MMP-9、LMP-1在鼻NK/T细胞淋巴瘤组织中的表达及意义

目的 通过检测鼻NK/T细胞淋巴瘤组织中的基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、潜伏膜蛋白-1(LMP-1)蛋白的表达及分布情况,探讨两者间的相互关系,为临床治疗和预后判断提供依据.方法 采用免疫组化S-P法检测20例鼻NK/T细胞淋巴瘤组织中MMP-9、LMP-1的表达情况,同时与组织芯片中其他类型淋巴瘤及10例淋巴组织反应性增生进行比较.结果 鼻NK/T细胞淋巴瘤组中MMP-9、LMP-1阳性表达率分别为90.0%(18/20)和45.0%(9/20);组织芯片包含的B细胞淋巴瘤组及外周T细胞淋巴瘤组MMP-9的阳性表达率分别为61.1%(11/18)、50.0%(6/12),LMP-1的阳性表达率分别为11.1%(2/18)、25.0%(3/12).淋巴组织反应性增生组未见LMP-1的阳性表达, MMP-9的阳性表达率为30.0% (3/10).鼻NK/T细胞淋巴瘤组MMP-9、LMP-1 阳性表达率与淋巴组织反应性增生组比较差异有统计学意义(P＜0.05),MMP-9与LMP-1表达呈正相关(r=0.327,P＜0.05).结论 MMP-9在鼻NK/T细胞淋巴瘤组织中存在高表达,与EB病毒感染关系密切,LMP-1能上调MMP-9表达,可能与鼻NK/T细胞淋巴瘤的高度侵袭性有关.     

鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤中EB病毒感染与survivin的关系

目的 讨论EB病毒感染与survivin在鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤中的相关性.方法 ①用原位杂交方法检测57例鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤组织中EB病毒的表达;②用免疫组化法EnVision二步法检测57例鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤中LMP1和survivin的表达.结果 ①57例鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤中EB病毒、LMP1和survivin阳性率为80.7％(46/57)、56.1％(32/57)和75.4％(43/57);②LMP1的表达与survivin的表达有相关性(P＜0.05),而EB病毒与survivin表达无显著相关性(P＞0.05).结论 鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤EB病毒感染与survivin无显著相关性.     

前列腺癌p53、bcl-2、bax基因表达与凋亡、增殖的关系

目的　研究前列腺癌组织中细胞增殖与细胞凋亡 ,及其相关蛋白表达意义。方法　采用原位细胞凋亡标记技术(TUNEL)及免疫组织化学ABC法对 3 6例前列腺癌 (Pca)和 11例正常前列腺 (NP)组织石蜡切片 p5 3、bcl 2、bax、PCNA蛋白及细胞凋亡检测。结果　前列腺癌细胞的增殖指数和细胞凋亡指数较NP明显增高 ,且AI/PI比值较正常组织AI/PI低 (P <0 0 1) ;随着肿瘤分级的增加 ,细胞增殖水平明显增加 (P <0 0 1)。p5 3蛋白表达与前列腺癌细胞增殖水平相关 ;bcl 2蛋白表达与细胞凋亡水平相关 (P <0 0 5 ) ;bax基因表达与凋亡无关 ,但发现它们的bcl 2 /bax的比值与凋亡有关 ,结果显示 :高bcl 2 /bax比值多见于低凋亡组 ;低bcl 2 /bax比值多见于高凋亡组。结论　细胞增殖与细胞凋亡均参与了前列腺癌的发生、发展。p5 3基因与细胞增殖水平的调控有关。bcl 2和bax在细胞凋亡调节中起到重要作用 ,由于bcl 2蛋白过量表达引起bcl 2 /bax失平衡 ,在前列腺癌发生、发展过程中起到重要作用。     

抑制Skp2基因表达对NK/T细胞淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究抑制Skp2基因表达对NK/T细胞淋巴瘤细胞系HANK1细胞增殖和凋亡的影响,探讨抑制Skp2基因表达治疗NK/T细胞淋巴瘤的潜在应用价值。方法:用RNA干扰(RNA interference,RNAi)方法抑制HANK1细胞Skp2基因表达,实时定量RT-PCR和Western blot检测Skp2基因表达,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡。结果:Skp2-shRNA表达载体明显抑制HANK1细胞Skp2基因表达,细胞增殖受抑,细胞周期G1期停滞,凋亡细胞增多。结论:抑制Skp2蛋白功能可能是治疗NK/T细胞淋巴瘤的好方法,值得深入研究。     

