实验家兔遗传质量检测方法的建立

目的 建立实验家兔遗传生化位点的同工酶醋纤膜电泳法并用此法对实验家兔的Adh（乙醇脱氢酶）等9个生化位点的等位基因分布进行分析测定。方法 利用同工酶醋纤膜电泳法对实验家兔进行Adh等多个生化位点进行检测。结果 Adh等5个生化位点呈多态性，各群体之间基因频率分布有差异。结论 通过对现有远交系封闭群的实验家兔进行生化监测，反应出该种群同工酶的等位基因频率，根据等位基因频率判断其是否符合群体遗传平衡，适当地对某些等位基因加以扩大，以求达到远交系家兔种群的遗传稳定性。     

中国昆明小鼠生化基因标志多态性的研究

小鼠的某些酶和蛋白质具有多态性,已成为研究小鼠遗传结构的标志,也是控制其遗传质量的良好指标。目前,国内外对现有近交系小鼠各品系的研究已经积累了丰富的资料,但对远交系和来自非近交原种的封闭群动物的研究尚少。昆明小鼠是我国1946年由印度Hoffikine研究所引入云南昆明,以后陆续在全国各地繁殖饲养,称为昆明(Kun Ming)小鼠(简称KM小鼠),已成为广泛应用于我国生物医学领域内进行科研工作的远交品系实验动物。但由于对KM小鼠本身开展的研究工作甚少,使得许多应用KM小鼠进行的实验结果,难以进行国际交流。我们采用醋酸纤维素薄膜电泳法对KM小鼠群体中7个生化标志进     

中国KM小鼠亚群遗传变异的研究

应用电泳方法和Festing下颌骨形态分析法对北京、上海、长春三大地区的四个中国KM小鼠的主要群体展开调查,并与近年从美国引进Swiss来源的NIH小鼠群体进行比较.结果显示:1.中国KM与NIH小鼠群体在Es-3,Es-10,Got-2,Glo-1,Gpt-1,和Mpl-1座位的等位基因组成存在显著差异;两者间遗传距离为0.131±0.011,证实中国KM小鼠为非Swiss来源的另一亚种。2.KM小鼠各亚群间等位基因分布无明显差异,亚群间遗传距离为0.008～0.027,与群体封闭时间成正相关.3.对群体生化和下颌骨形态学数据聚类分析表明S:KM在四个KM亚群中为特殊的一类,提示不同地区KM亚群存在的遗传差异可能对实验重复性产生影响.     

上海KM小鼠种子群体遗传状况分析

目的对国家啮齿类实验动物种子中心上海分中心KM小鼠种子群体进行群体遗传质量分析与评价。方法利用筛选出的30个微卫星位点设计引物,对种群中随机抽取的30只KM小鼠样本进行PCR扩增,扩增产物利用STR扫描技术进行测定,用Popgen1.32软件对所得结果进行处理分析。结果 KM小鼠种子群体共得到123个等位基因型,平均有效等位基因数为2.3989,平均杂合度为0.5342,平均多态性信息含量(PIC)为0.4735。结论上海分中心KM小鼠种子群体具有良好的遗传稳定性和多样性,符合封闭群动物的群体遗传概貌特征。     

国家上海KM小鼠种子群体遗传状况分析

目的 对国家啮齿类实验动物种子中心上海分中心KM小鼠种子群体进行群体遗传质量分析与评价。方法 利用筛选出的30个微卫星位点设计引物,对种群中随机抽取的30只KM小鼠样本进行PCR扩增,扩增产物利用STR扫描技术进行测定,用Popgen1.32软件对所得结果进行处理分析。结果 KM小鼠种子群体共得到123个等位基因型,平均有效等位基因数为2.3989,平均杂合度为0.5342,平均多态性信息含量(PIC)为0.4735。结论 上海分中心KM小鼠种子群体具有良好的遗传稳定性和多样性,符合封闭群动物的群体遗传概貌特征。     

中国KM(昆明)小鼠遗传组成及起源的研究(摘要)

中国KM(昆明)小鼠是一株远交系小鼠,在我国已封闭饲养近50年,交配繁殖达150多代,广泛地应用于生物学、医学研究及药品、生物制品的检定,是我国用量最大的实验小鼠。但由于对其遗传背景缺乏完整了解,对中国KM小鼠的遗传来源及KM小鼠各亚群间存在     

