丹酚酸B对NASH细胞焦亡通路NLRP3/Caspase-1/GSDMD的影响

背景大量实验证明丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)有治疗作用,细胞焦亡在NAFLD发病及其向非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)进展的过程中起了重要作用,通过研究Sal B对NASH细胞焦亡主要相关蛋白的调节,发觉Sal B在NAFLD中多途径、多靶点的治疗作用及优势.目的建立NASH体外细胞模型,并用Sal B及焦亡抑制剂(VX-765)干预,探讨Sal B对细胞焦亡的影响及对焦亡通路GSDMD/NLRP3/Caspase-1的调节机制.方法取对数生长期HepG2细胞,MTT法检测筛选棕榈酸(palmitic acid,PA)最佳的药物干预浓度及干预时间;将细胞随机分为对照组、模型组(PA),治疗组(Sal B+PA)及抑制剂组(VX-765+PA).取各组细胞分别经油红O染色在光学显微镜观察细胞内脂质蓄积情况,收集细胞上清液酶标仪下测定光密度(optical density,OD)值;免疫荧光H2DCFH探针测定细胞内活性氧含量;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assays,ELISA)检测各组细胞上清液白细胞介素-18(interleukin 18,IL-18)、白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)表达量;Western Blot检测炎性小体核苷酸寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)及焦亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、消皮素(gasdermin D,GSDMD)、GSDMD的N端结构域(GSDMD-N)的表达,并检测各种蛋白的相对表达量变化.结果模型组细胞内脂质小体及活性氧(reactive oxygen species,ROS)蓄积明显,IL-1β、IL-18等促炎因子分泌增多(P值<0.05),炎症小体NLRP3、焦亡相关蛋白Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N表达均升高(P值均<0.05).使用Sal B干预治疗或VX-765抑制剂处理后可逆转PA造成的脂质及ROS蓄积,IL-1β及IL-18炎症因子的分泌,同时可下调NLRP3、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N等焦亡相关蛋白表达(P值均<0.05).结论PA可诱导肝脏细胞焦亡发生,丹酚酸B通过对焦亡通路NLRP3/Caspase-1/GSDMD的抑制作用减轻炎症反应,缓解NASH进展.     

NLRP3炎症小体激活对胰腺星状细胞增殖、迁移及细胞外基质沉积的影响

目的观察核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体激活对胰腺星状细胞(PSCs)增殖、迁移及细胞外基质沉积的影响。方法对大鼠PSCs进行分离培养与鉴定, 根据是否给予细菌脂多糖(LPS)10 μg/ml预处理24 h分为对照组和LPS组, ELISA法检测PSCs培养液中NLRP3炎症小体相关分子的表达;通过携带靶向NLRP3基因的shRNA慢病毒载体感染PSCs的方法构建NLRP3基因表达抑制的PSCs细胞株, 根据有无LPS预处理和是否慢病毒干扰NLRP3表达, 将PSCs分为LPS+阴性对照组和LPS+慢病毒组, 采用CCK-8法和Transwell小室实验分别检测细胞增殖及迁移能力变化;采用免疫荧光染色检测PSCs细胞外基质α-SMA和collagen沉积;采用RT-qPCR检测PSCs促纤维化因子TGF-β的变化。结果培养24 h的PSCs胞质内富含高亮环形脂滴, 细胞表达desmin。培养7 d后, 细胞体积变大, 脂滴基本消失, 细胞活化并表达α-SMA。LPS组PSCs上清液中caspase-1、IL-1β、IL-18水平均显著高于对照组(1.55±0.0...     

NOD样受体蛋白3炎症小体在非酒精性脂肪性肝炎中的作用

非酒精性脂肪性肝炎(NASH)是非酒精性脂肪性肝病的重要病理阶段,主要特征为肝细胞脂肪变性、肝损伤和炎症,可进一步发展为肝硬化和肝细胞癌。NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体是细胞内一种多蛋白复合体,可通过激活半胱氨酸天冬酶-1,释放成熟的IL-1β、IL-18等炎症因子,并诱导细胞焦亡,进而扩大炎症反应。近年来,研究发现NLRP3炎症小体可参与NASH的发生发展。概述了NLRP3炎症小体在NASH中的作用,为今后的相关研究及治疗提供理论基础。     

