子痫前期中miR-141表达及其对MCL-1的影响

目的探讨子痫前期(PE)患者中 miR-141表达及其对髓细胞白血病因子1(MCL-1)的影响。方法选取2018年1月至2019年1月来海南省人民医院治疗的PE孕妇40例为研究组(轻度、重度各20例),另选择同期在本院体检的正常妊娠孕妇20例为对照组。采用RT-qPCR检测血浆及胎盘组织中miR-141、MCL-mRNA表达含量,采用免疫组化法检测收集样本中MCL-1蛋白水平。分析各组研究对象胎盘、血浆中miR-141、MCL-1表达水平、孕妇临床特征与妊娠结局的相关性。结果对照组血浆及胎盘组织中MCL-1蛋白、MCL-1 mRNA表达水平高于PE组,miR-141mRNA表达水平低于PE组,差异均有统计学意义(P0.05)。血浆中miR-141与MCL-1mRNA表达水平、胎盘中miR-141与MCL-1mRNA、MCL-1表达水平呈负相关(P0.05)。血浆、胎盘中miR-141 mRNA表达水平与患者分娩孕周、新生儿出生体重呈负相关,而与患者收缩压、舒张压水平呈正相关(P0.05),而MCL-1mRNA表达则相反。结论 PE患者血浆、胎盘组织中miR-141呈高表达,其参与PE发病可能是通过抑制MCL-1表达实现。     

子痫前期患者胎盘组织中microRNA-205-5p的表达及其对血管内皮生长因子A的影响

目的探讨子痫前期(PE)患者胎盘组织中microRNA-205-5p(miR-205-5p)的表达情况及其对血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)表达的影响。方法选取2017年12月至2019年6月于河北省人民医院产科住院行剖宫产分娩的PE患者52例(PE组)和正常妊娠孕妇55例(对照组)。荧光定量PCR(RT-qPCR)检测两组患者胎盘组织中miR-205-5p与VEGFA mRNA的表达情况,应用双荧光素酶报告基因实验验证两者的靶向关系,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析胎盘组织中miR-205-5p表达对PE诊断的价值。结果 RT-qPCR结果显示,与对照组相比,PE组胎盘组织中miR-205-5p的表达量显著升高,VEGFA m RNA的相对表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),且胎盘组织中miR-205-5p表达量与VEGFA mRNA表达量呈显著负相关关系(r=-0.652,P<0.05),双荧光素酶报告基因实验证实miR-205-5p与VEGFA存在靶向作用关系。胎盘组织中miR-205-5p表达水平预测PE的ROC曲线下面积为0.933(95%CI 0.8880.978,P<0.05),最佳截断点为1.55,预测PE的灵敏度和特异度分别为84.6%和90.9%。结论胎盘组织中miR-205-5p表达增加可能通过抑制VEGFA的表达在PE发生中起重要作用,且miR-205-5p表达水平对PE的诊断有重要价值。     

miR-210和HIF-1α在子痫前期患者胎盘中的表达关系研究

目的:检测子痫前期(PE)患者胎盘中miR-210和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达水平,分析二者表达相关性及其与PE患者临床病理的关系。方法:选取深圳市南山区人民医院(我院)2016年1月—2018年2月收治的46例PE孕妇为研究对象,根据子痫前期病情程度分为轻度组21例和重度组25例,另选择同期在我院孕检正常并在妊娠结束行剖宫产孕妇34例为对照组,通过常规指标检测分析PE患者临床症状,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测胎盘中miR-210、HIF-1αmRNA表达,采用免疫组织化学染色法检测胎盘中HIF-1α表达,分析PE患者胎盘中miR-210和HIF-1α的表达相关性及与患者基本病理资料的关系。受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-210、HIF-1αmRNA表达水平对PE的诊断价值。结果:PE患者收缩压(SBP)、舒张压(DBP)和尿蛋白(PRO)水平高于对照组(P0.05),且重度PE组高于轻度PE组(P0.05)。PE患者胎盘组织中miR-210、HIF-1α水平高于对照组(P0.05),且重度PE组高于轻度PE组(P0.05)。胎盘组织中miR-210、HIF-1α水平与PE患者SBP、DBP、PRO水平及PE严重程度相关(P0.05)。PE患者胎盘中miR-210与HIF-1α表达呈正相关(P0.05)。ROC分析显示miR-210、HIF-1αmRNA的截断值分别为1.06、1.27时,诊断PE时的敏感度分别为80.43%和78.26%,特异度分别为70.59%和82.35%。结论:miR-210和HIF-1α在PE患者胎盘组织中高表达,二者表达水平呈正相关,共同参与PE发生、发展。     

