高效液相色谱法测定人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度

目的建立人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度的高效液相色谱法（HPLC）测定方法。方法色谱柱为Hypersil BDS C18（250mm×4.6mm,5μm）柱;流动相为磷酸二氢钾缓冲液-甲醇（87∶13）,流速1ml/min;紫外检测波长236nm;以甲硝唑为内标,采用乙腈和硫酸锌沉淀蛋白后直接进样。结果万古霉素、去甲万古霉素血清浓度与峰面积线性关系良好,万古霉素回归方程为Y=0.0873X-0.0061,r=0.9999;去甲万古霉素回归方程为Y=0.1000X-0.0004,r=0.9997;线性范围1.0～50.0mg/L。日内相对标准编差（RSD）小于4.8%,日间RSD小于6.6%;万古霉素低、中、高浓度的平均方法回收率分别为102.41%,100.44%,104.69%,平均提取回收率分别为87.54%,89.86%,88.13%;去甲万古霉素低、中、高浓度的平均方法回收率分别为99.46%,98.88%,99.47%,平均提取回收率分别为78.13%,77.41%,76.45%。结论方法操作简便快速,回收率稳定,适于临床血药浓度测定及相关科研的应用。     

样品固相萃取及高效液相色谱法测定血浆中去甲肾上腺素

去甲肾上腺素（noradrenaline,NE）是重要的单胺类递质,原发性高血压患者的血浆NE通常增高,故测定其血浆浓度可为高血压的诊治、嗜铬细胞瘤诊断定位提供依据.国内外有不少测定人血浆中去甲肾上腺素含量方法的报道,如气质联用、高效液相色谱-荧光检测器和放射酶标分析等,由于它们存在灵敏度低和选择范围窄、费时、成本高等问题,近年来,又出现了高效液相色谱-电化学检测法（HPLC-ECD）.该法对不同样品处理的方法各异,但大都步骤烦琐或特异性差,不够理想.本实验采用酸洗氧化铝吸附及高氯酸洗脱的方法萃取血浆中的NE,用HPLC-ECD法测定血浆NE的质量浓度.该方法与其他方法相比更加简便,而且灵敏度高、特异性强、数据重现性好、测定结果可靠,是临床诊断和基础研究较为实用的方法.     

固相萃取结合HPLC法快速测定紫杉醇的含量

采用γ－Ａｌ２Ｏ３固相萃取和ＨＰＬＣ法对云南红豆杉和东北红豆杉培养细胞中的紫杉醇进行了定量分析,工豆杉浸膏粗品经γ－Ａｌ２Ｏ３固相萃取柱后,可直接上高效液相色谱柱,Ｃ１８ＨＰＬＣ的最佳条件,甲醇－乙腈－水（２５：４５：３０）为流动相,２２７ｎｍ紫外检测。该法简单、快速、准确、适应性强,对紫杉醇的检测范围在０．４－１９．２μｇ。     

固相萃取-高效液相色谱法测定人血清中奥美拉唑的含量

目的 建立人血清中奥美拉唑含量测定的固相萃取-高效液相色谱法.方法 血清样品经C18固相萃取小柱提取后进样测定,色谱柱为Agilent TC-C18柱(4.6×150 mm,5 μm),流动相为0.1 mol·L-1醋酸铵溶液(用氨水调节pH=7.0)乙腈=6931,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为302nm.结果 血清中奥美拉唑在0.005～2 μg·mL-1浓度范围内线性关系良好,高、中、低浓度的方法回收率分别为104.8%、104.2%和102.4%,RSD均小于10%.日内和日间精密度均小于8.27%.结论 本方法 专属性强,灵敏度高,操作简便,适用于奥美拉唑的人体药代动力学及生物利用度研究.     

