巯基乙酸对爪蟾卵母细胞体外核成熟的影响

背景与目的:探讨巯基乙酸(thioglycolic acid,TGA)对孕酮诱导的爪蟾卵母细胞核成熟的影响.材料与方法:用不同浓度的TGA(5、25、125 μg/ml)在体外预处理爪蟾卵母细胞2 h后,再用孕酮诱导成熟,实验并设不经TGA预处理的对照组.在培养过程中观察卵母细胞的外观和核形态,以判断生发泡破裂(GVBD)情况;在培养结束时(加入孕酮后8 h),收集卵母细胞进行荧光染色.观察染色体的状态. 结果:经不同浓度TGA处理后卵母细胞的GVBD50 明显缩短,与对照组比较均具有统计学意义(P均<0.05),说明TGA加快卵细胞GVBD的发生;荧光染色观察GV期卵母细胞未见凝集的染色体,第一次减数分裂中期细胞可见赤道板形成,第二次减数分裂中期细胞除染色体赤道板外,还可见第一极体(PB1).经25 mg/ml和125 mg/ml浓度的TGA处理后,排出PB1的爪蟾卵母细胞比例明显降低(P<0.05),即抑制了MI-MII转变和第一极体的释放.结论:TGA可抑制孕酮诱导的爪蟾卵母细胞体外成熟.     

芹菜素对非洲爪蟾卵母细胞体外成熟的影响及其作用机制

目的： 探讨不同浓度的芹菜素对非洲爪蟾卵母细胞体外成熟的影响及作用机制。方法：将健康的非洲爪蟾卵母细胞移入含不同浓度 (0、20、80、160和500 μmol/L)的芹菜素培养液中培养,另设阳性对照 (孕酮5 μg/mL)组。每隔1 h观察生发泡破裂 (germinal vesicle breakdown,GVBD)发生情况、并记录发生GVBD的细胞数目;同时用10%的三氯乙酸固定,观察细胞核的变化;采用荧光染色法在激光共聚焦显微镜下观察细胞染色体的变化。收集上述各浓度芹菜素处理8 h后的卵母细胞,采用Western blot法检测卵母细胞成熟相关蛋白p-Erk1、Mos和CyclinB2的表达。结果：与阴性对照组相比,当芹菜素浓度为80~500 μmol/L且作用时间在4~8 h时,卵母细胞GVBD发生率均明显升高 (P均<0.05)。在80~500 μmol/L芹菜素处理细胞8 h后,p-Erk1、Mos和CyclinB2蛋白表达量明显高于阴性对照组 (P<0.05)。结论：芹菜素在卵母细胞体外培养过程中促进了第1次减数分裂的开启,其机制可能与MPF和MAPK信号通路的活化有关。     

巯基乙酸对孕酮诱导爪蟾卵母细胞体外成熟过程中MAPK和MPF激酶活性的影响

背景与目的:探讨巯基乙酸(TGA)对孕酮诱导爪蟾卵母细胞体外成熟过程中丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)和成熟促进因子(MPr)蛋白激酶活性的影响.材料与方法:用0、5、25和125 μg/ml浓度的TGA分别处理经孕酮诱导的体外培养爪蟾卵母细胞,另设不含孕酮的阴性对照组,于处理4 h和8 h收集卵母细胞进行Western Blotting检测,观察p-Erkl/Erkl蛋白、p-RSK蛋白、Cdc2、p-Cdc2和Cyclin BI蛋白的表达情况.结果:TGA处理爪蟾卵母细胞4 h后,Erkl蛋白的磷酸化水平(即MAPK的活性水平),较对照组明显增加(P＜0.05);MAPK的活性底物p-RSK蛋白的表达也增加(P＜0.05);同时伴随着p-fAc2表达水平的下降和Cyclin B1蛋白表达的增强(P＜0.05).TGA处理8 h后Erkl蛋白磷酸化水平和p-RSK蛋白含量与对照组相比无明显差异(P＞0.05),但此时TGA组p-Cdc2水平明显增加(P＜0.05),Cyclin BI蛋白的表达降低(P＜0.05).结论:在孕酮诱导的爪蟾卵母细胞体外成熟早期,TGA可促进MPF和MAPK蛋白激酶及其底物p-RSK的活化;在成熟的晚期,TGA对MAPK活性无明显影响,但明显抑制MPF活性.TGA影响MPF活性的可能机制是降低Cyclin B1蛋白水平.     

