阿霉素肾病大鼠肾小管间质损害及益气血祛风湿方的干预作用

目的：探讨益气血祛风湿方对阿霉素肾病肾小管间质损伤的有效治疗作用,为临床应用提供实验室理论依据。方法：采用阿霉素一次性尾静脉注射诱导的肾病模型,造模2周后用益气血祛风湿方或黄芪当归水煎剂等干预治疗。实验于第6周末处死大鼠,留取肾脏。采用HE染色观察肾组织病理改变;RT-PCR测定肾组织中TGF-β1基因表达;采用免疫组化技术检测肾小管间质MCP-1、TGF-β1的蛋白表达。结果：肾脏病理结果显示,模型组大鼠肾小管上皮浊肿、严重的空泡变性;肾小管不同程度扩张;可见较多蛋白管型;肾间质出现小灶性～灶性炎细胞浸润和灶性纤维化。各治疗组大鼠肾小管扩张、浊肿及间质炎细胞浸润等病理改变均较模型组减轻,肾间质纤维化程度也显著低于模型组。模型组大鼠肾组织和小管间质TGF-β1表达均显著增多,MCP-1阳性表达也显著增加,各治疗组肾小管间质中的MCP-1、TGF-β1表达较模型组显著降低,益气血祛风湿方组作用显著优于芪归治疗组。结论：益气血祛风湿方可显著改善肾小管间质的炎症损伤和纤维化程度,机制可能与其显著降低肾小管间质炎症因子和促纤维化细胞因子表达的作用有关。     

丹参注射液对糖尿病大鼠TSP-1、TGF-β_1表达影响的研究

目的：观察丹参注射液对糖尿病大鼠的肾脏保护作用及肾组织凝血酶敏感蛋白-1（TSP-1）和转化生长因子β1（TGF-β1）表达水平的影响。方法：雄性SD大鼠30只随机分为3组,糖尿病组、丹参注射液治疗组和正常对照组。链脲佐菌素诱导糖尿病模型,分组处理给药,4周后处死。测定大鼠血糖、血肌酐及尿素氮水平,HE染色观察肾脏组织的病理改变,同时免疫组化法观察大鼠肾组织中TSP-1和TGF-β1蛋白表达的改变。结果：丹参注射液治疗组大鼠较糖尿病组大鼠体重和血糖出现显著性差异（P〈0.05）。糖尿病组大鼠肾脏组织光镜下可见肾小球的毛细血管球肥大、肾小囊腔呈裂隙状、肾小管上皮细胞显示空泡和颗粒变性;TSP-1、TGF-β1蛋白在上皮细胞和肾小球系膜细胞表达显著增高。丹参注射液治疗组上述病理变化明显改善,同时TSP-1和TGF-β1的表达也较糖尿病组降低。结论：丹参注射液可以改善糖尿病大鼠肾损伤,并且该保护机制可能是通过抑制TSP-1和TGF-β1的表达而起作用。     

土茯苓对糖尿病肾病大鼠肾组织形态学及相关因子ET、NO、TGF-β_1的影响

目的:观察土茯苓对DN大鼠肾组织形态学及相关因子的影响。方法:用尾静脉注射STZ致大鼠DN模型,按GLU值分层随机分成模型组,土茯苓高、中、低剂量组和阳性对照组,另取同批次7只大鼠为正常对照组;各组经口灌胃给予相应药物,每日1次,连续4周。放免法测定血NO、ET含量;取肾测定肾脏指数,进行肾脏常规病理观察和TGF-β1(免疫细化法)在肾小球内表达的检测。结果:土茯苓可显著提高DN大鼠NO水平和NO/ET值(P0.01,P0.05),不同程度地降低肾重和肾脏指数,抑制TGF-β1的表达;HE染色和PAS染色结果显示,高、中剂量组大鼠部分肾小球内系膜细胞增生,少量肾小管上皮空泡化,个别形成上皮管型,PAS染色弱阳性,部分基底膜增生,低剂量组部分肾小球体积增大,系膜细胞增生,部分肾小管上皮细胞空泡化,部分形成上皮管型,肾小球基底膜增生明显。结论:土茯苓能够一定程度的改善DN模型大鼠肾脏病理变化,抑制肾脏TGF-β表达和舒张血管是其部分作用机制。     