固相萃取-高效液相色谱法测定青银注射液中蒿酮

目的 建立固相萃取-高效液相色谱法测定青银注射液中蒿酮的分析方法。方法 采用高效液相色谱法测定。色谱柱为Dikma Kromasil C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈-水（75∶25）；检测波长：242 nm；柱温：30 ℃；体积流量：0.8 mL/min；进样量：10 μL。供试品溶液的制备采用C₁₈固相萃取小柱（甲醇10 mL活化，水10 mL平衡），用50％甲醇洗脱，弃去洗脱液，再用甲醇洗脱。结果 蒿酮在0.220 5～3.527 2 μg具有良好的线性关系（r＝0.999 9），平均回收率为98.28％，RSD为0.35％。结论 该方法简便、快速、准确，具有良好的重复性和回收率，可作为青银注射液中蒿酮的定量分析方法。     

固相萃取-超高效液相色谱-质谱/质谱法测定蔬菜、水果中多菌灵

目的:建立一种新的蔬菜、水果中多菌灵的超高效液相色谱-质谱/质谱测定方法.方法:多菌灵通过Oasis HLB固相萃取柱分离浓缩后,采用超高效液相色谱-质谱/质谱仪的正离子模式电离和多反应离子检测模式进行测定,同时对诸如流动相的种类、色谱柱类型、锥孔电压和碰撞能量等参数进行了研究.结果:多菌灵在0.005～1.000 mg/L范围内对响应值具有良好线性关系;样品的加标回收率为87.3%～105.6%,相对标准偏差小于15%(n=6);方法检出限为1.0μg/L.结论:该方法测定特异性好、灵敏度高,定性定量准确,可用于实际样品测定.     

固相萃取联合高效液相色谱-串联质谱测定人血浆中肌苷浓度的方法学建立

目的·建立一种使用固相萃取联合高效液相色谱-串联质谱(solid-phase extraction-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,SPE-HPLC-MS/MS)测定人血浆中肌苷浓度的方法.方法·采用电喷雾离子化正离子模式和...     

固相萃取—高效液相色谱法在血液样品分析中的应用

目的 综述固相萃取—高效液相色谱法在血液样品分析中的应用。方法 查阅了关于固相萃取—高效液相色谱法的国内外文献。结果 从固相的选择、SPE-HPLC联用技术、实际应用和影响因素等方面进行了概括。结论 SPE-HPLC在血液样品的分析中已经得到了广泛的应用，此技术促进了生物样品分析的研究。     

高效液相色谱法测定万古霉素的血药浓度

目的 建立人血浆中万古霉素的高效液相色谱测定法,为临床监测血药浓度以调整万古霉素的给药剂量提供方法学基础.方法 以去甲万古霉素为内标,色谱柱为依利特Hypersil BDS C8 (4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为20 mmol/L的磷酸二氢钾-乙腈,采用梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为236 nm,柱温40℃.结果 本测定法在1.313 ～ 105 mg/L间线性良好(r=0.999 1),日内、日间精密度≤5.2％,绝对回收率≥66％.结论 高效液相色谱法测定万古霉素的血药浓度是一种快速可靠、结果准确的方法.     

固相萃取-高效液相色谱串联质谱测定人体尿液中芳香化合物代谢物的方法研究

  目的  建立固相萃取-高效液相色谱串联质谱（high performance liquid chromatographic tandem mass spectrometric, HPLC-MS/MS）同时测定尿液中8种芳香化合物代谢物（苯巯基尿酸、甲基马尿酸、N-乙酰基-S-苯基-L-半胱氨酸、苯乙醛酸、苯乙醇酸、对氨基酚、对硝基酚和1-羟基芘）的方法。  方法  取1 mL尿液,加入20 μL β-葡萄糖醛酸酶和1 mL乙酸铵缓冲溶液,在37 ℃孵箱中酶解20 h。酶解后混匀,取适量酶解液注入PrimeHLB 固相萃取柱净化,4 mL乙腈洗脱,洗脱液氮吹至干,用0.20 mL甲醇复溶后进样HPLC-MS/MS系统分析。高效液相色谱分离采用反相C₁₈色谱柱（2.1 mm×150 mm,3.5 μm）,流动相A为含体积分数0.1%甲酸的水,流动相B为甲醇,采用梯度洗脱,流速为0.2 mL/min。质谱采用正、负离子交替扫描方式,多反应监测（multiple reaction monitoring, MRM）模式检测,内标标准曲线法定量。  结果  8种代谢物在 1~100 ng/mL范围内线性良好,相关系数均大于0.995,测定的精密度（relative standard deviation, RSD）在0.05%～9.95%之间,8种代谢物的检出限在0.041~0.12 ng/mL范围内。将所建立的方法用于尿样分析,加标回收率为80.1%～114.0%。  结论  所建立的方法灵敏、快速、准确,适用于普通人群和职业人群的芳香化合物生物监测评估。     

