艾灸对慢性溃疡性结肠炎小鼠内脏高敏及结肠组织炎性反应的影响

目的：观察艾灸“足三里”对慢性溃疡性结肠炎（UC）小鼠结肠组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、肿瘤坏死因子受体1(TNF-R1)、P38丝裂原活化蛋白激酶（P38 MAPK）、瞬时感受器电位香草酸受体1(TRPV1)表达的影响,探讨艾灸改善慢性UC内脏高敏的可能机制。方法：雄性C57BL/6J小鼠按体质量随机分为正常组、正常+艾灸组、模型组、模型+艾灸组,每组10只。以2.5%的葡聚糖硫酸钠循环3个周期饮用法建立慢性UC模型。正常+艾灸组和模型+艾灸组小鼠予以“足三里”艾灸,每次20 min,每周连续干预5 d,休息2 d,共4周。评价各组小鼠治疗前后的疾病活动指数（DAI）评分;测定各组小鼠腹壁回撤反射（AWR）最小容量阈值以观察小鼠肠道敏感性;测量各组小鼠结肠长度;HE染色观察各组小鼠结肠组织病理变化;过碘酸雪夫染色检测各组小鼠结肠组织杯状细胞中的黏液素分泌;Masson染色观察各组小鼠肠道纤维化情况;免疫荧光染色法检测各组小鼠结肠组织类胰蛋白酶阳性细胞数（即肥大细胞数）及TNF-α表达水平;免疫组织化学法检测各组小鼠结肠组织TNF-R1、P38 MAPK、TRPV1表达水平。结...     

艾灸对动脉粥样硬化小鼠炎性反应因子及MMP-9的实验研究

目的:观察艾灸对Apo E~(-/-)小鼠主动脉内肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)的影响,并从抑制炎性反应,稳定动脉粥样硬化斑块等角度探讨艾灸在防治动脉粥样硬化中的机制。方法:将48只采用高脂饮食喂养的载脂蛋白E基因敲除小鼠(Apo E~(-/-)小鼠)作为动脉粥样硬化模型,并随机分为3组:艾灸组,模型组,药物对照组。并将16只同龄相同遗传背景的C57BL/6小鼠作为空白对照组。空白组、模型组小鼠每天常规抓取、固定,并放置假艾灸装置。艾灸组小鼠每天抓取固定,并艾灸膻中穴。药物组小鼠每天采用辛伐他汀0.28 mg/100 g灌胃,所有干预20 min/d,6 d/周,干预14周后牺牲,取材检测。Elisa法测定主动脉内TNF-α、IL-10、MMP-9的含量。油红"O"染色观察胸主动脉病理改变。结果:1)与模型组相比,艾灸组,药物组小鼠主动脉内TNF-α、MMP-9含量明显降低(P0.05),艾灸组,药物组之间无明显差异;与模型组相比,药物组IL-10水平明显升高有统计学意义(P0.05),艾灸组小鼠主动脉内IL-10呈升高趋势,但无统计学意义。2)胸主动脉病理改变:与空白组相比,模型组胸主动脉可见明显的AS斑块,内膜破坏,中膜增厚,平滑肌细胞破坏变性,管腔变狭窄。相比于模型组,艾灸组及药物组主动脉病变明显减轻。结论:1)艾灸可以有效缓解动脉粥样硬化病变,抑制动脉粥样硬化斑块生长;2)艾灸可以抑制体内炎性反应,并具有稳定斑块的作用     

针灸“肺俞”穴对病毒性肺炎小鼠肺指数及相关炎性因子的影响

目的:观察针灸"肺俞"穴对病毒性肺炎小鼠肺指数及其肺组织和血清中白介素(IL)-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平的影响,探讨针灸抑制病毒性肺炎的效应机制,为针灸介入小儿病毒性肺炎的防治提供实验依据。方法:健康KM小鼠采用流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株滴鼻感染复制病毒性肺炎模型,造模后小鼠分为模型组、西药组、电针组和艾灸组,同时选健康KM小鼠作为正常对照组,每组10只。电针组及艾灸组电针及艾灸小鼠背部双侧"肺俞"穴,每日灸或针刺两次,共治疗1周;西药组腹腔注射炎琥宁,每日1次,治疗1周。计算各组小鼠肺指数,采用固相夹心法酶联免疫吸附实验检测小鼠肺组织及血清中IL-10、TNF-α水平,观察各组肺组织病理变化。结果:模型组肺指数及血清TNF-α、肺组织TNF-α及IL-10水平较正常组明显升高(P0.01)。西药组、电针组及艾灸组肺指数及血清TNF-α均较模型组降低(P0.01),电针组较西药组降低更明显(P0.05)。造模后血清IL-10较空白组变化不明显(P0.05),各组治疗后血清IL-10较模型组升高(P0.01)。各治疗组肺组织TNF-α及IL-10均较模型组降低(P0.05,P0.01)。正常组小鼠肺脏无充血水肿,模型组肺脏充血水肿明显,西药组、电针组和艾灸组小鼠肺脏轻度充血水肿。结论:针灸"肺俞"穴辅助治疗病毒性肺炎可能是通过抑制或调节相关炎性因子IL-10、TNF-α水平来发挥作用,同时通过进一步抑制TNF-α的过量产生而减轻病毒感染引起的免疫病理损害。     