芪卫颗粒对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠肾组织转化生长因子β1蛋白及mRNA表达的影响

目的探讨芪卫颗粒对KK-Ay小鼠肾组织TGF-β1蛋白及mRNA表达的影响。方法采用自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠模型。将KK-Ay小鼠随机分为模型组、中药组、西药组,以C57BL/6J小鼠作为正常组,每组15只,连续治疗12周,用HE、PAS及Masson染色法观察肾脏病理改变。采用免疫组织化学法及实时荧光定量PCR法,检测肾组织中转化生长因子β1(TGF-β1)的蛋白及mRNA表达。结果模型组小鼠肾脏病理改变呈现肾小球肥大,系膜基质区增宽,系膜细胞增多,肾小管上皮细胞空泡样变性,肾小管扩张,灶状萎缩,偶见坏死,可见较多蛋白管型,间质内炎性细胞浸润,间质纤维化表现。肾脏细胞内的TGF-β1的蛋白及mRNA表达较正常组明显增多。经芪卫颗粒、缬沙坦处理后,小鼠肾脏病理改变较模型组明显减轻,TGF-β1的蛋白及mRNA表达明显降低(P<0.05)。结论芪卫颗粒可通过抑制TGF-β1的蛋白及mRNA表达起到防治糖尿病肾病的作用。     

益肾消结方对阿霉素肾病综合征大鼠TGF-β1、SMAD3表达的影响

目的：观察益肾消结方对阿霉素肾病综合征大鼠TGF-β1、SMAD3表达的影响。方法：选取雄性SD大鼠100只,适应性喂养1周后,随机分为健康组(20只)和模型组(80只),采用阿霉素注射法建立肾病综合征大鼠模型,去除造模后死亡大鼠9只,将造模成功大鼠随机分为模型对照组、治疗组、中药组各20只。健康组和模型对照组予生理盐水灌胃,治疗组予强的松+卡托普利片灌胃,中药组在治疗组的基础上加用益肾消结方颗粒灌胃,给药四周后,取尿液测量尿蛋白排出量,测量血清肝肾功、血脂等指标,取出大鼠肾组织行HE染色及PAS染色,分别观察肾小管及肾小球的组织形态结构变化,采用免疫组织化学检测大鼠肾小球中转化生长因子-β1(TGF-β1)及信号转导蛋白3(SMAD3)的变化及分布情况。结果：造模成功后,与健康组比较,模型组大鼠体质量均减轻,大鼠尿蛋白排出量均不同程度增加,光镜下可见模型组大鼠肾脏部分肾小球节段性硬化,肾脏皮质和髓质区域小管管腔内均可见蛋白管型的蓄积。灌胃4周后,与模型对照组比较,镜下可见治疗组及中药组大鼠损伤肾小球数量有所降低,小管内蛋白管型的蓄积均所减少;中药组大鼠尿蛋白排出量显著减少(P<...     

芪归益肾方对小鼠肾脏纤维化的延缓作用

目的探讨芪归益肾方对小鼠肾脏纤维化的延缓作用。方法建立单侧输尿管梗阻模型后,40只ICR小鼠随机分为假手术组、模型组、芪归益肾方组(10 g/kg)、贝那普利组(10 mg/kg)、川芎嗪组(100 mg/kg)。HE、Masson染色观察肾小管间质损伤情况;免疫组化、蛋白质印迹检测FN、TGF-β1、PAI-1、TM表达。结果与模型组比较,芪归益肾方组、贝那普利组、川芎嗪组明显改善肾小管间质纤维化,抑制FN、TGF-β1、PAI-1表达,升高TM表达,以芪归益肾方组更显著(P0.05)。结论芪归益肾方可有效延缓单侧输尿管梗阻小鼠肾脏纤维化,其作用机制可能与减少PAI-1表达,增加TM表达或减少其代谢有关。     

