中药干预LPS/D-GalN诱导的急性肝衰竭的研究进展

急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)病情危重,病死率高,内科综合治疗疗效尚不满意,肝移植受限于肝源供给不足难以广泛开展。中药治疗可减轻肝脏损伤,延缓病情发展,降低病死率。基于动物模型积极筛选有效中药并阐述其作用机制具有重要意义。D-氨基半乳糖胺(D-galactosamine, D-GalN)可以引起肝细胞大量坏死,而脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)可以模拟肝细胞大量死亡后的机体免疫应答,LPS联合D-GalN诱导建立的ALF模型更符合临床实际。因此,基于LPS/D-GalN构建的ALF模型,归纳总结可有效干预ALF的常见中药及其有效活性成分,并详细阐述其作用机制,以期对中药有效性评价、试验思路及临床合理应用提供参考。     

大鼠急性肝功能衰竭模型的建立及凝血功能的变化

目的：观察不同剂量D-氨基半乳糖（D-GalN）联合脂多糖（LPS）对大鼠急性肝衰竭模型的影响及凝血功能的变化,建立理想的急性肝衰竭大鼠模型。方法：SD大鼠随机分为正常组, D-GalN高、中、低剂量组,每组10只,除正常组外,其余各组注射不同剂量D-GalN联合LPS建立急性肝衰竭大鼠模型,观察大鼠的死亡率,检测大鼠0、12、24、48、72 h肝功能及凝血功能的水平;HE染色,观察肝脏病理的变化。结果：D-GalN高、中、低剂量组72 h内的死亡率分别为：60%、30%、10%;不同剂量组不同时间点血液中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）、凝血酶原时间（PT）、国际标准比率（INR）、血浆纤维蛋白原（FIB）含量与正常组比较均有明显差异（P<0.05）;但在高、中、低剂量组间比较,ALT、AST无统计学意义,TBIL、PT、INR、FIB均有统计学差异（P<0.05）。结论：凝血功能在肝衰竭模型建立中为更加稳定的检测指标,通过肝功能、凝血功能、病理形态综合诊断,中剂量D-GalN联合LPS腹腔注射48 h后建立的急性肝衰竭大鼠模型与临床肝衰竭症状比较一致,中剂量是理想的造模剂量。     

茵虎清肝方对D-氨基半乳糖脂多糖诱导的急性肝衰竭模型大鼠肝损伤的影响

目的观察茵虎清肝方对D-氨基半乳糖脂多糖诱导的急性肝衰竭模型大鼠肝损伤的影响并探讨其作用机制。方法 60只大鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、实验组。采用腹腔注射D-氨基半乳糖脂多糖建立急性肝衰竭大鼠模型。阳性对照组给予安宫牛黄丸灌胃、实验组给予茵虎清肝方药液灌胃。检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(GOT)以及总胆红素(TBIL)水平,观察肝脏组织病理学变化,采用ELISA检测检测肝脏组织中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、I白细胞介素-6(L-6)表达以及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平的变化,检测肝脏纤维化指标透明质酸酶(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(Ⅲ-PC)和Ⅳ型胶原及肝细胞凋亡情况。结果模型组肝细胞排列紊乱、细胞水肿变性坏死,肝索紊乱,炎性细胞浸润,纤维组织增生,肝窦区扩张并充血。给予药物干预后,阳性组和实验组大鼠的肝细胞形态结构稍紊乱,肝细胞肿胀减轻,坏死肝细胞减少,结节状也少,纤维组织减少。模型组大鼠的ALT、GOT、TBIL、肝脏指数以及肝纤维化指标明显升高(P <0.05)。给予药物干预后,阳性组和实验组的ALT、GOT、TBIL、肝脏指数、HA、LN、Ⅲ-PC以及Ⅳ-C水平明显低于模型组,两组间差异有统计学意义(P <0.05)。模型组大鼠的SOD和GSH含量明显降低,TNF-α、IL-1β、IL-6水平和MDA含量明显升高;药物干预后,阳性组和实验组大鼠SOD和GSH含量明显升高(P <0.05),TNF-α、IL-1β、IL-6水平和MDA含量明显降低(P <0.05)。阳性组和实验组大鼠的SOD、GSH和MDA含量、TNF-α、IL-1β以及IL-6水平差异有统计学意义(P <0.05)。结论茵虎清肝方通过抑制炎症反应、减少氧化应激,阻断肝脏纤维化对D-氨基半乳糖脂多糖诱导的大鼠急性肝衰竭发挥保护作用。     

