微波消融对小鼠肝癌细胞活性和HSP70表达的影响

[目的]探讨微波消融对小鼠肝癌细胞活性和HSP70表达的影响.[方法]建立C57BL/6J小鼠Hepa 1-6肝癌皮下移植模型,采用微波能量以不同的温度消融肝癌,分别用酶组织化学和Western blot检测被消融肝癌组织细胞琥珀酸脱氢酶（SDH）的活性和HSP70的表达,并观察消融后30 d肝癌局部残留率.[结果]经40℃、45℃或50℃,120 s的条件微波消融后,50℃组消融后24 h小鼠肝癌组织细胞的琥珀酸脱氢酶活性明显低于假消融组;该组消融后30 d肝癌局部残留率明显低于假消融组（均P＜0.01）.3个消融组消融后12 h和24 h肝癌组织HSP70的表达均明显高于相应的假消融组（均P＜0.01）,且随消融温度升高表达明显增强.[结论]微波消融可促进小鼠肝癌HSP70的表达,同时在一定消融条件下能明显降低肝癌细胞的活性.     

微波凝固肝癌细胞活性的酶组织化学检测

目的比较HE染色和酶组织化学染色对判断微波消融灭活肝癌细胞活性的价值。方法用10W、1.5～2min(85～95℃)和5W、1.5～2min(55～65℃)两种条件的微波消融,分别治疗A、B两组(每组3只)小鼠移植型肝癌,并取微波消融前后的肿瘤组织标本制成切片,进行常规HE染色及琥珀酸脱氢酶的酶组织化学染色,在显微镜下观察两种染色的情况。结果从HE染色观察到,A、B两组小鼠肝癌组织在微波消融后的即刻,其细胞核形态和排列较消融前无明显改变。酶组织化学染色显示,A组肿瘤消融区内的琥珀酸脱氢酶的活性均消失,这说明了癌细胞的灭活;B组肿瘤消融区内上述的酶活性都呈散在阳性,提示部分癌细胞仍存活,A、B两组的肿瘤灭活效果明显不同(Ρ<0.01)。结论HE染色不能评价微波消融对肝癌的即刻灭活效应,用酶组织化学染色测琥珀酸脱氢酶的活性能判定MA对肝癌的灭活效果。     

不同温度微波消融肝癌效果的酶组织化学检测

目的 比较HE染色和酶组织化学染色对判断微波消融灭活肝癌细胞效果的价值。方法 分别用60℃、3min和50℃、3min两种条件的微波消融，依次治疗A、B两组（每组6只）小鼠移植型肝癌，取微波消融前、后的肿瘤组织标本制成石蜡和冰冻切片，进行常规HE染色及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸黄递酶（NADH-diaphorase）化学染色，并在显微镜下观察两种染色情况。结果 从HE染色观察．两组小鼠肝癌组织在微波消融后的即刻．其细胞核形态和排列较消融前无明显改变；酶组织化学染色显示，A组肿瘤消融区内的NADH-diaphorase活性均消失，说明癌细胞灭活；B组肿瘤消融区内上述酶活性都呈散在阳性，提示部分癌细胞仍存活；两组肿瘤灭活效果明显不同（P〈0．01）。结论 HE染色不能评价微波消融对肝癌的即刻灭活效应，酶组织化学染色测定NADH-diaphorase活性能判定微波消融对肝癌的灭活效果。     

