mg/kg可显著减少小鼠的自发活动和明显加强戊巴比妥钠对小鼠的催眠作用;注入甘草浸膏250mg/kg可明显延长小鼠戊巴比妥钠的睡眠时间。结果提示甘草具有镇静催眠作用。     

安神胶囊镇静催眠作用的研究

目的 研究安神胶囊的镇静催眠作用。方法 采用与戊巴比妥钠协同作用，强迫游泳“不动”法以及尾悬挂法等方法，观察安神胶囊的主要药理作用。结果 安神胶囊能明显延长戊巴比妥钠对小鼠的催眠作用时间，使戊巴比妥钠阈下催眠剂量所致睡眠动物数增加。结论 安神胶囊具有明显的镇静催眠作用，并且量效关系明显。     

腺苷A2A受体与帕金森病

腺苷在人类生物中不仅是细胞内的基本组成部分,同时也是在生理和病理状态都存在的细胞外组成成分.腺苷是腺嘌呤核苷酸的前提和代谢产物,在中枢神经系统(central nervous system,CNS)中,腺苷调节着运动,神经元保护、睡眠、觉醒、疼痛、药物上瘾及其他重要的过程,而这些过程的发生都是由其受体介导的[1].     

安眠灵镇静催眠作用的实验研究

目的 :观察安眠灵对小鼠的镇静、催眠作用。方法 :利用抖笼法和对阈下剂量戊巴比妥钠作用的影响等方法对安眠灵的镇静、催眠作用进行实验研究。结果 :安眠灵可使小鼠自主活动明显减少(P <0 .0 1 ) ;与阈下剂量戊巴比妥钠合用可使小鼠入睡个数增加 (P <0 .0 1 )。结论 :安眠灵具有镇静、催眠作用。     

中药复方镇静催眠作用的研究

目的：观察中药复方的镇静、催眠作用。方法：以蒸馏水为空白对照组,阳性药物对照组和高、中、低给药组连续灌胃给药7d,观察小鼠自主活动情况。结果：中药复方能减少小鼠自主活动次数,与对照组比较给药组差异有显著性。结论：中药复方对小鼠具有镇静、催眠作用。     

睡枣的镇静催眠作用

本实验验证了中药睡枣的复方制剂的镇静催眠作用。实验结果表明睡枣有明显地镇静催眠作用与酸枣仁相比,睡枣的作用强于酸枣仁,其作用强度随着剂量的增加而增强。事先制成睡枣的复方制剂其药理活性不变。此为中药剂型改革提供了理论基础。     

新型镇静催眠化合物B2对小鼠脑内单胺类神经递质水平的影响

目的研究新型镇静催眠化合物B2对小鼠脑内单胺类神经递质水平的影响。方法小鼠随机分为溶剂对照组和B2给药组（5mg／kg,ip）,采用高效液相色谱-电化学法（HPLC-ECD）检测B2对小鼠不同脑区中去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）和5-羟色胺（5-HT）等单胺类神经递质水平的影响;并用比色法测定化合物B2对小鼠下丘脑、纹状体及大脑皮质中单胺氧化酶（MAO）活性的影响。结果与对照组相比,B2（5mg／kg,ip）可使小鼠下丘脑中NE含量由（1.08±0．09）μg／g显著降低至（0．88±0．07）μg／g（P〈0．01）;纹状体中DA含量由（12．85±2．21）μg/g显著降低至（8．44±2．25）μg／g（P〈0．01）;下丘脑中5-HT含量由（1．12±0．12）μg／g显著降低至（0．56±0．18）μg／g（P〈0．01）。B2对小鼠不同脑区MAO的活性无显著影响。结论B2引起小鼠不同脑区中单胺类递质NE、DA和5-HT水平的下降可能是其发挥镇静催眠作用的机制之一。     