艾灸对银屑病小鼠皮损表现和免疫炎性反应的影响

目的:观察艾灸对银屑病小鼠皮损改善作用和对免疫炎性反应的影响,探讨艾灸治疗银屑病的可能机制。方法:将32只雄性BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组和西药组,每组8只。模型组、艾灸组和西药组采用背部涂抹5%咪喹莫特乳膏7 d诱导银屑病小鼠模型。造模同时,艾灸组予背部皮损悬灸治疗,每日1次,每次20 min;西药组予1 mg/kg甲氨蝶呤片溶液灌胃给药,每日1次,两组均连续干预7 d。观察各组小鼠每日皮损变化情况,并评定其银屑病皮损面积和疾病严重程度指数(PASI)评分;HE染色法观察小鼠皮损组织形态学变化;免疫组化法检测皮损增殖细胞核抗原(PCNA)、T淋巴细胞表面标志CD3阳性表达情况;ELISA法检测血清白介素(IL)-17A表达水平,实时荧光定量PCR法检测皮损组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β和IL-6 mRNA相对表达。结果:模型组小鼠背部鳞屑增多、肥厚,皮肤干燥,表皮红肿,浸润明显,PASI各项评分与总分均高于正常组(P<0.01);艾灸组小鼠PASI鳞屑、浸润评分和总分低于模型组(P<0.01),西药组小鼠PASI浸润评分和总分低于模型组(...     

艾灸神阙穴对溃疡性结肠炎小鼠血清促炎性因子及肠黏膜紧密连接蛋白的影响

目的观察艾灸神阙穴对DSS诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠的疗效,探讨艾灸神阙穴对UC小鼠炎性反应及肠黏膜屏障的影响。方法以32只雄性ICR小鼠为研究对象,随机选取8只作为空白对照组,其余24只通过自由饮用3.5%DSS溶液8 d制成UC模型,造模成功后再随机分为模型组、艾灸组和阳性药物组,每组8只。持续干预8 d:艾灸组小鼠每日抓取放入固定器固定,艾灸神阙穴20 min,每日1次;空白对照组和模型组每日进行同艾灸组同样的抓取固定,但不进行其他操作,每日1次;阳性药物组小鼠按0.4 g/kg体质量灌服美沙拉嗪溶液,每日1次。干预结束后取小鼠血清用ELISA法检测促炎性因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,取小鼠结肠组织用Western blotting法检测紧密连接蛋白1(ZO-1)、Occludin蛋白表达水平,采用HE染色法观察结肠组织病理切片,通过疾病活动指数评分(DAI)观测UC小鼠的恢复情况。结果与空白对照组相比,UC模型小鼠体质量减轻,大便稀软并带有脓血便,模型组小鼠DAI评分显著升高(P 0.05),病理组织切片显示结肠黏膜组织严重损伤,有明显炎性反应,促炎性因子IL-6、TNF-α含量明显升高(P 0.05),结肠组织中ZO-1、Occludin蛋白表达均显著降低(P 0.01)。与模型组相比,艾灸组与阳性药物组小鼠结肠组织病理损伤有显著改善,炎性反应下调,DAI评分显著降低(P 0.05),血清中IL-6、TNF-α含量显著降低(P 0.05),结肠组织中ZO-1、Occludin蛋白表达均显著升高(P 0.01)。结论艾灸神阙穴能有效缓解UC症状,升高结肠组织中紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的表达,改善结肠组织损伤,降低UC小鼠血清炎性因子IL-6和TNF-α含量,对UC小鼠有治疗作用;提示艾灸对UC的起效机制可能与肠上皮黏膜屏障有关。     

