miR-199a-3p通过DDR调控Wnt/β-catenin通路抑制卵巢癌细胞侵袭转移

目的:探讨miR-199a-3p调控卵巢癌细胞侵袭转移及机制。方法:QPCR技术检测22例卵巢癌组织及20例卵巢正常组织中DDR2 mRNA表达水平。采用miR-199a-3p mimics转染人卵巢癌SKOV3细胞,QPCR技术检测DDR2 mRNA表达,Western blot法检测DDR2、Wnt/β-catenin相关通路信号分子表达。结果:DDR2在卵巢癌组织中表达明显升高。较SKOV3细胞组,miR-199a-3p mimics组中DDR2 mRNA表达水平降低,DDR2、β-catenin、c-myc、c-JUN表达水平明显下调。结论:miR-199a-3p可能通过下调DDR和Wnt/β-catenin通路抑制卵巢癌细胞体外侵袭转移。     

过表达NDRG1通过调控Wnt/β-catenin信号通路促进滋养层细胞上皮-间质转化

目的:探讨N-myc下游调节基因1(NDRG1)过表达对滋养层细胞上皮-间质转化(EMT)的影响以及对Wnt/β-catenin信号通路的作用。方法:采用携带NDRG1基因的慢病毒感染人胎盘滋养层细胞系HTR-8/SVneo,建立NDRG1基因稳定过表达的HTR-8/SVneo细胞株。qRT-PCR和Western blot法检测慢病毒感染后细胞中NDRG1基因mRNA和蛋白的表达水平,Transwell小室法观察细胞侵袭和迁移能力,免疫荧光实验检测β-catenin蛋白核转位情况,Western blot法分析EMT相关蛋白、Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9等蛋白表达。结果:慢病毒介导NDRG1过表达后,HTR-8/SVneo细胞中NDRG1 mRNA和蛋白表达水平显著上调。NDRG1过表达可显著增强细胞的侵袭和迁移能力,并上调MMP-2、MMP-9、波形蛋白(Vimentin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)、β-catenin、Snail1和环氧化酶-2(COX-2)等蛋白的表达水平,下调上皮钙黏蛋白(E-cadherin)和糖原合成酶激酶3β(GSK3β)磷酸化水平,同时促进β-catenin蛋白由细胞质向细胞核转位。结论:NDRG1过表达可促进HTR-8/SVneo细胞EMT过程,提高细胞侵袭和迁移能力,其机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路转导相关。     

顺铂对沉默β-catenin的卵巢癌SKOV3增殖、凋亡的影响

目的:通过沉默Wnt/β-catenin信号转导通路的核心蛋白β-catenin,探讨顺铂对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡的影响,为卵巢癌的耐药逆转提供新思路。方法:用包含β-catenin基因特异RNA序列的慢病毒转染人卵巢癌SKOV3细胞,沉默β-catenin蛋白表达。分组:SKOV3组、SKOV3-neg组(转染空载体)、SKOV3-RNAi组(转染β-catenin-RNAi慢病毒)。Western blot法检测转染前后SKOV3细胞中β-catenin蛋白的表达。12.5μg/ml顺铂作用48h后,用MTT法检测顺铂对各组SKOV3细胞增殖抑制率的影响;流式细胞术检测各组中SKOV3细胞的凋亡率。结果:(1)Western blot结果显示,SKOV3-RNAi组中β-catenin蛋白表达水平显著低于SKOV3-neg和SKOV3组(P<0.05)。(2)相同浓度顺铂作用下,SKOV3-RNAi组的增殖抑制率显著高于SKOV3组及SKOV3-neg组(P<0.05),而后两组的增殖抑制率无显著差异(P>0.05)。(3)流式细胞术检测结果显示,SKOV3-RNAi、SKOV3-neg和SKOV3组的细胞凋亡率分别为(18.8±4.3)%、(1.8±0.3)%、(1.9±0.3)%,SKOV3-RNAi组凋亡率显著高于其余两组(P=0.008<0.05)。顺铂作用后,SKOV3-RNAi、SKOV3-neg和SKOV3组的细胞凋亡率分别为(67.7±2.5)%、(33.3±2.6)%、(32.3±2.1)%;顺铂作用后,各组凋亡率均显著升高(P均<0.05),且SK-OV3-RNAi组凋亡率显著高于其余两组(P=0.000<0.05)。结论:沉默β-catenin蛋白能有效增强SKOV3对cDDP的敏感性,β-catenin有可能成为逆转卵巢癌化疗耐药的治疗靶点。     