芪归益肾方对UUO小鼠肾组织TGF-β1/Smads/PI3K信号通路的影响

目的:利用单侧输尿管梗阻(UUO)模型探讨芪归益肾方通过调控转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads/磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)信号通路延缓肾脏纤维化进展的机制。方法:Balb/C小鼠32只,制造UUO肾病模型,根据干预的药物分为芪归益肾方组(中药组,10 g·kg~(-1)),洛汀新组(10 m L·kg~(-1)),模型组,假手术组。实验结束后取肾组织采用苏木素-伊红(HE)染色及Masson染色进行病理学检测,观察肾小管-间质指数的变化;采用免疫组化检测肾组织中TGF-β_1,Smads,PI3K,纤维连接蛋白(FN)蛋白的表达,蛋白免疫印迹(Western blot)及逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法对肾组织的TGF-β1,PI3K蛋白及mRNA表达进行分析。结果:与假手术组比较,模型组肾小管-间质指数明显升高,免疫组化显示TGF-β1,Smads,FN蛋白表达均明显升高,PI3K蛋白表达明显降低(P0.05),TGF-β_1蛋白及mRNA表达明显升高,PI3K蛋白及mRNA表达明显降低(P0.05);与模型组比较,中药组和洛汀新组明显降低肾小管-间质指数,免疫组化显示明显降低TGF-β_1,Smads,FN蛋白表达,明显升高PI3K蛋白表达(P0.05),明显降低TGF-β1蛋白及mRNA表达,明显升高PI3K蛋白及mRNA表达(P0.05)。结论:芪归益肾方对于UUO模型小鼠延缓肾脏纤维化有较好的治疗作用,其作用机制可能与调控TGF-β1/Smads/PI3K信号通路有关。     

黄芪对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织转化生长因子β1表达的影响

目的:动态观察黄芪(AM)对单侧输尿管梗阻(UUO)所致大鼠肾小管间质纤维化的拮抗作用及对转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,初步探讨其可能的分子作用机制.方法:SD大鼠随机分为假手术组、UUO模型组和黄芪治疗组.在造模后3,7,14 d处死动物,观察肾脏病理改变.采用免疫组化方法检测肾组织中TGF-β1和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达.用实时荧光定量RT-PCR检测大鼠TGF-β1 mRNA和α-SMA mRNA表达量.用westem blot检测大鼠TGF-β1蛋白表达量.结果:与假手术组相比,各时间点的UUO大鼠肾脏病理损害进行性加重,TGF-β1和α-SMA mRNA和蛋白表达随梗阻时间延长逐渐增高:黄芪治疗后可明显减轻UUO大鼠肾组织的肾小管损伤及.肾间质纤维化,使UUO大鼠肾组织中高表达的TGF-β1和α-SMA降低(p<0.05).结论:黄芪可能通过从核酸和蛋白水平抑制TGF-β1的表达,抑制肾小管上皮细胞转分化,减轻和改善UUO大鼠肾间质纤维化.     

三七总皂苷联合氨基胍治疗对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用及机制

目的探讨三七总皂苷(PNS)联合氨基胍(AG)对糖尿病肾病(DM)大鼠的肾脏保护作用及机制。方法以链脲佐菌素(STZ)诱导DM大鼠模型,之后将实验组随机划分为DMD组(D组)、PNS治疗组(P组)、AG治疗组(A组)和联合治疗组(P+A组),另外设置对照组(N组)。提供药剂8周后处死各实验组大鼠,行肾功和24 h尿蛋白定量检查;高碘酸-希夫(氏)染色剂染色(PAS)观察肾组织的病理变化;采用免疫散射比浊法检测血C-反应蛋白(CRP)水平;免疫放射法检测血肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;免疫组织化学法检测单核/巨噬细胞表面特异性标志抗原(ED-1)的表达;行实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)水平。结果 P组、A组、P+A组与D组相比大鼠肾脏病理改变明显减轻,其中P+A组大鼠肾脏病理情况改善最明显;P组、A组、P+A组血糖、肾小球体积(V)、血肌酐、24 h尿蛋白、血CRP、TNF-α较D组明显降低(P0.05),其中P+A组上述指标值最低。免疫组织染色实验结果表明:N组大鼠肾小球内、肾小球周围、肾小管及间质存在较少的ED-1阳性染色(巨噬细胞)结果;D组大鼠的上述相同肾脏部分ED-1阳性细胞染色显著高于对照N组(P0.05);P组、A组、P+A组ED-1阳性染色程度显著降低(P0.05),且P+A组ED-1阳性染色程度最轻(P0.05)。实时荧光定量PCR检测结果显示:与对照组相比,N组大鼠肾脏组织有基础量的TGF-β1 mRNA表达,D组TGF-β1的表达程度存在显著升高,和N组的数据差异有统计学意义(P0.05);与D组相比,P组、A组、P+A组TGF-β1 mRNA表达水平明显减少(P0.05),且P+A组中TGF-β1 mRNA表达程度显著小于P组、A组(P0.05)。结论 PNS和AG均能通过减少TGF-β1和炎症反应因子水平,可以改善DM大鼠肾脏的病理损伤。二者联用肾保护作用优于单一药物治疗。三七总皂苷联合氨基胍治疗糖尿病肾病机制可能与降低尿蛋白、对抗炎症反应,抑制TGF-β1的表达等因素密切相关。     

