组织工程皮肤的最新研究

构建一种理想的组织工程皮肤，无论是对急性烧(创)伤患者，还是伤后要求皮肤修复重建的患者都有重大作用。但是，迄今为止，尚无一种持久、合适耐用的皮肤代用品。目前从组织工程学的观点来看，人工皮肤主要有3类：①培养的表皮膜。②真皮替代物。③具有表皮、真皮双层结构的复合皮肤替代物。前两类都有一定的局限性。理想的皮肤替代物应同时修复表皮和真皮组织，因为这两种成分不仅影响皮肤的功能和外形，而且具有相互影响的机制，促进彼此的分化。文章就临床上使用的各种组织工程皮肤的特性、使用情况、作用机制和目前存在的问题及其未来的发展方向进行展望。     

组织工程化人工皮肤的构建与应用

目的 探讨组织工程化人工皮肤的构建与应用。方法 无血清培养人原代表内细胞，接种于经桂枝汤浸泡的异种真皮，进行复合移植。结果 人原代表皮细胞在无血清培养下生长增殖较好；桂枝汤浸泡的异种真皮存时间明显延长；复合移植于烧伤创面上皮片获成活。结论 人表皮细胞和经桂枝汤浸泡的异种真皮复合移植可作为一种新的皮肤代用品。     

组织工程化人工皮肤的构建与应用

目的探讨组织工程化人工皮肤的构建与应用。方法无血清培养人原代表皮细胞,接种于经桂枝汤浸泡的异种真皮,进行复合移植。结果人原代表皮细胞在无血清培养下生长增殖较好;桂枝汤浸泡的异种真皮存活时间明显延长;复合移植于烧伤创面上皮片获成活。结论人表皮细胞和经桂枝汤浸泡的异种真皮复合移植可作为一种新的皮肤代用品。     

组织工程化人工皮肤胶原蛋白和蛋白多糖的代谢

背量：真皮的细胞外基质由胶原蛋白、弹性蛋白和其他基质成份组成。组织工程化人工皮肤作为一种体外皮肤模型应当具有合成、分泌和分解细胞外基质功能。 目的：观察组织工程化人工皮肤胶原蛋白和蛋白多糖的代谢。 设计：单一样本观察。 单位：北京大学深圳医院皮肤科。 材料：转铁蛋白；胰蛋白酶；^3H-脯氨酸；天狼星红等。 方法：实验于2000-06／2004-12在北京大学深圳医院皮肤科和吉林大学再生医学科学研究所完成。①参照文献进行组织工程化人工皮肤的制备。②^3H-脯氨酸掺入法测定组织工程化人工皮肤合成胶原蛋白能力，于培养第1，2和3周的人工皮肤培养板孔中，分别加入^3H-脯氨酸，培养4h，并与天然皮肤做对照。③苦味酸-天狼星红染色观察组织工程化人工皮肤合成、分泌胶原蛋白的功能；AB-PAS染色测定组织工程化人工皮肤合成、分泌蛋白多糖功能；均于培养第1,2，3，4和6周进行观察。 主要观察指标：①组织工程化人工皮肤合成、分泌蛋白多糖测定结果。②组织工程化人工皮肤合成、分泌胶原蛋白的功能。③^3H-脯氨酸掺入实验结果。 结果：①培养第7，14天的组织工程化人工皮肤^3H-脯氨酸掺入值与天然皮肤相近，培养第21天的组织工程化人工皮肤^3H-脯氨酸掺入值明显高于天然皮肤。②培养的组织工程化人工皮肤，在偏振光显微镜下可见到有成束的红色双折光物质和细的绿色双折光物质。单纯基质网架只见到红色双折光物质。③培养第1，2周的组织工程化人工皮肤Ab-PAS染色阴性，单纯网架Ab-PAS染色呈阴性，培养第3-6周的组织工程化人工皮肤Ab-PAS染色阳性。 结论：构建的组织工程化人工皮肤具有合成、分泌细胞外基质胶原蛋白和蛋白多糖的功能。     

构建结构完整功能正常的组织工程化皮肤:还将有多少症结?