微小RNA-101在子痫前期胎盘组织中表达及调控机制研究

目的探讨微小RNA-101(miR-101)在子痫前期(PE)患者胎盘组织中的表达和作用及可能的调控机制。方法收集2012年1月至2015年12月咸宁市中心医院收治的40例PE患者和40例正常孕妇胎盘组织,采用荧光定量PCR分析胎盘组织中miR-101的表达情况。体外转染miR-101抑制物至人滋养层细胞系(HTR-8/SVneo),并观察其对细胞侵袭及凋亡的影响。通过生物信息学,双荧光素酶报告基因试验及蛋白质印迹分析miR-101靶基因。结果 miR-101在PE患者胎盘组织的表达量明显高于正常胎盘组织(P0.05),而基质金属蛋白酶-1(MMP-1)在PE患者胎盘组织的表达量明显低于正常胎盘组织(P0.05),二者表达水平呈明显负相关(P0.05)。体外敲低miR-101可明显促进HTR-8/SVneo细胞的侵袭(P0.05),并抑制细胞凋亡(P0.05)。MMP-1是miR-101的靶基因,miR-101可通过与MMP-1信使RNA的3’-非编码区(3’-UTR)结合并抑制其翻译。体外敲低miR-101可显著增加MMP-1的蛋白表达水平(P0.05)。结论 miR-101在PE患者胎盘组织中呈现高表达,敲低miR-101可显著促进胎盘细胞的侵袭并抑制其凋亡。MMP-1是miR-101的下游直接靶基因,提示miR-101可能通过负性调控MMP-1参与子痫前期的发生发展过程。     

miR-574-5p在子痫前期中的表达研究

目的探讨miR-574-5p在子痫前期患者血浆中的表达水平及其与胎盘组织中表达量的关系。方法收集2014年2月至2015年12月在深圳市罗湖区人民医院住院的子痫前期和同期住院正常晚期妊娠孕妇各20例,应用Real Time PCR法检测血浆和胎盘组织miR-574-5p的表达水平。结果子痫前期患者的血浆和胎盘组织中miR-574-5p表达量较正常对照组均明显升高。与对照组(1.01±0.03)相比,子痫前期组的血浆中miR-574-5p的表达量(3.80±0.19)显著升高(P0.01);子痫前期组的胎盘组织miR-574-5p水平(4.15±0.18)明显高于正常对照组(1.13±0.10)(P0.01);且随着子痫前期血浆中miR-574-5p表达量的增加,胎盘组织中miR-574-5p表达量也呈现增高趋势,二者具有明显的相关性(r=0.843)。结论 miR-574-5p有望成为子痫前期筛查的生物标志物。     

miR-223-3p靶向NLRP3调控子痫前期胎盘中炎性反应的机制研究

目的:探讨miR-223-3p能否通过靶向NLRP3参与调节子痫前期(PE)胎盘中的炎性反应。方法:选取2018年12月至2020年01月在江苏省苏北人民医院住院行剖宫产分娩的60例孕妇,其中PE组30例,正常对照组30例。采用实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹、免疫组化法对胎盘组织中NLRP3和miR-223-3p的表达模式进行评估。通过生物信息学软件和双荧光素酶报告基因实验探究miR-223-3p与NLRP3的靶向关系。利用脂多糖(LPS)诱导HTR8/SVneo细胞构建PE胎盘滋养细胞炎症模型。在炎症模型中转染miR-223-3p过表达或miR-223-3p阴性对照质粒,评估miR-223-3p过表达对NLRP3炎性小体相关基因及下游因子的调控作用。结果:与正常对照组相比,PE胎盘中NLRP3在mRNA和蛋白水平上表达均显著上调(P<0.05),而miR-223-3p表达明显下调(P<0.05)。NLRP3是miR-223-3p的一个靶基因。在LPS诱导的HTR8/SVneo细胞炎症模型中,过表达miR-223-3p可有效抑制NLRP3炎性小体的激活(P<0.05)、下游炎性因子的分泌(P<0.05)和细胞焦亡(P<0.05)。结论:miR-223-3p可能通过靶向NLRP3抑制PE胎盘中的炎症反应和细胞焦亡,为PE的治疗提供了一个新的潜在治疗策略。     

ALX-R在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其与NF-κB p65的相关性

目的:观察子痫前期(PE)患者胎盘组织中脂氧素A4受体(ALX-R)、核因子-κB p65(NF-κB p65)表达的变化,探讨两者在PE发生发展中的作用及相关性。方法:采用RT-PCR方法、免疫组化法检测PE组(轻度10例、重度20例)与对照组(20例)孕妇胎盘组织中ALX-R、NF-κB p65 mRNA和蛋白的表达水平。结果:(1)胎盘组织中ALX-RmRNA表达水平随病情严重程度而明显下降,重度PE组低于轻度PE组、对照组(P<0.01);NF-κB p65 mRNA表达水平随病情严重程度而升高,重度PE组高于轻度PE组、对照组(P<0.05);(2)胎盘组织中PE组ALX-R蛋白的表达强度低于对照组(P<0.01);PE组NF-κB p65蛋白的表达强度高于对照组(P<0.01);(3)重度与轻度PE组胎盘组织中ALX-R与NF-κB p65的mRNA和蛋白表达水平无明显相关性;对照组胎盘组织中ALX-R与NF-κB p65的mRNA和蛋白表达水平呈负相关(r=-0.86,P<0.01;r=-0.63,P<0.01)。结论:ALX-R与NF-κB p65的表达,可能与PE发生发展的病理生理过程密切相关。     