抗原冲击树突状细胞介导细胞毒性T淋巴细胞特异性抗白血病作用的体外研究

 目的　研究白血病来源树突状细胞体外诱导的有效方法;观察不同抗原诱导的特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的抗白血病效应。方法　分离白血病患者骨髓单个核细胞,经钙离子载体A23187诱导分化,将弱酸洗脱抗原、低渗抗原分别冲击树突状细胞,96 h后树突状细胞与T细胞共同培养,采用MTT法比较CTL细胞对白血病细胞的杀伤活性。结果　骨髓来源的单个核细胞经过100 ng／ml的GM-CSF、500 ng／ml钙离子载体A23187成功诱导为树突状细胞,倒置显微镜下具有树突状细胞的典型形态,流式细胞术测定其CD1a、CD83表达较诱导前明显升高,差异有统计学意义（P＜0.01）。弱酸洗脱法获得抗原冲击树突状细胞致敏T细胞后杀伤白血病的能力最高,未负载抗原的树突状细胞致敏T细胞杀伤白血病细胞的能力最低,两者差异具有统计学意义（P＜0.01）。结论　白血病来源的骨髓单个核细胞经GM-CSF、钙离子载体A23187能够成功诱导为树突状细胞;弱酸洗脱后获得的抗原冲击树突状细胞致敏T细胞能够获得更强的杀伤白血病细胞的能力。     

小鼠腔前卵泡体外培养成熟-染色体分析技术的建立

背景与目的：初级卵母细胞生长过程中对理化因子反应敏感，拟建立小鼠腔前卵泡体外培养成熟（IVG）一染色体分析技术，为生殖毒理学提供有效的检测模型。材料与方法：采用机械分离法从12～14日龄昆明小鼠的卵巢中分离出直径为140—160μm的腔前卵泡，单个卵泡放入微液滴培养体系中，隔天半量换液，连续培养10d，对成活卵泡体外诱导超排，于16～24h后，检测卵母细胞成熟情况，分别计数停滞在生发泡期（GV）、生发泡期破裂（GVBD）和排出第一极体（PB）的卵母细胞数，对卵母细胞进行染色体数目与结构分析，并与体内发育体外成熟卵母细胞（IVM）及体内超排成熟卵母细胞（IVC）进行比较分析。结果：从4只小鼠卵巢中分离得到332个腔前卵泡，培养早期卵泡直径增长显著，随后呈“摊鸡蛋”样生长，部分形成假腔。培养10d后存活率为95．78％（318／332），激索诱导排卵后，卵丘-卵母细胞复合体排出率72．01％（229／318），其中11．80％（27／229）停滞在GV期，39．30％（90／229）发生GVBD，47．16％（108／229）发育成熟，排出第一极体（PB），1．74％（4／229）发生孤雌活化。IVG与IVM、IVC两种方法获得的卵母细胞染色体对比分析，未见明显的染色体数目与结构异常。结论：小鼠腔前卵泡体外培养成熟，可获得与体内生长相同的成熟卵母细胞，染色体分析未见异常，可成为一种良好的生殖毒理学体外检测与卵泡发育机制研究模型。     

B7—1单抗和CsA联用诱导人T细胞无能及其特性探讨

目的:在体外探讨T细胞无能诱导的条件及其生物学特性.方法:将B7-1单抗和CsA联用在体外诱致了抗原特异性T细胞无能,采用RT-PCR法检测了无能T细胞细胞因子基因的表达.结果:T细胞无能为抗原特异性的,多克隆激活剂PHA、CD3单抗和PMA A23187可以恢复无能T细胞的活性 ; IL-2可以阻止T细胞无能的形成,但不能逆转其耐受状态;无能T细胞IL2和IFNmRNA是关闭的,而IL-4和IL-10RNA则是开放的.结论对细胞无能在体外可以诱导的,无能T细胞细胞因子基因格局向Th2样偏离.     