刺五加果水提物和醇提物对小鼠的镇静催眠作用及其机制

目的：探讨刺五加果水提物（ASF-WE）和醇提物（ASF-AE）对小鼠的镇静催眠作用,并阐明其可能作用机制,为刺五加果的开发提供依据。方法：分别制备ASF-WE和ASF-AE。120只雄性ICR小鼠随机分为空白对照组、地西泮（DZP）阳性对照组（DZP组）、不同剂量（4、8、16、32和64 mg·kg^-1） ASF-WE组和不同剂量（4、8、16、32和64 mg·kg^-1） ASF-AE组,每组10只,连续给药5 d,记录各组小鼠自主活动次数,利用阈下催眠剂量戊巴比妥钠诱导睡眠实验记录小鼠入睡率,利用催眠剂量戊巴比妥钠诱导睡眠实验记录小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间,筛选出ASF-WE和ASF-AE的催眠剂量和亚催眠剂量。根据模型药的不同[模型药分别为5-羟色氨酸（5-HTP）、对氯苯丙氨酸（pCPA）和氟马西尼（FLU）],分别将雄性ICR小鼠40只随机分为空白对照组、模型对照组（5-HTP组和pCPA组）、ASF-WE＋模型药组和ASF-AE＋模型药组,每组10只;80只雄性ICR小鼠随机分为空白对照组、FLU组、DZP组、ASF-WE组、ASF-AE组、DZP+FLU组、ASF-WE＋FLU组和ASF-AE＋FLU组,每组10只;连续给药5 d,采用戊巴比妥钠诱导睡眠实验记录各组小鼠的睡眠潜伏期和睡眠时间,采用ELISA法检测小鼠海马组织中5-羟色胺（5-HT）和γ-氨基丁酸（GABA）水平。结果：与空白对照组比较,32和64 mg·kg^-1 ASF-WE组小鼠自主活动次数明显减少（P<0.05或P<0.01）,16、32和64 mg·kg^-1ASF-AE组小鼠自主活动次数明显减少（P<0.05或P<0.01）,16、32和64 mg·kg^-1ASF-WE组和ASF-AE组小鼠入睡潜伏期明显缩短（P<0.05或P<0.01）,睡眠时间明显延长（P<0.05或P<0.01）。与5-HTP组比较,ASF-WE＋5-HTP组和ASF-AE＋5-HTP组小鼠睡眠潜伏期明显缩短（P<0.01）,睡眠时间明显延长（P<0.01）,小鼠海马组织中5-HT水平明显升高（P<0.05）。与空白对照组比较,pCPA组小鼠睡眠潜伏期明显延长（P<0.01）,小鼠睡眠时间明显缩短（P<0.01）,表明失眠模型成功建立;与pCPA组比较,ASF-WE＋pCPA组和ASF-AE＋pCPA组小鼠睡眠潜伏期明显缩短（P<0.05）,睡眠时间明显延长（P<0.01）,小鼠海马组织中GABA水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。与ASF-WE组比较,ASF-WE+FLU组小鼠睡眠潜伏期明显延长（P<0.05）,睡眠时间明显缩短（P<0.01）,小鼠海马组织中GABA水平明显降低（P<0.05）;与ASF-AE组比较,ASF-AE+FLU组小鼠睡眠潜伏期差异无统计学意义（P>0.05）,睡眠时间明显缩短（P<0.01）,小鼠海马组织中GABA水平明显降低（P<0.05）。结论：ASF-WE和ASF-AE均具有较好的镇静催眠作用,其作用机制可能与5-HT能和GABA能中枢神经系统有关。     

上调A1腺苷受体减轻继发性脑损伤

目的:探讨A1腺苷受体(A1 adenosine receptor,A1AR)在脑出血(intracranial hemorrhage,ICH)诱导的继发性脑损伤(secondary brain injury,SBI)中的作用.方法:将30只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑出血组、激动剂组[A1腺苷受体激动剂N(6...     