CYR61和血管内皮生长因子在结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤中的表达及其意义

目的 研究血管诱导生成因子61（CYR61）和血管内皮生长因子（VEGF）在结外鼻型NK／T细胞淋巴瘤中的表达及其意义。方法 应用实时荧光定量PCR和免疫组化技术分别检测结外鼻型NK／T细胞淋巴瘤中CYR61 mRNA、VEGF mRNA及其蛋白水平表达。结果 ①经实时荧光定量PCR检测，20例中有19例（95．0％）CYR61 mRNA表达上调，15例（75．0％）VEGF mRNA表达上调。②经免疫组织化学染色，40例中有38例（95．0％）肿瘤细胞CYR61蛋白阳性，25例（62．5％）VEGF蛋白阳性，与对照组比较差异均无统计学意义；CYR61和VEGF在mRNA和蛋白水平表达的一致率分别为95．0％和65．0％；8例患者CYR61 mRNA、VEGF mRNA及其蛋白表达一致。③通过生存分析显示CYR61 mRNA和VEGF mRNA表达上调者预后较差，CYR61和VEGF表达水平与结外鼻型NK／T细胞淋巴瘤的预后相关。结论 CYR61和VEGF在结外鼻型NK／T细胞淋巴瘤中的表达水平有变化，并与该肿瘤的预后可能有一定的关系。     

应用多重标记技术对霍奇金淋巴瘤H/RS细胞属性及生物学行为的研究

目的　探索细胞凋亡相关基因、蛋白与经典型霍奇金淋巴瘤 (CHL)的相关关系及H/RS细胞的属性。方法　选用山西省肿瘤医院 6 2例存档CHL。用免疫组化ABC法检测bcl 2、CD3、CD2 0、CD30、CD15和CD10 ;免疫组化双标记技术检测RS细胞表达P5 3;ABC和DNA末端标记双标记技术检测细胞凋亡 ;免疫组化和原位杂交双标记技术检测H/RS细胞表达κRNA和λRNA ;多重标记检测背景中非肿瘤性T、B细胞的分布特点。结果　 6 2例CHL中 14例 (2 2 .5 8% )表达P5 3蛋白 ,35例 (5 6 .4 5 % )表达bcl 2蛋白。 6 2例背景非肿瘤细胞均有细胞凋亡 ,仅有 10例H/RS细胞出现凋亡 ,表达bcl 2的H/RS细胞凋亡与其bcl 2的表达呈负相关 (P =0 .0 2 )。H/RS细胞CD30全部阳性 ,4 1例表达CD15 ,8例表达CD2 0 ,6 2例均不表达CD3、MPO、bcl 6、CD10、κRNA和λRNA。非肿瘤性T细胞围绕H/RS细胞呈玫瑰花样 ,B细胞分布在其外围。结论　CHL中H/RS细胞对B系细胞标志有较大的变异。T、B淋巴细胞和H/RS细胞的分布特点可作为诊断的参考指标。多重标记可突出研究的目标细胞 ,从而有针对性的对H/RS细胞进行研究。P5 3的异常表达在CHL可能不起主要作用。bcl 2过度表达可能抑制细胞凋亡     

含铂方案治疗进展期NSCLC与p53、p16、bcl-2表达的关系

目的 :化疗耐药是影响非小细胞肺癌 (NSCLC)预后的主要原因 ,本研究旨在探讨进展期NSCLC化疗耐药与凋亡相关基因p5 3、p16和bcl- 2的关系。方法 :用免疫组化方法检测进展期NSCLCp5 3、p16和bcl- 2的表达 ,同时收集患者的临床资料及化疗方案 ,比较p5 3、p16和bcl- 2表达与化疗疗效的关系。结果 :共有 14 1患者纳入研究 ,男性 12 1例 ,平均年龄 6 3岁 ;Ⅲ期 6 7例 ,Ⅳ期 76例 ;p5 3阳性 72例 (5 1% ) ,p16阴性 83例(5 9% ) ,bcl- 2阳性 15例 (10 % )。p5 3阳性组患者化疗有效率为 2 6 % ,p5 3阴性组化疗有效率为 5 7% ,两者相关显著 (P =0 0 0 4 )。结论 :本研究探讨了以顺铂为基础的联合化疗与p5 3表达的关系 ,对指导进展期NSCLC治疗及判断预后有一定意义。     

