血小板膜糖蛋白特异性抗体与免疫性血小板减少症患者疗效及出血程度的关系

目的探讨血小板膜糖蛋白(GP)特异性抗体与原发免疫性血小板减少症(ITP)患者临床疗效及出血程度之间的关系。方法 2013年10月至2015年6月40例新诊断ITP患者纳入研究,所有患者均接受口服大剂量地塞米松(40 mg/d×4 d)治疗。应用改良单克隆抗体俘获血小板抗原技术(MAIPA)检测患者体内抗血小板GPⅡb/Ⅲa和GPⅠb/Ⅸ抗体,分析抗体与ITP患者疗效及出血程度的关系。结果大剂量地塞米松治疗后,血小板膜糖蛋白特异性抗体阴性的患者疗效(95.0%)明显优于抗体阳性的患者(60.0%)(P0.05),抗GPⅠb/Ⅸ抗体阴性的患者疗效(90.9%)优于抗GPⅠb/Ⅸ抗体阳性的患者(61.1%)(P0.05)。抗体阳性患者2级出血(55.0%)高于抗体阴性患者(20.0%)(P0.05)。1级出血时抗GPⅡb/Ⅲa抗体阳性(9.5%)、抗GPⅡb/Ⅲa与抗GPⅠb/Ⅸ双抗体阳性(28.6%)出血程度均高于抗GPⅠb/Ⅸ阳性,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。2级出血时抗GPⅠb/Ⅸ抗体阳性(33.3%)、抗GPⅡb/Ⅲa与抗GPⅠb/Ⅸ双抗体阳性(40.0%)出血程度比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论抗GPⅠb/Ⅸ抗体阳性的ITP患者对大剂量地塞米松治疗的反应差,血小板膜糖蛋白特异性抗体阳性的患者较抗体阴性患者临床出血程度重。     

人血小板功能抗体及其片段的识别

目的研究特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者血小板膜糖蛋白（GP）特异性IgG抗体及其片段的免疫活性及对血小板聚集功能的影响.方法用改良单克隆抗体特异性俘获血小板抗原技术（MAIPA）检测84例慢性ITP患者血浆中抗GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/Ⅸ及GPⅥ自身抗体,比浊法血小板聚集试验筛选出自身抗体阳性并能抑制血小板聚集的患者,用蛋白A柱纯化其血浆IgG抗体并用胃蛋白酶制备F（ab＇）2片段.检测纯化的IgG抗体及其酶切片段与血小板GP的结合活性及对正常人血小板聚集功能的影响.结果 （1）84例ITP患者血浆中,48例（57.1%）抗GPⅡb/Ⅲa和/或GPⅠb/Ⅸ和/或GPⅥ自身抗体阳性,其中7例（14.6%）明显抑制了二磷酸腺苷、瑞斯托霉素或胶原诱导的血小板聚集;（2）纯化的IgG及F（ab＇）2片段具有与相应血小板GP的结合活性;（3）4例患者纯化IgG及F（ab＇）2片段具有抑制血小板聚集的功能.结论 F（ab＇）2片段是IgG自身抗体的功能片段,它不但保留了良好的抗原结合活性且可部分抑制血小板聚集功能,为人源化血小板糖蛋白特异性抗体的制备奠定了基础.     

抑制血小板聚集功能的抗血小板膜糖蛋白GPⅡbⅢa自身抗体的筛选

目的：筛选出血浆中含有抑制血小板聚集的血小板膜糖蛋白GPⅡbⅢa自身抗体的血小板减少性紫癜(ITP)患者，为人源化抗GPⅡbⅢa基因工程抗体的研制做准备。方法：用改良MAIPA法检测24例慢性ITP患者血浆有无血小板膜糖蛋白GPⅡbⅢa自身抗体，用血小板聚集试验研究抗GPⅡbⅢa自身抗体对血小板聚集的影响。结果：24例慢性ITP患者中10例(41．7％)血浆中抗GPⅡbⅢa自身抗体阳性，2例明显抑制血小板聚集功能。结论：少数抗GPⅡbⅢa自身抗体可抑制血小板聚集功能。     