蚓激酶对UUO模型大鼠肾间质纤维化的影响北大核心CSCD

目的研究蚓激酶对单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾间质纤维化(RIF)的影响及作用机制。方法采用单侧输尿管结扎术的方法制备UUO大鼠模型。大鼠随机分为假手术组,模型组,蚓激酶低、中、高剂量组(0.9×10~5,1.8×10~5,3.6×10~5U·kg^(-1)),灌胃给药,连续14 d。生化指标检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量;HE染色和Masson染色观察肾脏组织病理学变化;采用免疫组化法检测肾脏组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠的Scr、BUN含量有不同程度升高,蚓激酶各给药组的Scr、BUN含量有不同程度降低,但各组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。模型组大鼠梗阻侧肾脏组织部分肾小管上皮细胞空泡变性,部分管腔扩张或萎缩坏死,可见炎性细胞浸润、成纤维细胞增生和RIF,蚓激酶不同剂量干预治疗后,上皮细胞变形萎缩、炎性细胞浸润及间质纤维化程度均明显改善。与假手术组比较,模型组的TGF-β1、α-SMA及Col-Ⅰ阳性表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,蚓激酶各剂量组的TGF-β1、α-SMA、Col-Ⅰ阳性表达水平明显降低(P<0.05)。结论蚓激酶具有抗RIF的作用,可能与其抑制肾脏组织TGF-β1、α-SMA和Col-Ⅰ的表达有关。     

针刺捻转补泻手法对SHR大鼠肾脏TGF-β1表达的影响

目的:研究针刺捻转补泻手法对SHR(spontaneous hypertensive rats,自发性高血压大鼠)肾脏中TGF-β1(transforming growth factor-β1,转化生长因子-β1)表达的影响及其与肾损害的关系,探讨其保护作用机制。方法:60只12周龄的雄性SHR大鼠被随机分成5组,分别为捻转补法组(A)、捻转泻法组(B)、平补平泻组(C)、针刺留针组(D)、模型组(E),均为高血压组,每组12只;12只12周龄雄性WKY大鼠作为空白对照组。针刺处理28天后,分别取各组大鼠肾脏,观察肾脏病理学改变;应用免疫组化法检测TGF-β1在各组肾脏中的表达。结果:TGF-β1在空白组肾小管的表达无或极微量;在模型组的肾小球有少量表达,但在肾小管的表达显著,且随高血压病程的进展,TGF-β1的表达显著性增加(P0.01):B组与E组比较有明显差异(P0.05),A、C、D组之间比较无明显差异(均P0.05)。结论:捻转泻法是积极有效的降压治疗方法,会减少高压血流对血管内皮和平滑肌细胞的机械性损伤,改善血管内皮功能,减少TGF-β1的分泌,从而降低高血压肾损害的发生率。     

