蛋白质芯片技术检测血清室间隔缺损特异标志物的研究

目的应用蛋白质芯片技术筛选单纯性室间隔缺损血清特异标志物。方法采用病例对照设计。用CMIO蛋白质芯片检测56例单纯性室间隔缺损患儿与85例儿科常见痛患儿血清，筛选血清差异蛋白。结果有21个蛋白具有统计学差异．其中质荷比6640、784、8571，079、6441、972、8698．804、3322．549、2128．960、2291、255、2055，652、2243．846和2．99．661等10个蛋白在VSD患儿血清中呈高表达，而质荷比2050．946、9306．537、7783．535、9198．666、2143．745、4604．572、7993．109、2824．602、2230．218、2083．311和9360．675等11个蛋白下调。结论蛋白质芯片技术是进行室间隔缺损分子流行病学研究的有效工具，所筛选出的蛋白成分可能是单纯性室间隔缺损的血清标志物。     

应用蛋白质指纹图谱建立炎性和非炎性早产诊断模型

目的 建立炎症早产和非炎症早产血清蛋白质组诊断模型.探讨应用蛋白质指纹技术进行早产的早期预警并区分炎症早产.方法 从2008至2010年在解放军第三○六医院住院分娩的产妇中挑选250例作为研究对象,根据人选条件和分娩后胎盘胎膜的病理结果,分5组每组50例:炎症早产组,非炎症早产组,盲法验证组和炎症足月产组;用正常足月产组做对照.各组标本50例,共250例.应用SELDI-TOF-MS蛋白质指纹技术和生物信息学方法,建立炎症和非炎症早产诊断模型并经过盲法验证和统计学分析;同时将炎症早产组和炎症足月产组建模所用差异蛋白进行比较分析.结果 炎症早产组与对照组质谱比较,得出36个差异蛋白,使用相对分子质量为1089、6635、2875、10 068、4405、4971、36 665、9713的标志蛋白建立模型.其特异度80.85％,敏感度84.44％,阳性预测值93.33％,阴性预测值46.67％;非炎症早产组共有15个差异蛋白,使用相对分子质量为3941、5808、6858、4289的标志蛋白建模,其特异性75.68％,敏感性64.44％,阳性预测值80.00％,阴性预测值66.67％.诊断炎症早产和诊断炎症足月产所用的模型比较得知,两者所用的差异蛋白完全不同.结论 应用血清蛋白质组诊断模型预测早产,能够将炎症早产和非炎症早产加以区分,具有指导个性化治疗的临床应用前景.炎症早产和炎症足月产的诊断模型完全不同,推测在妊娠的不同时期,绒毛膜羊膜炎所导致的相关蛋白质的表达不同.     

应用蛋白质芯片筛选壮族单纯性室间隔缺损血清标志蛋白

目的:应用蛋白质芯片技术筛选壮族单纯性室间隔缺损(VSD)血清标志蛋白.方法:用表面增强激光解吸、电离飞行时间质谱技术和CM10芯片检测25例壮族单纯性VSD患儿与36例儿科常见病患儿血清,用Ciphergen公司的Biomark Wizard软件分析数据.结果:有12个蛋白具有统计学差异,其中质荷比(m/z)6 640.784、8570.154、8698.278、2244.582、5321.868、6441.972和7973.310 7个蛋白在VSD患儿血清高表达,质荷比(m/z)2 213.579、4604.572、2142.465、9198.582和2169.264 5个蛋白下调.结论:蛋白质芯片技术是发现与筛选室间隔缺损血清标志蛋白的快速、有效的蛋白质组学工具.     

应用蛋白质芯片筛选汉族单纯性室间隔缺损血清标志蛋白

目的应用蛋白质芯片技术筛选汉族单纯性室间隔缺损（VSD）血清标志蛋白。方法用表面增强激光解吸／电离飞行时间质谱技术和CM10芯片检测21例汉族单纯性VSD患儿与33例儿科常见病患儿血清，用Ciphergen公司Biomark Wizard软件分析数据。结果有8个蛋白的差异具有统计学意义，其中质荷比6442．233、3322．694、6640．853、5122．828、8702．852、2746．566和8574．304等7个蛋白在VSD患儿血清中高表达，质荷比2823．419下调。结论蛋白质芯片技术是发现与筛选VSD血清标志蛋白的快速、有效的蛋白质组学工具。     