黄芪甲苷对高糖诱导的大鼠H9c2心肌细胞焦亡的影响

目的探讨黄芪甲苷对高糖诱导的心肌细胞焦亡的影响。方法体外培养H9c2细胞, 分为对照组(5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(33.3 mmol/L葡萄糖)、黄芪甲苷组(33.3 mmol/L葡萄糖+100 μmol/L黄芪甲苷)、NLRP3抑制剂组(33.3 mmol/L葡萄糖+1 μmol/L MCC950)。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测H9c2细胞活性, 乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞上清液中LDH含量, 超氧化物阴离子荧光探针(DHE)检测细胞内活性氧(ROS)水平, 实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)及免疫印迹法(Western blot)检测焦亡相关基因mRNA和蛋白表达水平, 免疫荧光法检测NLRP3荧光强度, 酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中炎症因子水平。结果黄芪甲苷浓度为100 μmol/L时可改善高糖诱导的细胞活力下降(P<0.01), 减少LDH释放(P<0.01)。与对照组相比, 高糖组ROS水平升高(P<0.01), 细胞焦亡相关分子mRNA和蛋白表达上调(均P<0.01), NLRP3荧光强度增加(P&...     

NLRP3炎症小体介导细胞焦亡在急性胰腺炎肺损伤中的作用机制研究

细胞焦亡参与了急性胰腺炎的发生,但其在远隔器官损伤中的作用尚未明确。目的：探讨NLRP3炎症小体依赖性细胞焦亡在急性胰腺炎相关肺损伤中的作用和机制。方法：32只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为4组：对照组、重症急性胰腺炎（SAP）组、Z-WEHD-FMK(caspase-1抑制剂)组和双硫仑（GSDMD抑制剂）组,后3组以5%牛磺胆酸钠构建SAP模型。检测血清淀粉酶、脂肪酶、降钙素原水平和髓过氧化物酶（MPO）活性;通过组织病理学检查和肺湿/干重比评估胰腺和肺损伤程度;分别以ELISA法和免疫组化染色、蛋白质印迹法检测血清细胞焦亡相关炎症因子水平和肺组织细胞焦亡通路相关蛋白表达。结果：与对照组相比,SAP组血清生化指标、MPO活性、白细胞介素（IL）-1β、IL-18水平显著升高,胰腺和肺组织损伤明显,肺组织NLRP3、caspase-1、GSDMD表达显著上调（P均<0.05）;与SAP组比较,caspase-1抑制剂和GSDMD抑制剂预处理组胰腺和肺损伤程度减轻,血清生化指标、MPO活性降低,细胞焦亡相关炎症因子水平和焦亡通路相关蛋白表达下凋（P均<0.05...     

肺炎支原体感染RAW264.7细胞NLRP3炎性体及下游分子的表达

目的观察肺炎支原体(Mycoplasma pneunoniae,Mp)感染RAW264.7细胞早期NLRP3炎性体及前炎性细胞因子的表达。方法将RAW264.7细胞随机分为5组,正常组用常规方法培养,不感染Mp;4个实验组RAW264.7细胞均用Mp感染4h,感染复数(细胞︰Mp)分别为1︰20、1︰40、1︰80、1︰100,采用FQ-PCR法检测细胞NLRP3、ASC、caspase-1mRNA表达和IL-1β、IL-18水平。结果 Mp感染复数1︰20、1︰40、1︰80、1︰100组NLRP3、ASC、caspase-1mRNA表达量分别为2.10±0.62、2.14±0.66、2.66±0.69、3.29±0.64和3.91±0.83、4.21±0.95、4.25±0.86、4.30±0.99和1.65±0.48、1.65±0.36、1.94±0.51、2.00±0.57,与正常对照组0.98±0.08、1.00±0.08、0.99±0.09比较,差异均有统计学意义(P<0.01);感染复数1︰100组IL-1β为200.00±9.25pg/ml,与对照组159.92±5.89pg/ml比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Mp感染可诱导RAW264.7细胞NLRP3炎性体活化。NLRP3炎性体可能参与了Mp的早期感染。     