山奈酚干预对D-氨基半乳糖/脂多糖诱导小鼠急性肝衰竭的保护作用

目的探讨山奈酚对D-氨基半乳糖(D-Ga IN)/脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肝衰竭(acute hepatic failure,AHF)的干预作用。方法 37只C57 BL/6小鼠按完全随机分组法分为正常对照组(10只)、AHF模型组(13只)、山奈酚干预组(14只)。AHF模型组小鼠腹腔注射D-Ga IN(700 mg/kg)/LPS(10μg/kg),作用6 h,建立AHF模型;山奈酚干预组小鼠于建模前2 h尾静脉注射5 mg/kg的山奈酚,后腹腔注射D-Ga IN(700 mg/kg)/LPS(10μg/kg),作用6 h,建立AHF模型。正常对照组腹腔注射等量生理盐水。检测血清ALT、AST水平,观察肝脏组织病理学变化,检测肝脏组织中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达,检测NF-κB通路相关分子表达及肝细胞凋亡情况。结果与AHF模型组比较,山奈酚干预组小鼠的生存率提高(P0.05)。与正常对照组比较,AHF模型组血清ALT和AST水平升高(P0.05),炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达升高(P0.05),肝脏组织中NF-κB信号通路相关分子IκB-α表达降低(P0.05),p-NF-κBp65表达升高(P0.05),肝脏病理损伤严重,细胞凋亡增多;与AHF模型组比较,山奈酚干预组血清ALT和AST水平降低(P0.05),炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达降低(P0.05),肝脏组织中NF-κB信号通路相关分子IκB-α升高(P0.05),p-NF-κBp65表达降低(P0.05),肝脏病理损伤减轻,细胞凋亡减少。结论山奈酚干预通过抑制炎症反应对D-Ga IN糖/LPS诱导的小鼠AHF发挥保护作用。     

清化凉血化瘀方对急性肝衰竭大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、内毒素及肝脏组织病理改变的影响

目的:观察清化凉血化瘀方对急性肝衰竭大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、内毒素及肝脏组织病理改变的影响。方法:将160只大鼠随机分为:空白组20只、模型组35只、西药组(复方甘草酸苷)35只、中药组(清化凉血化瘀方)35只、中西医结合组(清化凉血化瘀方+复方甘草酸苷)35只,其中西药组和中西医结合组均给予复方甘草酸苷溶液灌胃,中药组给予清化凉血化瘀方灌胃,空白组和模型组均予灭菌蒸馏水灌胃,连续灌胃3天后,除空白组外,其余各组共140只大鼠均分别予D-Ga1800mg/kg、LPS 8μg/kg的剂量腹腔注射,制造急性肝衰竭模型,造模后西药组给予复方甘草酸苷溶液灌胃1次,中药组及中西医结合组给予清化凉血化瘀方灌胃1次。造模24h后处死,腹主动脉采血,测血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、内毒素检测。取肝组织病理标本,肉眼观察各组大鼠肝脏组织的外观形态改变,HE染色后在光镜下观察肝组织的病理改变。结果:与模型组相比,各治疗组TNF-α、内毒素都出现了明显下降,中西医结合组低于中药组及西药组(P0.05),中药组及西药组内毒素组间比较无统计学差异。对于肝组织病理改变:光镜下,模型组可见肝小叶结果紊乱,肝细胞大片坏死,肝窦肝索显示不清,肝组织结构破坏严重,中西医结合组肝小叶结构基本正常,尚能分辨肝窦结构,肝细胞间界限尚清晰,比较肝脏组织病理评分,中西医结合组积分显著低于模型组、西药组、中药组(P0.05)。结论:清化凉血化瘀方联合复方甘草酸苷可显著降低急性肝衰竭大鼠TNF-α、内毒素水平,减轻肝组织病理学改变,中西医结合治疗具有显著的协同增效作用。     