Wnt信号通路成分β-catenin和APC在卵巢肿瘤中的表达及意义

目的:探讨Wnt信号通路成分β-catenin和APC基因在上皮性卵巢癌的表达及意义。方法:应用免疫组织化学染色SABC法检测49例卵巢癌(24例浆液性囊腺癌、15例黏液性囊腺癌、10例子宫内膜样癌),10例交界性卵巢肿瘤及16例良性卵巢肿瘤中β-catenin、APC基因的表达,分析其相关性。结果:卵巢癌中β-catenin的异常表达率明显高于卵巢交界性肿瘤和卵巢良性肿瘤,差异有统计学意义(P0.05)。卵巢癌中APC基因的阴性表达率明显高于卵巢良性肿瘤,差异有统计学意义(P0.05),而与卵巢交界性肿瘤无显著差异(P0.05)。卵巢癌中APC基因的阴性表达与β-catenin的异常表达无相关性(r=0.0429,P0.05)。2例卵巢子宫内膜样癌中可见β-catenin胞核表达,但不伴有APC基因的阴性表达。结论:卵巢癌中Wnt信号通路中的成分发生变化,但其激活机制可能有别于Wnt信号通路的传统激活机制,可能在卵巢子宫内膜癌的发生中发挥作用。     

β连环素在卵巢肿瘤中的研究进展

β连环素（β-catenin）主要参与Wnt信号通路和上皮钙黏蛋白（E-cadherin）介导的细胞间的黏附,其在多数肿瘤中存在异常表达。研究表明,Wnt/β-catenin信号通路的异常激活与卵巢肿瘤的发生密切相关。同时,E-cadherin/β-catenin复合体的改变直接参与卵巢肿瘤的侵袭转移。卵巢肿瘤动物模型的出现进一步证明β-catenin在卵巢肿瘤发生发展中的作用。对卵巢肿瘤中β-catenin的研究进展做文献综述。     

GATA4基因沉默对多囊卵巢综合征模式大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及相关机制

目的:GATA4基因沉默对多囊卵巢综合征(PCOS)模式大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法:空白对照组(Control)、阴性对照组(NC)和转染GATA4-siRNA沉默组(GATA4-siRNA)转染PCOS卵巢颗粒细胞48h后,Western blot检测各组细胞中GATA4、Cleaved caspase3、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达;流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:NCsiRNA组的GATA4、Cleaved caspase3、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达及细胞凋亡率与对照组差异无统计学意义(P0.05),GATA4-siRNA组的细胞凋亡率及Cleaved caspase3蛋白表达显著高于对照组,GATA4、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达显著低于对照组(P0.01)。结论:沉默PCOS模式大鼠卵巢颗粒细胞中GATA4表达,可促进细胞的凋亡,其机制与上调Cleaved caspase3蛋白表达及下调Wnt/β-catenin信号通路有关。     

