镉对小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤作用研究

目的 研究氯化镉对小鼠睾丸生殖细胞DNA的损伤作用.方法 用不同浓度氯化镉分别对小鼠睾丸细胞进行处理,分为阴性对照组(生理盐水)、微剂量组(0.04mmol\LCdCI2)、低剂量组(0.2mmol\L CdCI2)、中剂量组(1mmol\LCdCI2)、高剂量组(5mmol\L CdCI2),用单细胞凝胶电泳法分别计数各组400个细胞,按照不同的损伤程度进行分类;并分别测量各组50个彗星细胞尾长并计算均方值.结果 各组小鼠睾丸生殖细胞损伤率和尾长均方分别为阴性对照组8.0%、8.543±2.131,微剂量组48.5%、24.761±3.595,低剂量组65.0%、39.246±5.894,中剂量组71.5%、42.745±5.231,高剂量组87.5%、49.374±4.543;4个剂量组小鼠睾丸细胞DNA损伤率显著高于阴性对照组(P＜0.001),四个剂量组小鼠睾丸细胞DNA损伤的彗星细胞尾长均方值显著高于阴性对照组(P＜0.001),并且DNA损伤率和彗星细胞尾长均方值随着剂量增加而增加.结论 微量氯化镉对小鼠睾丸生殖细胞DNA即已存在明确损伤作用,且损伤程度与氯化镉剂量成正比.     

氯化镉染毒小鼠睾丸流式细胞DNA分析

是一种工业用途甚广的重金属,广泛应用于冶金、电镀等行业中。本文适用流式细胞ＤＮＡ分析法,观察氯化镉染毒对小鼠睾丸生精过程的影响。１材料与方法：选用体重为１８—２５ｇ的健康昆明种雄性小鼠４０只（华北制药厂实验动物中心提供）,实验前观察一周后,随机分为４...     

活性氧在氯化镉诱导的小鼠睾丸间质细胞凋亡中的作用

目的 探究活性氧(reactive oxygen species, ROS)在氯化镉(cadmium chloride, CdCl₂)诱导的睾丸间质细胞毒性中的潜在作用及机制。方法 以不同浓度CdCl₂(0、5和10μmol/L)染毒小鼠睾丸间质TM3细胞24 h。CCK-8法检测CdCl₂对TM3细胞活性的影响;Hoechst33342染色法检测凋亡小体;DCFH-DA探针法检测TM3细胞ROS水平;1 mmol/L N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine, NAC)预处理1 h后用10μmol/L CdCl₂染毒TM3细胞24 h, Western blot检测细胞内促凋亡蛋白Caspase-9和cleaved Caspase-3的表达水平;RT-qPCR检测细胞内抗凋亡基因Bcl-2以及促凋亡基因Caspase-9和Caspase-3 mRNA表达水平。结果 CdCl₂染毒细胞24 h后,TM3细胞活力降低且凋亡小体数量增加。10μmol/L CdCl<...     

氯化镉对小鼠睾丸急性和长期的遗传毒性

本研究选用12～14周的雄性小鼠,随机分为处理组和对照组:第1组小鼠10只,镉剂量为1 mg/kg;第2组为10只,给予灭菌生理盐水。第3组为25只,镉剂量为1 mg/kg,     

甲醛对小鼠睾丸细胞DNA的损伤作用

目的探讨甲醛对离体小鼠睾丸细胞DNA的损伤作用.方法用不同剂量的甲醛(0、25、50、75、100μmol/L)对小鼠睾丸细胞进行染毒,应用彗星实验检测睾丸细胞DNA的损伤效应.结果甲醛在10、25、50μmol/L时具有DNA断裂作用(P＜0.05,P＜0.01和P＜0.01),在75 μmol/L时既有DNA断裂也有交联作用(P＜0.01),浓度为100μmol/L时尾部DNA百分比和尾距与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05),同时,甲醛致睾丸细胞DNA断裂的临界浓度在10 μmol/L左右,峰值浓度在50μmol/L附近.结论甲醛能引起离体小鼠睾丸细胞不同程度的DNA损伤,对小鼠睾丸细胞具有生殖遗传毒性.     