人骨肉瘤细胞凋亡及p53、p16及bcl-2的表达研究

目的　研究人骨肉瘤细胞凋亡及p5 3、p16、bcl- 2的表达情况 ,并初步探讨其临床及生物学意义。方法　采用原位DNA末端标记法及免疫组化方法检测了 39例骨肉瘤细胞凋亡及p5 3、p16、bcl- 2的表达情况 ,并统计其阳性反应率。结果　本组病例中细胞凋亡阳性率 6 1 5 % ,p5 3呈阳性反应 2 9例 ,阳性率 74 3% ,p16呈阳性反应 2 7例 ,阳性率 6 9 2 % ,bcl- 2呈阳性反应 7例 ,阳性率 19%。结论　骨肉瘤组织中有p5 3、p16、bcl- 2基因的高表达 ,与肿瘤的预后相关。在骨肉瘤中细胞凋亡是一种自然现象 ,其发生情况各不相同 ,研究初步提示了其与预后相关 ,但应与p5 3、p16、bcl- 2蛋白的表达相结合而综合判断。     

牛磺酸对大鼠视网膜光损伤导致的细胞凋亡及bcl-2表达量的影响

目的 :探讨牛磺酸与视网膜光损伤诱发的细胞凋亡及与凋亡相关基因bcl- 2蛋白表达量的关系。方法 :建立大鼠视网膜光损伤模型 ,30只wistar大鼠被随机分为 :正常对照组、阳性对照组、牛磺酸用药组。绿色荧光持续照射 2 4h形成视网膜光损伤。用流式细胞术检测视细胞的凋亡率及bcl- 2基因蛋白表达量的变化。结果 :在牛磺酸用药组 ,视细胞的凋亡率明显低于阳性对照组 (P <0 0 1) ,而bcl- 2蛋白表达量却显著高于阳性对照组 (P <0 0 5 )。结论 :牛磺酸通过上调bcl- 2基因蛋白的表达量 ,抑制了视网膜光损伤诱发的细胞凋亡 ,避免视网膜的光损伤。     

TAM诱导MA782细胞凋亡与p21/CIPI的关系

目的 :探讨Tamoxifen(TAM )诱导ET( -)小鼠乳腺癌细胞MA782细胞凋亡及其分子作用机制。方法 :TAM体外作用于MA782细胞 ,用MTT法检测细胞增殖活性、流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期分布 ,免疫组化检测p2 1/CIPI(以下简称p2 1)蛋白表达 ,并用病理图像分析软件进行半定量分析。结果 :6、10 μmol/LTAM在体外能明显抑制MA782细胞生长 ,诱导细胞凋亡 ,作用 2 4h细胞凋亡率分别为 7 0 4%、19 0 4% ,10 μmol/LTAM作用48h后细胞凋亡率从 19 0 4%上升到 5 1 2 7% ,与对照组比较差异有显著性 (P <0 0 1)。 2 μmol/LTAM作用于细胞72h后p2 1蛋白开始显著上升 ,而 6、10 μmol/LTAM作用不同时间后 ,p2 1蛋白表达有不同程度的上升 ,与对照组相比差异有显著性 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论 :TAM诱导MA782细胞凋亡其分子作用机制可能与上调p2 1蛋白表达有关。     

肠MALT淋巴瘤细胞凋亡与p53和bcl—2的表达

目的：探讨肠黏膜相关淋巴组织（MALT）淋巴瘤细胞增殖和凋亡的特征以及调亡相关调控基因的表达。方法：应用TUNEL技术检测21例肠淋巴瘤的凋亡指数（apoptosis index,AI),免疫组化S－P法检测PCNA增殖指数（proliferative index,PI）及bcl-2和p5e蛋白的表达。结果：随着肠MALT淋巴瘤恶性度的增高,AI和PI显著增加,并且二者呈显著正相关。低度恶性、高度恶性伴低度恶性以及高度恶性肿瘤组中,bcl-2阳性率分别为79．4％、57．1％、40．9％。三组bcl-2呈阳性率为AI均差异显著（P＜0．05）。bcl-2与AI呈显著负相关（P＜0．05）。p53阳性率为31．4％。高度恶性组p53阳性率显著高于其余两组。p53与bcl-2表达呈负相关（P＜0．05）。结论：凋亡和增殖在肿瘤的发生、发展、转化中起着重要作用,检测AI、PI可能是诊断恶性淋巴瘤、评价其生物学行为的可靠指标。在MALT的恶性度从低到高的转化中,p53和bcl-2基因可能起着重要作用。     

