金龟子绿僵菌固态发酵生产壳聚糖酶优化工艺的研究

目的 研究一种绿僵菌固态发酵产壳聚糖酶的新方法.方法 使用正交实验方法研究以日本根霉液态发酵后的菌丝体粉末为氮源,麸皮为碳源时,绿僵菌固态发酵产壳聚糖酶的最佳条件.结果 在起始pH5.0,27℃下培养120 h,C/N为l:4、固液比为1:1.4,绿僵菌发酵产壳聚糖酶活性最高.在优化的条件下,固态发酵产壳聚糖酶的最大活性可达35.08 U/g干培养基.     

去乙酰基壳聚糖在亲和层析纯化胰蛋白酶中的应用

首次用环氧氯丙烷活化的去乙酰基壳聚糖（Ｃｈｉｔｏｓａｎ）为载体,鸡卵粘蛋白（Ｏｖｏｍｕ－ｃｏｉｄ,简称ＣＨＯＭ）为配基,制备了胰蛋白酶（Ｔｒｙｐｓｉｎ）的亲和吸附剂,纯化效率与琼脂糖（Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ）相近,为４７倍,纯化的Ｔｒｙｐｓｉｎ经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳为单一区带。表明Ｃｈｉｔｏｓａｎ可以代替Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ作为亲和层析的载体。     

聚苯乙烯载体亲和层析纯化尿激酶

聚苯乙烯经磺化后连接手臂６－氨基己酸，然后偶联配基对氨基苯甲脒，制成亲水性的亲和载体。载体的最适配基密度为每克湿载体３２μｍｏｌ，最适吸附条件为ｐＨ７．５、０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲液（含ＮａＣｌ０．５ｍｏｌ／Ｌ）。在ｐＨ４．０、０．１ｍｏｌ／Ｌ醋酸缓冲溶液（含ＮａＣｌ０．５ｍｏｌ／Ｌ）中，采用０～１ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＳＣＮ梯度洗脱，可将比活８．３３μｍｏｌ·Ｓ－１·ｍｇ－１的粗酶纯化５０倍，收率大于５３％。     

Purification of Avidin with Affinity Chromatography on 2-1minobiotin-AH-Sepharose 4B

The affinity between 2-iminobiotin and avidin decreases with the decreasing ofpH.According to this property,avidin was purified in its natural state without alterationof its properties with affinity chromatography on 2-iminobiotin-AH-sepharose 4B column.The purified avidin had high activity to bind with biotin,showed one band onpolyacrylamide electrophoresis,and was much purer than the products commerciallyavailable.     

应用抗人Clq单克隆抗体亲和层析柱分离人血清中Clq的研究

本文报道了一种以抗人Cl_q单克隆抗体亲和层析柱分离人血清中Cl_q的方法。该法简便快速,可于24～48小时内完成。Cl_q产量约为7～10mg/100ml血清。该制剂经双向扩散及免疫电泳试验,未发现免疫球蛋白污染;SDS-PAGE分析表现典型的Cl_q亚单位结构;经红细胞凝集和胶乳凝集试验测定,其生物学活性比较好。抗人Cl_q单克隆抗体Sepharose 4B柱反复使用10余次,4℃冰箱保存将近一年仍保持活性。