荧光偏振法测定去甲万古霉素血药浓度

目的建立用荧光偏振分析仪(TDx)测定去甲万古霉素血药浓度的方法。方法用万古霉素试剂盒以荧光偏振法测定不同血药浓度的去甲万古霉素样品。结果去甲万古霉素在0.5~60ug/ml的浓度范围内呈良好线性关系,线性回归方程为C(实际浓度)=C(测得浓度)×0.6435 0.2690,r=0.9998(n=10)。最低检测浓度为0.5ug/ml。相对回收率为91.6%~101.3%,日内RSD为1.9%~8.4%,日间RSD为4.0%~9.6%。结论本方法可以用于临床去甲万古霉素血药浓度的常规测定。     

高效液相色谱法测定人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度

目的建立人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度的高效液相色谱法（HPLC）测定方法。方法色谱柱为Hypersil BDS C18（250mm×4.6mm,5μm）柱;流动相为磷酸二氢钾缓冲液-甲醇（87∶13）,流速1ml/min;紫外检测波长236nm;以甲硝唑为内标,采用乙腈和硫酸锌沉淀蛋白后直接进样。结果万古霉素、去甲万古霉素血清浓度与峰面积线性关系良好,万古霉素回归方程为Y=0.0873X-0.0061,r=0.9999;去甲万古霉素回归方程为Y=0.1000X-0.0004,r=0.9997;线性范围1.0～50.0mg/L。日内相对标准编差（RSD）小于4.8%,日间RSD小于6.6%;万古霉素低、中、高浓度的平均方法回收率分别为102.41%,100.44%,104.69%,平均提取回收率分别为87.54%,89.86%,88.13%;去甲万古霉素低、中、高浓度的平均方法回收率分别为99.46%,98.88%,99.47%,平均提取回收率分别为78.13%,77.41%,76.45%。结论方法操作简便快速,回收率稳定,适于临床血药浓度测定及相关科研的应用。     

酶放大免疫法测定去甲万古霉素的血药浓度

目的 考察酶放大免疫法(enzyme-multiplied immunoassay technique,EMIT)法检测去甲万古霉素血药浓度的可行性.方法 用EMIT法测定万古霉素和去甲万古霉素的等摩尔浓度模拟血浆样本的吸光度,分别按照各自的标准曲线计算浓度,用配对t检验考察两者间差异;比较HPLC法与EMIT法测定静脉滴注去甲万古霉素后的稳态谷浓度血样,将样本进行配对t检验,考察两者间的差异.结果 以EMIT法测定万古霉素与去甲万古霉素等摩尔浓度模拟血浆样本时,在质量浓度为0～25 mg·L-1范围内,2种药物的测定结果差异无统计学意义(P＞0.05),而质量浓度在25～46.9 mg·L-1范围内的测定结果差异有统计学意义(P＜0.05);以HPLC法和EMIT法测相同样本去甲万古霉素血药浓度时,2种方法的测定结果差异无统计学意义(P＞0.05).结论 EMIT法可用于临床测定去甲万古霉素血药浓度,方法较HPLC法简单、快捷.     

HPLC法测定万古霉素和去甲万古霉素血清药物浓度

目的建立人血清中万古霉素和去甲万古霉素的HPLC测定方法 ,用于万古霉素和去甲万古霉素血药浓度临床监测。方法色谱柱为Shim-pack（150×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇∶磷酸二氢钾缓冲液（pH=3.2）=19∶81,检测波长为236 nm,流速1 ml/min,柱温为35℃,万古霉素和去甲万古霉素互为内标。结果万古霉素和去甲万古霉素的保留时间分别为4.835 min和4.020 min;标准曲线回归方程分别为Y=32.16624X-2.117683,r=0.9997（n=3）,Y=51.53402X-2.958621,r=0.9992（n=3）;线性范围均为2.5~100μg/ml;方法回收率〉95%,绝对回收率〉80%,日内和日间RSD〈6.2%。结论本测定方法快速、准确、简便,适用于万古霉素和去甲万古霉素的临床常规血药浓度的监测。     