热消融联合消融灶周边注射CpG ODN抑制小鼠肝癌生长的研究

目的 探讨热消融联合消融灶周边注射CpG ODN治疗对小鼠肝癌的影响及继发免疫效应的抗肿瘤效果.方法 建立Hepa1-6小鼠皮下肝癌动物模型32只,随机分为热消融治疗组、热消融联合CpG ODN治疗组、CpG ODN治疗组和对照组,每组8只.每组各6只接种肿瘤细胞后第7天、第14天给予治疗,测量小鼠肿瘤体积,观察荷瘤小鼠存活率及消融灶内淋巴细胞和HSP70变化,另8只第7天给予治疗,30 d后对侧接种等量肿瘤细胞,1个月后处死,观察小鼠生存状况及对侧肿瘤生长情况.结果 （1）各实验组小鼠观察期内死亡率均低于对照组（P＜0.05）,各实验组对侧均无肿瘤生长,对照组再接种肿瘤生长率为100%（3/3）,两者相比差异有统计学意义（P＜0.05）;（2）各实验组小鼠与对照组相比,肿瘤体积显著缩小（P＜0.05）,联合治疗组肿瘤缩小更显著;（3）各实验组较对照组有较多淋巴细胞浸润（P＜0.05）,联合治疗组数量最多;（4）各实验组与对照组相比有更多HSP70表达（P＜0.05）,联合治疗组HSP70表达最多,与其余实验组相比差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 CpG ODN对荷瘤小鼠具有明显的免疫增强作用,CpG ODN联合热消融治疗小鼠肝癌有效,且能减少复发.     

弓形虫热休克蛋白70诱导建立弓形虫感染小鼠急性肝损伤模型研究

[目的]通过给弓形虫感染小鼠腹腔注射给予弓形虫热休克蛋白70(T.g.HSP70)建立急性肝损伤模型,观察T.g.HSP70诱导弓形虫感染小鼠急性肝损伤的作用机制.[方法]将20只KM雌性小鼠随机分为正常对照组、感染组、T.g.HSP70组及模型组(感染+T.g.HSP70).于弓形虫感染第7d,腹腔注射给予小鼠T.g.HSP70.次日处死小鼠,取血液,分离血清,取肝脏组织.测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,测定肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量.[结果]模型组小鼠ALT,AST,MDA水平较其他组明显升高(P<0.01),SOD水平明显降低(P<0.05).[结论]T.g.HSP70可诱导弓形虫感染小鼠急性肝损伤,其机制可能与T.g.HSP70加重弓形虫感染小鼠肝组织的脂质过氧化有关.     

犬颅脑枪弹伤后脑组织中热休克蛋白70和bcl-2的表达

[目的]研究犬枪弹伤后脑组织中热休克蛋白70(Heat Shock Protein70,HSP70)和bcl-2的变化规律.[方法]24只杂种犬,随机分为对照组,损伤组.采用德国小口径步枪子弹致犬颅脑额叶切线伤(TangentBrain Injury,TBI).用免疫组织化学方法检测伤后2、6、12、24和48 h各不同时期弹道挫伤区、震荡区及脑干神经元中HSP70和bcl-2蛋白的表达.[结果]对照组脑神经元中HSP70和bcl-2蛋白表达弱,枪弹伤组挫伤区、震荡区、海马及脑干神经元中HSP70蛋白2 h开始增加(P＜0.05),6 h时明显增加,12 h达高峰(P＜0.01),24 h开始下降.bcl-2伤后2 h开始增加(P＜0.05),24 h达高峰(P＜0.01),48 h开始下降.[结论]HSP70和bcl-2蛋白在弹道挫伤区、震荡区、海马及脑干神经元均有表达,伤后两者在脑组织中表达分布范围不一致,HSP70先于bcl-2表达,可能共同参与细胞抗凋亡过程,相互间也可能存在着一定的调控作用.     

不同温度热消融小鼠皮下移植性肝癌的实验研究

目的通过对小鼠皮下肝癌进行不同温度的热生理盐水消融,探讨诱导有效免疫反应的合适消融温度。方法共120只小鼠皮下种瘤成功后,随机分为50℃、60℃、70℃、100℃及对照组共5组,每组24只,各组小鼠的皮下瘤内注射不同温度热生理盐水0．15ml进行消融,观察小鼠生存时间、肿瘤体积及消融灶内淋巴细胞和HSP70的变化。结果（1）各组小鼠生存时间不相等（P〈0．05）,50℃组生存时间较长.（2）各消融组体积均显著小于对照组（P〈0．05）;与消融前肿瘤体积比较,仅50℃缩小。（3）50℃组CD4^＋细胞数量显著高于其他各组（P〈0．05）,CD8^＋细胞50℃组与对照组之间差异无统计学意义（P〉0．05）,但高于其他热消融组（P〈0．05）;50℃组CD4^＋／CD8^＋比值升高最为明显;HSP70热消融组均显著高于对照组（P〈0．05）,50℃组表达量最高。结论50℃组消融温度可能有利于诱导产生更为强烈的主动免疫效应。     