皮肤组织工程研究的最终目的就是要构建出一种皮肤替代物,能迅速达到完整皮肤功能的重建。因此,无论是表皮替代物、真皮替代物和全皮替代物均应能够具备皮肤附属器毛囊、皮脂腺、汗腺及感受器,还要具有分层良好,能迅速重建血管化及神经功能,并尽可能与邻近组织无瘢痕     

组织工程化人工皮肤胶原蛋白和蛋白多糖的代谢

背景:真皮的细胞外基质由胶原蛋白、弹性蛋白和其他基质成份组成。组织工程化人工皮肤作为一种体外皮肤模型应当具有合成、分泌和分解细胞外基质功能。目的:观察组织工程化人工皮肤胶原蛋白和蛋白多糖的代谢。设计:单一样本观察。单位:北京大学深圳医院皮肤科。材料:转铁蛋白;胰蛋白酶;3H-脯氨酸;天狼星红等。方法:实验于2000-06/2004-12在北京大学深圳医院皮肤科和吉林大学再生医学科学研究所完成。①参照文献进行组织工程化人工皮肤的制备。②3H-脯氨酸掺入法测定组织工程化人工皮肤合成胶原蛋白能力,于培养第1,2和3周的人工皮肤培养板孔中,分别加入3H-脯氨酸,培养4h,并与天然皮肤做对照。③苦味酸-天狼星红染色观察组织工程化人工皮肤合成、分泌胶原蛋白的功能;AB-PAS染色测定组织工程化人工皮肤合成、分泌蛋白多糖功能;均于培养第1,2,3,4和6周进行观察。主要观察指标:①组织工程化人工皮肤合成、分泌蛋白多糖测定结果。②组织工程化人工皮肤合成、分泌胶原蛋白的功能。③3H-脯氨酸掺入实验结果。结果:①培养第7,14天的组织工程化人工皮肤3H-脯氨酸掺入值与天然皮肤相近,培养第21天的组织工程化人工皮肤3H-脯氨酸掺入值明显高于天然皮肤。②培养的组织工程化人工皮肤,在偏振光显微镜下可见到有成束的红色双折光物质和细的绿色双折光物质。单纯基质网架只见到红色双折光物质。③培养第1,2周的组织工程化人工皮肤Ab-PAS染色阴性,单纯网架Ab-PAS染色呈阴性,培养第3～6周的组织工程化人工皮肤Ab-PAS染色阳性。结论:构建的组织工程化人工皮肤具有合成、分泌细胞外基质胶原蛋白和蛋白多糖的功能。     

组织工程皮肤的最新研究

构建一种理想的组织工程皮肤,无论是对急性烧(创)伤患者,还是伤后要求皮肤修复重建的患者都有重大作用。但是,迄今为止,尚无一种持久、合适耐用的皮肤代用品。目前从组织工程学的观点来看,人工皮肤主要有3类:①培养的表皮膜。②真皮替代物。③具有表皮、真皮双层结构的复合皮肤替代物。前两类都有一定的局限性。理想的皮肤替代物应同时修复表皮和真皮组织,因为这两种成分不仅影响皮肤的功能和外形,而且具有相互影响的机制,促进彼此的分化。文章就临床上使用的各种组织工程皮肤的特性、使用情况、作用机制和目前存在的问题及其未来的发展方向进行展望。     

