间接免疫荧光试验在检测风疹病毒感染中的应用

目的建立检测风疹病毒(RV)抗原E1、E2、C的间接免疫荧光试验(IFA),为快速、敏感地检测临床标本中的RV提供一种重要的检测手段。方法采用荧光素标记的羊抗鼠IgG抗体,检测病毒抗原与抗风疹病毒衣壳蛋白E1、E2、C蛋白的单克隆抗体的结合物。用该系统测定中国麻疹实验室网络送检的咽拭子标本,并与病毒分离结果和临床诊断进行比较。结果IFA方法可以快速、敏感地检测临床标本中的RV。经检测咽拭子标本38份,其中28份采集于临床诊断风疹病例;6例采集于出疹患者,但诊断不明;4份采集于风疹病例的接触者。检测结果有22份风疹阳性标本。IFA的结果与病毒分离结果完全一致,但与临床诊断不一致,IFA结果的阳性数低于临床诊断风疹病例数。结论IFA方法简单可行、敏感特异,结果易于判断,是中国麻疹实验室网络中进行RV检测的重要方法之一。同时IFA方法也可以作为临床快速诊断RV感染的备选方法之一。     

2009年-2010年广东省风疹病毒分离株基因特征分析

目的:对2009年-2010年广东省两起疑似麻疹暴发疫情进行病原学鉴定,并对分离到的风疹病毒进行基因型别鉴定和分子流行病学特征的分析。方法:采集两起疑似麻疹暴发病例的血清学标本和病原学标本,使用ELISA法检测血清麻疹和风疹IgM抗体;同时将临床标本接种至Vero/Slam细胞进行病毒分离,通过逆转录-聚合酶链反应和序列测定与分析鉴定其基因型别。结果:2009年-2010年在广东省发生的两起疑似麻疹暴发证实是由风疹病毒引起,从暴发疫情中分离到的8株风疹病毒均为1E基因型,并且2009年和2010分离株之间的同源性为99.5%。结论:2009年-2010年广东省流行1E基因型风疹病毒,在广东省持续循环。1E基因型风疹病毒在我国广泛分布和流行,说明广东省的风疹病毒不是独立进化,而是与我国其他省份风疹病毒在共同进化。     

一种新型诊断方法——比色法免疫学实验在检测风疹病毒中的应用研究

目的尝试建立一种新型的、可以推广应用于中国麻疹实验室网络的诊断风疹病毒感染的方法。方法来自山东、河南、安徽省疾病预防控制中心麻疹实验室送检的咽拭子标本38份,同时分别用病毒分离[通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)判断]、免疫荧光(IFA)法和比色法免疫学实验进行风疹病毒检测,并将三种方法的敏感性、特异性进行比较和评价。结果三种方法分别检测38份咽拭子标本,阳性均为22份,阳性检出率均为57.9%,检测结果完全一致。结论与RT-PCR和IFA两种方法相比,比色法免疫学实验更快速简便,不需要昂贵的仪器,通过肉眼即可判断结果,而且结果敏感可靠。因此作为检测风疹病毒感染的方法,更适合在中国麻疹实验室网络推广应用。     

山东省正常人群风疹病毒IgG的检测

目的了解山东省正常人群风疹病毒自然感染状况,为保护易感人群及制定合理的预防接种方案提供科学依据。方法采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测山东省部分地区正常人群血清中风疹病毒特异性抗体IgG。结果该人群RV-IgG阳性率为80.20%,其中,≤20岁组人群抗体的阳性率为66.87%,>20岁组人群抗体阳性率为82.86%,差异有统计学意义(P<0.05);男性人群抗体阳性率为77.37%,女性人群的抗体阳性率为83.37%,差异有显著性意义(P<0.05);不同职业及不同地区人群抗体阳性率的差异亦均有统计学意义(P<0.05,P<0.05)。结论低龄儿童和青少年风疹免疫水平较低,是风疹免疫的主要对象。育龄妇女也是风疹免疫的重点对象。不同的工作环境和生活习惯对风疹病毒的感染率有一定的影响。     

风疹病毒的分子流行病学

风疹是由风疹病毒引起的以急性发热、出疹为主要特点的呼吸道传染病。根据世界卫生组织的标准,将风疹病毒分为两个进化枝(分别命名为Clade 1和Clade 2),两个进化枝在核苷酸水平上差异为8%～10%。目前在两个进化支中已确定了7个基因型(1B、1C、1D、E、1F、2A、2B)和3个临时基因型(1a、1g、2c)。不同风疹病毒基因型有各自的地理分布特征,不同地区有本土流行株或优势株,同时风疹病毒流行也和年代有一定的相关性。风疹病毒的分子流行病学研究可以发现新的基因型,了解病毒各基因型在时间、空间上的分布,鉴定传染病,追踪传播途径,阐述特定区域内随着时间推移病毒的变异情况,评估控制风疹策略的效果,对于全球控制乃至消除风疹有着重要意义。该文就风疹病毒的基因划分及其分子流行病学研究现状加以综述。     