炎症小体在结核分枝杆菌感染中的作用研究进展

炎症小体(inflammasome)是由应激,组织损伤和细胞内感染等途径激活的多蛋白复合物,它通过激活半胱天冬酶-1(caspase-1)从而促进IL-1β,IL-18等有效促炎细胞因子的释放,引起炎症反应和细胞焦亡。它是先天免疫中的一部分,和多种疾病相关,研究表示结核分枝杆菌感染巨噬细胞亦可激活NLRP3和AIM2炎症小体并引起炎症反应,本文就NLRP3炎症小体和AIM2炎症小体在结核分枝杆菌感染中的作用进展做一综述。     

微小RNA-206促进神经细胞凋亡参与阿尔茨海默病的机制研究

目的探究微小RNA-206(miR-206)通过调节脑源性神经营养因子(BDNF)及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路,促进神经元凋亡参与阿尔茨海默病(AD)的机制。方法将大鼠海马神经细胞分为对照组、AD组、miR-206抑制剂组(抑制剂组)、抑制剂+siBDNF组和siBDNF组(n=3),除对照组外,其他4组建立AD模型,抑制剂组和抑制剂+siBDNF组通过转染miR-206抑制剂质粒以抑制miR-206,抑制剂+siBDNF组和siBDNF组转染BDNF质粒沉默BDNF。在转染48 h后,检测miR-206、BDNF mRNA和蛋白表达水平。结果 AD组miR-206、细胞凋亡率、Thr231/tau-5及Ser404/tau-5水平明显高于对照组和抑制剂组,BDNF mRNA和蛋白表达、细胞活力、磷酸化PI3K/PI3K及磷酸化Akt/Akt表达明显明显低于对照组和抑制剂组(P0.05)。siBDNF组细胞活力、BDNF mRNA和蛋白表达、磷酸化PI3K/PI3K、磷酸化Akt/Akt表达明显低于AD组,miR-206、细胞凋亡率、Thr231/tau-5、Ser404/tau-5蛋白表达明显高于AD组(P0.05)。抑制剂+siBDNF组miR-206、细胞凋亡率、Thr231/tau-5和Ser404/tau-5蛋白水平明显高于抑制剂组[(1.79±0.18)vs(1.20±0.14),(14.37±1.72)%vs(6.84±0.48)%,(1.40±0.15)vs(0.89±0.09),(2.45±0.26)vs(1.12±0.12),P0.05],细胞活力、BDNF mRNA和蛋白表达、磷酸化PI3K/PI3K和磷酸化Akt/Akt表达明显明显低于抑制剂组(P0.05)。结论下调miR-206表达,会通过促进BNDF的水平激活PI3K/Akt通路,并提高AD模型细胞活力,抑制凋亡,这可能是治疗AD的新思路。     

TXNIP介导的NLRP3炎症小体激活在心肌微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤中的作用

目的 研究硫氧还蛋白结合蛋白（TXNIP）介导的NLRP3炎症小体激活在心肌微血管内皮细胞（CMECs）缺氧/复氧（H/R）损伤中的作用。方法 分离培养C57BL/6J小鼠CMECs,随机分为对照组、H/R损伤组、H/R+Scrambled siRNA组和H/R+TXNIP siRNA组。各组处理后使用ELISA试剂盒检测细胞IL-1β水平,采用免疫共沉淀的方法检测TXNIP和NLRP3的相互作用,Western blot检测TXNIP和NLRP3的表达水平,乳酸脱氢酶试剂盒检测细胞培养上清LDH释放情况和细胞Caspase-3活性。结果 与对照组相比,H/R后CMECs的NLRP3表达水平明显升高（P<0.05）,NLRP3炎症小体激活（IL-1β水平升高,P<0.01）,且TXNIP和NLRP3的结合效果明显增强（P<0.01）。运用TXNIP siRNA抑制TXNIP表达后行H/R处理,与H/R+Scrambled siRNA组相比,NLRP3炎症小体激活水平明显下降（IL-1β水平降低）,细胞Caspase-3活力和LDH释放水平均显著降低（均P<0.05）。结论 在CMECs发生H/R损伤时,NLRP3炎症小体激活,TXNIP和NLRP3的相互作用增强;抑制TXNIP表达后,NLRP3炎症小体激活水平降低,内皮损伤减轻。说明TXNIP介导的NLRP3炎症小体激活参与CMECs的H/R损伤,可能成为CMECs的H/R损伤的新机制。     