TGF-β1联合Wnt3a促进子宫内膜纤维化的机制研究

目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)与Wnt3a联合对子宫内膜基质细胞纤维化的促进作用。方法:原代分离培养人子宫内膜基质细胞(hESCs),将hESCs分为正常对照组和实验组(不同浓度TGF-β1),RT-PCR和Western blot法检测纤维化标记物(CollageⅠ、α-SMA、Fibronectin)及Wnt/β-catenin信号通路配体和核心分子的表达。筛选10ng/mL TGF-β1与100ng/mL Wnt3a联合作用hESCs,同法检测上述分子和Wnt/β-catenin核心分子的表达。结果:与正常对照组相比,TGF-β1诱导纤维化标记物(CollageⅠ、α-SMA、Fibronectin)、Wnt/β-catenin信号通路配体(Wnt3a)及核心分子(β-catenin、GSK-3β)和下游靶基因(CyclinD1、MMP-9)表达均升高;Wnt3a和TGF-β1联合诱导组纤维化标记物和Wnt/β-catenin信号通路核心分子表达显著高于对照组、Wnt3a组、TGF-β1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:Wnt3a联合TGF-β1激活Wnt/β-catenin信号通路促进子宫内膜基质细胞纤维化。     

DKK3、Wnt/β-连环蛋白信号通路与宫颈癌关系的研究进展

宫颈癌为女性恶性肿瘤之一,对于其发病机制及所涉及的通路分子的研究越来越深入。其中Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的研究受到高度关注。Wnt/β-catenin信号通路涉及广泛的生理和病理过程,包括细胞生长、分化、个体发育、迁移、遗传稳定性、凋亡、干细胞自我更新和维持成人组织稳态。稳定的β-catenin在细胞质中积累并转移到细胞核,激活Wnt/β-catenin信号通路,是多种癌症的诱发因素之一。β-catenin的积累在Wnt/β-catenin信号通路占据核心位置。β-catenin通过Wnt/β-catenin信号通路驱动靶基因,参与宫颈癌多步骤的发生及发展。而Dickkopf相关蛋白3(DKK3)可能通过降解β-catenin、阻断β-catenin的核转运,抑制Wnt/β-catenin信号通路,在抑制宫颈癌的发生、发展中发挥潜在作用。因此,深入研究DKK3、Wnt/β-catenin信号通路与宫颈癌的关系,显得尤为重要。     

早发型子痫前期胎盘细胞侵袭相关信号通路表达及其交互作用的研究

目的:探讨细胞侵袭相关Notch1及Wnt1信号通路在早发型子痫前期患者胎盘组织中的表达以及两者的交互作用。方法:收集2016年6月—2017年12月郑州人民医院收治的176例早发型子痫前期患者(轻度组102例、重度组74例),同期60例健康孕妇为对照组。收集所有研究对象分娩后的胎盘组织样本,通过免疫组织化学法检测组织Notch1及Wnt1蛋白的表达,Western blotting检测Notch1、Jagged1、Wnt1及β-catenin蛋白表达水平,并对各蛋白表达水平进行相关性分析。结果:3组Notch1及Wnt1表达强度和阳性表达率差异均有统计学意义(P0.05);轻度组和重度组Notch1及Wnt1阳性表达率低于对照组,重度组阳性表达率低于轻度组(P0.05)。3组Notch1、Jagged1、Wnt1及β-catenin蛋白表达水平差异有统计学意义(P0.05);轻度组及重度组Notch1、Jagged1及Wnt1蛋白表达水平均低于对照组,重度组β-catenin表达水平低于对照组,且重度组Notch1、Jagged1及Wnt1及β-catenin均低于轻度组(均P0.05)。Notch1与Jagged1(r=0.826,P=0.000)、Wnt1与β-catenin(r=0.531,P=0.000)表达水平呈正相关,Wnt1与Notch1(r=-0.167,P=0.010)、Wnt1与Jagged1(r=-0.136,P=0.037)表达水平呈负相关。结论:Notch1及Wnt1低表达与早发型子痫前期的发生、发展相关,且在该过程中Notch及Wnt信号通路之间可能存在一定的交互作用。     