组织工程化组织的初步临床应用

目的：组织缺损和器官功能衰竭的修复与重建是临床医学面临的难题，组织工程学的最新发展为此带来了希望，成为21世纪医学最有前途的领域之一。通过查阅近年来国内外人组织工程化组织应用研究的相关文献，总结分析组织工程化组织在临床的最新应用，并分析其应用前景。资料来源：应用计算机检索Medline 1995—01／2006-05有关人组织工程化组织临床应用的文章，检索词“Tissue engineering，transplantation，Clinical application，Human”，并限定文献语言种类为“English”。同时计算机检索中国期刊全文数据库、万方数据库1995-01／2006-05期间的人组织工程化组织临床应用相关文献，检索词“组织工程，移植，临床应用．人”，并限定语言种类为中文。资料选择：对资料进行初选，选择关于人组织工程化组织临床应用研究的文献．排除非临床应用的研究文献，然后查找全文。纳入标准：已应用于临床的组织工程化组织的应用研究。排除标准：①重复研究；②尚未应用于临床的实验研究。资料提炼：共收集到106篇关于人组织工程化组织研究及临床应用的文献，排除重复研究64篇，纳入32篇文献进行综述。资料综合：组织工程学目前已经完成了大量基础理论、组织构建、动物体内植入等研究，并已有商品化的组织工程皮肤、软骨等正式进入临床应用．组织工程骨、肌腱、角膜、黏膜、血管、膀胱等的临床应用也开始起步并取得了一定疗效。①组织工程皮肤通常可分为表皮替代物、真皮替代物和复合皮肤替代物3种类型。理想的组织工程皮肤应该是包含表皮与真皮组织、具有完整皮肤生理功能的复合皮。尽管目前已有的组织工程化皮肤具有与正常皮肤相似的结构及屏障功能，但仍远非真正意义的皮肤功能重建，尤其是缺乏皮肤的附属结构和免疫功能。②软骨组织再生能力有限，没有血管、神经和淋巴分布，其特有的组织器官特异性和生物学特性使之成为组织工程学的研究热点。目前，组织工程骨促进实验动物骨缺损的修复作用较肯定，但其临床应用仍处于探索阶段。③组织工程角膜应用于临床治疗眼表面疾病已获得了较好的疗效，但组织工程复合角膜还停留在体外的构建和基础研究阶段，体外构建生物角膜取代人供体角膜进行移植仍极富挑战性。结论：组织工程化组织的临床应用研究不断成熟，国内外有限病例的初步临床应用展示了良好的前景。组织工程学的研究成果将会为临床医学提供工程化组织，以修复组织缺损，重建或改善组织、器官功能。     

组织工程化皮肤在烧伤外科的应用与进展

组织工程化皮肤研究的3大要素是：（1）组织外基质替代物；（2）种子细胞；（3）生长因子。介绍了组织工程化皮肤目前在临床的应用进展情况，指出异体／异种脱细胞真皮基质在治疗创面修复，瘢痕控制方面前途大人可为，复合皮肤的质量相当于全厚皮移植的效果。     

慢性皮肤溃疡的愈合与修复

目的：慢性皮肤溃疡慢性迁延，难以治愈，给患者造成极大的身体和精神上的痛苦，而临床治疗方法多样，且效果均不佳，因此研究慢性皮肤溃疡的治疗具有重要意义：资料来源：应用计算机检索Medline 1993-07／2004-06相关文章，检索词为“ulcer，skin，chronic,therapy”，限定文章语言种类为English，同时检索中文期刊全文数据库1994-01/2005-04，检索词为“溃疡，皮肤，创面，慢性，治疗”限定文章语言种类为中文。资料选择：纳入标准：有关慢性皮肤溃疡及慢性皮肤创面治疗的实验性研究。排除标准：①重复研究。②个例报道。资料提炼：共收集到相关文章142篇，排除重复类似研究，选择其中13篇进行综述。资料综合：随着人口老龄化趋势和心血管疾病、糖尿病等发病率的不断增高，慢性皮肤溃疡的发病率也不断上升，且该病慢性迁延，难以治愈，临床治疗中存在很大困难。手术治疗有效却有一定的手术适应症，中医治疗治本可是见效慢且效果不一定，物理治疗只能作为辅助治疗，各类生长因子治疗能明显促进创面愈合，组织工程皮肤和骨髓间充质干细胞均为较新兴的治疗方法有很好的发展前景。结论：目前对慢性皮肤溃疡的各种治疗方法各有利弊，组织工程皮肤和骨髓间充质干细胞作为较新兴的治疗方法有很好的发展前景。     