二硫化碳对大小鼠睾丸组织超微结构影响的研究

目的 从超微结构损伤的角度观察、探讨二硫化碳（CS2）不同浓度染毒对雄性大、小鼠睾丸组织各级生精细胞及支持细胞、间质细胞的影响.方法 将40只雄性Wistar大鼠和32只雄性昆明小鼠分别随机分为对照组和不同CS2染毒浓度3组（大鼠：50、250、1 250 mg/m3,小鼠：220、660、1 980 mg/m3）,静式吸入染毒,2 h/d,5 d/周,共10周.染毒结束后,取大、小鼠睾丸组织,透射电镜观察大、小鼠睾丸组织超微结构的改变.结果大鼠50 mg/m3和250 mg/m3及小鼠220 mg/m3和660 mg/m3浓度组精原细胞、精母细胞胞质中可出现空泡,线粒体轻度肿胀.大鼠1 250 mg/m3和小鼠1 980 mg/m3浓度组,间质细胞及支持细胞胞质中出现明显空泡;精原细胞、初级精母细胞胞质中空泡较多,线粒体肿胀加重;精子细胞胞质中也出现空泡,但线粒体肿胀较轻;精子＂9＊2＋2＂ 轴丝结构紊乱,部分微管和致密纤维溶解缺失,有的甚至完全断裂.结论吸入一定浓度的CS2可使大、小鼠睾丸组织各类生精有关细胞的内质网、各级生精细胞的线粒体及精子尾部轴丝等超微结构发生病理变化.     

阿的平对高功率微波损伤小鼠睾丸的保护作用

目的:探讨阿的平对高功率微波辐射小鼠睾丸的保护作用。方法:雄性小鼠随机分为4组,即正常组、辐射对照组、阿的平低剂量组(12.6mg/kg)、阿的平高剂量组(50.4mg/kg)。小鼠分别灌胃给予注射用水和不同剂量阿的平后,使用频率2.856GHz、脉宽500ns的微波源,进行50mW/cm2的微波远场照射30min。于照射后即刻、1d、2d、7d取小鼠睾丸。将小鼠睾丸组织病理切片观察其形态学变化;组织蛋白匀浆法提取睾丸组织蛋白检测热休克蛋白(HSP)70表达变化。结果:微波照射小鼠30min后,辐射对照组的睾丸组织从即刻至7d均有病理改变,曲精小管边缘不整齐,生精细胞水肿,排列紊乱,间质充血。给药组与对照组相比曲精小管排列基本整齐,边缘清晰,生精上皮细胞肿胀较对照组减轻。其中给药低剂量组在照射即刻至2d改善效果与高剂量组相似,但在7d时高剂量组的改善效果明显优于低剂量组。Western blot结果显示,在照后2d阿的平高、低剂量给药组与辐射对照组相比HSP70蛋白表达升高,在7d时只有阿的平高剂量组与辐射对照组相比HSP70蛋白表达升高。结论:阿的平可能是通过上调HSP70蛋白的表达,发挥其抗炎和抗凋亡作用,从而对高功率微波致伤的小鼠睾丸组织产生保护作用。     

羊睾丸提取液对铅染毒小鼠睾丸氧化损伤的拮抗作用

目的 探讨羊睾丸提取液对铅染毒小鼠睾丸氧化损伤的拮抗作用.方法 将30只健康清洁级ICR雄性小鼠随机分为对照(蒸馏水)组、模型组和羊睾丸拮抗组.模型组采用0.4％乙酸铅溶液灌胃染毒(染毒剂量为30 mg/kg,染毒容量为10 ml/kg),同时,腹腔注射蒸馏水0.5 ml;羊睾丸拮抗组采用0.4％乙酸铅灌胃染毒,同时,腹腔注射羊睾丸提取液0.5 ml.每天染毒1次,连续21d.检测血清中睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)及黄体生成素(LH)含量;检测睾丸组织匀浆中总抗氧化能力(T-AOC)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)含量;检测附睾精子密度、精子活率和活精子百分率.结果 与模型组比较,对照组和羊睾丸拮抗组小鼠血清T含量和睾丸组织匀浆中T-AOC、T-SOD 、CAT、GSH-Px活力及精子密度、精子活率、活精子百分率均较高,MDA含量均较低,差异有统计学意义(P＜0.01);而羊睾丸拮抗组小鼠血清T含量和睾丸组织匀浆中T-AOC、T-SOD、CAT、GSH-Px活力及精子密度、精子活率、活精子百分率与对照组比较,差异无统计学意义.各组小鼠血清FSH和LH含量间比较,差异均无统计学意义.结论 羊睾丸提取液可拮抗铅染毒致小鼠睾丸的氧化损伤作用.     