不同灸温下穴位涂抹辣椒素对佐剂性关节炎疗效的影响

目的:以佐剂性关节炎为载体,研究穴位涂抹辣椒素(TRPV1激动剂)在不同灸温下对艾灸治疗佐剂性关节炎疗效的影响,以证实艾灸起效需要适宜的灸温,并进一步探讨瞬时受体电位通道香草醛亚型1(简称TRPV1)与艾灸抗炎起效机制的关系。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、38℃艾灸组、38℃实验组、45℃艾灸组、45℃实验组,用弗氏完全佐剂造成佐剂性关节炎模型,空白组与模型组不予处理;45℃实验组在双侧后三里、肾俞穴局部涂抹5%辣椒素,每隔10 min涂1次,共涂3次,再用艾条灸后三里、双肾俞,灸温控制在45℃;38℃实验组将灸温控制在38℃;38℃、45℃艾灸组仅艾灸;1次/d,每次每穴灸10 min,连续治疗5 d,治疗结束后检测患侧足趾肿胀度、血清IL-1β、TNF-α含量。结果:45℃艾灸组、38℃实验组、45℃实验组3个指标较模型组均明显降低(P<0.01);38℃艾灸组与模型组相比,肿胀度、IL-1β含量虽有下降趋势,但无统计学差异(P>0.05)。38℃与45℃艾灸组、38℃实验组与艾灸组、45℃实验组与艾灸组比较,炎症指标有明显统计学意义(P<0.01)。38℃实验组与45℃艾灸组比较,各指标无统计学意义(P>0.05)。结论:1艾灸抗炎需要适宜的灸温,其启动机制与TRPV1有关;2穴位涂抹辣椒素可降低艾灸抗炎所需的温度阈值,并能提高艾灸抗炎的疗效,其起效机制依赖于TRPV1。     

外用8-甲氧补骨脂素诱导的黄褐斑动物模型研究

目的采用综合造模法创建小鼠皮肤黄褐斑动物模型。方法 30只KM雌性小鼠随机分为空白组、造模1组、造模2组。除空白组外,造模1组和造模2组根据文献均每日用波长320 nm的中波紫外线(UVB)照射小鼠背部皮肤1次,照射时间30 s,并每日定时肌肉注射1%黄体酮注射液2 mL/kg体重,两腿交替注射;同时每日将小鼠置于特制的束缚桶内束缚30 min;造模2组同时局部外涂8-甲氧补骨脂素(8-MOP),每日1次。造模4周后,HE染色和免疫组化染色观察皮肤黑色素细胞病理形态学。结果 (1)HE染色结果 :造模1组和造模2组小鼠皮肤黑色素细胞的上皮层增生数、真皮血管数和真皮炎性细胞数高于空白组(P0.01);造模2组小鼠皮肤黑色素细胞的上皮层增生数、真皮血管数和真皮炎性细胞数高于造模1组(P0.01)。(2)免疫组化染色结果:造模1组和造模2组小鼠皮肤黑色素细胞的HIS、平均光密度和积分光密度高于空白组(P0.01);造模2组小鼠皮肤黑色素细胞的HIS、平均光密度和积分光密度高于造模1组(P0.01)。结论采用小鼠皮肤局部黄体酮注射+慢性束缚+局部紫外线照射+外涂8-甲氧补骨脂素的综合实验方法建立的黄褐斑小鼠模型,更加接近人类黄褐斑病变特征。     

不同艾灸因素对阿尔茨海默小鼠PI3K/AKT通路与皮质β淀粉样蛋白沉淀的影响

目的:观察艾灸、艾烟、无烟灸干预对APP/PS1小鼠大脑皮质PI3K/AKT通路相关指标和β淀粉样蛋白沉淀的影响,从能量代谢的角度探索艾灸不同作用因素在防治阿尔茨海默病中的机制。方法:将32只5个月龄雄性APP/PS1阿茨海默病模型小鼠随机分为模型组、艾灸组、艾烟组、无烟灸组,每组各8只,并将8只同月龄雄性C57BL/6小鼠作为空白对照组。空白组、模型组小鼠每日常规抓取、固定于正常环境;艾灸组与无烟灸组小鼠每日抓取、固定后取关元穴灸治;艾烟组小鼠每日抓取、固定后暴露于10~15 mg/m~3艾烟环境。所有干预20 min/d,6 d/周,共8周。于第10周取材。ELISA法检测各组小鼠大脑皮质中IRS-1、PI3K、AKT、GSK-3α、IDE的含量,刚果红染色检测大脑皮质区β淀粉样蛋白沉淀情况。结果:皮质中IRS-1含量比较显示,模型组低于空白组(P0.01),艾灸组、艾烟组高于模型组(P0.01,P0.05);脑中PI3K含量比较显示,模型组低于空白组(P0.01),艾灸组、艾烟组高于模型组(P0.05);脑中AKT含量比较显示,模型组低于空白组(P0.05),艾灸组、艾烟组、无烟灸组高于模型组(P0.05),艾灸组高于无烟灸组(P0.05);脑中GSK-3α含量比较显示,模型组高于空白组(P0.01),艾灸组、艾烟组、无烟灸组低于模型组(P0.01,P0.05,P0.05)。模型组小鼠在皮质内可观察到明显的橘红色Aβ沉积,空白对照组明显少于模型组(P0.01)。艾烟组、艾烟组、无烟灸组在相同皮质区域中,淀粉样蛋白沉淀均有不同程度的减少。结论:艾灸与艾烟可以调整APP/PS1阿尔茨海默病小鼠的脑部能量代谢,此外艾烟还可以增加对β淀粉蛋白的清除,减缓小鼠皮质内β淀粉蛋白沉淀的产生速度,以延缓AD病理进程。     