风疹病毒感染检测研究的进展

风疹病毒(Rubella Virus,RV)是人类重要的致畸病毒之一,尤其对妊娠妇女的威胁最大,感染后可发生广泛的先天性缺陷,为此引起了国内外医学界的极大关注。研究RV感染的检测对于临床早期、快速诊断、孕期妇女的妊娠指导及风疹的疫苗预防接种等都具有重大意义。     

2株副流感病毒株的分离与鉴定

目的 副流感病毒的分离、鉴定。方法 应用鸡胚和人胚肺成纤维细胞突变株分离病毒,用多株流感国际和国内代表株抗血清进行血凝抑制交互试验,用4类主要呼吸道病毒单克隆抗体间接免疫荧光法做特异性交叉反应鉴定。结果 分离株在鸡胚培养中有较高的血凝效价,但与流感病毒甲、流感病毒乙均不发生血抑反应,而与副流感病毒2型单克隆抗体发生较强免疫荧光反应,在人胚肺成纤维细胞突变株培养出现明显细胞融合病变。结论 分离虽具有高滴度血凝效价,但不是流感病毒,根据与副流感病毒2型单克隆抗体可以发生较强反应和在人胚肺成纤维细胞上的特征性细胞病变,确认为副流感病毒2型。     

安徽省2018-2022年风疹病毒流行株基因特征

目的 分析安徽省风疹病毒(Rubella virus, RV)流行株基因特征。方法 对安徽省2018-2022年RV阳性咽拭子标本开展RV分离、靶基因序列扩增和序列测定分析,构建与1E和2B基因亚型参考株之间的基因亲缘性关系树,鉴定RV基因亚型,分析核苷酸和氨基酸序列同源性。结果 2018-2021年共分离获得83株RV毒株,其中1E-L2基因亚型81株,来自2018-2020年13个地市;2B-L2c基因亚型2株,来自2019年和2021年2个地市;2022年未获得RV毒株。与其他省份同期的相应RV代表株相比,1E-L2基因亚型流行株的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为99.32%-100%和98.78%-100%,2B-L2c基因亚型流行株的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为99.59%-99.86%和100%。结论 安徽省2018-2021年RV流行株为输入性的1E-L2和2B-L2c基因亚型,其中1E-L2基因亚型RV为2018-2020年优势流行株。2022年流行RV基因型别不详,需加强风疹病原学监测。     

2013年风疹病毒株标准命名的更新

风疹病毒（Rubella Virus,RV）的病毒学监测数据可以用来跟踪实现消除风疹目标的进程,有助于风疹病例分类,证实RV的传播途径。本文对以往RV标准命名的资料进行了更新,同时增加了世界卫生组织（World Health Organization,WHO）麻疹和风疹实验室网络（Measles/Rubella Laboratory Network,M/RLN）在过去5年中所获得的数据。RV的标准命名最初在2005年提出,以描述风疹野病毒（Wild RV,WRV）的遗传多样性,随后在2007年进行了修订。WRV的标准命名有助于风疹病毒学监测,它为描述RV基因特征定义了标准方法,对病毒进行标准命名,并将RV株序列划分到认可和临时的基因型中。标准命名系统必须能够适合于RV新基因型的发现,已知病毒的进化,以及周期性病毒株的更替。     

辽宁省风疹野病毒基因特征分析

目的 了解辽宁省现阶段流行的风疹野病毒基因特征,为风疹的控制和消除提供科学依据。方法 用Vero/Slam细胞从2007-2008年采集的风疹暴发和散发患者标本中分离到22株风疹野病毒(Rubella Virus,RV),应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)针对RV分离株的E 1基因739个核苷酸片段进行PCR扩增,再对扩增产物进行核苷酸序列测定,与世界卫生组织(WHO)RV基因型参考株进行分子流行病学比较分析。结果 核苷酸和氨基酸同源性比对及构建亲缘关系树结果显示,22株RV分离株属1 E基因型,核苷酸和氨基酸同源性分别为97.6%～100.0%和99.1%～100.0%;与1 E基因型参考株序列的核苷酸和氨基酸同源性分别为97.0%～99.1%和99.1%～100.0%结论辽宁省分离的22株RV均为1 E基因型,并且可能是辽宁省现阶段的优势基因型。     

浙江省蚊虫中乙型脑炎病毒的分离及鉴定

目的 对2007年浙江省采集的蚊虫标本进行病毒分离与鉴定.方法 2007年在浙江省采集蚊虫标本,用金黄地鼠肾细胞(BHK-21)分离病毒,对新分离的病毒进行血清学和分子生物学鉴定.结果 采集到4735只蚊虫,分离到2株致BHK-21细胞病变的病毒,经免疫荧光和RT-PCR试验鉴定为乙型脑炎病毒(JEV),利用病毒PrM区段进行基因分型分析,新分离的2株病毒属于基因Ⅰ型JEV.对这2株病毒的E基因区段进行分析,核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.0%和98.8%.与疫苗株SA14-14-2相比,核苷酸同源性在87.7%,氨基酸同源性在96.4%以上,共有14个共同的氨基酸位点差异.结论 在浙江省采集的蚊虫标本中分离到2株病毒,经鉴定为基因Ⅰ型JEV,是浙江省近年来首次分离.     