清化凉血化瘀方对急性肝衰竭大鼠生存率及生化指标的影响

目的观察清化凉血化瘀方对急性肝衰竭大鼠肝功能和累积生存率的影响。方法将160只大鼠随机分为空白组20只、模型组35只、西药组35只、中药组35只、中西医结合组35只,西药组和中西医结合组予复方甘草酸苷溶液灌胃,中药组予清化凉血化瘀方灌胃,空白组与模型组予灭菌蒸馏水灌胃。灌胃3 d后,除空白组外,其余组均腹腔注射纯D-氨基半乳糖(D-Gal)800 mg/kg、内毒素脂多糖(LPS)8μg/kg制造急性肝衰竭模型,造模后西药组和中药组再分别给予相应药物灌胃1次,中西医结合组予清化凉血化瘀方灌胃1次。造模24 h后,将每组大鼠再随机分为A、B 2个亚组,空白组2个亚组均为10只,其余每组中A组20只,B组15只,处死每组中A组大鼠,采集血清,检测肝功能、凝血功能;每组中B组大鼠观察至96 h,统计大鼠累积生存率及生存时间。结果模型组大鼠血清ALT、AST、TBil、CHE水平及血浆PT均明显高于空白组(P均<0.05),ALB明显低于空白组(P<0.05);各给药组大鼠血清ALT、AST、TBil、CHE水平及血浆PT均明显低于模型组(P均<0.05),ALB均明显高于模型组(P均<0.05);中西医结合组和西药组ALT、AST水平均明显低于中药组(P均<0.05),ALB水平均明显高于中药组(P均<0.05),且中西医结合组ALB水平明显高于西药组(P均<0.05);中西医结合组TBil、CHE水平及血浆PT明显低于中药组及西药组(P均<0.05),西药组CHE水平明显低于中药组(P均<0.05)。各给药组大鼠存活率均明显高于模型组(P均<0.05),但各给药组间比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。各组生存时间比较差异均有统计学意义(P均<0.05);中西医结合组生存时间明显长于模型组(P<0.05)。结论清化凉血化瘀方联合复方甘草酸苷可改善肝衰竭大鼠的肝功能及凝血功能,提高大鼠累积生存率,延长大鼠生存时间。     

中医“热毒血瘀证”模型大鼠血管内皮损伤及血小板功能障碍研究

目的研究具有中医“热毒血瘀证”表征的大鼠血管内皮细胞（VEC）损伤和血小板功能的病理变化,以阐释中医“热毒血瘀证”的现代生物医学基础。方法大鼠腹腔注射内毒素即脂多糖（LPS）,连续8周,在不同时间点进行行为学分析、检测舌血氧饱和度基础上,检测血浆内皮素（ET）、热休克蛋白-70（HSP70）、血栓烷B2（TXB2）和6-酮-前列腺素（6-Keto-PGF1α）的变化。结果注射毒素后大鼠活动减少,舌血氧饱和度降低。早期血浆ET、HSP70和TXB2/6-Keto-PGF1α增高,晚期TXB2/6-Keto-PGF1α降低。结论具有舌体组织血氧饱和度下降的中医“热毒血瘀证”存在血管内皮细胞损伤及血小板功能障碍,VEC损伤在中医“热毒血瘀证”发展过程可能起着重要作用。     

中西医结合救治急性肝衰竭病例体会

急性肝衰竭(ALF)发病急骤,病情进展迅速,治疗难度大,病死率极高,是临床急危重症之一。热毒和瘀血是ALF病机的关键,清热解毒活血法可抑制肝细胞凋亡,是中医药治疗ALF的重要治则。中医药在干预ALF方面应扬长避短,避开中医药治疗急重症相对薄弱的环节,在危重患者的诊治抢救过程中,应重视现代医学技术及药物的应用,运用中西医结合救治ALF。     

温病热毒血瘀证证型治法探析

热毒血瘀是温病和许多内科杂病病变过程中常见的一种病理变化,治疗方法除叶天士强调的＂凉血散血＂外,其他如清热解毒法、养阴生津法、益气固脱法、调畅气机法等,均是温病热毒血瘀证的重要治法.对其治法的研究有助于揭示温热病和一些内科杂病发生发展过程中证候的病变本质,深入理解络病理论,探求其演变规律,从现代科学的角度理解中医学理论,进一步探求有效的治疗方法与方药,提高疗效,具有重要的意义.     

陆英颗粒对急性实验性肝损伤的保护作用研究

目的:研究陆英颗粒灌胃给药对急性实验性肝损伤的保护作用.方法:采用急性CCl4肝损伤模型、D-半乳糖胺盐酸盐大鼠急性肝损伤模型、ConA致小鼠急性肝损伤模型研究陆英颗粒灌胃给药对急性实验性肝损伤的保护作用.结果:陆英颗粒对CCl4致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用,其保肝作用可能与对抗脂质过氧化以及提高肝细胞膜和微粒体膜钙泵的活性有关;对D-半乳糖胺盐酸盐致大鼠急性肝损伤和ConA所致小鼠急性肝损伤亦有明显的保护作用.结论:陆英颗粒对多种急性实验性肝损伤有较明显的保护作用.     