壳聚糖对镉致小鼠睾丸损伤的干预作用

目的探讨壳聚糖对镉致小鼠睾丸损伤的干预作用。方法50只健康昆明种雄性小鼠,随机分为5组,即对照组,单纯镉染毒组,壳聚糖50、150、450mg/kg 3个剂量干预组。壳聚糖干预组分别灌胃50、150、450mg/kg壳聚糖,对照组和单纯镉染毒组灌胃蒸馏水。2h后单纯镉染毒组和各剂量壳聚糖干预组腹腔注射氯化镉0.8mg/kg,对照组腹腔注射蒸馏水。连续14d。末次染毒后处死动物,剖取附睾和睾丸,分别测定精子畸形率、睾丸超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量。结果小鼠染毒14d后,各处理组小鼠精子畸形率明显升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);睾丸SOD活力明显下降,其中单纯镉染毒组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);其余各剂量壳聚糖干预组与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。MDA含量明显升高,与对照组比较,单纯镉染毒组、50和150mg/kg壳聚糖干预组差异有统计学意义(P<0.05)。随着壳聚糖摄入剂量的逐渐升高,小鼠精子畸形率有所降低,睾丸SOD活力有所升高,MDA含量有所下降,与单纯镉染毒组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论壳聚糖对镉致小鼠睾丸损伤有一定的干预作用。     

氧化乐果对小鼠睾丸Sertoli细胞DNA的损伤作用

目的 研究有机磷农药氧化乐果对小鼠睾丸Sertoli细胞DNA的损伤作用.方法 将40只清洁级昆明雄性小鼠随机分为对照(蒸馏水)组和1.0、2.0、4.0 mg/kg氧化乐果染毒组,每组10只.采用灌胃方式进行染毒,染毒容量为20 ml/kg,每天1次,连续染毒14d.采用单细胞凝胶电泳技术检测小鼠睾丸Sertoli细胞的DNA损伤情况.结果 与对照组比较,2.0、4.0 mg/kg氧化乐果染毒组彗星长度均明显增加,各剂量氧化乐果染毒组彗星尾长、Olive尾矩、尾长/头长、尾部DNA含量也均升高,差异有统计学意义(P＜0.05).且随着氧化乐果染毒剂量的升高,各指标均呈上升趋势.结论 氧化乐果对小鼠睾丸Sertoli细胞DNA有明显的损伤作用.     

镍铬联合染毒对小鼠睾丸的损伤作用及其作用机制

目的观察镍与铬对小鼠睾丸的联合毒作用,探讨镍、铬联合作用类型及毒作用机制。方法 54只昆明种雄性小鼠按3×3析因设计随机等分为9组,镍染毒剂量为0.0、2.5、5.0 mg/kg.bw、铬染毒剂量为0.0、2.5、5.0 mg/kg.bw,按0.1 m/l10 g.bw连续灌胃5 d,35 d后处死动物,检测睾丸脏器系数、睾丸结构、睾丸细胞凋亡及细胞周期;精子数量、活力和畸型;检测睾丸组织中MDA含量、SOD、LDH、SDH活性。结果小鼠睾丸脏器系数、SOD、LDH、SDH活性随染毒剂量增加而降低,MDA含量增高(P<0.01),且有量-效关系;精子数量较对照组低(P<0.01)、精子活力下降(P<0.01)、畸形率高于对照(P<0.01),睾丸的结构受损,各染毒组小鼠睾丸细胞凋亡率和G0/G1期细胞百分数较对照组升高(P<0.05),各染毒组S期及G2+M期细胞百分数较对照组低(P<0.05),并呈现一定的量-效关系,镍、铬合用的效应大于二者单独作用的效应之和(P<0.01)。结论镍和铬联合染毒可致小鼠睾丸损伤,二者的联合作用为协同毒效应;损伤机制可能与其降低睾丸细胞的抗氧化能力、抑制睾丸细胞酶活性、促进睾丸细胞凋亡等有关。     

山楂黄酮对小鼠睾丸间质细胞热损伤保护作用

目的探讨山楂黄酮对离体小鼠睾丸间质细胞的热应激防护作用。方法选取对数生长期的小鼠睾丸间质细胞株（TM₃）,设对照组、热应激组（43 ℃ 1 h）、山楂黄酮高、中、低剂量组（800、200、50 mg/L）、阳性对照组（绒毛膜促性腺激素500 IU/L）。采用噻唑蓝法观察细胞活性,光学显微镜观察细胞形态学变化,检测丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。结果与对照组比较,热应激组细胞增殖率[（77.74±5.10）%]明显下降,SOD和GSH-Px活性[分别为（19.27±1.02）、（246.03±13.53）U/mL]降低,MDA含量[（2.54±0.09）nmol/mL]明显升高（P<0.01）,细胞数量明显下降,细胞收缩变形;与热应激组比较,山楂黄酮低剂量组细胞增值率[（91.33±5.50）%]、SOD和GSH-Px活性[分别为（28.31±1.30）、（270.91±10.34）U/mL]明显升高,MDA含量[（2.04±0.01）nmol/mL]明显下降（P<0.05）,细胞数量虽明显减少,但细胞形状保持良好。结论山楂黄酮可增强细胞抗氧化能力,对睾丸间质细胞的热应激损伤具有一定保护作用。     