人工皮肤替代物的材料种类及其特征

目的:评价组织工程人工皮肤替代物各种生物材料的性能和应用,寻找适合人体的替代物.方法:以"组织工程,人工皮肤,支架材料"为中文关键词,"tissue engineering,Artificial skin,intravascular stent"为英文关键词,采用计算机检索1993-01/2009-10相关文章.纳入与有关生物材料与人工皮肤修复相关的文章;排除重复研究或Meta分析类文章.以26篇文献为主重点进行了讨论组织工程人工皮肤替代物及其性能.结果:组织工程人工皮肤是应用组织工程技术将体外培养的上皮细胞和成纤维细胞扩增后,接种于具有良好生物相容性的材料上,经体外培养,形成含有与正常皮肤相似的表皮和真皮结构的皮肤替代物.然后将其移植于皮肤创面处,以实现创伤的修复和重建.将两种或两种以上的材料复合在一起,或对生物材料表面进行各种各样的修饰,促进细胞与材料之间的黏附、提高细胞的生物活性、维持生物功能成为目前组织工程生物材料研究的热点.结论:目前还没有一种人工材料能完全符合组织工程的要求.进一步提高支架材料的微观渗透性和生物活性,促进毛细血管的长入;制备结构仿生支架材料及高活性复合支架材料是今后的研究方向.     

壳多糖基质网架复层组织工程皮肤的动物移植实验

背景治疗由烧伤或疾病等引起的大面积全层皮肤缺失最为常见的和有效的方法就是皮肤移植修复,但目前面临的最大障碍是皮肤供体不足.以自体皮肤细胞作为种子细胞构建的组织工程皮肤是解决这一矛盾的最理想途径.目的探讨组织工程皮肤动物移植实验的效果.设计随机对照实验.单位一所大学再生医学科学研究所及皮肤科.材料实验于1998-09/2001-07在吉林大学细胞工程研究室完成.选用新生Wistar大鼠20只;8周龄雄性裸鼠24只.方法应用以壳多糖为基质网架构建的组织工程化复层人工皮肤,对裸鼠大面积(直径20mm)全层皮肤缺损模型进行移植修复.24只8周龄裸鼠分为组织工程皮肤移植(artificial skin,AS)组、壳多糖膜覆盖物(chitosan,CH)组及对照组(control group,CG),术后进行大体观察,并在3,7,14和21 d应用组织学、红外热像扫描分析等手段对修复组织进行动态监测.主要观察指标①实验动物大体观察情况.②修复区血供情况的红外热像观察.③组织学观察.结果AS组在移植第3天,移植的组织工程皮肤与自体皮肤能够很好地融合,有少量毛细血管长入移植物,皮肤移植物颜色与自体皮肤颜色接近;随着时间的延长,移植物中毛细血管的数量逐渐增多,表皮层清晰可见基底层、棘细胞层、颗粒层和角质层,角化现象加强,有角化物脱落;真皮层细胞数量增多,网架逐渐降解,分泌的细胞外基质成份增多;第14天,创面基本愈合;修复区皮肤颜色与正常皮肤颜色非常接近,瘢痕很小,无需进行二次植皮.至移植的第14天,CH组结痂未完全脱落,创面未愈合,颜色较AS组深.对照组的结痂脱落,创面大而深,颜色深红.结论以壳多糖为基质网架构建的组织工程皮肤具有良好的组织相容性,可应用于皮肤缺损的移植修复.     

组织工程皮肤与正常皮肤角蛋白构型的对比研究

目的:对比研究培养的组织工程皮肤与正常皮肤的角蛋白构型,探讨培养后的表皮分化情况。方法:将毛乳头细胞、真皮鞘细胞或成纤维细胞分别与鼠尾胶原混合,制成间质细胞凝胶,再在细胞凝胶表面接种角质形成细胞,体外培养2周,组织切片用15种角蛋白单抗和两种整合素α单抗进行免疫组化染色。结果:在重建的表皮中,染色结果基本相同于正常表皮,抗原性相对要弱些,在正常表皮大多抗体可稀释数倍,而重建表皮中一般都用原液才染色较强。所不同的是RCK107在重建表皮中全表皮层弱阳性,RKSE60在表皮+真皮鞘细胞中基底层弱阳性反应。结论:在培养条件下重建的表皮相似于体内的组织学发生,角蛋白构型基本上相同于体内,但真皮鞘细胞还诱导了低相对分子质量角蛋白表达,毛乳头细胞阻止了K10表达,说明它们与成纤维细胞还存在着功能上的差异。     