血清蛋白质指纹图谱与人工神经网络模型在肺癌诊断中的应用

目的筛选肺癌相关标志物并建立诊断肺癌的蛋白质谱模型。方法应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术检测了86例肺癌、80例健康对照样本的血清蛋白质质谱，结合人工神经网络建立肺癌诊断模型。结果从肺癌组与健康对照组中筛选出了4个蛋白质荷比峰建立肺癌诊断模型，该诊断模型的特异性为 100％（95％的置信区间为93.9％～100.0％），敏感性为93.6％（87.6％～96.4％），准确率为96.7%（88.1％～98.3％）。结论成功建立了肺癌诊断模型，该模型在肺癌的诊断中具有较高的敏感性和特异性。     

应用蛋白质芯片与人工神经网络建立胃癌诊断模型

目的应用血清蛋白质芯片质谱技术结合生物信息学方法筛选胃癌相关标记, 建立诊断胃癌的蛋白质标记模型。方法应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术检测了74例胃癌、70例健康对照样本的血清蛋白质质谱,结合人工神经网络建立胃癌诊断模型。结果从胃癌组与健康对照组中筛选出了4个蛋白质荷比峰,建立胃癌诊断模型,该诊断模型的特异性为100％（95％的置信区间为94.6％～100.0％）,敏感性为92.0％（88.7％～95.2％）,准确率为95.8%（86.4％～97.5％）。结论成功建立了胃癌诊断模型,该模型在胃癌的诊断中较传统方法具有更高的敏感性和特异性,可进一步研究与应用。     

二维超声诊断室间隔缺损与手术对照

为提高对先天性心脏病诊断的准确率，本文对经二维超声检查并接受手术治疗的39例先天性心脏病患儿进行对照分析，经二线超声诊断室间隔缺损手术证实准确率为92．3％，并对缺损的大小及类型也进行了估测。     

血清蛋白质指纹图谱筛选上皮性卵巢癌及预测肿瘤复发的应用研究

目的:建立人上皮性卵巢癌蛋白质组诊断模型,并盲法验证.方法:应用蛋白质芯片SELDI-TOF MS技术和生物信息学方法,比较40例上皮性卵巢癌患者手术前后、29例卵巢癌复发患者、22名健康人血清蛋白质谱,用45例包括良恶性卵巢病变患者和健康人的血清作肓筛验证.结果:卵巢癌和正常人血清比较,P＜0.01的差异蛋白峰有7个,用其中的质荷比4 162.69、5 804.26、6 749.37建立诊断模型,诊断的敏感度为98.3％,特异度为95.7％,阳性预测值为96.7％.卵巢癌术前、术后血清蛋白质谱比较,P＜0.01的差异蛋白峰有4个,术后化疗后复发与正常人血清差异蛋白质峰有5个,其中质荷比5 804.26蛋白峰术后下降、复发时升高.结论:应用SELDI方法建立人卵巢癌血清蛋白质谱诊断模型可用于卵巢癌的筛查,质荷比5 804.26蛋白峰有望成为卵巢癌疗效监测特异蛋白峰.     

血清 miR-141和 miR-143联合检测非小细胞性肺癌的诊断价值

目的：探讨血清中 microRNA 作为非小细胞性肺癌生物标志物的诊断价值。方法采用定量 RT-PCR 检测训练组中30例非小细胞性肺癌患者血清、30例健康对照者血清中差异表达的 microRNA,采用受试者工作曲线和曲线下面积来筛选作为候选标志物的 microRNA,建立诊断模型,再用15例非小细胞肺癌和15例健康对照者中的候选 miRNA 的表达情况去验证模型（验证组）的诊断效能,计算灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值等诊断价值。结果训练组中 miR-141和 miR-143表达与对照组比较差异有统计学意义（P ＜0．05）,在验证组中二者联合的诊断效能分别为：灵敏度为99％（95％CI ：0．94～1．0）,特异度为85％（95％CI ：0．75～0．93）,阳性预测值为87％,阴性预测值为99％。结论血清 miR-141和 miR-143是非小细胞性肺癌潜在的诊断标志物。     