剖腹产在远交系小鼠群体中引起的“瓶颈效应”

本文研究比较了经剖腹产技术建立的清洁级小鼠A:KM(f)群体12个基因位点等位基因的组成状况。发现A:KM(f)群体多态性基因位点的比例明显低于A:KM小鼠群体,某些位点的基因频率也发生了明显偏移。A:KM(f)与A:KM群体间的遗传距离为0.097,明显大于1987年我们对各KM群体间测试的遗传距离。该项研究提示:剖腹产净化技术引起的“瓶颈效应”可能是导致远交群体发生遗传漂变的主要原因之一。     

远交系昆明种小鼠遗传特性的研究——Ⅰ “上生所”昆明小鼠生化、免疫遗传位点的检测分析

为检定我所远交系昆明种小鼠的遗传特性,选择了20个生化免疫遗传这点作了调查和分析。结果证实该系小鼠具有良好的遗传多态性,符合远交系小鼠的遗传特性要求。     

中国昆明系小鼠(KM)下颌骨形态遗传的初步研究

封闭饲养近40年,繁殖达140代的中国昆明系小鼠(KM),现已广泛应用于生物医学研究和药品生物制品检定。但其遗传背景尚缺乏完整的了解,各地区饲育的群体之间的遗传变异状况也不清,以至未获国际公认和注册。为了研究并确定KM的遗传特性,本研究组按课题分工,根据Festing创立的小鼠下颌骨形态分析法,对北京、上海和长春3地区4个群体KM进行了测试分析。     

利用多重荧光STR技术分析上海地区7品系常用近交系小鼠核心群的遗传特性

目的 分析比较上海地区7品系常用近交系小鼠核心群的遗传特性。 方法 将筛选到的48对多态性丰富的微卫星引物组合优化，形成11组多重荧光PCR引物混合体系，对来自上海地区两大实验小鼠供应商的7品系14种群（亚系）近交系小鼠核心群的DNA样进行分型检测。利用遗传分析软件进行数据分析。结果 14种群（亚系）近交系小鼠在48个微卫星位点上都为纯合子，同品系小鼠在同一种群(亚系)内表现为单态性，在不同种群(亚系)间存在差异；但同品系不同种群(亚系)近交系小鼠间的遗传距离与品系间相比均较近，均首先两两聚成一类。C57BL/6小鼠与其他6品系小鼠的亲缘关系均较远。结论 上海地区不同供应商的同品系近交系小鼠，不论是否为相同亚系，其遗传差异均存在。     

两种玻璃化胚胎冷冻方法对不同品系小鼠胚胎冷冻结果比较

目的 探讨EFS和DAP两种玻璃化冷冻方法对不同品系小鼠胚胎冷冻的效果。方法6个品系小鼠（KM、ICR、BALB/c、C57BL/6J、OB/OB、LAP/rtTA0F59）的2-cell胚胎分别用EFS和DAP两种玻璃化冷冻方法进行冷冻和复苏,比较两种冷冻方法的胚胎复苏率和着床率。结果 6个品系小鼠冷冻胚胎EFS方法的平均复苏率为69.97%（47.9%～83.6%）,DAP方法的平均复苏率47.23%（26.3%～76.7%）EFS方法明显优于DAP方法。其中KM、ICR和BALB/c小鼠EFS方法的冷冻复苏率显著高于DAP方法（P<0.01）;冻融胚胎移植后EFS方法的平均着床率27.23%（1.75%～45.0%）,DAP方法的平均着床率31.43%（7.0%～46.3%）。除KM、ICR小鼠外,其他4个品系小鼠的着床率DAP方法高于EFS方法。结论 KM和ICR远交群小鼠胚胎适合用EFS方法冷冻保存;C57BL/6J、OB/OB、LAP/rtTA0F59三个品系小鼠DAP方法优于EFS方法,但差异不大; BALB/c小鼠两种玻璃化冷冻方法的冻融胚胎着床率均较低,需进一步研究。     