112例鼻和鼻咽外周T细胞淋巴瘤患者的疗效和预后分析

目的对发生于鼻腔和鼻咽部位的外周T细胞淋巴瘤的临床特点、治疗和预后情况进行回顾分析，并探讨治疗方法的改进。方法112例患者均经病理和免疫组化证实诊断，其中39例明确为CD56（＋）的NK／T细胞淋巴瘤]，确诊时中位年龄46岁，男84例，女28例，疗前病程中位数4个月：局部病变累及部位包括鼻腔（88例）和鼻咽（50例）以及临近部位，超腔者83例：临床分期ⅠE／ⅡE期病变占91．1％。国际预后指数（IPI）小于2分者占78．8％。接受化、放综合治疗72例，单纯化疗32例，单纯放射治疗3例，5例未治。结果存活患者中位随访时间42个月。首程治疗后完全缓解（CR）率65．1％，先期化疗的CR率为34．4％，局部肿瘤控制率为50．5％，巾位肿瘤进展时间（1TrP）为11个月，超过30％的患者有明确全身播散的证据。超腔病变的TTP较短（r=-0．191，P=0．024）。全组3年无进展生存率和总生存率分别为38．8％和52．4％，5年无进展生存率和总生存率分别为34．9％和44．8％：单因素分析显示生存有利因素包括病程不少于3个月、早期病变、非NK／T细胞病理类型、无皮肤浸润、IPI低危、首程化疗达CR、放射治疗、首程治疗达CR和局部控制：多凶素分析显示在病情和治疗凶素中，病程不少于3个月（P=0．0l1）、非NK／T细胞病理类型（P=0．007）、首程化疗达CR（P=0．008）和放射治疗（P=0．000）是生存有利的预后因素？结论鼻和鼻咽外周T细胞淋巴瘤虽然确诊时多为早期病变，但部分患者可表现为高度侵袭性、预后不良，其中包括CD56（＋）的NK／T细胞淋巴瘤，放、化综合治疗作为主要的治疗手段尚待改进，以提高治疗缓解率，改善患者的生存。     

blu基因在鼻咽部淋巴瘤的甲基化状态研究

目的 探讨鼻咽部淋巴瘤blu基因启动子的高度甲基化在肿瘤发生中的作用及在分子病理诊断中的应用价值。方法 选用20例鼻咽部NK／T细胞淋巴瘤（包括NK细胞淋巴瘤，NK样T细胞淋瘤及外周T细胞淋巴瘤）石蜡包埋组织，用甲基化特异性PCR（methylation specific PCR,MSP)方法检测。结果 blu基因在鼻咽部NK／T细胞淋巴瘤中高度甲基化，出现率为30％（20例中6例）。其中在15NK细胞淋巴瘤中4例存在blu的高度甲基化；2例NK样T细胞淋巴瘤中1例有高度甲基化；3例外周T细胞淋巴瘤（非特殊型）中1例有blu高度甲基化状态。结论 blu基因启动子的CpG岛在鼻咽部NK／T细胞淋巴瘤中高度甲基化现象，表明此抑癌基因被失活，提示blu基因的高度甲基化可能与淋巴瘤的发生有关。证实MSP方法在石蜡组织标本中可以检测基因甲基化。blu基因的高度甲基化也可能为鼻咽部NK／T细胞淋巴瘤提供新的肿瘤分子病理诊断标记物。     

眼附属器及胃肠MALT型淋巴瘤Ki-67和p53表达对患者生存期及预后评估的意义

目的研究眼附属器MALT型淋巴瘤Ki-67和p53表达对临床治疗的选择和预后评估的意义.方法采用免疫组化的方法,检测29例眼附属器MALT型淋巴瘤Ki-67和p53表达,分析其在不同临床特征间的差异;并与15例胃肠MALT型淋巴瘤的Ki-67和p53表达进行对比.结果29例眼附属器MALT型淋巴瘤在不同的年龄、性别、发病部位Ki-67和p53表达差异无显著性.在分期上,2例非Ⅰ期病例出现了Ki-67的高表达.与胃肠MALT淋巴瘤对比,29例眼附属器MALT型淋巴瘤未见有高恶转化,p53表达程度低;15例胃肠MALT淋巴瘤有5例出现高恶转化,3例p53高表达.结论Ki-67和p53的高表达对眼附属器MALT型淋巴瘤的临床分期和高恶转化有一定的提示作用,与胃肠MALT型淋巴瘤相比,Ki-67和p53表达率、表达程度低,提示预后较好.     