原发与继发免疫性血小板减少症患者血小板膜糖蛋白特异性抗体及其与出血评分关系的研究

目的 探讨原发与继发免疫性血小板减少症（ITP）患者抗GPⅡb/Ⅲa及GPΙb/Ⅸ抗体的表达、抗体阳性表达与出血评分的关系,以及不同抗体类型出血评分的差异,为原发与继发ITP患者的诊治和出血严重程度提供临床依据。方法 选取2013年10月—2020年8月在新疆医科大学第一附属医院诊断为原发ITP患者（42例）及继发ITP患者（42例）为研究对象,所有患者入院时采用ITP出血评分量表行出血评分。应用改良MAIPA法检测患者抗GPⅡb/Ⅲa和抗GPΙb/Ⅸ抗体。结果 原发与继发组患者抗GPⅡb/Ⅲa抗体、抗GPΙb/Ⅸ抗体阳性率比较,差异无统计学意义（P >0.05）,原发组患者抗体表达以抗GPⅡb/Ⅲa抗体为主,继发组抗体表达以抗GPΙb/Ⅸ抗体为主,两者抗体阳性构成比较,差异有统计学意义（P <0.05）。继发组患者整体出血程度较原发组重（P <0.05）。抗体阳性表达与出血程度的关系：①抗GPⅡb/Ⅲa抗体阳性患者出血程度较抗体阴性患者重（P <0.05）。②抗GPΙb/Ⅸ抗体阳性患者出血程度较抗体阴性患者重（P <0.05）,双抗体阳性患者出血程度较抗体阴性患者重（P <0.05）。结论 抗GPⅡb/Ⅲa抗体、抗GPΙb/Ⅸ抗体阳性表达对原发与继发ITP无鉴别意义,但原发ITP患者抗体表达以抗GPⅡb/Ⅲa抗体为主,继发ITP患者抗体表达以抗GPΙb/Ⅸ抗体为主。继发ITP患者临床出血程度较原发ITP患者重。抗GPⅡb/Ⅲa抗体、抗GPΙb/Ⅸ抗体及抗体双阳性患者出血程度较抗体阴性患者重。     

特发性血小板减少性紫癜自身抗体的特异性免疫诊断

目的 检测特发性血小板减少性紫癜(ITP)及非免疫性血小板减少症的抗血小板特异性抗体及PAIgG,并比较其诊断及鉴别诊断的价值。方法 用酶联免疫吸咐竞争法检测PAIgG,用血小板抗原单克隆抗体固相化法(MAIPA)和改良抗原捕获ELISA法(MACE)检测抗血小板膜糖蛋白(GPⅡ b／Ⅲa、GPⅠ b／Ⅸ和P-选择素)的特异性抗体。结果 PAIgG在ITP组的阳性率为94.0％,非免疫性血小板减少症组为53.3％。MAPIA和MACE在ITP组的阳性率分别为GPⅡb／Ⅲa 31.3％、26.7％,GP Ⅰ b／Ⅸ12.0％、8.7％,P-选择素24.6％、19.3％,在非免疫性血小板减少症组中MAIPA和MACE的阳性率除1例P-选择素阳性外,其余均为阴性,与ITP组相比,P<0.001。结论 PAIgG的敏感性可达90％以上,但特异性较差;而MAIPA和MACE虽然敏感性较低,但具有很高的特异性,并能鉴别免疫性血小板减少和非免疫性血小板减少。抗血小板特异性抗体的检测可成为ITP的特异性诊断指标。     

血小板特异性抗体对特发性血小板减少性紫癜的诊断价值

目的:探讨血小板特异性抗体(PAIg)对特发性血小板减少性紫癜(ITP)的诊断价值.方法:应用改良单克隆特异性抗体俘获血小板(MAIPA)技术检测35例ITP患者(ITP组)、32例慢性障碍再生贫血(CAA)患者(CAA组)、30例恶性血液疾病患者(恶性血液病组)以及30例健康体检者(健康对照组)的血小板特异性抗体GP Ⅰ V、GPV、GPⅠb/Ⅰ X及GPⅡb/Ⅲa抗体阳性率,并比较4种抗体的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值.结果:ITP组、CAA组、恶性血液疾病组以及正常对照组4种抗体的阳性率分别为91.43％、15.63％、10.00％及0.00％,ITP组特异性抗体阳性率明显高于其余3组,CAA组与恶性血液病组明显高于对照组,差异有统计学意义(P ＜0.05);GP Ⅰ V、GPV、GPⅠb/Ⅰ X、GPⅡb/Ⅲa联合检测时的敏感性、特异性、阳性预测值以及阴性预测值明显高于与单一抗体检测,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:PAIg可鉴别ITP与非免疫性血小板减少疾病,并作为ITP诊断的特异性指标.     