有氧运动联合抗阻力运动对糖尿病大鼠血管内皮功能的作用及其对磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶通路的影响

目的探讨有氧运动联合抗阻力运动对糖尿病大鼠血管内皮功能及对磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/一氧化氮合酶(PI3K/Akt/eNOS)通路的影响。方法将SD大鼠随机分为对照组(NC)、糖尿病模型组(DM)、单纯有氧运动训练组(AE)、单纯抗阻力运动训练组(RE)及有氧运动+抗阻力运动训练组(ARE),检测各组内皮功能指标、PI3K/Akt/eNOS通路基因及蛋白表达情况。结果乙酰胆碱(Ach)浓度在3×10~(-5) mol/L时,ARE组舒张率高于AE组和RE组(P0.05)。ARE组VEGF、一氧化氮(NO)表达量高于DM组[(21.45±3.48)vs(8.23±1.14)pg/ml,(25.67±3.19)vs(8.89±1.56)μmol/L,P0.05]。ARE组PI3K、Akt及eNOS基因相对表达量高于DM组[(4.08±0.83)vs(0.27±0.11),(2.75±0.69)vs(0.26±0.09),(4.25±0.74)vs(0.59±0.19),P0.05]。ARE组PI3K、磷酸化Akt(p-Akt)及磷酸化eNOS(p-eNOS)蛋白相对表达量高于DM组[(0.78±0.21)vs(0.20±0.09),(1.21±0.38)vs(0.54±0.19),(0.59±0.23)vs(0.16±0.08),P0.05]。结论有氧运动联合抗阻力运动能改善糖尿病大鼠血管舒张功能,促进VEGF、NO的释放,作用与激活PI3K/Akt/eNOS信号通路有关。     

细胞焦亡相关蛋白NLRP3、IL-1β、Caspase-1在溃疡性结肠炎黏膜中的表达及意义

目的 通过研究细胞焦亡相关蛋白NLRP3、IL-1β、Caspase-1在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)患者结肠黏膜中的表达，比较其差异性，探讨其在UC发病机制中的作用及相关性。方法 取27例UC患者结肠黏膜标本，根据内镜及组织学进行分级，其中轻度13例，中重度14例。同时收集确诊为结直肠癌并行外科手术切除的结直肠断端正常的结肠黏膜标本25例。采用免疫组化SP法检测所有患者肠黏膜中NLRP3、IL-1β、Caspase-1的表达情况。结果 NLRP3、IL-1β、Caspase-1在UC患者结肠黏膜中的蛋白表达高于癌旁组织对照组，差异均有统计学意义(H=110.57,P<0.01)。IL-1β的表达与病理分级呈正相关(r=0.511,P<0.01)。NLRP3、Caspase-1蛋白表达与病理分级无相关性。结论 IL-1β与UC炎症的发生发展密切相关，NLRP3、Caspase-1参与炎症损伤，介导细胞焦亡，从而影响UC炎症的发生发展，提示细胞焦亡参与UC的发病过程。     

黄芩苷对脂多糖诱导心肌细胞炎症反应和焦亡的抑制作用及其机制

目的 观察黄芩苷对脂多糖（LPS）诱导心肌细胞焦亡、炎症反应的抑制作用并分析其机制。方法 体外培养大鼠心肌细胞H9C2,取对数生长期细胞分为对照组、LPS组、黄芩苷组,对照组不做干预,LPS组以LPS刺激H9C2细胞构建体外细胞损伤模型,黄芩苷组在LPS诱导后分别加入10、20、40、80μmol/L黄芩苷,CCK-8法检测各组细胞活力,取细胞活力最高的黄芩苷浓度作为最佳作用浓度进行后续实验。而后取对数期H9C2细胞分为对照组、LPS组、黄芩苷组、抑制剂组、黄芩苷+抑制剂组及黄芩苷+激活剂组,除不做干预的对照组外均给予LPS刺激构建细胞损伤模型;黄芩苷组在此基础上给予黄芩苷处理,抑制剂组给予磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/丝苏氨酸蛋白激酶（AKT）通路抑制剂LY294002处理,黄芩苷+抑制剂组给予黄芩苷及LY294002处理,黄芩苷+激活剂组给予黄芩苷及PI3K/AKT通路激活剂胰岛素样生长因子1(IGF-1)处理。采用ELISA法检测细胞上清液炎症因子白细胞介素（IL）-1β、IL-6,Western blotting法检测细胞焦亡相关蛋白焦孔素D(GSDMD)、核苷酸寡聚化结构域样...     