HPLC法测定人血清中万古霉素的浓度

目的 建立人血清中万古霉素的HPLC测定方法.方法 色谱柱为20RBAX Eplison XDB - C18( 150 mm×4.6 mm,5um)柱;流动相为醋酸铵溶液(含0.25％甲醇)-甲醇(85∶15),流速为1ml/min;检测波长为225 nm;以去甲万古霉素为内标,采用20％硫酸锌直接沉淀蛋白后进样.结果 万古霉素血清浓度与峰面积线性关系良好,万古霉素回归方程为Y=0.0683+ 0.0318X,r=0.9966;线形范围为3.8～ 114ug/ml,日内RSD小于3.6％,日间RSD小于5.6％;万古霉素高、中、低浓度的平均方法回收率分别为100.6％,100.2％,98.8％,平均提取回收率分别为64.9％,66.2％,65.3％.结论 方法操作简便快速,回收率稳定,适于临床血药浓度测定及相关科研的应用.     

人血清中万古霉素浓度的改良监测方法

目的：优化HPLC测定人血清中万古霉素浓度的方法.方法：在不同流动相配比、沉淀剂及柱温条件下,高效液相色谱法测定血万古霉素浓度,确定最佳的色谱条件和操作方法.结果：在色谱条件为色谱柱C18（250.0 mm×4.6 mm,5μm）、流动相磷酸二氢钾缓冲液（pH 3.2）-乙腈（90：10,v/v）、流速1.0 ml/min、检测波长236 nm、柱温35℃的情况下,万古霉素浓度在4.47～60.83 mg/L范围内线性关系良好（r=0.9 943,n=5）,回收率在85％～115％范围内;日内、日间RSD＜15％,在定量下限附近RSD＜20％.结论：优化后,操作简便快速,回收率稳定,适于临床血药浓度测定.     

高效液相色谱法测定人血浆中盐酸吡格列酮浓度

目的 :建立盐酸吡格列酮血药浓度的测定方法。方法 :采用高效液相色谱法测定血药浓度 ,血样用乙醚萃取 ;色谱柱为HiQsilC1 8(4 .6mm× 1 5 0mm ,5 μm) ;流动相为 0 .0 5 %磷酸二氢钾缓冲液 (pH =6.3 0 )∶甲醇∶乙腈 (3∶2∶3 .5 ) ;流速 1 .0ml/min;测定波长 2 3 0nm。结果 :血药浓度线性范围为 2 5ng/ml～ 3 2 0 0ng/ml(γ =0 .9994,n =1 2 ) ,最低检测浓度为 2 5ng/ml;高、中、低 3种浓度的萃取回收率分别为 :70 .63 %± 2 .61 % ,76.0 5 %± 4.3 1 % ,82 .1 0 %± 6.92 % ;方法回收率分别为 :1 0 1 .2 4%± 6.74% ,1 0 6.1 6%± 7.89% ,90 .77%± 2 .87% ;日内相对标准偏差 (RSD) <7.41 % (n =5 ) ,日间RSD <5 .2 4% (n =5 )。结论 :该法为盐酸吡格列酮的药物动力学研究提供了一种检测方法。     

高效液相色谱法测定万古霉素的血药浓度

目的 建立人血浆中万古霉素的高效液相色谱测定法,为临床监测血药浓度以调整万古霉素的给药剂量提供方法学基础.方法 以去甲万古霉素为内标,色谱柱为依利特Hypersil BDS C8 (4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为20 mmol/L的磷酸二氢钾-乙腈,采用梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为236 nm,柱温40℃.结果 本测定法在1.313 ～ 105 mg/L间线性良好(r=0.999 1),日内、日间精密度≤5.2％,绝对回收率≥66％.结论 高效液相色谱法测定万古霉素的血药浓度是一种快速可靠、结果准确的方法.     

高效液相色谱法测定人血浆中甲苯咪唑含量

目的建立固相萃取、反相高效液相色谱测定人血浆中甲苯咪唑的方法。方法血浆加入阿苯哒唑为内标,以0.5mol/L的硼砂NaOH缓冲液3ml碱化后经乙醚提取,固相萃取,进行HPLC测定,采用HypersilBDSC18(4.6mm×200mm5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.1mmol/L(NH4)2SO4溶液(60∶40,V/V);流速1.0ml/min;检测波长310nm。结果甲苯咪唑血药浓度为0.05～1.6μg/ml,峰面积与血药浓度呈线性关系,方法平均回收率为97.21%。平均RSD为3.56%;最低检测限为0.02μg/ml。结论该方法符合生物样品分析要求,为甲苯咪唑的体内含量测定提供了一种简便、准确、灵敏度高的分析方法。     