蛋白质组学技术在胃癌诊断中的应用及临床意义

目的应用SELDI蛋白质芯片检测胃癌患者血清蛋白质指纹图谱，筛选候选肿瘤标志物以建立诊断模型，并探讨其诊断早期胃癌的临床意义。方法表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱（SEL-DI-TOF-Ms）技术及其配套蛋白质芯片检测40例胃癌患者和30例健康人的血清蛋白质组图谱，运用判别分析处理数据筛选标志物并建立诊断模型。结果8592m／z、13725m/z,8678m/z等3个蛋白质峰组合所构建的诊断模型能达到鉴别胃癌患者和健康人的最佳诊断效果，灵敏度为90％（36／40），特异性为86．5％（26／30）。结论SELDI蛋白质芯片技术在胃癌的诊断尤其是早期诊断、术前分期及候选肿瘤标志物筛选等方面具有一定价值，值得进一步研究。     

microRNA标志物在早期诊断室间隔缺损中的价值*

目的 评价血浆microRNA（miRNA）在室间隔缺损（VSD）早期诊断中的临床应用价值以及作为VSD分子诊断标志物的可行性,并建立临床早期诊断模型。方法 采用以济南市儿童医院、泰安市妇幼保健院为基础的病例-对照研究方法开展本次研究。研究分为VSD组85例和对照组80例,分3个阶段进行检测：首先选取VSD组及其匹配对照组各3例,应用miRNA全基因组表达谱芯片进行初筛;然后扩大样本量（20例VSD组vs 15例对照组）,对选定的8个有差异的miRNA采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）进行芯片结果的验证;最后进一步扩大样本（62例VSD组vs 62例对照组）进行qRT-PCR检测,筛选先天性心血管病早期诊断的生物标志物,建立多指标的Logistic回归模型,并应用MedCalc软件进行受试者工作特征（ROC）曲线分析评价诊断模型的价值。结果 芯片杂交初筛结果显示,与对照组比较,有36个表达有差异的miRNA（P?<0.05）,两阶段大样本qRT-PCR验证,检测到5种血浆miRNA（let-7e-5p、miR-155-5p、miR-222-3p、miR-433-3p和miR-487b-5p）在VSD中的表达差异有统计学意义（P?<0.05）,可以选择作为具有VSD早期诊断意义的生物标志物。5种血浆miRNA的ROC曲线下面积（AUC）分别在0.678～0.832,其中miR-222-3p的ROC曲线下面积最大为0.832。建立多指标Logistic回归分析模型,5种血浆miRNAs联合模型可提高VSD的诊断效率,ROC曲线下面积达到0.955,敏感性和特异性分别为83.87%和95.16%;3种血浆miRNA（let-7e-5p、miR-155-5p、miR-222-3p）联合诊断模型,ROC曲线下面积达到0.910,敏感性和特异性分别为82.30%和90.30%,接近5个miRNA的诊断效率。结论 5种血浆miRNA作为VSD早期诊断标志物,具有一定的可信性。将其整合后可建立起多指标的联合诊断模型。联合3种血浆miRNA构建诊断模型可提高VSD的诊断效率,临床应用价值更大。     

胃癌血清蛋白指纹人工神经网络诊断模型的研究

目的建立胃癌人工神经网络蛋白分子诊断模型,寻找胃癌早期诊断的新方法。方法采用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术及配套芯片CM10和Biomarker Wizard 3.1软件筛选胃癌差异表达蛋白,通过人工神经网络(ANN)建立并验证胃癌的SELDI分子诊断模型。结果共建立3个胃癌诊断模型(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),分别为胃癌的诊断、筛查、鉴别诊断模型。选其中由5个差异表达蛋白(质荷比为2502、2544、3085、8574、8740)组成的胃癌人工神经网络诊断模型Ⅰ作为胃癌人工神经网络诊断模型,对胃癌的诊断灵敏度为95.0%,特异度为98.33%,阳性预测值为95.0%,阴性预测值为98.33%,诊断准确度为97.5%。结论 SELDI-TOF-MS技术对胃癌的早期诊断具有一定的价值,值得进一步的研究。     