葛根红藤解毒汤对浊毒内蕴型溃疡性结肠炎患者血清NLRP3炎症小体、IL-18、IL-1β及对肠道菌群、黏膜屏障的影响

目的:观察葛根红藤解毒汤对溃疡性结肠炎患者的血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomeric dome-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体、IL-1β、IL-18表达水平与对肠道菌群、黏膜屏障的影响。方法:将90例浊毒内蕴型溃疡性结肠炎患者随机分为观察组和对照组,每组各45例。对照组予美沙拉嗪肠溶片治疗,观察组在对照组基础上加葛根红藤解毒汤治疗,疗程均为8周。比较两组治疗前后的中医证候积分、血清NLRP3炎症小体、IL-1β、IL-18、二胺氧化酶(diamine oxidase, DAO)、D-乳酸的变化情况及肠道菌群数量。结果:治疗8周后,观察组的总有效率为91.11%(41/45),对照组为73.33%(33/45),观察组的疗效明显优于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者的中医证候积分均较治疗前降低(P<0.05),观察组的中医证候积分均明显低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者的血清NLRP3炎症小体、IL-1β、IL-18、DAO、D-乳酸水平均较治疗前降低(P&...     

受体相互作用蛋白3介导自身免疫性肝炎肝脏单核细胞来源巨噬细胞募集

目的探索受体相互作用蛋白3(RIP3)对自身免疫性肝炎(AIH)肝脏单核细胞来源巨噬细胞浸润的调控作用。方法纳入2018年1至6月于天津医科大学总医院消化科行肝穿刺活组织病理学检查的AIH患者10例,同期选择年龄和性别均匹配且无肝功能异常的5例肝囊肿患者作为对照,应用免疫荧光染色观察AIH患者和对照者肝组织单核细胞来源巨噬细胞浸润情况。将Raw264.7巨噬细胞分为对照组、脂多糖组、脂多糖+RIP3抑制剂GSK872(GSK872)组,采用定量聚合酶链反应(qPCR)检测巨噬细胞RIP3、混合谱系蛋白激酶样结构域(MLKL)、TNF-α、IL-6、IL-1β、细胞炎性小体Nod样蛋白3(NLRP3)、CC趋化因子配体(CCL)2和CCL5的mRNA水平;将Raw264.7巨噬细胞分为对照组、脂多糖组、脂多糖+地塞米松组,采用qPCR检测巨噬细胞TNF-α、NLRP3、RIP3和MLKL的mRNA水平。选择24只6周龄雌性C57BL/6小鼠建立急性AIH小鼠模型,并将其分为对照组、刀豆蛋白A(ConA)组、ConA+地塞米松组和ConA+GSK872组(每组6只),处死小鼠后收集外周血和...     

基于NLRP3炎症小体探讨中医药防治结直肠癌的相关进展

近年来结直肠癌的发病率和病死率逐步上升,其发病机制为肠道慢性炎症、免疫失调、菌群失衡等。NLRP3炎症小体是人体固有免疫系统的重要组成部分,能够被多种物质激活,诱发肠道慢性炎症及免疫失调、细胞焦亡等,目前已被证实与结直肠癌的发生、发展密切相关。该文根据国内外最新研究,聚焦NLRP3炎症小体与结直肠癌的关系,综述中医药通过NLRP3炎症小体通路治疗结直肠癌的研究进展。     