HSP70/HSP90在鼻咽癌热疗后的表达变化及对热疗疗效影响的体外研究

目的 探讨体外鼻咽癌细胞系HNE1细胞热疗后热休克蛋白70/90(HSP70/HSP90)的表达变化及抑制HSP70/ HSP90表达对鼻咽癌热疗的影响,并初步探讨其机制.方法 对体外培养的鼻咽癌细胞HNE1,恒温水浴42 ℃热处理2 h,分别于2 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h后荧光定量PCR检测HSP70/HSP90的基因表达变化,采用Western blot检测蛋白表达量的变化.流式细胞术检测细胞的凋亡,观察在热疗前应用槲皮素、格尔德霉素及联合应用对HSP70/HSP90表达抑制后,对HNE1细胞凋亡的影响.结果 42 ℃热疗后鼻咽癌细胞HSP70/HSP90表达在基因及蛋白水平上均有明显升高,4 h达到高峰,8 h后开始回落,24 h接近正常.槲皮素能抑制HSP70表达,但导致HSP90表达水平升高及下降延迟.热疗前使用槲皮素及格尔德霉素处理,凋亡细胞比例明显增加,联合处理组增加更为明显(P＜0.05).结论 HSP70/ HSP90在HNE1细胞内的表达均在热疗后迅速升高,在热疗前联合抑制HSP70/HSP90的活性,可以更有效增加热疗敏感性.     

悦肝口服液对四氯化碳所致小鼠肝细胞损伤的保护作用

[目的]探讨悦肝口服液对四氯化碳所致小鼠肝细胞损伤的保护作用.[方法]将小鼠随机分为3个组,给予相应药物,8d后处死,取肝,采用油红O染色法和亚铁氰化钾染色法分别观察中性脂肪和琥珀酸脱氢酶活性.[结果]悦肝口服液组与模型组相比较,小鼠肝小叶损伤区域缩小,肝细胞中脂滴减少,琥珀酸脱氢酶活性增强.[结论]悦肝口服液对四氯化碳所致小鼠肝细胞损伤具有保护作用.     

肝区微波照射后肝脏HSP70的表达及机制初探

目的 采用20W、2450MHz微波照射家免肝区，观察照射过程中肝前区温度及肛温的变化，并于24小时后从家兔肝右中方叶前缘取组织用免疫组化方法检测HSP70的表达。方法 健康成年家免13只，对其中4只在微波照射过程中肝前区温度及肛温的变化进行测定，其余9只分为两组，一组（n=4）取肝组织用免疫组化方法观察照射前肝HSP70的表达，另一组（n=5）进行微波预处理，24小时后观察肝脏HSP70的表达。结果 肝区微波照射过程中，家兔肝前区温度升高0．5～2．2℃，肛温升高0．5～0．7℃，24小时后肝细胞核内有HSP70的高表达，而预处理前动物肝细胞内无或仅有低水平HSP70的表达。结论 肝区微波照射过程中肝前区温度及肛温有轻度升高，24小时后肝细胞核内有HSP70的高表达。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

醋柳黄酮缓释片的药动学初步研究

目的:研究醋柳黄酮缓释片在家犬体内的药动学过程,测定其药动学参数,计算缓释片相对于普通片的生物利用度。方法:将实验动物分为两组,分别用醋柳黄酮缓释片和普通片进行口服给药,用高效液相色谱法测定血浆药物浓度,应用3P97软件求算药动学参数。结果:醋柳黄酮缓释片及普通片的tm ax分别为4.87 h和2.87 h,Cm ax分别为每小时0.46μg.L-1和每小时0.56μg.L-1,缓释片的相对生物利用度为111.7%。结论:醋柳黄酮缓释片与普通片均符合一室模型,缓释片与普通片具有生物等效性,且醋柳黄酮缓释片有明显的缓释效果。     