曲古霉素A对肺腺癌细胞株NCI-H1299增殖的抑制作用及其机制

背景与目的：曲古霉素A（trichostatin A,TSA）是具有组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylases,HDAC@强效非竞争性抑制剂,对血液系统肿瘤和实质性肿瘤均有较强的生长抑制作用。本文观察HDACs抑制剂TSA对体外培养的肺腺癌NCI-H1299细胞株的增殖、凋亡和周期以及相关基因表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：MTT法检测不同浓度（0.1、0.2、0.4、2.0μmol/L@的TSA对人肺腺癌NCI-H1299细胞株体外增殖的影响,流式细胞术检测药物处理后细胞周期及凋亡率的变化;Western blot法检测细胞内组蛋白H4乙酰化水平的变化;Real-time PCR检测NCI-H1299细胞内p21、CyclinB1、Bcl-2和Bax的基因表达。结果：TSA能明显抑制NCI-H1299细胞的体外生长,其抑制作用呈明显的剂量和时间依赖性。TSA诱导后,流式细胞术检测结果显示细胞阻滞于G2/M期,细胞凋亡增加。TSA可明显提高NCI-H1299细胞内组蛋白H4的乙酰化水平,诱导p21和Bax的mRNA表达增加,同时抑制Bcl-2和CyclinB1表达。结论：TSA可通过诱导细胞凋亡及阻滞细胞周期而发挥体外抗肺腺癌细胞生长的作用,其机制可能与组蛋白乙酰化水平的提高以及调控相关基因p21、Bax、Bcl-2和CyclinB1的表达变化有关。     

鞣花酸通过下调ERK1/2抑制MCF-7乳腺癌细胞的增殖

目的:探讨鞣花酸在雌激素诱导的乳腺癌细胞增殖中的作用及细胞和分子机制。方法:雌激素培养乳腺癌细胞MCF-7,鞣花酸培养液处理,观察细胞增殖情况。采用Western blot观察细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）的表达。结果:雌激素可明显促进MCF-7细胞增殖,与对照组比较有显著性差异,并能激活ERK1/2,使p-ERK1/2表达明显增加,且具有时间依从性。鞣花酸可明显抑制雌激素诱导的MCF-7细胞增殖,并抑制p-ERK1/2的表达,呈剂量依赖性。结论:雌激素通过激活ERK1/2诱导MCF-7细胞增殖,而这一效应可被鞣花酸抑制。     

鞘氨醇激酶-1激活ERK通路介导人结肠癌细胞株LoVo侵袭与迁移的实验

目的研究Sphk1对人结肠癌LoVo细胞侵袭与迁移能力的影响并探讨其作用机制。方法将人结肠癌LoVo细胞分成Sphk1激活组,Sphk1抑制组,空白对照组。以Phorbol 12-myristate 13-acetate（PMA）为Sphk1激活剂（终浓度为100 nM）,N,N-dimethyl-D-eryt-hro-sphingosine（DMS）为Sphk1抑制剂（终浓度为50 μM）,NaCl（终浓度为0.9%）为空白试剂处理LoVo细胞24 h后,用Transwell Boyden小室模型测定LoVo细胞的相对侵袭率与迁移率;用Western　blot方法测定细胞Sphk1、ERK1/2与p-ERK1/2蛋白水平的变化;用ELISA方法检测细胞培养上清中MMP-2、MMP-9及uPA的蛋白含量;用半定量RT-PCR检测细胞中MMP-2、MMP-9和uPA的mRNA水平。结果Sphk1激活剂可促进LoVo细胞侵袭与迁移,同时明显增强LoVo细胞中Sphk1、ERK1/2及p-ERK1/2的蛋白表达,并促进MMP-2、MMP-9及uPA的mRNA表达与蛋白分泌。Sphk1抑制剂则抑制LoVo细胞侵袭与迁移,同时抑制Sphk1、ERK1/2与p-ERK1/2的蛋白表达,并抑制MMP-2、MMP-9及uPA的mRNA表达与蛋白分泌。结论Sphk1可促进人结肠癌细胞株LoVo细胞的侵袭与迁移,其机制可能与激活ERK1/2信号通路从而促进MMP-2、MMP-9及uPA mRNA表达与蛋白分泌有关。     