原发性肝癌患者癌组织NLRP3炎性小体表达状况研究

目的 研究原发性肝癌患者癌组织核苷酸结合寡聚化结构域富含脓素亮氨酸重复序列结构域3(NLRP3)炎性小体表达情况。方法 2017年1月～2018年1月我院诊治的原发性肝癌(PLC)患者34例和同期因肝胆管结石切除的肝组织标本30份,采用免疫组织化学法检测肝组织NLRP3炎性小体表达,采用RT-PCR法检测肝组织NLRP3 mRNA 水平,采用ELISA法检测血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平,采用蛋白印记法检测肝组织NLRP3炎性小体、细胞钙依粘连蛋白、波形蛋白和半胱氨酸蛋白酶-1表达。结果 肝癌组织细胞NLRP3炎性小体阳性率为76.5%,显著高于正常对照组的23.3%(P<0.05);肝癌组织NLRP3 mRNA水平为(-2.58±0.35),显著高于正常肝组织【(0.00±0.24),P<0.05】;PLC患者血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平分别为(17.25±3.36) pg/ml、(60.32±8.14) pg/ml 和(24.68±3.58) pg/ml,显著高于对照组【(10.35±1.25) pg/ml、(33.21±4.20) pg/ml和(10.36±2.54) pg/ml, P<0.05】;正常对照组肝组织钙依粘连蛋白水平为(1.2±0.15),显著高于肝癌组【(0.41±0.04), P<0.05】,而半胱氨酸蛋白酶-1和波形蛋白水平为(0.21±0.03)和(0.42±0.06),显著低于肝癌组【(1.49±0.12)和(1.51±0.14), P<0.05】。结论 原发性肝癌患者癌组织NLRP3炎性小体呈现高表达,可能会导致炎症反应并促进肝癌细胞的迁移。     

NLRP3炎症小体在大鼠严重烫伤早期心肌内的表达及意义

目的 探讨严重烫伤大鼠早期心肌组织内NLRP3炎症小体信号通路的表达及意义。方法 采用大鼠95℃热水浴18 s,制成40%总体表面积Ⅲ度烫伤模型,将24只健康雄性SD大鼠按随机数表法分为对照组、烫伤组、干预组。烫伤组大鼠立即腹腔注射10 ml生理盐水补液;干预组大鼠注射10 ml生理盐水+(BAY11-7082) 10 μl(0.2 mg/ml,10 mg/kg);对照组动物背部置于25℃温水浴18 s模拟烫伤过程。伤后8 h分别取各组大鼠心肌组织及血清,采用蛋白免疫印迹法和实时荧光定量RT-PCR法检测心肌组织中NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）-1蛋白表达水平和NLRP3、caspase-1、IL-1β、TNF-α mRNA表达水平,同时观察HE染色组织大体形态,酶联免疫吸附试验法检测血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）含量。结果 ①烫伤组大鼠心肌组织内NLRP3、caspase-1蛋白表达量显著高于对照组（P<0.01）;与烫伤组比较,干预组大鼠心肌组织内NLRP3、caspase-1明显降低（P<0.01）;②烫伤组大鼠心肌组织中NLRP3、caspase-1、IL-1β和TNF-α的mRNA表达量分别为3.15±0.46,2.47±0.24,3.26±0.22和2.17±0.32,显著高于对照组的1.00±0.09,1.00±0.06,1.00±0.08和1.00±0.07（均P<0.01）;干预组大鼠心肌组织中NLRP3、caspase-1、IL-1β和TNF-α的mRNA表达量分别为1.68±0.37,1.55±0.17,1.21±0.15和1.38±0.23,显著低于烫伤组（均P<0.01）;③对照组大鼠心肌组织呈不规则圆柱形、排列整齐、横纹清晰,结构完整。烫伤组大鼠部分心肌纤维排列紊乱,细胞和间质可见水肿,见点片状溶解灶及炎性细胞浸润。BAY11-7082干预组部分心肌纤维排列紊乱,心肌细胞和间质水肿、心肌纤维溶解及炎细胞浸润程度均较烫伤组减轻;④烫伤组大鼠血清CK-MB、LDH含量分别为(2753±825)U/L,(2618±238)U/L,显著高于对照组的(247±76)U/L,(721±59)U/L（均P<0.01）;干预组大鼠血清CK-MB、LDH含量分别为(1267±248)U/L,(1982±183)U/L,显著低于单纯烫伤组（均P<0.01）。结论 NLRP3炎症小体在严重烫伤大鼠早期心肌组织内活性增高,使用BAY11-7082干预后,可抑制NLRP3炎症小体的活化,减轻心肌组织损伤,降低心肌炎症反应。     