艾灸激活TRPV1对高脂血症小鼠胆固醇的影响

目的比较38℃和46℃两组不同温度艾灸对高脂血症小鼠胆固醇的影响,同时用Real-Time PCR法检测两组野生小鼠背根神经节瞬时感受器电位香草酸受体1(Transient Receptor Potential Vanilloid receptor 1,TRPV1)表达的差异,验证激活TRPV1影响艾灸调胆固醇疗效。方法将40只2月龄C57BL/6J野生型(WT)小鼠按随机数字表法分为正常空白组、模型对照组、38℃艾灸组和46℃艾灸组,每组各10只。适应性喂养1周后,除正常空白组外其他三组用高脂饲料喂养法造模成高脂血症模型小鼠。38℃艾灸组和46℃艾灸组均取神阙和双足三里穴,每穴每次艾灸10 min,每日一次,连续两周。治疗结束后,取血,采用氧化酶法检测血清胆固醇含量;取背根神经节组织,用Real-Time PCR法检测TRPV1的表达。将30只2月龄TRPV1基因敲除(TRPV1~(-/-))小鼠适应性喂养1周后,随机分为模型组、38℃艾灸组和46℃艾灸组,每组各10只,造模、治疗及检测方法均同WT小鼠组。结果 WT小鼠46℃艾灸组对小鼠胆固醇和背根神经节TRPV1表达的影响明显高于38℃艾灸组,两组比较差异有统计学意义。TRPV1~(-/-)小鼠两组艾灸对胆固醇调节无差异。结论艾灸激活TRPV1影响艾灸调脂疗效。     

针灸对溃疡性结肠炎小鼠结肠组织中信号转导与转录活化因子3和低氧诱导因子-1α表达的影响

目的:观察针灸对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠组织中信号转导与转录活化因子3(STAT3)和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,探讨针灸治疗UC的机制。方法:雄性昆明小鼠采用DSS饮用法复制UC模型,模型成功后随机分为模型组、针刺组、艾灸组,每组8只,另设8只为空白组。选取"关元""足三里"进行针刺或艾灸治疗,每次15 min,每日1次,连续5 d。观察小鼠一般情况、疾病活动指数(DAI),HE染色法观察各组小鼠结肠组织形态学变化,免疫组织化学法、Western blot法检测结肠组织中STAT3和HIF-1α蛋白表达水平。结果:模型组较空白组一般状况差,DAI明显升高(P0.01),光镜下模型组小鼠出现结肠黏膜破坏缺损、炎性细胞浸润等表现,模型组STAT3、HIF-1α的表达较空白组明显上调(P0.05)。与模型组比较,针刺组和艾灸组小鼠的一般状况好转,DAI评分明显下降(P0.05),结肠腺体破坏、黏膜下层水肿程度减轻,炎细胞浸润量减少,STAT3、HIF-1α蛋白表达明显下降(P0.05)。结论:针刺或艾灸均对UC具有治疗效应,且能有效降低UC小鼠结肠组织STAT3和HIF-1α蛋白的表达,针刺与艾灸之间效果差异不明显。     