肿瘤疫苗热休克蛋白-多肽复合物(HSP-PCs)的临床应用研究进展

热休克蛋白（heat shock proteins,HSPs）又称应激蛋白（stress protein,SP）,是机体细胞在一些应激原如环境高温、氧化应激、感染、创伤、缺氧等条件诱导下,激活HSP基因,高效表达的一组蛋白质,广泛存在于自然界原核、真核细胞中参与细胞的损伤与修复。其所具备的一系列免疫学功能如伴侣抗原肽、提成和加工处理抗原肽及激活抗原提成细胞（antigen presentingcells,APCs）等,使其在肿瘤免疫应答过程中可充     

线粒体复合物在维生素E琥珀酸酯诱导人胃癌细胞凋亡中的作用

目的： 探讨维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)诱导人胃癌细胞凋亡过程中线粒体4种复合物的作用,并寻找对肿瘤细胞有抑制作用的关键酶。方法：体外常规培养SGC-7901细胞,分别加入线粒体复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ (complexⅠ~Ⅳ, CⅠ~Ⅳ)的抑制剂鱼藤酮(rotenone,ROT)、噻吩甲酰三氟丙酮 (thenoyltri?uoroacetone,TTFA)、抗霉素A (antimycin A,AA)和叠氮钠 (sodium azide,SA)2 h后以20 μg/ml VES诱导处理,并设阴性对照组(含0.1%乙醇的培养液),20 μg/ml VES单独处理组;MTT法测定细胞增殖情况,共聚焦显微镜观察活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞中细胞色素C和Caspase-3表达情况。结果：与VES对照组比较,在VES诱导SGC-7901细胞凋亡的过程中,添加5 μg/ml TTFA抑制线粒体复合物Ⅱ酶活性后,细胞增殖抑制率水平显著降低 (P<0.05)。4个线粒体复合物抑制剂处理组ROS水平均显著降低 (P<0.05),而细胞凋亡率显著升高 (P<0.05);但5 μg/ml TTFA处理组ROS及凋亡率的升高均显著低于其他3个处理组 (P均<0.05)。分别抑制CⅠ~Ⅳ酶活后,VES上调细胞中细胞色素C和Caspase-3的能力均受到抑制,其中VES+TTFA组抑制程度明显高于另外3组 (P均<0.05)。结论：VES处理SGC-7901细胞,可影响线粒体复合物Ⅱ中琥珀酸脱氢酶活性,致使线粒体中ROS堆积,这可能是VES诱导人胃癌细胞凋亡的机制之一。     

冷冻载体及蔗糖浓度对复苏卵母细胞存活率的影响

目的： 探讨MⅡ卵母细胞玻璃化冷冻和复苏过程中不同冷冻载体和不同蔗糖浓度解冻对卵母细胞存活率的影响。方法：收集2009年6月至2012年5月在成都市锦江区妇幼保健院生殖医学中心常规IVF治疗周期第1天没有受精的MⅡ卵母细胞853枚,进行玻璃化冷冻后复苏。按照实验过程中所用不同冷冻载体和不同解冻方法分为4组。A组79枚,载体为冷冻环,采用常规方法解冻;B组580枚,载体为半麦管,采用常规方法解冻;C组121枚,载体为冷冻环,采用改良法解冻;D组73枚,载体为半麦管,采用改良法解冻。将卵母细胞复苏2 h后观察,对各组卵母细胞存活率进行了比较。结果：C组卵母细胞存活率 (97.52%)显著高于A组 (72.15%)、B组 (52.24%)和D组 (64.38%)(P< 0.01);A组卵母细胞存活率高于B组,差异显著 (P< 0.05);其余各组间卵母细胞存活率差异无统计学意义 (P> 0.05)。结论：采用冷冻环冷冻及改良法解冻能提高成熟卵母细胞存活率。     