铁死亡激活剂Erastin通过活化凋亡增强卵巢癌细胞顺铂敏感性的研究

目的:探讨铁死亡激活剂Erastin对人上皮性卵巢癌细胞顺铂(DDP)敏感性的影响及其机制。方法:CCK-8法检测上皮性卵巢癌细胞株HEY、SKOV3、OVCAR3、ES2对Erastin的敏感性,选择Erastin不敏感的细胞株,CCK-8法测定联合Erastin前后顺铂半数抑制浓度(IC_(50)),流式细胞学检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡相关蛋白caspase 3的表达情况。结果:人上皮性卵巢癌HEY、SKOV3、OVCAR3、ES2细胞株中,HEY、SKOV3细胞株对Erastin引起的细胞死亡较不敏感。在联合Erastin后,细胞顺铂的IC_(50)值显著降低(P0.05)。流式结果提示Erastin可以增加顺铂诱导的HEY、SKOV3凋亡细胞数,Western blot结果显示促凋亡蛋白cleaved-caspase 3表达升高。结论:铁死亡激活剂Erastin可能通过活化凋亡通路进而提高HEY、SKOV3细胞对顺铂的敏感性。铁死亡激活剂可为改善临床EOC铂类耐药提供全新的思路。     

慢病毒转染自杀基因后联合更音洛韦治疗卵巢上皮性癌的实验研究

目的探讨以抗Ⅰ型粘蛋白单链抗体(anti-MUC1)为靶向的慢病毒高效转染自杀基因后联合更昔洛韦(GCV)对Ⅰ型粘蛋白阳性(MUC1+)卵巢上皮性癌细胞的靶向性基因治疗.方法包装以anti-MUC1为靶向的慢病毒,介导单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)基因转染卵巢上皮性癌细胞株SKOV3(MUC1+)及正常成纤维细胞GF(MUC1-),荧光显微镜下观察转染效果.聚合酶链反应(PCR)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术鉴定HSV-tk基因在靶细胞(SKOV3及GF)中的整合转录结果.光学显微镜观察GCV作用后细胞形态变化;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定GCV的体外杀伤效应.结果荧光显微镜下观察到以anti-MUC1为靶向的慢病毒可有效转染SKOV3细胞,PCR、RT-PCR均证明HSV-tk基因已在靶细胞SKOV3中整合且转录表达;而在GF细胞中未见HSV-tk基因的整合及转录表达.光学显微镜下观察到HSV-tk基因转录后的细胞在GCV作用后出现明显形态变化;MTT法显示GCV对转染HSV-tk基因后的SKOV3细胞有显著杀伤作用,其半数抑制浓度为0.10mg/L.结论以anti-MUC1为靶向的慢病毒可将HSV-tk基因高效、靶向性转染MUC1+卵巢上皮性癌细胞,联合应用GCV可高效、靶向性杀伤MUC1+卵巢上皮性癌细胞.     

periostin促进Ishikawa子宫内膜癌肿瘤干细胞的增殖和侵袭

目的:探讨periostin对子宫内膜癌肿瘤干细胞增殖和侵袭的影响,及其可能作用机制。方法:收集100例手术切除的子宫内膜癌组织及距病灶3cm的癌旁组织,免疫组化、荧光定量PCR技术检测子宫内膜癌组织及癌旁组织中periostin的表达。流式细胞仪分选出子宫内膜癌细胞系Ishikawa CD133~+细胞并培养,免疫荧光检测Ishikawa肿瘤细胞球中CD133的表达情况。Western bolt法检测CD133~+ Ishikawa和parental Ishikawa细胞中periostin的表达。构建针对periostin的shRNA表达载体转染Ishikawa CD133~+细胞和过表达periostin的载体转染亲本parental Ishikawa细胞。Western bolt法检测细胞中periostin蛋白表达水平,CCK-8和Transwell小室检测细胞的增殖和侵袭能力,Western bolt法检测Wnt信号通路蛋白(β-catenin、c-myc、CyclinD1、GSK3β)的表达。结果:periostin在子宫内膜癌组织的表达高于癌旁组织(P0.01),并与子宫内膜癌的病理级别呈正相关(r=0.65,P0.01)。子宫内膜癌肿瘤干细胞具有"干细胞"特性,能形成肿瘤球并表达干细胞标记物CD133。periostin在CD133~+ Ishikawa细胞中的表达高于亲本parental Ishikawa细胞(P0.01);相对于转染空载体组细胞,periostin shRNA能有效抑制Ishikawa CD133~+细胞的增殖和侵袭,且抑制Wnt信号通路蛋白(β-catenin、c-myc、CyclinD1、GSK3β)的表达(均P0.01)。Parental Ishikawa细胞过表达periostin慢病毒能增强其增殖和侵袭能力,表现为Wnt/β-catenin信号通路被激活。结论:periostin通过激活Wnt/β-catenin信号通道促进子宫内膜癌肿瘤干细胞的增殖和侵袭。periostin可能成为临床治疗子宫内膜癌的新靶标。     