补气消癜汤对免疫性血小板减少症模型小鼠的白细胞介素系列因子及TNF-α的影响

目的:探讨补气消癜汤对免疫性血小板减少症模型(ITP)小鼠的白细胞介素系列因子及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,旨在为临床治疗提供依据。方法:采用注射豚鼠抗小鼠血小板血清(GP-APS)方法建立ITP小鼠,随机将72只小鼠分为6组:空白组、模型组、强的松组、补气消癜汤组(低、中、高剂量),观察造模前、给药前、给药后小鼠外周血血小板计数(PLT);给药后,观察小鼠的脾脏系数、胸腺系数、骨髓巨核细胞数(MN)、脾脏MN,采用ELISA法测定小鼠血清白介素-2(IL-2)、IL-6、IL-10及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血小板生成素(TPO)含量的变化。结果:1给药前,与空白组对比,模型组、强的松组、补气消癜汤各剂量组的PLT均出现明显下降(P0.01);给药后,各组小鼠的PLT较造模前减少,较给药前增多,差异显著(P0.01);与模型组对比,补气消癜汤各剂量组的PLT和TPO明显增多(P0.01)。2与空白组对比,模型组的脾脏系数、胸腺系数、脾脏MN、骨髓MN均明显增多(P0.01),与模型组对比,补气消癜汤各剂量组的脾脏系数、胸腺系数、脾脏MN、骨髓MN明显减少(P0.01或P0.05),与强的松组对比,补气消癜汤高剂量组的脾脏系数、胸腺系数、脾脏MN明显减少(P0.05)。3与空白组对比,模型组的IL-2、IL-6及TNF-α升高,IL-10降低,差异显著(P0.01);与模型组对比,强的松组、补气消癜汤各剂量组的IL-2、IL-6及TNF-α降低,IL-10升高,差异显著(P0.01);与强的松组对比,补气消癜汤高剂量组的IL-2及TNF-α降低,IL-10升高,差异显著(P0.01或P0.05)。结论:补气消癜汤可通过调节ITP小鼠体内IL-2、IL-6、IL-10及TNF-α分泌,促进脾脏和骨髓的巨核细胞分化,增加ITP模型小鼠外周血小板数。     

不同灸温对高脂血症小鼠胆固醇及“神阙”穴皮肤的影响

目的:通过观察不同温度艾灸对急性高脂血症模型小鼠胆固醇及"神阙"穴皮肤的影响,探讨艾灸效应与瞬时感受器电位香草酸受体1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)的相关性。方法:32只C57BL/6J野生型(WT)小鼠选取8只作为空白组,余24只采用注蛋黄乳法制备急性高脂血症模型,造模成功后随机分为模型组、38℃艾灸组、46℃艾灸组,每组8只。38℃艾灸组施灸温度控制在(38±1)℃,46℃艾灸组施灸温度控制在(46±1)℃,两组均取"神阙"和双"足三里",每穴每次艾灸10min,每日1次,共治疗2次。空白组和模型组以同样方法抓取固定,不予艾灸治疗。治疗结束后,采用氧化酶法检测血清胆固醇含量;HE染色观察各组小鼠"神阙"穴皮肤组织形态;免疫组化法检测皮肤组织内TRPV1的表达。结果:1与空白组比较,模型组血清胆固醇含量升高(P0.001);46℃艾灸组血清胆固醇含量较模型组降低(P0.001);46℃艾灸组血清胆固醇含量较38℃艾灸组降低(P0.01)。238℃艾灸组皮肤组织形态结构有轻微的改变;46℃艾灸组皮肤组织形态结构改变明显,出现了特异性的变化。346℃艾灸组"神阙"穴皮肤组织内TRPV1表达与空白组、模型组比较差异均有统计学意义(均P0.01),与38℃艾灸组比较差异亦有统计学意义(P0.05)。结论:温度是影响小鼠胆固醇和穴位皮肤的重要因素,艾灸效应与TRPV1有相关性。     

保健灸对Wister大鼠衰老进程肝脏组织中SIRT1、FOXO3a、PPARα表达的影响

目的观察艾灸关元穴对Wister大鼠衰老进程肝脏组织中SIRT1、FOXO3a、PPARα表达及血清中炎症因子的影响,探讨艾灸关元穴延缓衰老的机制。方法选取SPF级Wistar雌性大鼠18只,其中3月龄6只,为青年组,12月龄大鼠12只,随机分为对照组和艾灸组。艾灸组温和灸关元穴,20 min/d,共40 d。青年组与对照组空白抓取。40 d后,采用酶联合吸附法(ELISA)法检测各组大鼠肝脏组织中的SIRT1、FOXO3a、PPARα的表达水平,血清炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)的表达水平。结果与青年组比较,对照组肝脏组织中SIRT1、FOXO3a、PPARα表达水平明显下降(P0.01),血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10含量显著上升(P0.01);与对照组比较,艾灸组肝脏组织中SIRT1、FOXO3a、PPARα表达水平上升(P0.05),血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10含量显著下降(P0.01)。结论艾灸关元穴可延缓衰老,其机制可能是激活机体内长寿基因"SIRT1",上调FOXO3a、PPARα的信号通路,引发一系列的抗炎反应进而达到延缓衰老的目的。     