巯基乙酸对小鼠成熟卵母细胞皮质颗粒分布和MAPK活性的影响

背景与目的:探讨巯基乙酸(thioglycolic acid ,TGA)对小鼠卵母细胞胞浆成熟和相关生化指标的影响.材料与方法:以不同浓度TGA(0.2、1.0、2.5 mmol/L)体外培养小鼠卵母细胞,并设M16培养液对照组,培养16 h后在体视显微镜下,观测卵母细胞生发泡破裂和第一极体排出情况,用免疫荧光染色方法对皮质颗粒(cortical granules,CGs)进行标记,采用western blot方法对p44/42MAPK进行检测.结果:各组生发泡破裂率均达到90%左右,各组间差异无统计学意义(P＞0.05).随着TGA剂量的增加,第一极体排出率下降,各剂量组和对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05).各剂量组均可观察到CGs在细胞膜下的线状排列,但随着TGA吼剂量的增加,质膜下CGs的密度降低,胞浆中CGs的密度有增加的趋势.对照组卵母细胞中有非常明显的无皮质颗粒区(cortical granules free domain,CGFD)形成,0.2 mmol/L组也形成了CGFD,但1.0 matol/L和2.5 mmol/L两个剂量组未观察到CGFD.1.0 mmol/L和2.5mmol/L TGA可抑制p44/42MAPK的活化.结论:TGA可影响小鼠卵母细胞细胞质成熟和MAPK的活性,具有一定的生殖毒性.     

静磁场对体外三维培养小鼠腔前卵泡发育成熟的影响

目的： 用三维小鼠腔前卵泡体外培养成熟体系检测静磁场对生殖细胞发育成熟的影响。方法：从12日龄昆明小鼠的卵巢中,机械分离出直径为 (130±10) μm的腔前卵泡,用海藻酸钠凝胶将单个卵泡包埋后,放入预平衡的培养液滴中培养,并随机分成对照组、5 和450 mT暴磁组,隔天半量换液,在倒置显微镜下测量其直径,连续培养8 d,对成腔的卵泡进行体外人绒毛膜促性腺激素 (HCG)刺激16~18 h后,检测卵母细胞成熟情况。结果：各组卵泡形态学发育均良好,随着体外培养时间的延长,卵泡逐渐增大,在第4天450 mT暴磁组卵泡直径与对照组相比增大显著 (P<0.05),第6天5 和450 mT暴磁组均明显高于对照组 (P<0.05)。随着磁场强度增强,卵泡成腔率亦比对照组显著提高 (P<0.05)。而5 mT暴磁组成熟率与对照组相比无明显变化 (P>0.05),但450 mT组与对照组相比显著降低 (P<0.05)。结论：海藻酸盐凝胶可维持昆明小鼠腔前卵泡体外正常生长发育。随着磁场强度增强,卵泡的成腔率显著性提高,成腔卵泡直径显著增大,但高强度的静磁场可能会影响卵母细胞的成熟过程。     

Axin通过激活p53的表达抑制结肠癌细胞的生长

目的： 观察过表达Axin对结肠癌SW480细胞生长的影响,并探讨其作用机制。方法：将pCMV5-HA-Axin质粒瞬时转染至结肠癌SW480细胞中,并设置转染空载体pCMV5-HA及未转染空白对照组,采用噻唑蓝(MTT)比色法及克隆形成实验检测细胞增殖状态的变化,流式细胞仪检测细胞周期变化;RT-PCR检测Axin及p53 mRNA的表达;Western blot检测Axin及P53蛋白的表达。结果：与转染空载体及空白对照组比较,过表达Axin显著抑制结肠癌SW480细胞的增殖。MTT实验显示转染Axin后细胞生长明显受到抑制,存活的瘤细胞明显减少(P<0.05);克隆形成实验结果显示瞬时转染Axin质粒组细胞集落形成能力明显下降(P<0.05);流式细胞仪分析检测结果显示转染Axin质粒后结肠癌SW480细胞周期G1前期比例升高,G1期明显被阻滞,S期比例下降(P均<0.05)。RT-PCR结果显示转染Axin的SW480细胞中p53 mRNA的表达较转染空载体组升高约1倍(P＜0.05);同时,Western blot结果显示转染质粒Axin后结肠癌SW480细胞中P53的蛋白表达量明显增加,较转染空载体组几近升高1倍(P＜0.05)。结论：过表达Axin抑制结肠癌SW480细胞增殖,其作用机制是通过激活癌基因p53的表达而发挥效应的。     