山东省监测地区先天性风疹综合征流行病学回顾性调查

风疹是由风疹病毒引起的急性呼吸道传染病.妇女孕早期感染风疹病毒会引起流产、死胎或婴儿出生后发生多器官严重损害的先天性风疹综合征(CRS).     

山东省监测地区先天性风疹综合征流行病学回顾性调查

风疹是由风疹病毒引起的急性呼吸道传染病.妇女孕早期感染风疹病毒会引起流产、死胎或婴儿出生后发生多器官严重损害的先天性风疹综合征(CRS).     

云南省一株版纳病毒的分离和鉴定

目的 对2008年在云南省勐腊县采集的蚊虫进行版纳病毒(BAV)分离和鉴定.方法 2008年7月在勐腊县南嘎村人房和畜圈采集蚊虫标本,用细胞培养法进行虫媒病毒分离并鉴定,测定分离到的BAV第5、8及11节段序列,利用MEGA4软件进行系统进化分析.结果 共采集到蚊虫7种1731只,分离到1株导致C6/36细胞产生规律病变的分离物,经血清学和分子生物学鉴定为BAV,系统进化分析显示第8节段和中国分离株关系最近,而第11节段和越南分离株关系最近.结论 系统进化分析提示该BAV毒株可能与越南分离株之间发生了基因重配.     

山东省监测地区先天性风疹综合征流行病学回顾性调查

风疹是由风疹病毒引起的急性呼吸道传染病.妇女孕早期感染风疹病毒会引起流产、死胎或婴儿出生后发生多器官严重损害的先天性风疹综合征(CRS).     

山东省某地屠宰场猪肝内戊型肝炎病毒感染状况研究

目的研究商品猪肝脏内戊型肝炎（戊肝）病毒（HEV）的检出状况及其基因分型。方法采集35份山东省某个人屠宰场和某城镇大型屠宰场内的猪肝，处理后采用逆转录．巢式聚合酶链反应（nested RT·PCR）方法检测HEV RNA。并与GenBank中登录的HEV全长序列进行同源性分析。结果35份猪肝标本中共有3份检出HEVRNA，阳性率为8．57％。同源性分析显示这3株病毒均为Ⅳ型HEV。结论即将上市的商品猪肝脏内存在HEV感染，其基因型与中国大陆HEV流行株相同，均为基因Ⅳ型。     

酵母表达的风疹病毒E1在ELISA检测中应用

目的将毕赤酵母表达系统中表达的E1糖蛋白作为包被抗原,建立一种优于病毒作为包被抗原的风疹病毒(rubellavirus,RV)抗体ELISA检测方法。方法将重组包膜糖蛋白(E1)抗原和风疹病毒分别作为包被抗原,用间接ELISA法检测90份临床血清标本,同时用晶美(JINGMEI)进口分装试剂盒和德国RECI公司试剂盒进行检测;将RECI试剂盒作为金标准,计算另外三者检测结果的特异性、灵敏性和符合率;比较他们之间的差异有无统计学意义,特别是重组抗原与病毒抗原作为包被抗原检出RV抗体阳性率的差异有无统计学意义。结果重组蛋白重复性实验结果经统计学处理,P>0·05,差异无统计学意义;RECI试剂盒与重组抗原、病毒抗原的检测结果差异有统计学意义(P<0·05);重组抗原与病毒抗原的检测结果差异有统计学意义(P<0·05),作为包被抗原,重组抗原优于病毒抗原。结论用毕赤酵母表达的RVE1重组蛋白作为包被抗原进行ELISA检测优于病毒作为包被抗原,具有广阔的应用前景。     

山东省实施儿童风疹疫苗免疫后风疹发病年龄变化趋势的分析

目的分析山东省自1995年开始实施儿童风疹疫苗免疫后风疹发病年龄的变化趋势。方法对1999—2004年通过麻疹疫情专报系统得到的风疹疫情资料以及风疹疫苗接种情况进行分析。结果1999—2004年山东省风疹年平均报告发病率为0．59／10万，多为暴发（占总病例数的81．17％）；发病主要集中在7～15岁学龄儿童（77．77％），7岁以下发病较少（占7．93％），发病年龄中位数分别为10．37岁、11．66岁、11．41岁、12．81岁、14．28岁和13．96岁，发病高峰年龄逐年后移，成人发病有所增加；学龄前儿童风疹疫苗基础免疫估算接种率约为60％，学龄儿童约为20％。结论风疹发病年龄后移，将威胁育龄期妇女，增加发生先天性风疹综合征的危险性；应在继续做好儿童风疹免疫的同时，积极开展育龄期妇女风疹抗体筛查及疫苗接种工作。