蚓激酶对UUO模型大鼠肾间质纤维化的影响

目的研究蚓激酶对单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾间质纤维化(RIF)的影响及作用机制。方法采用单侧输尿管结扎术的方法制备UUO大鼠模型。大鼠随机分为假手术组,模型组,蚓激酶低、中、高剂量组(0.9×10~5,1.8×10~5,3.6×10~5U·kg~(-1)),灌胃给药,连续14 d。生化指标检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量;HE染色和Masson染色观察肾脏组织病理学变化;采用免疫组化法检测肾脏组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠的Scr、BUN含量有不同程度升高,蚓激酶各给药组的Scr、BUN含量有不同程度降低,但各组之间的差异无统计学意义(P0.05)。模型组大鼠梗阻侧肾脏组织部分肾小管上皮细胞空泡变性,部分管腔扩张或萎缩坏死,可见炎性细胞浸润、成纤维细胞增生和RIF,蚓激酶不同剂量干预治疗后,上皮细胞变形萎缩、炎性细胞浸润及间质纤维化程度均明显改善。与假手术组比较,模型组的TGF-β1、α-SMA及Col-Ⅰ阳性表达水平明显升高(P0.05);与模型组比较,蚓激酶各剂量组的TGF-β1、α-SMA、Col-Ⅰ阳性表达水平明显降低(P0.05)。结论蚓激酶具有抗RIF的作用,可能与其抑制肾脏组织TGF-β1、α-SMA和Col-Ⅰ的表达有关。     

肾病Ⅰ号方醋酸乙酯提取物对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的探讨肾病I号方醋酸乙酯提取物(ethyl acetate extract of Shenbingyihao Decoction,EASD)对肾纤维化大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法 50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、洛丁新(洛丁新片1.67 mg/kg)组、肾病I号方(生药18.75 g/kg)组、EASD(EASD,300 mg/kg)组,除假手术组外,其他各组采用单侧输尿管结扎的方法制备单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型。各组ig给药14 d后处死大鼠,采集血清,检测尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr)水平,取肾组织行HE和Masson染色评价肾小管间质纤维化损伤程度,采用免疫组织化学染色方法和实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测TGF-β1、a-SMA蛋白及m RNA的表达情况。结果与假手术组比较,模型组和3个给药组大鼠血清Scr、BUN升高(P0.05),间质纤维化程度加重(P0.05),肾组织TGF-β1、a-SMA表达明显增多(P0.05)。与模型组比较,3个给药组大鼠的血清Scr、BUN下降(P0.05),肾组织TGF-β1、a-SMA表达下降(P0.05)。结论肾病I号方及EASD能够延缓肾纤维化的发生发展,其作用机制可能是通过下调TGF-β1、a-SMA的表达,从而达到保护肾脏的作用。     

益气活血方对肾间质纤维化大鼠肾脏TGF-β/smad信号通路及结缔组织生长因子的影响

目的:观察益气活血方对肾间质纤维化大鼠肾脏TGF-β/smad信号通路及结缔组织生长因子(connectivetissue growth factor,CTGF)的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠30只诱导建立单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)致肾小管间质纤维化模型,模型成功后随机分为模型组,益气活血方大、中、小剂量组和西药组,另取健康雄性Wistar大鼠6只设为假手术组。3周后处死大鼠,称取体质量;取血清检测肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(bloodurea nitrogen,BUN)水平;取肾脏组织采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法和免疫印迹法检测各组转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)、smad2、smad7、CTGF mRNA和蛋白表达水平;苏木精-伊红染色和Masson染色检测各组肾间质纤维化指数。结果:模型组大鼠血清Cr和BUN值较假手术组偏高;与模型组比较,大剂量益气活血方可以降低Cr和BUN值,但差异无统计学意义。苏木精-伊红染色和Masson染色显示模型组肾小管上皮细胞萎缩,大部分肾小管管腔扩张,间质纤维组织增生,大量炎性细胞浸润,肾小球数目明显减少,胶原成分显著增加。益气活血方大剂量组、中剂量组和西药福辛普利钠组大鼠肾间质炎性细胞浸润、纤维组织增生、肾小管扩张情况较模型组明显减轻,胶原成分明显减少。与假手术组比较,模型组大鼠肾脏组织中TGF-β、smad2和CTGFmRNA以及蛋白表达水平明显升高(P0.05),smad7的表达水平则明显降低(P0.05)。与模型组比较,益气活血方大剂量组和中剂量组大鼠TGF-β、smad2、CTGF mRNA和蛋白表达明显下降(P0.01,P0.05),smad7表达明显升高(P0.01,P0.05)。结论:UUO大鼠肾组织中CTGF mRNA的表达可能通过TGF-β/smad信号通道进行调节;益气活血方可以通过下调TGF-β、smad2和上调smad7的表达来抑制CTGF表达,进而遏制肾纤维化的进展。     