PPAR-γ和COX-2在子痫前期患者血浆中的表达及其意义

目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)和环氧合酶-2(COX-2)的相关性及其在子痫前期(PE)发生发展中的作用。方法:利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测30例正常妊娠孕妇(对照组)和60例PE患者(轻度PE组24例,重度PE组36例)血浆中PPAR-γ、COX-2蛋白表达水平,分析二者在PE中的相关性以及和新生儿出生体质量的关系。结果:PPAR-γ在轻度PE组母体血浆中明显高表达,与对照组和重度PE组比较差异有统计学意义(P0.05),在重度PE组显著降低,与对照组比较差异具有统计学意义(P0.05);COX-2在轻度PE组和重度PE组母体血浆中的蛋白表达量明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);PPAR-γ与COX-2的Spearman相关分析显示二者在轻度PE组的孕妇血浆的表达量呈正相关性(r=0.414,P=0.045),在重度PE组中呈负相关性(r=-0.445,P=0.007);COX-2的蛋白表达量与分娩孕周具有临界负相关关系(r=-0.245,P=0.059);PPAR-γ的蛋白表达量与收缩压、舒张压均呈负相关,而与分娩孕周呈正相关。结论:PPAR-γ与COX-2的蛋白表达水平在重度PE患者血浆中呈负相关,提示二者可能相互影响共同参与PE的发病。     

重度子痫前期胎盘组织中NFAT5表达与围生儿结局的相关性研究

目的:探讨核转录因子5(NFAT5)在重度子痫前期(sPE)胎盘中的表达及其与围生儿结局的相关性。方法:收集2015年1月至2016年1月在郑州大学第三附属医院行剖宫产分娩的sPE孕妇(试验组)60例。选取同期非PE行剖宫产术的孕妇60例作为对照组。免疫组化法检测胎盘组织中NFAT5表达;RT-PCR法检测胎盘组织中NFAT5 mRNA表达。对胎盘中NFAT5 mRNA水平与围生儿结局进行相关分析。结果:sPE组的新生儿体重、胎盘重量、Apgar评分及分娩孕周均低于对照组(P均0.05)。两组胎盘中NFAT5蛋白多位于胎盘滋养细胞的胞核与胞质中,绒毛间质细胞内有少量表达。sPE组的NFAT5蛋白和mRNA表达水平均高于对照组,差异均有统计学意义(t=-40.434,P=0.001;t=-6.696,P=0.001)。sPE组的NFAT5 mRNA相对表达量与新生儿出生体重、胎盘重量、分娩孕周均呈负相关(r分别为-0.554,-0.698,-0.612,P均0.05),与孕妇体重指数(BMI)呈正相关(r=0.630,P=0.012)。结论:sPE组胎盘组织中NFAT5表达水平升高,与围生儿不良结局有关。     

妊娠期糖尿病孕妇胎盘和大网膜脂肪组织TNF-α及IL-1β的表达及其与胰岛素抵抗的关系

目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇胎盘和大网膜脂肪组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的表达及其与胰岛素抵抗的相关性.方法:采用荧光实时定量PCR检测20例GDM孕妇(GDM组)和20例正常孕妇(对照组)胎盘和大网膜脂肪组织中TNF-α、IL-1β mRNA的相对表达量,测定两组孕妇空腹血浆葡萄糖(FPG)、胰岛素(FIN)水平,计算出胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),并进行相关性分析.结果:①与对照组相比,GDM组孕妇胎盘和脂肪组织中TNF-α mRNA的表达量升高,差异有统计学意义(P=0.01;P=0.01).②两组孕妇胎盘和脂肪组织中IL-1β mRNA的表达比较,差异无统计学意义(P＞0.05).③GDM组孕妇胎盘和大网膜脂肪组织TNF-α mRNA表达水平与HOMA-IR呈明显正相关(r=0.54,P=0.01;r=0.61,P=0.01);对照组大网膜脂肪组织TNF-α mRNA表达水平与HOMA-IR呈明显正相关(r =0.52,P=0.02).④两组孕妇胎盘和大网膜脂肪组织IL-1β mRNA表达水平与HO-MA-IR均无明显相关性(P＞0.05).结论:胎盘和脂肪组织TNF-α的过度表达可能是GDM孕妇胰岛素抵抗的重要原因,IL-1β在胰岛素抵抗过程中发挥的作用并不明显.