反相高效液相色谱-二极管阵列检测蛋黄中的角黄素和虾青素

目的建立蛋黄中角黄素及虾青素的反相高效液相色谱-二极管阵列同时检测法,探讨样品前处理方法及色谱条件的优化。方法蛋黄样品以乙腈超声提取,冷冻除脂,固相萃取净化并氮吹定容后以C18柱分离,乙腈为流动相,二极管阵列检测器于470nm波长下测定。结果实验表明角黄素及虾青素在0.5～100μg/mL浓度范围内线性关系良好(r≥0.998),日内精密度≤3.6%,日间精密度≤5.2%,两者平均加标回收率分别为91.5%及88.7%,检出限分别为0.035μg/mL及0.027μg/mL。结论本法简便快速,灵敏度高,易于推广,适用于蛋黄中角黄素及虾青素的同时检测。     

酶放大免疫法测定去甲万古霉素的血药浓度

目的 考察酶放大免疫法(enzyme-multiplied immunoassay technique,EMIT)法检测去甲万古霉素血药浓度的可行性.方法 用EMIT法测定万古霉素和去甲万古霉素的等摩尔浓度模拟血浆样本的吸光度,分别按照各自的标准曲线计算浓度,用配对t检验考察两者间差异;比较HPLC法与EMIT法测定静脉滴注去甲万古霉素后的稳态谷浓度血样,将样本进行配对t检验,考察两者间的差异.结果 以EMIT法测定万古霉素与去甲万古霉素等摩尔浓度模拟血浆样本时,在质量浓度为0～25 mg·L-1范围内,2种药物的测定结果差异无统计学意义(P＞0.05),而质量浓度在25～46.9 mg·L-1范围内的测定结果差异有统计学意义(P＜0.05);以HPLC法和EMIT法测相同样本去甲万古霉素血药浓度时,2种方法的测定结果差异无统计学意义(P＞0.05).结论 EMIT法可用于临床测定去甲万古霉素血药浓度,方法较HPLC法简单、快捷.     

高效液相色谱法测定生姜中6-姜酚的含量*

[目的]建立测定生姜中6-姜酚的高效液相色谱(HPLC)法。[方法]以100倍80%的甲醇热回流提取生姜2 h后用HPLC法测定;采用依利特C18反相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以异丙醇-甲醇-冰乙酸-水(12∶38∶4∶36,V/V/V/V)为流动相;流速0.8 mL/min;紫外检测波长280 nm;柱温34℃。[结果]6-姜酚在0.021 6~0.432 0μg的质量范围内与峰面积线性关系良好(r2=0.999 2,n=6),回收率为(100.79±2.84)%,RSD为2.84%。[结论]本法操作简便,灵敏度高,快速可靠,可用于生姜中6-姜酚含量的测定。     

高效液相色谱法测定血浆美托洛尔浓度的改进

对反相高效液相色谱法测定血浆美托洛尔浓度的方法进行了改进，选用色谱柱带预柱，溶酶为四氢呋喃。本法的最低检测限为５ｎｇ。血浆中最低测定浓度为２０ｎｇ／ｍｌ，平均回收率为９９．６％。日内回收率为９９．８％，日间回收率为９９．４％。方法简便，灵敏度高，毒性较低，适于临床药理研究及临床治疗监测。     