肾炎四味片对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的 探讨肾炎四味片对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响及其作用机制.方法 采用单侧输尿管结扎(UUO)肾间质纤维化模型,将SD大鼠60只随机分为4组,即假手术组、肾炎四味片假手术组、模型组和肾炎四味片治疗组,每组15只,分别于术后第3、7、14 d每组大鼠各取5只.用HE和Masson染色法观察肾脏病理改变, 用免疫组化方法检测肾小管间质中转化生长因子β1(TGF-β1)和血小板凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)表达情况,对结果进行半定量分析.结果 假手术组和肾炎四味片假手术组肾小管间质胶原纤维相对面积及TGF-β1、TSP-1的表达组内及组间比较无统计学意义(P＞0.05).模型组肾小管间质胶原纤维相对面积及TGF-β1、TSP-1的表达,随梗阻时间延长而增加(P＜0.05),且与同期假手术组比较差异有统计学意义(P＜0.05);在术后各时间点,肾炎四味片治疗组肾小管间质胶原纤维相对面积及TGF-β1、TSP-1的表达较模型组显著减少(P＜0.05),但仍高于假手术组(P＜0.05).结论 肾炎四味片缓解UUO大鼠肾间质纤维化可能部分是通过降低肾脏TGF-β1和TSP-1的表达而实现的.     

肾病Ⅰ号方对单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的影响

目的:观察肾病Ⅰ号方对肾纤维化大鼠α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅳ型胶原(COL-Ⅳ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:24只雄性SD大鼠随机分为假手术组、UUO模型组、洛丁新组和肾病Ⅰ号方组,每组6只。采用单侧输尿管结扎的方法制备大鼠肾纤维化模型。假手术组和UUO模型组每日予2 m L生理盐水灌胃,洛丁新组按洛丁新片1.67 mg·kg~(-1)·d~(-1)给药,肾病Ⅰ号方组按18.75 g·kg~(-1)·d~(-1)给药。灌胃14 d后处死大鼠,采集血清检测尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和血肌酐(serum creatinine,SCr);取肾组织行HE染色评价肾小管间质纤维化损伤程度;采用免疫组织化学染色方法检测α-SMA、COL-Ⅳ、TGF-β1在肾组织中的表达情况;免疫印迹试验(Western blot)检测α-SMA相对蛋白表达量。结果:与模型组比较,洛丁新组、肾病Ⅰ号方组大鼠的SCr,BUN明显下降(P<0.05),肾组织α-SMA、COL-Ⅳ、TGF-β1表达量下降显著,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:肾病Ⅰ号方对肾纤维化具有一定改善作用,其作用机制可能是通过下调α-SMA、COL-Ⅳ、TGF-β1的表达,从而达到肾脏保护的作用。     

活血祛瘀方对单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β_1和CTGF表达的影响

目的通过研究活血祛瘀方对单侧输导管梗阻(UUO)大鼠肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨其抗肾间质纤维化的作用机制。方法建立大鼠UUO模型,48只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、代文组、活血祛瘀方组,于治疗4周后腹主动脉采血检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN);收集24 h尿液检测N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、β2-微球蛋白(β2-MG);取梗阻侧肾组织,HE染色观察肾小管间质病变;免疫组织化学染色观察TGF-β1、CTGF的阳性表达,并进行半定量分析。结果 与假手术组相比,模型组大鼠血SCr、BUN和尿NAG、β2-MG水平以及TGF-β1、CTGF阳性表达显著升高。与模型组相比,活血祛瘀方组大鼠BUN水平降低,尿β2-MG、NAG排泄减少;活血祛瘀方组和代文组肾间质TGF-β1、CTGF阳性表达显著下调。结论活血祛瘀方可降低UUO大鼠尿NAG、β2-MG和血BUN水平,表明具有保护肾小管功能和改善肾功能作用,可能因其能抑制肾间质TGF-β1、CTGF过度表达,从而减缓肾纤维化病程的进展。     