对比检测血清中抗环瓜氨酸肽抗体水平对类风湿关节炎的诊断价值

目的 比较国产和进口诊断试剂盒检测类风湿关节炎(RA)患者血清中的抗环瓜氨酸肽(CCP)的抗体水平的结果,探讨其对RA的临床诊断价值.方法 采用国产和进口试剂以酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测120例RA,71例非RA和50例正常人血清中的抗CCP抗体,用免疫速率散射比浊法检测类风湿因子(RF),绘制受试者工作特性(ROC)曲线并计算ROC曲线下面积,分析抗CCP抗体与RF在诊断RA中的相关性.结果 国产和进口试剂盒检测抗CCP抗体在RA组中的阳性率为61.7%(74/120)、69.2%(83/120),显著高于非RA组的9.9%(7/71)、7.0%(5/71)和正常组的0.0%(P＜0.001),国产和进口试剂盒检测结果之间的差异不显著(P=0.167).抗CCP抗体和RF对RA诊断的敏感性分别为69.2%、64.2%,特异性为92.9%、67.6%;阳性预测值和阴性预测值为94.3%、77.0%,64.1%、52.7%;似然比为9.82、1.98.抗CCP抗体的ROC曲线下面积为0.829,RF的ROC曲线下面积为0.740,抗CCP抗体对RA的临床诊断效能优于RF指标.抗CCP抗体和RF的检测结果间存在相关性(r=0.29.P=0.001).结论 抗CCP抗体可作为临床诊断RA的一项很好的血清学指标,在RA早期即有很高的特异性,联合检测RF更可提高对RA的早期诊断,但其与RA的发病及预后的关系有待进一步研究.     

血清PSA水平联合患者年龄及直肠超声特征的Logistic回归模型对前列腺癌的预测

目的探讨血清PSA水平联合患者年龄及直肠超声特征的Logistic回归模型对前列腺癌的预测价值。方法分析本院386例前列腺疾病患者的临床检查资料,以穿刺病理检查为确诊标准。对血清PSA水平联合患者年龄及直肠超声检查结果与穿刺病理结果进行统计分析,建立相关Logistic回归模型。结果血清PSA水平联合患者年龄及直肠超声特征的Logistic回归模型对前列腺癌的诊断准确度、特异度及敏感度分别为85．37％、93．51％及65．40％,阳性预测值及阴性预测值分别为83．74％及85．35％。结论血清PSA水平联合患者年龄及直肠超声特征的Logistic回归模型对前列腺癌的诊断预测结果较好,可提高前列腺癌的诊断率。     

血清蛋白指纹模型在再生障碍性贫血诊断中的应用研究

目的建立AA人工神经网络蛋白分子诊断模型,寻找AA血清学诊断的新方法。方法采用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术及配套软件、芯片筛选AA差异表达蛋白,通过ANN建立并验证诊断模型。结果由5个差异表达蛋白组成的AA人工神经网络诊断模型对AA的诊断灵敏度为95.0%、特异度90.0%、阳性预测值为90.5%、阴性预测值94.7%、诊断准确度为92.5%。结论 SELDI-TOF-MS技术对AA的血清学诊断具有一定的价值,值得进一步的研究。     

基于支持向量机的血清蛋白质指纹图谱模型在甲状腺癌诊断中的应用研究

目的 检测甲状腺癌患者血清蛋白质,筛选特异的蛋白质标记物,构建用于甲状腺癌早期诊断的血清蛋白质指纹图谱模型。方法 应用表面增强激光解吸电离主飞行时间质谱（SELDITOF-MS）技术测定81例血清标本（其中甲状腺癌40例,甲状腺腺瘤9例,健康人32例）的蛋白质质谱,用随机抽取的66例标本（甲状腺癌32例,甲状腺腺瘤9例,健康人25例）作为训练组,应用支持向量机进行训练和交叉验证,建立甲状腺癌诊断模型。结果区分甲状腺癌和正常人的诊断模型经留一法交叉检验该模型敏感性87.5％,特异性80％,用15例未知血清经盲法测试其敏感性为100％,特异性为86％;区分甲状腺癌和甲状腺腺瘤的诊断模型经留一法交叉检验敏感性为96．8％,特异性为89％。区分乳头状甲状腺癌和其他病理类型的甲状腺癌的诊断模型对乳头状甲状腺癌的判别率为97％,对其他病理类型的甲状腺癌的判别率为71％。结论表面增强激光解吸电离主飞行时间质谱技术结合支持向量机建立甲状腺癌血清蛋白质指纹图谱模型为早期筛查及诊断甲状腺癌提供了一种特异性强、敏感性高的新方法,值得进一步研究和应用。     