骨-肾畸形小鼠的G带核型分析

远交系KM小鼠中发现的先天后肢畸形且伴有一侧肾缺损畸形综合症小鼠，目前已被培育成稳定的突变抹．为进一步认识该致瘸基因，本文采用GTG显带法对KM-1d小鼠作了染色悻水平的遗传分析，实验表明KM-1d小时没有染色悻数日的变化，染色体盘数为如．雄性被型为40，XY，雌性棱型为40，XX。G带带型与小鼠标准棱型基本一致．与KM小鼠相比也未发现明显差异。从而提示该先天性畸形综台症并非由于染色体的畸变所致。     

Zmu-1:DHP近交系豚鼠的培育及其分子遗传结构初步鉴定

目的 培育近交系豚鼠品系,建立检测豚鼠遗传结构的微卫星分子标记。方法 采取近交与回交、单线与优选繁育、选择与淘汰等方法,试图将Zmu-1：DHP远交系豚鼠培育成Zmu-1：DHP近交系豚鼠。用15对已筛选出的豚鼠多态性微卫星引物（另行报道）,对该近交系及参照的Zmu-1：DHP远交系和Zmu-2：DHP近交系豚鼠DNA样本进行PCR,通过产物电泳条带分析相关品系的遗传结构,评价各品系遗传纯合性。同样方法研究Zmu-1：DHP近交系各支系豚鼠的遗传结构,评价各支系的遗传纯合性。结果 经过13年培育,获得8个20代以上的近交豚鼠支系（窝）,每个支系分别有1-3只。经鉴定,Zmu-1：DHP近交2系的基因频率达到86.7%,分别高于Zmu-1：DHP远交系的6.7%及Zmu-2：DHP近交系的66.7%;其位点平均基因数为1.13个,分别低于Zmu-1：DHP远交系的2.47个及Zmu-2：DHP近交系的1.33个;Zmu-1：DHP近交系基因型频率也高于其他品系。Zmu-1：DHP近交系的基因类型均包含在Zmu-1：DHP远交系的基因内,但缺少Zmu-2：DHP近交系所携带的2个特征基因。Zmu-1：DHP近交系8个支系的基因纯合率各不相等,第2、8支系基因纯合率较高。结论 Zmu-1：DHP近交系与Zmu-1：DHP远交系之间既有同源性,又有特异性,Zmu-1：DHP近交系第2支系基本培育成新的近交系豚鼠,多个近交支系的形成有利于筛选具优势性状的支系。Zmu-2：DHP黑色近交系携带白色品系未有的微卫星标记,可能携有与毛色性状关联的优越性状基因。     

ICR系小鼠造血系统的部分生理学数据初报

ICR系小鼠是国际通用的远交群小鼠,具有与人类群体相似的基因杂合性,在医学研究领域中应用广泛。我们经过多年工作,积累了正常ICR系小鼠造血系统部分正常参数,现就其外周血象和骨髓有核细胞数、增殖能力及所含的造血系祖、于细胞等数值,向同行作一介绍。材料和方法一、实验动物:ICR系小鼠,25±2克,10～12周龄。由 SIPPR/BK动物中心引进,在本所动物房饲养繁殖。饲养条件:温度21±2℃,相对湿度45％～     

广西三个少数民族ABO血型的调查

本文对广西壮、侗、瑶三个少数民族人群的ABO血型进行了调查,统计,分析,结果表明:壮、汉两族有相似的遗传特征,提示两者有较近的血缘关系。侗、瑶族的血型特征与华东型的相似,这和族源及遗传有关。各族间基因频率釣差异,则表示隔离群体有相对稳定的遗传性状。     

应用α-珠蛋白3′-HVR探针进行小鼠的DNA指纹分析

目的:探讨3′-HVR探针及Southern杂交技术应用于实验小鼠遗传质量监测的可行性.方法:采用人源α-珠蛋白3′-HVR探针,应用ECL试剂盒,以HRP标记进行Southern杂交,以化学发光法进行检测,对5种近交系小鼠(BALB/c、DBA/2、T739、TA1、615)、1种封闭群小鼠(KM)及2种免疫缺陷小鼠(BALB/c-nu/nu及C.B-17SCID)进行DNA指纹分析.结果:其不同近交小鼠的DNA指纹图各异,而同种近交系的不同个体的DNA指纹图相同,封闭群KM小鼠不同个体之间的DNA指纹图存在一定差异.BALB/c-nu/nu小鼠、CB-17SCID小鼠不同个体之间的DNA指纹图相同,并且与BALB/c小鼠的一致.结论:该探针及其Southern杂交技术可用于实验小鼠的遗传质量监测.     