艾灸督脉对阿尔茨海默病转基因小鼠自噬水平及学习记忆能力的影响

目的:通过观察艾灸督脉对APPswe/PS1de9(APP/PS1)双转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠大脑皮层和海马自噬功能和β-淀粉样蛋白(Aβ)表达的影响,探讨艾灸督脉改善AD小鼠认知功能的作用机制。方法:AD小鼠随机分为模型组、艾灸组、西药Ⅰ组、西药Ⅱ组,同龄同背景C57BL/6J雄性小鼠作为正常组,每组10只。艾灸组小鼠隔附子饼灸"百会",温和灸"风府""大椎",每次20min,1次/d,治疗2周;西药Ⅰ组腹腔注射雷帕霉素,2mg·kg-1·d-1,治疗2周;西药Ⅱ组在艾灸治疗的同时腹腔注射3-甲基腺嘌呤,1.5mg·kg-1·d-1,治疗2周。各组小鼠分别于治疗前后行Morris水迷宫行为学检测。治疗结束后,用透射电镜观察小鼠大脑海马中自噬体的形成,免疫组织化学法检测小鼠皮层和海马区Aβ1-42的表达水平,Western blot法检测小鼠海马微管相关蛋白轻链3(LC3)、sequestosome-1(SQSTM1/p62)、磷酸化核糖体40S小亚基S6蛋白激酶(p-P70S6K)蛋白的表达水平。结果:模型组小鼠水迷宫实验逃避潜伏期较正常组延长(P0.01);艾灸组和西药Ⅰ组与模型组比较,逃避潜伏期明显缩短(P0.05)。透射电镜结果显示,模型组海马区神经元出现变形、不规则或萎缩,核膜粗糙不完整、双层结构模糊,胞质内自噬泡减少;艾灸组神经元仍有部分不规则变形、萎缩,胞质内可见自噬泡。免疫组织化学结果显示,与正常组比较,模型组大脑皮层和海马区Aβ1-42阳性细胞表达增多(P0.01),并可见较多的老年斑;与模型组比较,艾灸组和西药Ⅰ组大脑皮层和海马区Aβ1-42阳性细胞表达减少(P0.01)。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组海马区中LC3-Ⅰ、p62、p-P70S6K蛋白表达水平明显增高(P0.01),LC3-Ⅱ蛋白表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ明显降低(P0.01);与模型组比较,艾灸组、西药Ⅰ组海马区中LC3-Ⅰ、p62、p-P70S6K蛋白表达水平明显降低(P0.01),LC3-Ⅱ蛋白表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ明显升高(P0.01)。结论:艾灸督脉改善AD转基因小鼠学习记忆能力/认知功能的作用,可能与上调细胞自噬水平,加速Aβ1-42清除,进而减少Aβ1-42沉积导致的神经细胞毒性损伤有关。     

艾灸对疲劳大鼠不同脑区炎性细胞因子的影响

目的:观察艾灸对疲劳大鼠不同脑区炎性细胞因子的影响,探讨艾灸缓解疲劳的可能机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组和艾灸组,每组8只。采用慢性负重力竭游泳法建立疲劳大鼠模型。艾灸组在造模同时灸双侧"足三里"穴各3壮,隔日1次,共11次。观察大鼠力竭游泳时间,ELISA法检测大鼠海马和下丘脑炎性细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)的含量。结果:与模型组比较,艾灸组在造模第14天和第21天力竭游泳时间显著延长(P0.05,P0.01)。与正常组比较,模型组大鼠海马IL-1β、IL-6和TNF-α含量显著升高(P0.01),IFN-γ含量显著降低(P0.05);模型组大鼠下丘脑IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-γ含量均呈增加趋势,但差异无统计学意义(P0.05)。与模型组比较,艾灸组大鼠海马IL-6含量显著降低(P0.01),IL-1β、TNF-α、IFN-γ含量差异无统计学意义(P0.05);艾灸组大鼠下丘脑IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-γ含量差异无统计学意义(P0.05)。结论:艾灸可显著下调大鼠海马促炎细胞因子水平,对下丘脑促炎细胞因子无明显作用。艾灸降低中枢炎性细胞因子与其发挥缓解疲劳作用的机制值得进一步研究。     