镉对小鼠睾丸细胞DNA损伤及锌保护作用研究

目的 建立亚慢性镉中毒动物模型并研究镉对雄性小鼠睾丸细胞DNA损伤，及锌对亚慢性镉中毒的保护作用。方法 以不同剂量的氯化镉(0．4，0．8，1．6mg／kg)每天在ICR小鼠背部行皮下注射，连续7周。锌保护组在皮下注射1．6mg／kg体重氯化镉溶液的同时给予350μg／ml硫酸锌水溶液喂饲7周。动物处死后，取一侧睾丸做单细胞凝胶电泳实验以观察睾丸细胞DNA损伤水平，另一侧睾丸作病理切片镜下观察其组织形态变化。结果 各组血、肝镉浓度随染毒剂量增加而增加，呈现明显相关关系。病理损伤随剂量的增加而明显加重。睾丸细胞DNA损伤水平和损伤程度与染毒剂量呈现剂量—反应关系。高剂量染毒组部分睾丸细胞彗星图像呈凋亡改变。结论 亚慢性镉染毒可造成雄性小鼠睾丸组织的病理损伤，也可以引起睾丸细胞DNA损伤，且呈剂量—反应关系。锌对镉的亚慢性毒作用具有一定的保护作用，但锌似无驱镉作用，也不能降低镉中毒引起的睾丸细胞DNA损伤。     

枸杞多糖对小鼠睾丸细胞DNA损伤的保护作用

目的 :研究枸杞多糖 (LBP)对过氧化氢 (H2 O2 )引起的睾丸细胞DNA氧化损伤的保护作用。方法 :睾丸细胞先用不同浓度LBP作用 1h ,再加入 10 0 μmol LH2 O2 共同培养 2 5min ,然后用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)测定DNA链断裂情况 ,分析LBP的抗氧化损伤作用。结果 :H2 O2 作用一定时间后 ,可引起DNA链断裂。 50、10 0、2 0 0、40 0 μg mL的LBP预处理可使H2 O2 染毒细胞的拖尾百分率和尾长显著降低。结论 :LBP本身没有致氧化损伤作用 ,它能够清除自由基 ,对氧化应激所致的睾丸细胞DNA损伤具有抑制作用     

SO2对雄性小鼠睾丸组织的氧化损伤作用

目的了解SO2对哺乳动物和人雄性生殖系统有无氧化损伤作用,探讨SO2污染对生殖的影响.方法SO2染毒剂量分别为(22±2)mg/m3,(64±3)mg/m3,(148±23)mg/m3,采用SO2动态吸入实验技术,使昆明小鼠吸入不同浓度的SO2,每天染毒6 h,共7 d,染毒后,测定小鼠睾丸组织氧化损伤和抗氧化状态的变化.结果SO2吸入能够引起小鼠睾丸中GSH-Px、SOD和CAT酶活性改变,GSH含量减少,脂质过氧化产物丙二醛含量显著增高,并且随着SO2熏气浓度的升高,氧化损伤程度愈加严重.结论SO2可对雄性小鼠生殖系统产生损伤作用.     

氯化镉对小鼠脏器系数及睾丸生殖细胞线粒体D-Loop基因突变的影响

[目的]研究氯化镉对发育中的小鼠睾丸、肾、肝等脏器系数及对睾丸生殖细胞线粒体DNA控制区（D-Loop）基因突变的影响,探索氯化镉对睾丸影响的机制。[方法]取7周龄雄性ICR小鼠40只[体重（19.5±2.5）g],随机分为低（1μmol/kg）、中（5μmol/kg）、高（10μmol/kg）剂量氯化镉腹腔注射染毒组和阴性对照组共4组,每组10只,隔天染毒,共10次,对照组腹腔注射等体积的生理盐水。第21天取小鼠双侧睾丸、肾和肝,测定脏器系数;提取睾丸生殖细胞基因组DNA,聚合酶链反应（PCR）扩增线粒体D-Loop基因,纯化后测序分析基因突变。[结果]高剂量组睾丸脏器系数明显低于对照组（P〈0.001）,但肝脏器系数明显高于对照组（P〈0.05）;低剂量组肾脏脏器系数明显高于对照组（P〈0.001）。测序结果显示各组小鼠睾丸生殖细胞线粒体D-Loop基因未检测到突变。[结论]高剂量的氯化镉对小鼠睾丸和肝脏脏器系数产生影响,低剂量的氯化镉对小鼠肾脏脏器系数产生影响。氯化镉处理小鼠21d,未检测到睾丸生殖细胞线粒体D-Loop基因突变。     