环孢素A血药浓度的HPLC测定方法

目的：建立环孢素A血药浓度的HPLC测定方法。方法：采用反相HPLC的方法,血样经乙醚萃取,正己烷洗脱等处理后测定。采用DiamonsilTM C18色谱柱,流动相为乙腈-水（74：26,V/V）,流速为1 ml/min,柱温为70℃,检测波长为210 nm。结果：环孢素A血药浓度在50~1000 ng/ml范围内线性关系良好,R2=0.9997,低中高三种浓度的提取回收率为70.01%~75.00%,方法回收率为98.93%~103.08%,日内精密度RSD为0.84%~4.76%,日间精密度RSD为5.38%~9.87%。结论：该方法快速灵敏准确,可用于环孢素A血药浓度的监测。     

新型液相色谱-串联质谱法快速测定水产品中孔雀石绿及其隐色代谢物残留

目的采用液相色谱-串联质谱（LCMS／MS）建立水产品中孔雀石绿及其隐色代谢物残留的检测方法。方法均质后的水产品样品，用乙腈和乙酸铵缓冲液提取，合并提取液，用二氯甲烷反提取，经中性氧化铝柱和丙磺酸（PRS）柱固相萃取净化，没有使用氧化铅柱在线氧化，色谱分离后直接进入串联质谱检测器。采用电喷雾（ESI）正离子扫描模式，多反应监控（MRM）方式检测，外标法定量。结果孔雀石绿和隐色孔雀石绿的检出限为0．5ng／g，线性方程的相关系数r〉0．99，在添加浓度0．5～2．0ng／g范围内，孔雀石绿回收率为78．4％～92．1％。隐色孔雀石绿回收率为82．4％～98．1％，相对标准偏差（RSD）均小于5．7％。结论此方法高效快速，结果准确，重现性好，适合于对水产品中孔雀石绿和隐色孔雀石绿的残留检测。     

UPLC同时测定潜阳育阴方中7种活性成分的含量

目的 建立UPLC同时测定潜阳育阴方中没食子酸、原儿茶酸、马钱苷、二苯乙烯苷、杯苋甾酮、肉桂酸、哈巴俄苷等7种活性成分。方法 采用Waters H-Class UPLC系统C₁₈（100mm×2.1mm,1.7μm）,流动相为乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱,流速0.3mL/min,柱温30℃,检测波长250nm,进样量2μL。结果 潜阳育阴方中7种活性成分在各自浓度范围内线性关系良好（r>0.9975）,平均加样回收率为95.8%～103.75%,平均回收率RSD为0.1%～1.0%,精密度RSD为0.10%～0.56%,稳定性RSD为1.25%～9.04%,重复性RSD为1.01%～3.24%。结论 建立的潜阳育阴方体外UPLC测定方法简便、准确可靠,为本课题后期的潜阳育阴方的体内药动学研究提供参考依据。      

HPLC法同时测定注射用头孢他啶和精氨酸的含量

目的建立同时测定注射用头孢他啶（含精氨酸）中头孢他啶和精氨酸的含量的高效液相色普法（HPLC）。方法采用Thermo pHenyl-2柱,乙腈：醋酸盐缓冲液（5∶95）为流动相,检测波长206nm。结果头孢他啶、精氨酸线性范围分别为0.09196～0.9196mg/ml和0.04868～0.4868mg/ml,回收率分别为99.97%~100.59%和99.80%～101.59%,相对标准偏差（RSD）分别为0.04%~0.74%、0.02%～1.02%（n=9）。结论该法专属性好、快速、准确。     

HPLC法测定大鼠血浆中甲硝唑的浓度

目的 建立大鼠血浆中甲硝唑浓度测定的HPLC法.方法 选用Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱,流动相为甲醇-乙腈-水-冰乙酸(10:10:80:0.1),流速为1.0 mL/min,紫外检测波长为317nm,柱温25℃,以替硝唑作内标物.结果 甲硝唑的线性范围为1~1 000mg/L,呈良好的线性关系(r=0.996 9),在低、中、高3个质量浓度的准确度分别为99.69%、96.35%、101.2%.RSD分别为0.3%、6.92%、8.66%,其日内、日间精密度≤15%.结论 可用于甲硝唑在大鼠体内的药物动力学研究.     