主动脉窦瘤破裂的外科治疗

报告２０例主动脉窦瘤破裂修复术的结果。１７例男性，３例女性。年龄７～５６岁。痊愈１９例，另一例因急性肾功能衰竭一周后死亡。作者就发病机理，诊断和合并畸形的处理进行了讨论。     

87株幽门螺旋杆菌VacA等位基因的分析

目的以研究方法LiPA（Line Probe Assay）分析VacA等位基因的表达,了解幽门螺旋杆菌致病机理的理解。方法从三个不同城市87位进行胃镜检查患者的胃粘膜中培养出幽门螺旋杆菌,提取DNA,用LiPA方法分析VacA等位基因。结果（1）87位患者以sic（88．5％）和m2a（63．2％）分布为主,未发现s1b和s2;（2）混合菌株感染率为41．4％,远远高于西方国家,其中上海的混合感染率最高（62．5％）,与北京（41．0％）和南宁（20．8％）相比具有显著性差异,P〈0．01;（3）北京、海、南京三个不同城市s1、m等位基因亚型分布率存在差异;（4）溃疡病和非溃疡病患者m1和m2的分布率没有显著性差异。结论我国幽门螺旋杆菌多重菌株感染率较高,不同的m基因型与消化性溃疡的发生无显著性相关。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

上颌骨牙源性囊肿刮除手术的疗效观察

目的探讨对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术的临床疗效。方法对我科在2010年1月～2017年9月收治的73例上颌骨牙源性囊肿患者行囊肿彻底刮除手术治疗,对患者术区肿胀消退、术后伤口感染、伤口愈合、牙龈再附着、术后复发、骨质改建、骨质修复等情况随访观察。结果 73例患者术后肿胀消退时间为1～4 d。73例患者术后均未发生伤口感染,伤口均一期愈合。所有患者牙龈再附着情况好,术后均未见复发。术后未见并发症。骨质改建效果好,骨质修复的效果因影像学资料过少,缺乏客观依据,暂不下有效结论。结论对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术,术后患者的恢复情况良好,值得在临床治疗上进行推广。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

扩张兔皮肤超微结构的变化

目的：动态观察扩张兔皮肤超微结构的变化。方法：选用2--3kg新西兰大白兔64只，分为2大组，快速扩张组和常规扩张组，每组32只，每大组再分为4组，为扩张完成后即时、1周、12周、24周组。每组8只，其中4只为实验组，另4只植入扩张器不扩张作为对照组。透射电子显微镜观察各组皮肤超微结构的变化。结果：表皮扩张后经历--由扩张刺激引起的创伤至完全修复的过程。扩张后即时真皮中成纤维细胞大量增生，功能由静止转向活跃，胶原纤维碎裂成片，弹力纤维部分断裂，炎症细胞浸润；扩张后1周常规扩张组基底膜连续性基本恢复。显示成纤维细胞合成功能活跃。扩张后12周、24周，成纤维细胞趋于稳定、形态狭长，部分胶原排列紊乱，部分有似癜痕样改变。结论：扩张刺激可致兔皮肤创伤。扩张后真皮不可完全修复。     

芹黄素对大鼠缺血视网膜功能恢复的作用

目的观察芹黄素对大鼠缺血视网膜功能恢复的作用。方法30只Long-Evans大鼠用动脉结扎法造成视网膜缺血模型,其中治疗组20只腹腔注射芹黄素,对照组10只注射溶媒二甲基亚酚。用视觉电生理仪检查视网膜功能恢复情况。结果芹黄素治疗组视网膜功能恢复明显好于对照组(P<0.05)。结论芹黄素能促进大鼠缺血视网膜的功能恢复。