艾灸对血管性痴呆大鼠海马炎性因子及微管相关蛋白表达的影响

目的:观察艾灸对血管性痴呆(VD)大鼠炎性因子及神经元再生标志物微管相关蛋白(DCX)表达的影响,探讨艾灸抑制炎性反应,促进神经元修复,改善VD的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、艾灸组、西药组,每组15只。用双侧颈总动脉缺血再灌注法建立VD大鼠模型。艾灸组给予悬灸"关元""命门""大椎"治疗,每穴15 min,每日1次,每周休息1 d,连续治疗4周;西药组给予尼莫地平灌胃治疗,每日3次,连续治疗4周。应用Morris水迷宫实验检测大鼠逃避潜伏期,HE染色法检测大鼠海马组织病理形态,免疫荧光双标记法检测大鼠海马DG区DCX与NeuN共表达强度,用免疫组织化学法检测DG区DCX阳性表达,Western blot法检测大鼠海马组织DCX、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、髓过氧化物酶(MPO)、核转录因子κB p65(NF-κB p65)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达。结果:造模后模型组大鼠逃避潜伏期较正常组与假手术组延长(P0.01),治疗后艾灸组与西药组大鼠逃避潜伏期较模型组明显缩短(P0.01,P0.05)。模型组海马组织神经元较正常组、假手术组排列紊乱,可见大量坏死神经元及少量淋巴细胞浸润;艾灸组与西药组细胞形态接近正常。免疫荧光双标记检测显示,与正常组、假手术组比较,模型组大鼠DCX/NeuN共表达细胞数显著增加(P0.01);与模型组比较,艾灸组与西药组DCX/NeuN共表达细胞数均显著增加(P0.05,P0.01),艾灸组DCX/NeuN共表达细胞少于西药组(P0.05)。免疫组织化学染色结果显示,模型组DCX阳性表达高于正常组与假手术组(P0.01,P0.05),艾灸组、西药组高于模型组(P0.01),艾灸组略低于西药组(P0.05)。模型组海马组织促炎因子TNF-α、 MPO、NF-κB p65、IL-6、IL-1β及DCX蛋白相对表达量明显高于正常组和假手术组(P0.01);与模型组比较,艾灸组和西药组大鼠各炎性因子表达明显下降(P0.01),DCX相对表达量显著增加(P0.01);与西药组比较,艾灸组大鼠海马组织中促炎因子表达下降(P0.05,P0.01),DCX相对表达量下降(P0.01)。结论:艾灸可通过抑制炎性损伤,促进神经细胞修复再生,改善VD大鼠记忆与学习能力。     

穴位埋线加艾灸对佐剂型关节炎大鼠P物质含量的影响及其对细胞因子的免疫调控作用

目的:观察穴位埋线加艾灸对佐剂型关节炎P物质(SP)含量的影响及其对细胞因子的免疫调控作用.方法:将大鼠随机分成正常对照组、模型组(佐剂型关节炎)、模型 埋线组、模型 艾灸组、模型 埋线加艾灸组.选用足三里、肾俞穴进行治疗.应用放射免疫法测定外周血、脊髓后角P物质含量的变化及外用血白介素-2(IL-2)、肿、瘤可坏死因子-a(TNF-α)含量的变化.结果:三种方法均可改变佐剂型关节炎大鼠Il-2、TNF-α的含量,而穴位埋线加艾灸方法改变更明显(P＜0.01),同时,外周血和脊髓后角中P物质的含量明显升高(P＜0.01).结论:穴位埋线加艾灸对佐剂性关节炎大鼠机体免疫力有良性调节作用,其机理可能与相应P物质的合成和释放增多有关,并通过这些免疫递质对神经-内分泌-免疫调节网络发挥作用.     

艾灸对化合物48/80致小鼠皮肤瘙痒模型的影响及与TRPV1的相关性研究

目的观察化合物48/80(Compound 48/80,C48/80)对正常和TRPV1敲除小鼠诱发的瘙痒反应及艾灸不同穴位对其的影响,探讨艾灸止痒效应及与TRPV1的关系。方法选用野生型C57BL/6小鼠(WT小鼠)和TRPV1敲除小鼠(KO小鼠)各30只,分为模型组、曲池组、血海组,连续两日分别于其颈部中央皮下注射C48/80,曲池组、血海组于第2日注射前给予艾灸刺激10min,,观察艾灸干预前后搔抓次数。结果 C48/80能诱发WT小鼠和KO小鼠对注射处显著的搔抓反应,模型组WT小鼠第1日的搔痒次数为(172.19±46.50)次/30min,KO小鼠第1日的搔痒次数为(122.20±29.26)次/30min,二者差异具有统计学意义(P0.05)。艾灸曲池、血海均能有效抑制此种搔抓反应(P0.05,P0.05),曲池组WT小鼠的艾灸前后变化率为50.76%,KO小鼠为27.87%,二者差异具有统计学意义(P0.05);血海组WT小鼠为43.52%,KO小鼠为25.39%,二者差异具有统计学意义(P0.05)。而对WT与KO小鼠而言,穴位间止痒效应的差异无统计学意义(P0.05)。结论 TRPV1参与C48/80诱发的瘙痒反应的产生,艾灸能明显抑制化合物48/80诱发的小鼠皮肤瘙痒反应,TRPV1可能参与艾灸止痒效应的启动。     