原发性血小板减少性紫癜患儿血浆中抗血小板膜糖蛋白自身抗体及平均血小板容积检测

本文20例原发性血小板减少性紫癜进行了抗血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa抗体测定,结果25％为阳性,提示患者血浆中抗体是不均一的。有些患者抗体的部位是作用于GPⅡb/Ⅲa的位置上。同时,对12例急性ITP进行了80人次连续血小板数及血小板平均容积(MPV)的观察,发现二者有明显负相关,r=一0.96,P值<0.01。结果提示MPV大小与血小板年龄无关。     

PAICA法检测ITP病人血小板特异抗体的临床应用

（1）目的：检测特发性血小板减少性紫癜（ITP）病人及非免疫性血小板减少症病人的抗血小板特异性抗体，并探讨其临床意义；（2）方法：采用血小板相关抗体特性检测技术（PAICA法），检测52例ITP病人，31例非免疫性血小板减少症病人抗血小板GPⅡb/Ⅲa,GPⅠb/Ⅸ的特异性抗体，并与血小板相关抗体IgG(PAIgG)检测结果进行了比较。（3）结果：血小板特异抗体检测的可能性比值及阳性预测值较高，但阴性预测值较低，而PAIgG检测的可能性比值，阳性预测值及阴性预测值均较低。（4）结论：血小板特异抗体检测对肯定ITP诊断有重要的意义，对排除ITP诊断意义不大。     

血小板膜糖蛋白自身抗体检测新方法--流式微球技术

目的 建立流式微球技术检测血小板膜表面糖蛋白特异性自身抗体（GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/IX）,探讨其在特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者体内表达情况及其与激素治疗效果之间的关系.方法 取67例ITP患者及30例健康对照组的外周血,分离、裂解血小板与单抗包被微球共同孵育后加入PE标记多克隆抗体,流式细胞仪分析,评价ITP患者激素治疗效果.结果 ITP患者血小板GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/IX自身抗体荧光强度为4.58（0.22～30.20）、4.78（0.56～22.00）,对照组为0.92（0.23～2.28）、0.87（0.22～2.13）.以微球荧光强度比率（测定/对照）CD41a＞0.025%、CD42＞2.12%定为阳性,用流式微球技术同时检测两种抗血小板抗体,诊断ITP敏感性为95.5%（64/67）、特异性为90.9%,阳性预测值为96.7%.ITP患者激素治疗效果与抗体检测结果呈负相关（r=-0.318）.结论 流式微球技术检测血小板膜糖蛋白自身抗体对ITP诊断的敏感性、特异性较高,对治疗及预后也有一定临床指导意义.     

血小板特异性抗体检测对血小板减少性紫癜鉴别的诊断意义

目的探讨血小板特异性抗体（抗GPⅠb、抗GPⅡb、抗CPⅢa）检测对区别免疫性与非免疫性血小板减少性紫癜诊断的临床价值。方法本院有70例血小板减少性紫癜患者,其中37例为免疫性血小板减少患者,33例为非免疫性血小板减少患者,应用单克隆抗体俘获血小板抗原技术（MAIPA）检测血小板特异性抗体（抗GPⅠb、抗GPⅡb、抗Ⅲa）。结果37例免疫性血小板减少患者中有26例血小板特异性抗体检测至少一项阳性,占70．2％。非免疫性血小板减少患者为6．1％。结论自体免疫性血小板减少性紫癜（AITP）患者血小板膜糖蛋白特异性抗体的总阳性率（抗GPⅡb或抗GPⅢa或抗GPⅠb特异性自身抗体阳性）为70．2％。显著高于非免疫组6．1％（χ^2=29．97,P〈0．05）,因此,我们认为血小板特异性抗体检测是特异性较强的一项指标,对提高ITP确诊率及鉴别免疫性和非免疫性血小板减少性紫癜有重要的临床意义。     

血小板特异性抗体、血小板相关抗体、网织血小板联合检测对血小板减少的鉴别诊断

目的探讨血小板相关抗体（PAlgG）、网织血小板（RP）及血小板特异性抗体（抗GPⅡb／Ⅲa、抗GPIb、抗P-选择素）检测对区别免疫性与非免疫性血小板减少性紫癜的诊断。方法本院75例血小板减少性紫癜患者，其中35例是特发性血小板减少性紫癜（ITP），40例为非免疫性血小板减少性紫癜，同时以PAlgG、RP及抗GPⅡb／Ⅲa、抗GPIb、抗P-选择素进行检测，其中血小板特异性抗体用改良单克隆抗体免疫固相法（MAIPA）检测，PAlgG、RP用流式细胞术测定。结果35例ITP患者有22例血小板特异性抗体检测至少一项阳性，占61．5％，非免疫性血小板减少患者均为阴性反应；ITP患者RP平均值30．5±5．5，非免疫性血小板减少患者为26.5±5.0（P〉0.05）；ITP患者PAIgG均值为38．5±6．0，非免疫性血小板减少患者为36．6±6．2（P〉0．05）。结论免疫性和非免疫性血小板减少性紫癜患者RP和PAlgG结果均显示增高，但差异无显著性；血小板特异性抗体检测是特异性较强的一项指标，对提高ITP确诊率及鉴别免疫性和非免疫性血小板性紫癜有意义。     