气质联用测定生活饮用水中痕量邻苯二甲酸酯类物质的正交分析

目的 建立一种测定生活饮用水中邻苯二甲酸酯类有机污染物的固相萃取-气质联用的定性定量分析方法.方法 采用固相萃取预处理和气质联用对10种邻苯二甲酸酯类物质(PAEs)进行测定,针对影响固相萃取的固相萃取柱、洗脱剂、洗脱时间3个主要因素,利用正交试验进行萃取条件的优化.结果 最佳萃取条件:固相萃取柱为HLB固相萃取小柱(HLB柱),洗脱剂为乙酸乙酯,洗脱时间为25 min,并确定了10种PAEs的相关系数≥0.98、最低检出限为0.03 μg/L,回收率为87.3%~96.6%.结论 正交试验得出的最佳萃取条件的检测方法线性相关性较好,精度高,准确性好,适于生活饮用水中痕量PAEs的测定.     

固相萃取结合高效液相色谱法测定人体血浆中氟罗沙星的含量

建立固相萃取结合HPLC高效液相色谱法对人体血浆中的氟罗沙星含量进行检测,为氟罗沙星的体内血药浓度监测和人体药代动力学研究提供测定方法.血样经固相萃取法处理,HPLC-高效液相色谱紫外检测法测定,外标法定量.结果发现本文建立的方法血样处理简单、杂质少、干扰小.高、中、低浓度的平均回收率平均为92.78%,在氟罗沙星体内治疗浓度范围内,检测线性关系良好.日内误差与日间误差均低于10%,精密度和准确度都能满足药动学研究及血药浓度监测的要求.结果提示固相萃取结合HPLC高效液相色谱法测定血浆氟罗沙星浓度重复性好、干扰小,是一种较为理想的测量方法.     

金马通络胶囊中东莨菪碱及士的宁成分的定量测定

目的 :建立一种用反相高效液相色谱法检测金马通络胶囊中东莨菪碱及士的宁含量的方法。方法 :用C18ODS柱为固定相。甲醇 :水 (5 8:4 2 ,V/V) (水相含 0 .0 5mol/L醋酸盐缓冲液及 0 .0 0 2 5mol/L十二烷基硫酸钠 )为流动相。检测波长2 2 6nm。结果 :该方法回收率为氢溴酸东莨菪碱 10 0 .3 3 % ,RSD =3 .19% (n =5 ) ;士的宁为 97.0 8% ,RSD =4 .5 1% (n =5 )。结论 :该方法操作简便、快捷、专一、准确性好 ,可用于金马通络胶囊质量控制。     

HPLC法测定紫杉醇血药浓度条件的筛选

目的：筛选小鼠血清中紫杉醇浓度测定的方法。方法：以Agilent C18柱为固定相,检测波长为227 nm,流速为1 mL.min-1,25℃条件下对流动相、内标、提取方法进行筛选。结果：确定以固相萃取方法提取样品,内标为地西泮和多西紫杉醇,流动相为磷酸水溶液-乙腈（50：50 V/V）以达到最佳的分离效果,测定线性范围在0.39～100.00μg.mL-1,回归方程为Y=13.325X＋0.851 9（R2=0.999 3）。结论：筛选出的方法血清干扰少,样品测定周期短、快速、准确,为血清中紫杉醇浓度的测定提供了优选的方法。     

高效液相色谱法快速测定脑梗塞模型大鼠脑组织中多胺的含量

目的:建立一种简便、灵敏和快速分离测定大鼠脑组织中腐胺、精脒和精胺等多胺含量的高效液相色谱法。方法:采用苯甲酰氯作为衍生化试剂,以1,6-己二胺为内标,采用polygocyl(250×4.6 mm 5μm)C18色谱柱,流动相为甲醇-水(62:38 V/V),流速1.0 mL/min,检测波长229 nm。结果:本法线性范围是1～2 000/mL,回收率大于90%。日内和日间变异系数为1.5%～4.2%。最低定量浓度为1 nmol/mL。结论:该方法符合生物样品分析要求,为脑组织中多胺的含量测定提供了一种简便、准确、灵敏度高的分析方法。