线粒体DNA序列分析封闭群小鼠遗传稳定性

目的分析ICR小鼠线粒体ATPase6和D—Loop基因多态性及封闭群ICR小鼠遗传稳定性。方法在一个亲本雌鼠100只繁殖产生的共1000只后代群体中随机取12周龄雄鼠20只,提取小鼠睾丸生殖细胞DNA,PCR扩增小鼠线粒体ATPase6和D-Loop基因,产物纯化后测序,测序结果与小鼠线粒体标准序列比对,比较20只小鼠的序列差异。结果检测的20只小鼠ATPase6和D—Loop基因序列完全一致,且与小鼠线粒体标准序列完全一致。结论ICR小鼠群体内未检测到ATPase6和D—Loop基因的多态性变异,该群体具有较好的线粒体遗传稳定性。     

两个封闭群NIH小鼠群体的遗传监测结果的比较分析

摘要 目的：对近3年北京地区的两个NIH封闭群小鼠群体的遗传质量进行监测分析。 方法：利用生化标记基因检测法,2011年测定A、B两单位NIH小鼠在碱性磷酸酶-1等14个遗传生化标记位点上的多态性。2014年利用相同方法原则对B单位的NIH小鼠群体进行抽样检测,比较了该小鼠群体3年来的遗传构成变化。结果：2011年,A、B两单位NIH小鼠群体均呈多态性的生化标记位点有6个（Ce2、Car2、Gpi1、Es10、Gpd1、Pgm1）,且B单位在Es3位点也呈多态性;两群NIH小鼠在Car2位点有差异（P<0.05）,在Es3、Gpd1、Pgm1三个位点有显著差异（P<0.01）;两群体的群间分化系数为0.0406,遗传一致性指数为0.9619,遗传距离为0.0388。与2011年相比,B单位封闭群NIH小鼠在2014年出现了2个纯合位点（Ce2和Gpd1）,同时Es10和Gpd1两位点差异极显著（P<0.01）,Pgm1位点差异显著（P<0.05）;不同代次NIH小鼠群间分化系数为0.1103,遗传一致性指数为0.8847,遗传距离为0.1266。结论：群体隔离、选种育种、种群数量和繁育代次等对NIH小鼠遗传构成差异影响显著。留种和繁育生产时应加强封闭群NIH小鼠的遗传监测,为其遗传质量的稳定性提供保障。     

屏障系统内昆明小鼠随机交配群体的建立及相关特性研究

通过剖腹取胎生物净化手段获得ＳＰＦ级昆明小鼠，然后在清洁级屏障室内严格遵照随机交配法（本文采用五组循环交配法）进行昆明小鼠的交配繁育和维持，建立了循环交配至１０代的群体。统计该群体的有关参数后发现其生产力和遗传质量都有了较大的提高，说明远交群动物采用随机交配法有其优越性和必要性。     

霍乱弧菌非O1群菌株的群体遗传结构

近年来非Ｏ１群霍乱弧菌在人类疾病上的流行病学意义也日益受到人们的关注。应用多位点酶电泳法对９８株非Ｏ１群霍乱弧菌１７个酶基因位点进行检测分析。结果：在被检测的基因位点中，大多位点的等位基因数较多，等位基因频率相对较低，但多数位点具有１～２个优势等位基因；平均遗传多态值和杂合度分析表明，检测的１７个酶基因位点都是多态的，平均遗传多态值ＨＮＯ１为０．６２７，平均杂合度ｈＮＯ１为６．５，说明非Ｏ１群霍乱弧菌群体遗传结构复杂，群体中的变异程度很高；这与非Ｏ１群霍乱弧菌广泛分布于自然环境水体中是一致的。结果提示：在被检测地区，非Ｏ１群霍乱弧菌中尚不具有遗传性状稳定的较大优势群体存在；同时也说明环境的自然选择在细菌进化变异中的重要作用。文中还对非Ｏ１群霍乱弧菌群体遗传结构的明显变化可能导致的流行病学意义进行了讨论