抑制PI3K/AKt信号通路对帕金森病炎症细胞模型反应的影响

目的探讨LY294002(LY)抑制磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKt)信号通路后对帕金森病(PD)细胞模型中炎症反应的影响。方法体外培养小鼠小胶质瘤细胞(BV2),分为对照组、脂多糖(LPS)组、LY+LPS组及LY组。LPS刺激BV2细胞来诱导炎症反应,运用Western印迹检测PI3K/AKt信号通路标志物磷酸化(p)-AKt蛋白表达情况;LY抑制PI3K/AKt信号通路后,运用荧光定量PCR (Q-PCR)检测炎症因子白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α的mRNA的表达情况,Western印迹检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达情况。结果与对照组相比,LPS组p-AKt蛋白表达显著下降(P0.01);与LPS组相比,LY+LPS组p-AKt蛋白下降更明显(P0.01);与对照组相比,LPS组IL-1β、TNF-αmRNA及iNOS蛋白表达均显著升高(均P0.01);与LPS组相比,LY+LPS组中IL-1β和TNF-αmRNA及iNOS蛋白表达均显著下降(均P0.01)。结论 LY抑制PI3K/AKt信号通路对BV2细胞中的LPS诱导的炎症反应有一定的抑制作用。     

乔松素对缺氧/复氧诱导大鼠心肌细胞焦亡的预防作用及其机制

目的 观察乔松素（PIN）对缺氧/复氧（H/R）诱导的大鼠心肌细胞焦亡的预防作用，并探讨其预防作用机制。方法 将大鼠心肌细胞H9c2分为PIN-H+740-Y-P组、PIN-H组、PIN-L组、模型组、对照组。PIN-H+740-Y-P组用加入25μmol/L PIN+50μg/mL 740-Y-P的培养基、PIN-H组用加入25μmol/L PIN的培养基、PIN-L组用加入12.5μmol/L PIN的培养基、模型组用空白培养基培养1 h之后进行H/R处理。对照组仅用空白培养基培养。取上述各组细胞继续培养24、48、72 h，采用CCK-8法测定细胞活力；取上述各组细胞，采用碘化吡啶（PI）染色法测算各组心肌细胞焦亡比例，ELISA法测定细胞中LDH,Western blotting法检测细胞中磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B(AKT)、核因子-κB(NF-κB)蛋白和细胞焦亡相关蛋白（Caspase-1、ASC和NLRP3蛋白），荧光定量PCR法测定细胞中PI3K、AKT、NF-κB mRNA。结果 与对照组相比，模型组细胞活力（48 h、72 h）下降（P均<0...     

COPD患者NLRP3炎症小体及TNF-α、HMGB1的表达及相互关系

目的分析核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体通路,早期炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α),人高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者中的表达及相关性。 方法选择2017年9月至2019年2月我院呼吸内科收治的AECOPD患者48例为观察组,健康者30例为对照组,采用实时荧光定量PCR技术检测NLRP3炎症小体组分NLRP3、ASC、Caspase1及其活化因子IL-1β、IL-18的mRNA表达,采用ELISA法检测血清中IL-1β、IL-18、TNF -α、HMGB1。 结果观察组NLRP3mRNA、IL-18mRNA表达水平高于对照组(P<0.05);观察组血清中IL-1β、IL-18、TNF-α、HMGB1含量高于对照组(P<0.05);观察组NLRP3mRNA表达与IL-18mRNA表达呈负相关(P<0.05);血清中TNF-α、IL-1β、HMGB1之间表达呈正相关(P<0.05);病程>10年患者Caspase1 mRNA、血清IL-18和TNF-α的水平高于病程≤10年患者(P<0.05);Caspase1 mRNA与病程不相关(P>0.05),血清中IL-18及TNF-α与病程正相关(P<0.05),确诊年龄,移动度(右)与病程负相关(P<0.05);病程、移动度对Caspase1 mRNA不相关(P>0.05);移动度对血清IL-18和TNF-α不相关(P>0.05),病程与血清IL-18和TNF-α呈正相关(P<0.01)。 结论NLRP3炎症小体相关指标、TNF-α及HMGB1参与AECOPD的炎症过程。血清中IL-1β、TNF-α和HMGB1可作为AECOPD的临床炎症诊断指标。病程越长,AECOPD体内Caspase1 mRNA、血清中TNF-α、IL-18含量越高,提示感染性炎症越明显。