DAPT对食管鳞癌细胞株增殖与凋亡影响机制探讨

目的：观察γ-分泌酶抑制剂DAPT阻断Notch信号通路对食管鳞状细胞癌细胞株增殖和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法：采用γ-分泌酶抑制剂DAPT处理培养的食管鳞癌Eca109和TE-1细胞株以阻断Notch信号,分别应用CCK-8试剂和流式细胞术检测两种食管鳞癌细胞株的增殖与凋亡情况;同时采用定量PCR检测细胞Notch受体及靶基因Hes-1mRNA的表达,蛋白质印迹法检测与细胞增殖、凋亡相关蛋白Cyclin D1和Bcl-2的表达。结果：DAPT处理明显抑制了食管鳞癌Eca109和TE-1细胞株增殖,5μmol/L DAPT处理Eca109细胞株72h、TE-1细胞株96h后增殖抑制率分别为（61.8±5.3）%和（59.8±2.9）%,与DMSO对照组（17.2±2.6）%和（7.0±2.1）%相比差异有统计学意义,P=0.000 2和P〈0.000 1,且抑制作用呈时间和浓度依赖关系。DAPT可诱导Eca09和TE-1细胞株凋亡,5μmol/L DAPT处理组Eca109细胞凋亡率在24和48h分别为（18.24±2.60）%和（21.77±5.82）%,与相应对照组（10.49±2.27）%和（9.74±3.38）%相比凋亡率增加,差异有统计学意义,P值分别为0.017 8和0.036 4;处理组TE-1细胞凋亡率在24和48h分别为（20.21±5.90）%和（32.14±5.92）%,与相应对照组（8.00±2.84）%和（12.59±3.72）%相比凋亡率增加,差异有统计学意义,P值分别为0.032 1和0.008 4。DAPT处理下调两种细胞株Notch2受体、Notch信号靶基因Hes-1及Cyclin D1的表达水平。DAPT处理可上调Eca109细胞Bcl-2水平,但下调了TE-1细胞中Bcl-2水平。结论：γ-分泌酶抑制剂DAPT可抑制食管鳞癌细胞株增殖并促进其凋亡,其机制可能与DAPT阻断Notch信号活化、调控Cyclin D1和Bcl-2的表达有关,阻断Notch信号通路有望成为食管鳞状细胞癌治疗的新靶点。     

吡柔比星化疗所致心脏毒性的早期监测与防治

目的：应用超声心动图观察右丙亚胺对吡喃阿霉素（吡柔比星,THP）所致心脏毒性的防治作用。方法：将接受吡柔比星化疗的非霍奇金淋巴瘤患者30例随机分为单纯化疗组及右丙亚胺组各15例,右丙亚胺组在常规化疗基础上,加用右丙亚胺静滴。在化疗第1疗程（T1）开始前、第3疗程（T3）及第6疗程（T6）结束后行超声心动图检测,记录EF、E／A及TDI技术测量ETALPW／PW法测量Tei指数,观察化疗前后吡柔比星对上述指标的影响,以及右丙亚胺对其心脏毒性的防治效果。结果：组间比较,T3结束后,单纯化疗组及右丙亚胺组EF及E／A差异无统计学意义（P〉0.05）,E＇/A＇及Tei指数有统计学意义（P〈0.05）。T6结束后,单纯化疗组及右丙亚胺组EF及E／A差异存在统计学意义（P〈0.05）,E＇/A＇及Tei指数亦存在有统计学意义（P〈0.05）。组内比较,与T1比较,单纯化疗组在T3结束后EF及E／A差异无统计学意义（P〉0.05）,而E＇/A＇及Tei指数有统计学意义（P〈0.05）,在T6结束后,单纯化疗组与T1比较,其EF、E／A、E＇/A＇及Tei指数均存在统计学意义（P〈0.05）;右丙亚胺组在T3、T6结束后,与T1比较。其EF、E／A、E＇/A＇及Tei指数的差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：右丙亚胺对吡柔比星化疗所致的心脏毒性具有一定的防治作用,TDI及Tei指数能够较EF及E／A更早、更敏感评估患者心脏功能的变化。     