体外研究牛磺酸对氯化镉致DNA损伤的保护作用

[目的]通过体外实验初步探讨牛磺酸对氯化镉所诱导DNA损伤遗传毒性的保护作用机制。[方法](1)单细胞凝胶电泳技术检测DNA损伤;(2)体外清除自由基检测。实验分5组:①阴性对照组,②氯化镉组:分别加入终浓度为10、20、40μmol/L的氯化镉。③同时处理组:终浓度为100mmol/L的牛磺酸与氯化镉10、20、40μmol/L同时加入。④后处理组:先加入终浓度为10、20、40μmol/L的氯化镉,45min后加入100mmol/L的牛磺酸。⑤预处理组:先加入终浓度为100mmol/L的牛磺酸,45min后加入10、20、40μmol/L的氯化镉。所有的处理组均培养72h。[结果]10μmol/L氯化镉即可引起细胞DNA损伤,并随着氯化镉浓度的增加而加重,呈一定的剂量-反应关系。用100mmol/L牛磺酸预处理组和同时用牛磺酸和氯化镉处理组的DNA损伤率明显低于相应的单纯氯化镉组(P<0.05),而羟自由基清除率明显高于单纯氯化镉组(P<0.05);牛磺酸预处理组的DNA损伤率明显低于同时处理组(P<0.05),而羟自由基清除率也明显高于同时处理组(P<0.05)。后处理组DNA损伤率与单纯氯化镉组比较差异无显著性。[结论]牛磺酸在体外对氯化镉引起的DNA损伤有预防作用。     

氯化镉对小鼠精子的影响

４０只小鼠随机分为４组：对照组，氯化镉３．５ｍｇ／ｋｇ，氯化镉７．０ｍｇ／ｋｇ，氯化镉１４．０ｍｇ／ｋｇ。灌胃染毒，灌胃量为０．１ｍｌ／１０ｇ体重。３天后处死动物，检测精子活动率及精子密度。结果表明，氯化镉７．０ｍｇ／ｋｇ和氯化镉１４．０ｍｇ／ｋｇ组精子活动率比对照组降低（Ｐ〈０．０５），氯化镉７．０ｍｇ／ｋｇ和氯化镉１４．０ｍｇ／ｋｇ组精子密度比对照组降低有非常显著意义（Ｐ〈０．０１）。     

芹菜对小鼠睾丸超微结构和血清激素的影响

有研究发现,常吃芹菜能减少男性精子的数量[1].据报道芹菜提取物作用于大鼠睾丸间质细胞时,以剂量依赖方式使原代培养的大鼠睾丸间质细胞睾酮的分泌量明显减少[2];腹腔注射芹菜汁能够影响小鼠精子运动参数及降低精子密度[3].本文旨在通过观察小鼠血清激素和睾丸超微结构的变化,为深入研究提供科学依据.     

维生素C对氯化镉致小鼠肾损伤的保护作用

目的 探讨氯化镉(cadmium chloride, CdCl₂)染毒诱导小鼠肾损伤及维生素C(vitamin C, VC)的保护作用。方法 将40只健康清洁级雄性昆明小鼠随机分为4组,分别为对照组(双蒸水灌胃、腹腔注射),VC组(200 mg/kg VC灌胃,双蒸水腹腔注射),CdCl₂组(双蒸水灌胃,2 mg/kg CdCl₂腹腔注射),VC+CdCl₂组(200 mg/kg VC灌胃,2 mg/kg CdCl₂腹腔注射)。染毒30 d。最后一次给药24 h后,摘眼球取血,立刻取出肾组织称重,计算肾脏系数,快速分离肾细胞。利用DCFH-DA试剂盒及流氏细胞仪检测活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平;利用血尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)、血清肌酐(serum creatinine, Scr)、β2微球蛋白(β2-microglobumin,β2-MG)、胱抑素C(cystatin C,Cys C)、超氧化物歧化酶(...