脑清通汤加减治疗眩晕肝热血瘀证38例

目的:观察脑清通汤加减治疗眩晕肝热血瘀证的临床疗效。方法:选取眩晕肝热血瘀证患者38例,所有患者均给予脑清通汤加减治疗,日1剂,早晚温服,7d为1个疗程。结果:临床控制10例,显效14例,有效12例,无效2例,有效率为94.74%。结论:脑清通汤加减治疗眩晕肝热血瘀证疗效满意。     

加味犀角地黄汤辨治儿童紫癜性肾炎血热夹瘀证的临床观察

目的:观察加味犀角地黄汤辨治儿童紫癜性肾炎血热夹瘀证的临床疗效及对炎症因子和凝血功能的影响。方法:将122例患者采用随机数字表法分为对照组60例和观察组62例。对照组口服醋酸泼尼松龙片,1. 5～2 mg·kg~(-1)·d~(-1),4周后改为隔日口服,经4周后再逐渐减量;口服双嘧达莫片,3～5 mg·kg~(-1)·d~(-1);口服复方芦丁片,1片/次,3次/d。观察组在对照组治疗的基础上采用加味犀角地黄汤辨证内服,1剂/d。两组均连续治疗12周。进行治疗前后血热夹瘀证评分;检测治疗前后尿β2微球蛋白(β2-MG),24 h尿蛋白定量(24 h UmAlb),尿微量蛋白(mAlb),胱抑素C(CysC),血小板计数(PLT),血浆凝血酶原时间(PT),活化部分凝血酶原时间(APTT),白细胞介素-2(IL-2),IL-4,IL-10,肿瘤坏死因子-α(TNF-α),血管性假性血友病因子(vWF),血小板活化因子(PAF),血栓调节蛋白(TM),血浆纤维蛋白原(FIB),尿红细胞(RBC)和尿蛋白(PRO)情况。结果:观察组临床疗效总有效率为95. 16%,高于对照组的81. 54%(χ~2=5. 466,P 0. 05);观察组中医证候总有效为96. 77%,高于对照组的75%(χ~2=12. 052,P 0. 01);治疗后观察组患儿β2-MG,24 h UmAlb,mAlb,CysC水平均明显低于对照组(P 0. 01);治疗后两组患者PT均较治疗前延长(P 0. 05),观察组延长更为显著(P 0. 05);治疗后观察组FIB水平低于对照组(P 0. 05);观察组患儿血清IL-4,IL-10和TNF-α水平均低于对照组,IL-2水平高于对照组(P 0. 01);观察组患儿vWF,PAF和TM水平均低于对照组(P 0. 01)。结论:在常规激素治疗的基础上,服用加味犀角地黄汤辨治HSPN血热夹瘀证患儿,可起到护保肾功能,减轻蛋白尿、血尿,有明显的临床疗效,并具有抗炎、改善凝血功能的作用。     

中医药治疗急性胰腺炎微循环障碍机制研究进展

微循环障碍是急性胰腺炎(AP)发生的重要机制之一,在细胞因子的改变、胰腺微血管痉挛及通透性改变、血液流变学改变、钙离子超载等因素的共同作用下,导致胰腺的微循环障碍.中医学认为“热毒血瘀互结”是其主要病机,研究表明,中医药治疗能够减轻AP微循环障碍,改善患者预后,降低并发症的发生,从而取得较好疗效.对近年来中医药治疗AP...     

出血性中风急性期证候分布及变化规律分析

目的探讨出血性中风急性期证候分布及动态变化规律。方法将530例出血性中风急性期患者分为风证、火热证、痰证、血瘀证、气虚证、阴虚阳亢证、瘀热证7个基本证候,分别于入院时及入院后第3、5、7、11、21天共6个时间点进行证候调查,研究证候的分布、变化规律。结果出血性中风急性期证候分布呈现一定的规律性,各时间点瘀热证始终占据第一位,风证、火热证基本保持不变,随着时间延长,痰证比例下降,血瘀、气虚比例上升,阴虚阳亢证始终处于最后一位。将各证候例数按时间点进行纵向比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论瘀热证是出血性中风急性期的主要证候,火热证、风证为常见证候,呈现出向血瘀、气虚演变的趋势。     