芍药苷对TNF-α诱导的内皮细胞TNFR1/NF-κB信号通路的抑制作用

目的研究芍药苷(paeoniflorin,PAE)对TNF-α诱导小鼠肾动脉内皮细胞TNFR1介导信号通路的抑制作用,试探讨其作用的分子机制。方法体外培养小鼠动脉内皮细胞。采用Western blot方法检测正常组(无血清培养基培养)、TNF-α组(无血清培养基培养2 h加TNF-α30ng/m L 6 h)、PAE低浓度组(PAE0.8μmol/L培养2 h加TNF-α30ng/m L 6 h)、PAE中浓度组(PAE 8μmol/L培养2 h加TNF-α30ng/m L 6h)及PAE高浓度组(PAE 80μmol/L培养2 h加TNF-α30ng/m L 6 h)细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)的蛋白表达;以免疫荧光法检测正常组(无血清培养基培养)、TNF-α组(无血清培养基培养2 h加TNF-α30ng/m L 45 min)、PAE高浓度组(PAE 80μmol/L培养2 h加TNF-α30ng/m L45 min)核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的核转位;以Western blot法检测正常组(无血清培养基培养)及PAE高浓度组(PAE 80μmol/L培养2 h)ph-ERK和ph-p38表达;Western blot法检测正常组(无血清培养基培养)、TNF-α组(无血清培养基培养2 h加TNF-α30ng/m L 30 min)、PAE高浓度组PAE 80μmol/L培养2 h加TNF-α30ng/m L 30 min)、p38抑制剂组(SB组,p38抑制剂SB238025 25μmol/L预处理30 min,PAE80μmol/L处理2 h,最后TNF-α30 ng/m L 30 min)及ERK抑制剂组(PD组,ERK抑制剂PD98059 50μmol/L处理30 min,PAE 80μmol/L处理2 h,最后TNF-α30 ng/m L 30 min)IκBα蛋白表达。结果与正常组比较,TNF-α组ICAM-1蛋白表达明显升高(P0.01);与TNF-α组比较,PAE高浓度组的ICAM-1表达受到显著抑制(P0.05)。PAE高浓度组ph-p38及ph-ERK蛋白表达水平明显较正常组升高(P0.05)。与正常组比较,TNF-α组IκBα表达水平下降(P0.01)。与TNF-α组比较,PAE高浓度组可显著抑制TNF-α诱导的IκBα蛋白降解(P0.01),SB组可显著阻断PAE对IκBα蛋白降解的抑制作用(P0.05)。正常组中NF-κB/p65信号主要位于胞浆中,TNF-α组在TNF-α刺激45 min可诱导NF-κB/p65由胞浆向细胞核转位,而PAE高浓度组可显著抑制TNF-α诱导的NF-κB/p65核转位。结论 PAE抑制TNF-α诱导的ICAM-1表达,其作用与抑制TNFR1/NF-κB信号通路有关,p38参与介导此作用。     

不同艾灸持续时间对类风湿关节炎大鼠影响的实验研究（英文）

目的:观察不同艾灸持续时间对类风湿关节炎(RA)大鼠影响的差异,评价灸量与灸效的关系。方法:将40只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机选取8只作为正常组,其他32只建立Ⅱ型胶原诱导的RA模型。造模成功后,将32只大鼠随机分为模型组、艾灸20 min组、艾灸40 min组和艾灸60 min组,每组8只。正常组不造模,不进行艾灸干预;模型组大鼠造模后不予艾灸干预;艾灸20 min组、艾灸40 min组和艾灸60 min组大鼠分别接受艾灸肾俞和足三里20 min、40 min和60 min治疗。6 d为1个疗程,疗程间休息1 d,共治疗3个疗程。治疗结束后,观察大鼠血清中白介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平、关节炎指数(AI)评分、足趾容积和滑膜炎症病理学评分。结果:治疗前,与正常组比较,模型组大鼠血清IL-1β和TNF-α水平升高,足趾容积增加,组间差异均有统计学意义(均P0.01)。与模型组比较,艾灸20 min组、艾灸40 min组和艾灸60 min组血清IL-1β、TNF-α水平、足趾容积和AI评分均显著下降(P0.05 or P0.01)。与艾灸20 min组和艾灸60 min组比较,艾灸40 min组血清IL-1β和TNF-α水平、足趾容积和AI评分下降更明显,组间有统计学差异(P0.05 or P0.01)。艾灸20 min组和艾灸60 min组比较,血清IL-1β、TNF-α水平、AI评分和足趾容积差异均无统计学意义(均P0.05)。艾灸20 min组、艾灸40 min组和艾灸60 min组的滑膜组织病理的改变比较,艾灸40 min组滑膜组织病理改善最明显。结论:艾灸40 min治疗RA大鼠的作用效果比艾灸20 min及艾灸60 min更明显,说明艾灸治疗持续时间是影响艾灸治疗效果的主要因素。