组织工程软骨生物支架材料研究新进展

目的:软骨组织损伤后自身修复能力有限,组织工程学使得关节软骨的生物学替代物即人工软骨显示出美好的前景。软骨生物支架材料为组织工程的重要一环,探讨软骨生物支架材料的研究进展对构建人工软骨具有重大意义。资料来源:应用计算机检索PubMed数据库2003-01/2006-12有关组织工程软骨生物支架材料的文章,检索词“articular,tissue engineering,scaffold”,限定文章语言种类为English。同时计算机检索中文期刊全文数据库2003-01/2006-12期间的相关文章,检索词“软骨、组织工程,支架”,限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,选取符合研究要求的有关文章找全文。纳入标准:文章所述的内容应与组织工程软骨生物支架材料研究相关。排除标准:重复或类似的同一研究、Meta分析、综述文献。资料提炼:共收集到185篇相关文章,排除重复或类似的同一研究、综述,30篇符合研究要求。资料综合:人工软骨生物支架材料按其来源可分为:天然生物材料、人工合成高分子材料和复合材料。①天然生物材料生物相容性、细胞黏附性好,亲水性强,但力学强度差、吸收过快,而且难以大批量生产。②人工合成高分子材料具有可控降解速度、力学强度好、易于塑形,但亲水性不够,对细胞的黏附性较弱以及有免疫反应、排斥反应等。③复合材料即将两种或两种以上具有互补特征的生物相容性可降解材料,按一定比例和方式组合,可设计出结构与性能优化的三维材料,以弥补单用人工合成或天然生物材料的缺陷,提高支架的整体性能。复合材料的制备不仅包括同一类生物材料的复合,还包括不同类别生物材料之间的交叉复合。结论:通过对支架材料进行表面修饰、采用新型构建技术以及利用天然和合成材料的各自优势联合应用,进行多材料复合,以研制出具有生物相容性好、力学适应能力强的复合材料、仿生材料、智能材料将是近年来人工软骨生物支架材料的主要研究方向。     

组织工程皮肤的生物学特性及其临床应用评价

背景:尽管组织工程皮肤已应用于皮肤缺损的修复治疗,但远未达到完全代替永久性皮肤的程度.目的:探讨不同类型组织工程皮肤的生物学特性及其临床应用评价.方法:应用计算机检索Pubmed数据库(1990-01/2005-12),检索词为"tissue-engineered skin";应用计算机检索CNKI数据库(2002-01/2007-12),检索词为"组织工程皮肤". 结果与结论:计算机初检得到226篇文献,阅读标题和摘要进行初筛,排除因研究目的与此文无关或内容重复性的研究,共保留11篇文献进行分析.皮肤组织工程学目的是创建出组织学及功能特性上最接近人类皮肤组织的皮肤替代物,尽管目前已经有多种较为成熟的组织工程皮肤产品应用于临床,并且又研制了多种人工皮肤类型,但是它们大多数只是在结构上与人体皮肤类似,只具有皮肤的屏障功能,由于缺乏皮肤附件,所以它们并不具备完整的皮肤功能,并没有达到真正的皮肤重建.理想的皮肤替代物应具有表皮层和真皮层,真皮层可以快速的血管化和神经再分布,可促进快速的生理性的伤13修复;表皮层可以快速地获得充分的屏障和保护功能,与伤口创面充分一体化.一种良好的真皮载体除了应具备较好的组织相容性外,还必须具有一定的理化性能,如强度、柔软度、弹性、透气、透湿性能,才能保证真皮和创面贴附良好,为细胞生长提供理想的纤维支架,从而促进自体皮生长.组织工程皮肤应用前景良好,但目前在生物相容性、皮肤功能重建等方面仍存在各种问题需要解决.     