补肾健脾活血解毒煎剂对单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1及α-SMA表达的影响

目的:研究补肾健脾活血解毒煎剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨其抗肾间质纤维化的作用机制。方法:建立大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型,50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、代文组、补肾健脾活血解毒煎剂低、中剂量组,于造模4周后腹主动脉采血检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),收集24 h尿液检测N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG)、β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG),取梗阻侧肾组织,HE、Mason染色观察肾小管间质病变,免疫组织化学染色观察α-SMA、TGF-β1在肾间质的阳性染色表达,并进行半定量分析。结果:与假手术组比较,模型组大鼠Scr、BUN、尿NAG、β2-MG水平以及α-SMA、TGF-β1阳性表达显著升高(P0.01);与模型组比较,补肾健脾活血解毒煎剂低、中剂量组大鼠Scr、BUN水平降低,尿NAG、β2-MG排泄减少(P0.05或P0.01),与代文组相当;补肾健脾活血解毒煎剂低、中剂量组和代文组α-SMA、TGF-β1阳性表达均显著下调(P0.01)。结论:补肾健脾活血解毒煎剂可能通过改善肾小球、肾小管功能,抑制α-SMA、TGF-β1的表达,从而抑制肾小管上皮细胞间充质转分化,达到改善肾间质纤维化的作用。     

Nrf2/HO-1通路介导的及己醇提取物致大鼠肾毒性研究

目的研究及己根、茎、叶醇提取物所致大鼠肾毒性及机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分成空白(KB)组、根醇(GC)组、茎醇(JC)组和叶醇(YC)组,每组10只。GC、JC、YC三组分别给予相应醇提取物4.14、3.21、1.17 g/kg灌胃。KB组给予等体积0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液灌胃,每天1次,连续灌胃14天。绘制体重变化曲线,计算肾脏指数,制作肾脏组织切片,进行HE染色及组织病理学观察。检测血清尿素氮(BUN,速率法)、肌酐(SCr,酶法)和尿酸(UA,酶法)及肾脏组织总超氧化物歧化酶(T-SOD,羟胺法)和丙二醛(MDA,TBA法)含量;Western Blot法检测Nrf2/HO-1通路中Nrf2、HO-1蛋白含量;免疫组化法检测肾脏TGF-β_1阳性表达情况。结果与KB组比较,JC组BUN、UA含量升高(P0.01);JC组和YC组SCr、MDA含量升高(P0.01),T-SOD含量及HO-1、Nrf2蛋白表达降低(P0.01,P0.05);GC组、JC组和YC组大鼠肾脏TGF-β_1表达水平升高(P0.01)。与GC组比较,JC组BUN、UA含量升高(P0.01);JC组和YC组SCr、MDA含量及TGF-β_1表达升高(P0.01,P0.05),T-SOD含量及HO-1、Nrf2蛋白表达降低(P0.01)。与JC组比较,YC组BUN、SCr、UA、MDA含量降低(P0.01,P0.05),T-SOD含量升高(P0.01)。KB组镜下未见明显病理变化;GC组偶见肾小管出血和上皮细胞脱落;JC组肾小管上皮细胞肿胀、坏死、脱落,炎细胞浸润明显,并出现严重的血管扩张充血和淤血;YC组肾小管上皮细胞脱落坏死,伴有淤血现象。结论及己茎和叶部位的肾毒性较大,根部位的肾毒性较小,其机制可能与氧化应激损伤有关。     

参芪保肾颗粒剂对阿霉素肾病大鼠转化生长因子β1表达的影响

目的:观察参芪保肾颗粒剂对阿霉素肾病大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,探讨本药延缓CRG进展的作用机理.方法:采用阿霉素肾病大鼠,分为5组,分别给予参芪保肾颗粒剂2.0g/k·d-1、5.0g/kg·d-1及0.25%苯那普利10mg/kg·d-1灌胃,给药至第18W.观察24h尿蛋白定量、血肌酐、血尿素氮、肌酐清除率,肾小管-间质病理变化,并用免疫组化法观察转化生长因子β1(TGF-β1)在肾组织的表达.结果:给药组尿蛋白含量、血Scr、BUN明显降低(P＜0.01),肾小管-间质病理变化,给药组明显减轻,TGF-β1主要表达于肾小球内皮细胞、肾小管上皮细胞,给药组阳性表达率明显减少.结论:参芪保肾颗粒剂可使尿蛋白量减少,降低血Ccr、BUN,改善肾功能,减轻肾小管-间质损伤,使TGF-β1在肾脏组织内的表达明显下调,此可能是本药延缓CRF进展的作用机理之一.