高效液相色谱法快速测定脑梗塞模型大鼠脑组织中多胺的含量

目的:建立一种简便、灵敏和快速分离测定大鼠脑组织中腐胺、精脒和精胺等多胺含量的高效液相色谱法。方法:采用苯甲酰氯作为衍生化试剂,以1,6-己二胺为内标,采用polygocyl(250×4.6 mm 5μm)C18色谱柱,流动相为甲醇-水(62:38 V/V),流速1.0 mL/min,检测波长229 nm。结果:本法线性范围是1～2 000/mL,回收率大于90%。日内和日间变异系数为1.5%～4.2%。最低定量浓度为1 nmol/mL。结论:该方法符合生物样品分析要求,为脑组织中多胺的含量测定提供了一种简便、准确、灵敏度高的分析方法。     

高效液相色谱法测定血清色氨酸

用高效液相色谱法测定血清色氨酸。采用Ｎｏｖａ－ＰＡＫＣ１８柱，０．１ｍｏｌ·Ｌ－１磷酸二氢钾水溶液为流动相，２９５ｎｍ的检测波长，测出线性范围为１．２２３～２４４７．３８１μｍｏｌ·－１，最低检出浓度为０．６１２μｍｏｌ·Ｌ－１，正常人血清色氨酸浓度为４６．６０３±５．１０８μｍｏｌ·Ｌ－１。测定血清色氨酸的时间＜５ｍｉｎ。本法简便、快速、准确、可靠，适用于临床和科研     

高效液相色谱—荧光检测法测定血清色氨酸

目的 :建立快速、直接测定色氨酸的方法。方法 :血清标本以高氯酸去蛋白后 ,取上清液进样 ,高效液相色谱荧光检测法测定 ,用 2 0 %乙腈水溶液作流动相 ,激发波长 2 5 4nm ,发射波长 313nm。结果 :色氨酸的线性范围为 1.2 2～ 4 0 0 μmol·L- 1 ,最低检测限为 0 .1μmol·L- 1 ,批内变异系数 (CV)为 2 .5 7% ,批间CV为 3.6 6 % ,平均回收率为 97.13%。进样后 5min可完成检测。苯丙氨酸、酪氨酸、5 羟色胺、5 羟吲哚乙酸等物质不干扰实验。结论 :本方法灵敏度好、特异性高、方法简便快速 ,适合临床应用     

HPLC法测定饮料食品中的邻苯二甲酸酯类含量

目的 建立高效液相色谱法测定饮料食品中邻苯二甲酸酯类含量的方法.方法 利用Cleanert DEHP-SPE萃取柱富集和净化样品,以乙腈/水为流动相,采用梯度洗脱,二极管阵列检测器外标法定量.结果 该方法10种邻苯二甲酸酯类回收率范围为70.9％～125.7％,相对标准偏差为1.47％～4.41％.结论 HPLC法精密度和灵敏度较高,操作简便.     

高效液相色谱法测定乌梅中绿原酸含量

目的 测定乌梅中绿原酸的含量。方法 采用高效液相色谱法，色谱柱为Kromasil C18柱，流动相为乙腈：水：磷酸(12：88：0．5)，波长为327nm。结果 绿原酸在0．033～1．602μg范围内线性关系良好，平均回收率为100．52％，相对标准偏差为2．28％，结论 该方法简便、可靠、准确，可用于乌梅的质量控制。     

高效液相色谱法测定金鸡胶囊中脱水穿心莲内酯的含量

目的:建立高效液相色谱法测定金鸡胶囊中脱水穿心莲内酯的含量。方法:采用色谱柱C1 8(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(50∶50),流速1.0mL/min,检测波长250nm,检测脱水穿心莲内酯的含量。结果:脱水穿心莲内酯在8～40μg/mL范围内线性关系良好,回归方程为:Y(峰面积)=131 312 X(对照品溶液取样量)-24 910,r=0.999 9(n=5),平均加样回收率为98.67%(n=6)。结论:高效液相色谱法操作简便,结果准确,重复性好,可用于金鸡胶囊中脱水穿心莲内酯的含量测定。