三种腺苷受体拮抗剂对小鼠空间记忆的影响比较

目的：探讨腺苷受体非特异性拮抗剂咖啡因、腺苷A1受体特异性拮抗剂DPCPX及腺苷A24受体特异性拮抗剂SCH58261对小鼠空间记忆的影响。方法：C57BL／6J雄性小鼠65只，分成咖啡因低剂量组（10mg／kg，n=15）、咖啡因高剂量组（50mg／kg，n=15）、DPCPX组（5mg／kg，n=10）、SCH58261组（5mg／kg，n=10）和生理盐水对照组（n=15）。每日4次训练结束后立即腹腔注射给药。用Morris水迷宫检测定位航行的潜伏期和空间探索指标，评价实验动物的空间学习记忆能力。结果：①咖啡因小剂量（10mg／kg）组分别与高剂量（50mg／kg）组和对照组相比，定位航行试验的逃避潜伏期显著缩短，空间搜索试验穿越原平台位置的次数显著增多。②DPCPX和SCH58261对小鼠Morris水迷宫的定位航行试验的潜伏期和空间探索能力无明显影响。结论：腺苷受体非特异性拮抗剂咖啡因小剂量能够提高小鼠的空间学习记忆能力，而单用腺苷A1或A24受体特异性拮抗剂对空间学习记忆并无明显影响，小剂量咖啡因对空间学习记忆的影响可锥存在腺菩以外的调节机制。     

腺苷A1受体激动剂预处理兔延迟相心肌蛋白质组学分析

目的:研究腺苷A1受体激动剂2-氯环戊腺苷(2-chloro-N6-cyclopentyladenosine,CCPA)预处理延迟相缺血再灌注心肌保护的蛋白质表达谱的变化.方法:8只新西兰大白兔随机分为CCPA预处理组(CCPA组)和生理盐水预处理组(NS组).CCPA组用100 μg/kg CCPA预处理大白兔,NS...     

腺苷A2A受体与慢性低O2高CO2小鼠神经系统炎症的关系

目的：观察慢性低O2高CO2小鼠脑组织超微结构改变及神经炎症因子表达,探讨腺苷A2A受体与神经系统炎症的关系。方法：实验动物随机分为6组：对照野生组（NC＋/＋）;对照杂合组（NC＋/-）;对照敲除组（NC-/-）;低O2高CO24周野生组（4HH＋/＋）;低O2高CO24周杂合组（4HH＋/-）;低O2高CO24周敲除组（4HH-/-）。利用野生型、A2A受体敲除型小鼠进行对照实验,电镜观察脑组织中神经胶质细胞改变以及外源性炎症细胞浸润;采用RT-PCR方法测定皮层和海马中TNF-αmRNA、IFN-γmRNA、TGF-β1mRNA的表达。结果：电镜示4HH＋/＋组比NC＋/＋组星形胶质细胞数量明显增加,形态以凋亡为主,同时可见足突明显水肿,少突胶质细胞水肿、空泡形成、髓鞘疏松;4HH-/-组比4HH＋/＋组凋亡的星形胶质细胞数量减少,形态仅轻度异常,未见明显水肿;实验动物脑内未见外周炎症细胞浸润。与相应小鼠表型的对照组比较,RT-PCR分析显示低O2高CO24周各组的皮层及海马的TNF-αmRNA、IFN-γmRNA表达上调（P〈0.05）;与4HH＋/＋组比较,4HH-/-组海马TNF-αmRNA表达上调不显著（P〈0.05）。结论：慢性低O2高CO2小鼠脑组织存在程度不等的凋亡与炎症现象,腺苷A2A受体基因敲除可能通过抑制TNF-αmRNA表达等起到神经保护作用。     

腺苷A1受体基因多态性与浙南汉族人群部分性发作癫痫耐药的相关性

目的：探讨腺苷A1受体（MAR）基因rs903361、rs10920573及rs3766553多态性与浙南汉族人群部分性发作癫痫耐药的相关性。方法：选取120例部分性发作癫痫患者（癫痫耐药组和非耐药组各60例）及正常对照组（正常组）60例。采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）法检测A1AR基因rs903361、rs10920573和rs3766553的多态性,并通过病例对照研究及logistic回归分析方法分析其与癫痫耐药的相关性。结果：所有入组人群三个位点等位基因C和T分布,正常组与非耐药组三个位点各基因型分布差异均无统计学意义;耐药组rs903361CT型分布频率低于非耐药组（P=0．017）,而rs10920573cT型分布频率高于非耐药组（P=-0．010）,差异均具有统计学意义;rs3766553基因型分布各组差异均无统计学意义;rs903361CC型、TT型耐药的危险性分别为CT型的2．730倍和2．609倍,P值分别为0．043和0．047;rs10920573的CT型耐药危险性为TT型的2．572倍（P=-0．036）;rs903361CC型、rs903361TT型、rs10920573CT型均为耐药的独立危险因素。结论：MAR基因的rs903361CC型、TT型和rs10920573CT型为浙南汉族人群部分性发作癫痫耐药产生的独立危险因素。     