Wnt/β-catenin通路在卵巢癌中的调控机制研究进展

卵巢癌死亡率居妇科恶性肿瘤首位,导致其高死亡率的主要原因是早期诊断困难和化疗耐药。研究证实,Wnt/β-catenin信号通路在卵巢癌组织和细胞中被异常激活。其相关蛋白质明显高表达,与卵巢癌的发生发展、侵袭、转移和耐药密切相关。本文简要回顾目前Wnt/β-catenin信号通路在卵巢癌中的研究进展,以期加强对Wnt通路的认知,并进一步研究Wnt通路调控机制,为卵巢癌的防治提供新的靶向治疗方法。     

MicroRNA-155通过调控Wnt/β-catenin通路对滋养细胞生物学行为的影响

目的:探讨miR-155是否通过调控Wnt/β-catenin通路影响滋养细胞的生物学行为,参与子痫前期(PE)的发生。方法:收集20例PE孕妇(PE组)及20例正常孕妇(Normal组)的胎盘组织,qRT-PCR检测组织中miR-155表达,qRT-PCR及Western blot检测β-catenin表达。HTR-8/SVneo细胞分别转染miR-155 mimic、miR-155 inhibitor及miR-155 NC,qRT-PCR检测其转染效率及β-catenin mRNA表达,Western blot检测β-catenin及Wnt3a蛋白表达,CCK-8、Transwell、流式细胞术分别检测细胞的增殖、迁移及凋亡。转染miR-155 inhibitor后,用β-catenin抑制剂处理细胞,检测相关蛋白表达及细胞的增殖、迁移和凋亡。结果:PE组胎盘组织中miR-155表达较Normal组升高(P<0.001),β-catenin表达降低(P<0.01)。过表达miR-155后,β-catenin及Wnt3a表达、细胞增殖、迁移能力均下降(P<0.01)...     

IGF1、IGF1R及IGFBP3在卵巢上皮性肿瘤的表达及临床病理意义

目的:探讨胰岛素样生长因子1(IGF1)及其受体(IGF1R)、胰岛素样生长因子结合蛋白质3(IGFBP3)在卵巢上皮性肿瘤的表达及在原发性卵巢上皮性癌(EOC)中的临床病理意义。方法:用免疫组化法检测10例正常卵巢组织、13例良性卵巢上皮性肿瘤、12例交界性卵巢上皮性肿瘤、50例EOC手术病理标本中IGF1、IGF1R、IGFBP3的表达,分析三者表达与EOC临床病理特征的相关性。结果:(1)IGF1、IGF1R、IGFBP3在正常卵巢组织、良性卵巢上皮性肿瘤、交界性卵巢上皮性肿瘤、EOC的表达依次增强,IGF1阳性表达率分别为20.00%,23.08%,25.00%,80.00%;IGF1R阳性表达率分别为20.00%,30.77%,33.33%,84.00%;IGFBP3阳性表达率分别为30.00%,38.46%,41.67%,86.00%,三者在EOC组的阳性表达率均明显高于交界性卵巢上皮性肿瘤组(P<0.01)。(2)IGF1R在EOC中的表达阳性程度与病理学分级、临床分期、腹水/腹腔冲洗液阳性之间呈显著正相关(P<0.05);IGFBP3表达的阳性程度与临床分期呈显著的负相关(P<0.05)。(3)IGF1R在EOC中的表达程度与IGF1表达程度间呈显著的正相关(P<0.05)。结论:卵巢上皮性癌中存在IGF1、IGF1R、IGFBP3的过表达,三者共同参与了EOC的发生发展过程;IGF1R与EOC不良预后的重要临床病理指标间呈显著的正相关,IGF1R可作为卵巢上皮性癌基因靶向治疗的新靶点。     