组织工程学前交叉韧带人工韧带的特征

目的:总结并分析当前组织工程学前交叉韧带的相关特征,探讨其研究方向,以期进一步在该领域得以发展。资料来源:应用计算机检索Medline和Elsevier1993-01/2006-12相关组织工程学前交叉韧带的文章。检索词“tissue engineering,ACL,scaffold”,并限定文章的语言种类为English。同时利用计算机检索中国期刊全文数据库1994-01/2006-12相关组织工程学前交叉韧带的文章,检索词“组织工程学,前交叉韧带,支架材料”,限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,选取包括组织工程前交叉韧带人工韧带方面的文献,开始查找全文。纳入标准:相关的论著和综述。排除标准:重复性和较陈旧的文章。资料提炼:共检索到125篇关于组织工程学前交叉韧带人工韧带方面的文献,最终纳入32篇符合标准的文献。资料综合:组织工程学前交叉韧带人工韧带是目前研究的热点方向,人们在支架材料的选择和构建的具体方法,种子细胞的分离和培养方法,细胞因子和表面修饰的应用等方面做了大量的研究,目前在生物力学上和体外实验上都获得了比较好的效果,但是仍然存在相当多的疑问,主要问题包括具体种子细胞的选择,支架材料的组织相容性和力学性质的统一,细胞和支架材料界面生物相容性的不确定性,因此仍然处于一个初步探索的阶段,离临床应用阶段还有一定距离。结论:组织工程学前交叉韧带人工韧带具有良好的应用前景,但在实际运用中,必须将种子的分离培养,支架材料的选择和构建,以及辅以细胞因子和表面修饰这三者有机的融合起来,才能达到良好的效果。     

基于组织工程皮肤的化学品光毒性检测

组织工程皮肤是指应用生命科学与工程学的原理与技术,研究并开发出的用于修复、维护、促进人体皮肤损伤后功能和形态的皮肤替代物.它有2个主要的应用方向:体内主要运用于各种皮肤创伤的治疗,体外主要作为皮肤模型检测化学品的安全性.化学品的安全性越来越受到人们的重视,光毒性的检测是其中的一项重要内容.鉴于对动物福利和动物保护的日趋重视,近些年出现了多种体外替代检测方法.文章重点综述了基于组织工程皮肤的化学品光毒性替代检测情况,具体涉及组织工程皮肤的介绍、光毒性概念和发生机制、光毒性替代检测、参考化合物选择和结果的判定等方面内容.随着组织工程理论和技术的发展,基于组织工程皮肤的化学品安全性检测的敏感度、特异性和精确度会进一步提高.     

Tissue-engineered skin substitutes

The last two years have seen new tissue-engineered skin substitutes come onto the market and begin to resolve the various roles to which each is best suited. It is becoming evident that some of the very expensive cell-based products have cost-benefit advantage despite their high price and are valuable within the restricted applications for which they are intended. The use of skin substitutes for testing purposes has extended from epidermal keratinocytes to other integumentary epithelia and into preparations containing multiple cell types in which reactions resulting from paracrine interactions can be examined. Challenges remain in the application of gene therapy techniques to skin substitutes, both the control of transgene expression and in the selection of suitable genes to transfect. A coming challenge is the production of tissue-engineered products without the use of animal products other than human cells. A challenge that may be diminishing is the importance of acute rejection of allogeneic tissue-engineered skin substitutes.     

组织工程化口腔黏膜构建的研究现状

背景:口腔黏膜组织工程期待能解决自体黏膜修复组织来源不足的难题.目的:综述组织工程化口腔黏膜的种子细胞的来源及选择、各种常见支架材料的优缺点及相关生长因子的研究进展.方法:由第一作者以"tissue engineering of oral mucosa,seed cells,scaffold material,growth factor"为检索词,检索PubMed数据库及Elsevier数据库2000-01/2011-12有关文章.结果与结论:几种常见的口腔黏膜组织工程种子细胞在研究中都有较好的增殖或分化能力,脂肪干细胞与其他种子细胞相比具有更明显的优势,可作为一种较理想的种子细胞;各种常见的支架材料都有各自的优缺点,可以采用多种方式改善其性能;将一些关键的细胞因子运用到口腔黏膜组织工程中,能促进移植物血管化,加快伤口愈合过程.口腔黏膜组织工程将是在临床上能解决异体移植免疫排斥及传播疾病和自体黏膜修复组织来源不足等问题一种安全有效的修复方法.