酸枣仁化学成分及其镇静催眠作用研究进展

酸枣仁是治疗失眠和焦虑的经典中药之一,其化学成分包括达玛烷型三萜皂苷、黄酮类化合物、生物碱、脂肪油、三萜类化合物、各种维生素和多糖等.早期的酸枣仁药理学研究论证了酸枣仁皂苷和黄酮类化合物是其镇静催眠的主要成分,近年来发现这两类成分对中枢神经系统及其递质、调质、受体和电生理等有着明确的作用.为了综合考察酸枣仁活性物质及其...     

金属硫蛋白介导腺苷A1受体激动剂延迟预处理对兔心肌的保护作用

目的：探讨腺苷A1受体激动剂——2-氯环戊腺苷（2-chloro-N6-cyclopentyladenosine,CCPA）延迟预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的延迟相保护机制。方法：30只健康新西兰雄性大白兔随机均分成3组：假手术组（C组）、缺血再灌注组（I/R组）和CCPA组（P组）。C组仅行左冠脉套线而不阻断160 min;I/R组行左冠脉阻断40 min,再灌注120 min;P组在静注CCPA 0.1 mg/kg 24 h后处理同I/R组。再灌注结束后观察心肌细胞超微结构和心肌梗死面积的变化,测超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性和丙二醛（malondialdhyde,MDA）含量,免疫印记法测心肌金属硫蛋白（metallothionein, MT）表达。结果：与I/R组比,P组血清中SOD的活性增高,MDA的含量降低（P<0.05）,MT表达增高(P<0.05),心肌梗死面积减少(P<0.05)。结论：CCPA预处理对缺血再灌注心肌的延迟相保护作用与促进心肌MT表达有关。     

降钙素基因相关肽和腺苷2A受体在偏头痛模型大鼠中的表达及作用机制

【摘要】 目的 通过检测降钙素基因相关肽（calcitonin gene related peptide,CGRP）及腺苷2A受体(adenosine 2A receptor,A2AR）蛋白在偏头痛模型大鼠三叉神经组织中的表达,探讨CGRP和A2AR在大鼠偏头痛发病机制中的作用。 方法 将30只雄性Sprague Dawley（SD）大鼠随机分为对照组和模型组,每组15只。模型组采用每周 1 次皮下注射硝酸甘油法建立无先兆性偏头痛模型,共 5 周;对照组则用生理盐水皮下注射代替硝酸甘油。对两组大鼠进行行为学评分,而后采集两组大鼠颅底三叉神经节,采用免疫组化法检测三叉神经节中CGRP的表达;采用免疫荧光检测法观察三叉神经节中A2AR表达;采用westernblot法检测 A2AR蛋白表达量。结果 三叉神经节组织HE染色结果：模型组和对照组均显示神经元与神经纤维分布正常、无紊乱,解剖结构完整,无异常改变。三叉神经节中A2AR蛋白表达的Western blot量及灰度值测定结果：模型组A2AR蛋白表达量及灰度值高于对照组。差异均有统计学意义（P＜001）。三叉神经组织中A2AR表达蛋白免疫荧光测定结果及A2AR阳性神经元细胞数：模型组中A2AR在三叉神经各神经元中的免疫荧光的表达分布明显多于对照组模型组。模型组表达 A2AR的阳性神经元细胞数高于对照组,差异有统计学意义（P＜001）。三叉神经节CGRP免疫组化表达水平及OD值结果：模型组CGRP及OD值的表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P＜001）。结论 模型大鼠偏头痛发作时,三叉神经组织无解剖结构上的改变,大鼠行为学改变与三叉神经功能异常有关。A2AR的激活或蛋白上调,CGRP的大量释放。A2AR、CGRP可能在偏头痛的发作中起重要作用。