VES诱导HER-2高表达乳腺癌细胞MDA-MB-453凋亡及其与Fas及TGF-β1表达的相关性分析

目的：研究维生素E琥珀酸酯（VES）诱导HER-2高表达乳腺癌细胞MDA-MB-453凋亡,以及Fas和TGF-β1表达的变化。方法：MTT法和Annexin V法分别用于检测不同浓度VES处理人乳腺癌MDA-MB-453细胞后生长情况和细胞凋亡情况,流式细胞术检测凋亡率;免疫组化比较凋亡前后Fas及TGF-β1表达变化。结果：不同浓度VES处理的细胞在不同时间均受到不同程度的抑制,随VES剂量的增加,抑制作用增强。其中20 mg/LVES处理组在24 h后受到明显抑制,第4天抑制率即接近100%;10 mg/L VES处理组7 d后细胞生长被抑制89.87%。经VES处理后,Fas及TGF-β1表达率差异有统计学意义,P〈0.001。结论：VES可诱导HER-2高表达乳腺癌细胞MDA-MB-453凋亡,其机制可能与Fas和TGF-β1上调有关。     

紫铆因抑制膀胱癌细胞增殖的体内外研究

目的 观察紫铆因对膀胱移行细胞癌细胞BLS增殖的影响以及对膀胱癌裸鼠移植瘤生长的 影响。方法 不同浓度紫铆因处理细胞,四甲基偶氮唑蓝比色实验（MTT）及平板克隆形成实验观 察细胞增殖能力,流式细胞仪分析细胞周期,蛋白印迹检测核转录因子κB (NF-κB)p65核内表达及 细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）的磷酸化程度,并检测NF-κB下游靶基因细胞周期素D1（Cyclin D1）及环氧合酶-2（COX2）的表达。建立膀胱癌裸鼠皮下移植瘤,采用腹腔注射的给药途径,测 量移植瘤的体积和重量。结果 紫铆因抑制了膀胱癌细胞增殖并诱导G2/M期细胞周期阻滞。紫铆因 处理后NF-κB p65的核内表达及ERK1/2的磷酸化程度下降（P<0.05）,Cyclin D1及COX2基因表达下 调（P<0.05）,体内实验发现紫铆因治疗组较对照组皮下移植瘤的生长明显受抑制（P<0.05）。结 论 紫铆因具有抗膀胱癌细胞增殖作用,可能与其抑制ERK及NF-κB信号激活有关。     

喷他脒对卵巢癌SKOV3细胞抑制作用的体内体外研究

目的探讨喷他脒对人卵巢癌SKOV3细胞株及卵巢癌SKOV3细胞株裸鼠皮下移植瘤的抑制作用。方法通过MTT法测定卵巢癌细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率;建立人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠转移瘤模型,按不同剂量喷他脒给药,观察并记录各组裸鼠及其皮下移植瘤的生长情况,计算肿瘤体积和肿瘤生长抑制率。结果经不同浓度的喷他脒处理后,卵巢癌SKOV3细胞生长明显受到抑制,且这种抑制作用呈时间及浓度依赖性,凋亡率增加。在卵巢癌裸鼠皮下移植瘤动物模型中,喷他脒能够明显抑制移植瘤的生长,且呈剂量依赖改变,高剂量的10 mg/kg组喷他脒对肿瘤抑制作用更明显。结论 (1)喷他脒可以抑制卵巢癌细胞的增殖及诱导凋亡。(2)高、中、低3种喷他脒给药剂量对荷瘤裸鼠无明显毒性作用。(3)喷他脒对荷瘤裸鼠皮下移植瘤的生长有抑制作用,并呈剂量依赖。