血清白介素-1β和乳酸脱氢酶在卵巢上皮性癌患者中的表达及意义

目的探讨卵巢上皮性癌(EOC)患者血清中白介素-1β(IL-1β)和乳酸脱氢酶(LDH)的表达及临床意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测收集2015年1月至2016年12月兰州大学第一医院妇产科收治的卵巢上皮性癌组、良性卵巢肿瘤组和正常对照组共268例受试者血清中IL-1β和LDH表达水平,及其与EOC患者间的临床病理及预后的关系。结果卵巢上皮性癌组患者血清中IL-1β和LDH含量水平显著高于良性卵巢肿瘤组和正常对照组(P 0.05);IL-1β和LDH高表达与EOC患者肿瘤分级、临床分期及盆腹腔淋巴结转移密切相关,IL-1β和LDH是影响EOC患者预后的独立风险因素(P 0.05)。结论 IL-1β和LDH表达水平与EOC进展及预后有关,IL-1β和LDH高表达可作为EOC患者不良预后的重要指标。     

醋酸甲羟孕酮通过诱导上皮-间质转化促进卵巢癌细胞转移机制研究

目的 探讨醋酸甲羟孕酮（MPA）对人卵巢上皮性癌（EOC）细胞转移能力的影响及其作用机制。方法 2011年8月至2012年6月在河北医科大学病理学实验室进行实验。培养EOC细胞SKOV3,取对数生长期细胞用于实验,分别设立对照组和MPA组（10-5mol/L MPA作用于SKOV3细胞48 h或72 h）。采用划痕实验观察细胞迁移能力,倒置显微镜观察细胞形态,实时荧光定量PCR(Real Time-PCR)检测Snail、Slug mRNA表达水平,蛋白印迹法(Western blot)检测E-cadherin、N-cadherin和vimentin蛋白表达水平。 结果 划痕24h、48h时,MPA组剩余划痕面积为［（0.34 ±0.06）%、（0.14±0.02）%］均显著小于对照组［（0.51±0.05）%、（0.46±0.06）%］,差异有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比,10-5mol/L MPA作用于SKOV3细胞72h后,细胞由上皮形态转变为间质形态,即细胞由立方形或椭圆形转变为纺锤形或多角形,且细胞间连接松散。10-5mol/L MPA作用于SKOV3细胞48h,可显著上调 Snail、Slug mRNA表达水平,与对照组相比,差异有统计学意义（P<0.05）;10-5mol/L MPA作用于SKOV3细胞72 h,E-cadherin蛋白表达水平较对照组明显减少,差异有统计学意义（P<0.05）。而N-cadherin和vimentin蛋白表达水平较对照组明显增加,差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论 MPA可通过诱导EOC细胞发生上皮-间质转化,进而增强EOC细胞的转移能力。     