鼻NK/T细胞淋巴瘤合并噬血细胞综合征临床分析

目的探讨鼻NK/T细胞淋巴瘤合并噬血细胞综合征(HPS)的临床特征、治疗方法及预后。方法对4例鼻NK/T细胞淋巴瘤合并HPS患者的临床资料进行回顾性分析。结果 4例鼻NK/T细胞淋巴瘤患者符合HPS诊断标准,初诊时具有多项淋巴瘤相关不良预后因素1,例以HPS为首发症状,3例发生HPS时处在疾病进展期,3例骨髓检查均发现淋巴瘤细胞浸润。合并HPS后病情进展迅速,最明显症状是发热、血象进行性下降、纤维蛋白原降低、血清铁蛋白升高、骨髓中出现噬血现象。给予HLH-2004为基础的方案结合化疗后,HPS均有不同程度改善,但由于原发病无法控制,HPS很快复发,患者合并肝功能异常、凝血异常或弥散性血管内凝血,最终死亡。结论鼻NK/T细胞淋巴瘤合并HPS时预后差,常发生在淋巴瘤复发进展期或终末阶段。HLH-2004为基础的方案联合化疗有希望逆转病情,延缓疾病进展,为原发病治疗创造机会。     

NK/T细胞淋巴瘤的病理组织学、免疫表型及基因研究

目的：筛选高效、方便、经济的对NK／T细胞淋巴瘤更进一步分类与诊断的检测方法。方法：收集了诊断为NK／T细胞淋巴瘤的34例患石腊包埋标本，27例发生于结外，7例发生在淋巴结。用多种抗体研究其免疫表型。EB病毒EBER探针原位杂交方法检测病毒感染。PCR方法检测T细胞受体β和γ基因的克隆性重排。结果：在34例结外淋巴瘤患中，18例CD56阳性，16例TIA-1阳性。2例皮肤淋巴瘤患中所有的瘤细胞Ki-67均阳性。在：EB病毒RNA检测中，12例发生于上呼吸消化道的病例阳性，包括鼻部的9例，以及鼻外的3例。同样在2例胃肠道淋巴瘤及1例皮肤淋巴瘤患中检测到EBER。22例上呼吸消化道淋巴瘤患中有2例检测到了TCRβ或γ基因克隆性重排，所有胃肠道和皮肤淋巴瘤患均检测到了TCR基因重排。2例其他部位结外淋巴瘤及7例结内淋巴瘤患中有5例显示TCR基因的克隆性重排。结论：大多数上呼吸消化道NK／T细胞淋巴瘤起源于NK细胞，只有一小部分为T细胞来源。然而，在皮肤及胃肠道中，NK样T细胞肿瘤更多见。在淋巴结中，NK细胞淋巴瘤很少。由于NK及NK样T细胞淋巴瘤的组织学改变相似，在进行NK细胞标志物、细胞毒性颗粒蛋白检测的同时必须检测TCR基因重排才会得到准确诊断。TCR的基因重排检测仍是鉴别NK和NK样T细胞淋巴瘤的重要标准。     

滤泡树突状细胞表达模式变化 在淋巴瘤病理鉴别诊断中的应用价值

目的 探讨滤泡树突状细胞(follicular dendritic cell,FDC)网在各种类型淋巴瘤中的形态变化模式及其在鉴别诊断中的临床应用价值。方法 采用免疫组化方法对56例各种类型的淋巴瘤进行CD21免疫组化染色,观察FDC网的形态变化模式。其中包括弥漫大B细胞淋巴瘤8例、伯基特淋巴瘤2例、小淋巴细胞性淋巴瘤6例、浆细胞瘤6例、MALT淋巴瘤3例、外周T细胞淋巴瘤6例、间变性大细胞淋巴瘤5例、NK/T细胞淋巴瘤8例、滤泡性淋巴瘤4例、套细胞淋巴瘤3例、AITL 3例、FDC肉瘤2例。结果 FDC网在各种类型淋巴瘤中的形态变化可归为4种模式:①破坏消减型:绝大部分淋巴瘤FDC网完全或部分破坏,包括弥漫大B细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、小淋巴细胞性淋巴瘤、浆细胞瘤、外周T细胞淋巴瘤、间变性大细胞淋巴瘤、NK/T细胞淋巴瘤; ②存在型:FDC网存在,甚至有数量增多,包括MALT淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、套细胞淋巴瘤; ③增生紊乱型:FDC网增多、变形、紊乱,如AITL; ④全表达型:FDC网在肿瘤组织中每个细胞表达,如FDC肉瘤。结论 FDC在各种类型淋巴瘤中存在不同的形态变化模式,在淋巴瘤鉴别诊断中具有重要的临床应用价值。