输血四项检测中化学发光微粒免疫分析技术的价值及应用

［摘要］ 目的探讨化学发光微粒免疫分析技术（chemiluminescent microparticle immunoassay，CMIA）在检测乙型肝炎表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）、人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）、丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）、梅毒螺旋体（treponema pallidum，TP）抗体输血四项指标中的价值。 方法选择进行输血前四项检查的患者300例。采用CMIA检测患者的血清标本，与病理检查结果比较。 结果CMIA检测血清HBsAg、HIV抗体、TP抗体、HCV抗体的结果与临床病理检测结果比较，差异无统计学意义（χ2=0.000、0.000、0.267、0.150，P＞0.05）。CMIA检测HBsAg、HIV抗体敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、诊断符合率皆为100.00%；CMIA检测TP抗体敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、诊断符合率分别为93.33%、95.00%、94.91%、93.44%、94.17%；CMIA检测HCV抗体敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及诊断符合率分别为95.00%、91.67%、91.93%、94.83%、93.33%。 结论在输血四项指标检测中，CMIA与病理诊断结果比较，虽然存在一定的差异，但是表现出良好的敏感度和特异度，具有较高的阳性预测值、阴性预测值及诊断符合率。     

定量检测抗CCP抗体在类风湿性关节炎中的临床价值

目的定量检测抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)水平,并探讨其在类风湿性关节炎中的诊断价值。方法分别用ELISA法、免疫散射比浊法检测RA患者和非RA自身免疫性疾病患者血清中的抗CCP抗体和RF水平,并进行评价分析。结果抗CCP抗体对RA诊断的敏感性为82.97%,特异性为94.59%,阳性预测值和阴性预测值分别为95.12%和81.39%,联合RF检测对RA诊断的特异度和阳性预测值可分别提高到97.29%和96.61%。RA组中病程1年以上抗CCP抗体水平(403.90±237.52)RU/ml显著高于病程1年以下患者的抗体水平(288.28±105.35)RU/ml。结论抗CCP抗体对RA的诊断价值优于RF,其抗体水平与病程有关。与RF联合检测可进一步提高RA的诊断特异性。     

下咽癌相关血清蛋白质分子标志物的初步研究

目的筛选下咽癌血清蛋白质分子标志物,并建立决策诊断模型。方法48例下咽癌病人血清,其中36例为建模组,12例为盲法验证组。52例正常对照的血清,其中36例为建模组,16例为盲法验证组。应用弱阳离子交换芯片（WCX2）及固定金属亲和芯片（IMAC3）,经表面加强激光解析电离飞行时间质谱测定得到蛋白质谱,分析下咽癌和正常人血清的蛋白质谱差异,建立分类树模型并进行盲法验证。结果在质荷比（M／Z）2～50范围内,WCX2芯片共检测出11个差异蛋白峰。IMAC3芯片共检测19个差异蛋白峰（P值以10^-5为界）。自动选用7796、4216、5927、5361（M／Z）建立决策树模型,灵敏性为94．44％（34／36）,特异性为88．89％（32／36）。盲法验证的灵敏性为91．67％,特异性为81．25％。结论应用该方法可以从病人血清中筛选出下咽癌相关的标志蛋白。建立的决策树模型可能对早期发现早期诊断下咽癌具有重要的临床意义。     

一种NT—proBNP（POCT）检测对早期心衰的诊断价值

目的 评估一种NT-proBNP （POCT）快速免疫检测试剂早期诊断心衰的临床应用价值.方法 应用深圳瑞莱公司NT-proBNP （POCT）试剂检测77例急诊疑似心衰病人血清的NT-proBNP浓度.结果 77例收集到的疑似心衰病人中,其中心衰患者24例,占31.2％,该POCT快速诊断试剂敏感度为96.0％,特异度为83.0％,阳性预测值为72.7％,阴性预测值为97.8％.ROC曲线下面值为0.793.结论 瑞莱公司NT-proBNP （POCT）快速诊断试剂具有很高的阴性预测值,在心衰发病早期,是非常好的鉴别诊断非心衰患者的POCT试剂.