Wnt/LRP5/β-catenin信号通路在绝经后骨质疏松发病中的作用

目的 探讨Wnt/LRPS/β-catenin信号通路在绝经后骨质疏松发病中的作用.方法 选取50只6月龄雌性Wistar大鼠,随机分为对照组(n=24)和去卵巢组(n=26),去卵巢组大鼠行双侧卵巢切除术,对照组打开大鼠腹腔后不作任何处理即缝合.去卵巢后0、4和8周分别测定两组大鼠血雌二醇水平和骨密度,4和8周用逆转录-PCR技术检测骨组织中低密度脂蛋白受体相关蛋白5( LRP5)、β连环蛋白(β-catenin)及骨形成关键基因—runt相关基因2(Runx2)mRNA的表达.结果 去卵巢组大鼠术后4和8周,出现雌二醇水平明显下降,术后4周时为( 92±15) pmol/L,对照组为( 117±29) pmol/L;术后8周时为(95±22) pmol/L,对照组为(114±15) pmol/L;两组分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).术后4周时去卵巢组骨密度为(0.076±0.016) g/cm2,对照组为(0.098 +0.016) g/cm2;术后8周时去卵巢组为(0.052±0.013) g/cm2,对照组为(0.095±0.028)g/cm2;两组分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).去卵巢组大鼠术后4周骨组织中LRP5、β-catenin和Runx2 mRNA表达水平明显减少,分别为0.97±0.04、0.58±0.05、0.86±0.03,对照组为1.02±0.06、1.04±0.05、1.07±0.21,两组各指标分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 Wnt/LRP5/β-catenin信号通路抑制可能是绝经后骨质疏松重要发病机制之一.     

罗格列酮对人卵巢癌SKOV3细胞中PPARγ和β-catenin表达的影响

目的：研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferators activated re-ceptorgamma，PPARγ）的特异性配体罗格列酮对人卵巢癌SKOV3细胞中PPAγ和β-catenin表达的影响，并探讨其机制。方法：设立对照组和实验组，采用荧光定量RT-PCR技术和免疫细胞化学方法检测干预前后细胞中PPARγ、β-catenin mRNA和蛋白水平的变化。结果：免疫细胞化学和荧光定量RT-PCR结果显示：SKOV3细胞表达PPARγ，罗格列酮作用于SKOV3细胞24h后PPARγ mRNA和蛋白表达水平上调，而β-cateninmRNA和蛋白表达水平下调。结论：罗格列酮通过活化PPARγ，下调β-catenin mRNA和蛋白表达水平，从分子水平上揭示PPARγ可能是基因治疗卵巢癌的理想靶点。     

长链非编码RNA TINCR、Wnt5a蛋白及β-catenin蛋白在重度子痫前期胎盘组织中的表达及临床意义

目的:研究重度子痫前期(SPE)患者胎盘组织中终末诱导分化长链非编码RNA-TINCR (TINCR)、Wnt5a蛋白、β-catenin蛋白的表达及临床意义。方法:选取2016年4月至2018年4月于中国医科大学附属盛京医院妇产科行剖宫产分娩的SPE患者30例(SPE组)和正常妊娠孕妇30例(对照组)。Real-time PCR(RT-PCR)法检测患者胎盘组织中TINCR相对表达水平,Western blot法及免疫组化法检测胎盘组织中Wnt5a蛋白、β-catenin蛋白的表达及定位情况。分析母婴不良预后与三者表达水平的相关性。结果:RT-PCR结果显示,SPE组胎盘组织中TINCR相对表达水平高于对照组,差异有统计学意义(2.424±1.125 vs 1.128±0.536,P0.001)。Western blot结果显示,Wnt5a蛋白、β-catenin蛋白均表达于胎盘组织中,SPE组胎盘组织中Wnt5a、β-catenin蛋白表达水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.001,P0.01)。免疫组化法显示,胎盘组织的细胞滋养细胞和合体滋养细胞细胞中均有Wnt5a蛋白、β-catenin蛋白表达,其中Wnt5a蛋白主要在合体滋养细胞的细胞质中表达,β-catenin蛋白主要在细胞滋养细胞的细胞质中表达。TINCR高表达及Wnt5a蛋白、β-catenin蛋白低表达可能与孕妇入院平均动脉压有关。结论:TINCR高表达及Wnt5a蛋白、β-catenin蛋白低表达可能参与PE的发病机制。