急性冠脉综合征瘀毒互结证大鼠模型的建立及评价

目的：通过比较采用腹腔注射脂多糖（LPS）、结扎冠状动脉及两者不同组合方式建立急性冠脉综合征瘀毒互结证大鼠模型的可行性。方法：将225只SD雄性大鼠,随机分为假手术组、单纯结扎冠脉组、先注射LPS(5 mg·kg)组（结扎冠脉前24 h注射LPS）、后注射LPS(5 mg·kg)组（结扎冠脉后10 min注射LPS）。各组分别于造模后3、24、72 h进行各项指标的检测,对模型的建立进行综合评价。观察各组大鼠的一般状态与中医证候宏观评价指标舌象、脉象,采用心电图、超声心动图评价心功能,伊文思蓝/2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法测定心肌缺血、梗死面积,生化法或酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌钙蛋白T(cTnT)含量及白细胞介素（IL）-1β、IL-6的变化,血细胞分析仪测定白细胞数,检测凝血四项、血小板聚集率、血液流变学等凝血评价指标,苏木素-伊红（HE）染色观察心肌组织。结果：造模3 h后,与假手术组比较,单纯结扎冠脉组大鼠舌面R、G、B值显著下降（P<0.01）,舌下络脉色泽显著变紫（P...     

急黄汤抗大鼠急性肝衰竭的动态观察

目的:探讨急黄汤抗实验性急性大鼠肝衰竭的作用和机制。方法:以D-G1aN 900mg/kg剂量一次腹腔注射制成大鼠急性肝衰竭模型,治疗组造模前3d开始灌胃急黄汤清膏10mL/(kg·d),浓度为200％,于造模后24、48、72h,模型组及治疗组各取8只大鼠断头处死采血测定ALT、TB、PT、FP、TNFα,取肝组织作病检。结果:急黄汤在不同时相能明显降低急性肝衰竭大鼠ALT、TB、PT、FP、TNFα水平,改善肝组织病变,与模型组比较,P<0.05或P<0.01,有显著性差异。结论:急黄汤具有抗D-G1aN大鼠急性肝衰竭作用,可能与降低急性肝衰竭的重要介质TNFα及肝细胞损伤的标志物FP有关。     

解毒化瘀Ⅱ方防治急性肝衰竭肝性脑病的实验机制研究

[目的]研究解毒化瘀Ⅱ方防治急性肝衰竭肝性脑病的作用机制。[方法]将84只大鼠随机分为7组:空白组、阳性对照组、解毒化瘀Ⅱ方低、中、高剂量组、乳果糖组、安宫牛黄丸组。检测各组大鼠血清血氨(NH3)、支链氨基酸(BCAA)、芳香氨基酸(AAA)水平,脑线粒体钠钾ATP酶(Na -K -ATPase)、钙镁ATP酶(Ca2 -Mg2 -ATPase)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)、钙离子(Ca2 )含量。[结果]与模型组比较,解毒化瘀Ⅱ方能降低急性肝衰竭肝性脑病大鼠血清NH3的水平,恢复BCAA/AAA比值,提高脑线粒体Ca2 -Mg2 -ATPase、Na -K -ATPase、SOD的活力,抑制MDA生成,维持脑线粒体内Ca2 稳态,并以高剂量组最为显著。[结论]解毒化瘀Ⅱ方防治肝性脑病的机制可能与降低NH3、恢复BCAA/AAA比值、保护脑线粒体功能有关。     

生脉逐瘀汤加减治疗慢性心力衰竭气阴两虚兼血瘀证临床研究

目的:观察生脉逐瘀汤加减治疗慢性心力衰竭气阴两虚兼血瘀证的临床疗效。方法:将2013年2月—2015年5月本院收治的106例慢性心力衰竭气阴两虚兼血瘀证患者随机分为对照组和观察组各53例,对照组给予常规基础治疗,观察组在对照组治疗的基础上加用生脉逐瘀汤治疗,两组均连续用药1个月。评价治疗前后心功能疗效,监测血浆脑钠肽(BNP)水平变化。结果:观察组的心功能及症状改善情况显著优于对照组,其心功能、症状有效率分别为94.3%和96.2%,显著高于对照组的75.5%和81.1%,差异均有统计学意义(P0.05);观察组的心功能指标改善优于对照组,其左心室舒张末内径(LVDD)、左室射血分数(LVEF)、每搏输出量(SV)、心输出量(CO)均显著高于治疗前及对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组的血浆BNP浓度显著低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:生脉逐瘀汤加减治疗慢性心力衰竭气阴两虚兼血瘀证疗效确切,利于改善患者的心力衰竭症状,提高心功能,其机制与血浆脑钠肽的水平调控有一定相关性。