血小板减少症患者血小板参数检测的临床意义

目的探究血小板减少症患者血小板参数的变化及其临床意义。方法采用Sysmex XE-2100全自动五分类血液分析仪检测83例不同类型血小板减少症患者，包括24例急性白血病（AL），28例骨髓增生异常综合征（MDS）和31例特发性血小板减少性紫癜（ITP）病人治疗前后血小板计数（PLT）、血小板比积（PCT）、平均血小板体积（MPV）和血小板分布宽度（PDW），并将检测结果与正常对照组进行比较。结果初诊时ITP、AL和MDS患者的PTJT和PCT明显低于正常对照组（P〈0．01），其中ITP患者的MPV和PDW明显高于AL、MDS患者以及正常对照组（P〈0．01），AL和MDS患者的PDW也明显高于正常对照组（P〈0．01），但二者的MPV值与正常对照组比较无明显差异。ITP、AL和MDS患者缓解后PLT和PCT明显上升，而PDW下降，与未缓解组比较有显著差异（P〈0．01），ITP缓解组的MPV明显低于未缓解组（P〈0．01），而AL和MDS缓解组的MPV值与未缓解组比较无显著差异。结论血小板参数的检测对于明确血小板减少的病因及其预后具有重要临床意义。     

出血性血小板病患者凝血酶受体GPIb／IX／V复合物表达研究

目的观察出血性血小板病患者的血小板膜糖蛋白（GP）Ib／IX／V复合物及其组分GP Ibα的表达。方法采用流式细胞术检测68例出血性血小板病患者在出血期的血小板GPIb／IX／V复合物和GP Ibα的表达，采用比浊法检测其血小板最大聚集率（MA），并与33例出血控制者及32例正常健康者比较。结果出血性血小板病患者在出血期间GPIb／IX／V复合物、GP Ibα表达明显低于正常组（P均〈0．01），出血控制者的GPIb／IX／V复合物、GP Ibα表达与正常组比较无显著性差异（P均〉0．05）。结论血小板GPIb／Ⅸ／V复合物作为凝血酶和血管性血友病因子的受体，在出血性血小板病患者体内的表达下降，导致血小板聚集功能障碍，可能是本病反复发作出血倾向的重要原因之一。     

重组人血小板生成素临床耐受性试验

目的：评估国产重组人血小板生成素（rhTPO）在人体内的安全性。观察其对血象、血小板聚集功能等的影响及注射后抗体产生情况 。方法：27名正常人分为4组,分别单次皮下注射rhTPO0．25、0．5、1．0μg/kg或2．0μg/kg,5例化疗后急性白血病,2例非霍奇金淋巴瘤患者每日皮下注射rhTPO1．0μg/kg,连续7－14d,动态观测血象、血小板聚集、血清生化指标和抗rhTPO抗体等。结果：27名正常人单次皮下注射rhTPO后仅1例在给药后6h体温一度至37.4℃;1例给药次日出现轻度乏力、纳差和思睡;1例出现一过性丙氨酸转氨酶和天门冬氨酸氨酶轻度升高。血小板数约于给药后第14d达高峰,与给药前相比,平均升高24％－52％,给药后21d基本回落至基础水平。血小板升高时聚集功能无明显改变。7例血液肿瘤患者接受皮下注射rhRPO后未出现与药物相关的不适反应;1例出现一过性丙氨酸转氨酶和天门冬氨酸转氨酶轻度升高;4例用药后血小板数出现不同程度的升高;1例给药后血清中检出一过低滴度（1：5）抗rhTPO抗体。结论：rhTPO单次皮下注射（0．25－2．0μg/kg）和每日1次皮下注射（1．0μg/kg,7-14d）对人体是安全的,不良反应轻微。rhTPO具有特异性和剂量依赖性血小板作用,对血小板聚集功能无明显影响。     

Platelet function defects in chronic alcoholism

Platelet function in alcoholic patients was assessed on admission and during abstinence in hospital. On admission platelets from these patients were significantly less responsive (percentage aggregation and thromboxane A2 release) to conventional in vitro aggregating agents (adrenaline, adenosine diphosphate, and collagen) than platelets from healthy, moderate drinkers. Initially, platelet counts in platelet rich plasma tended to be low and the Simplate II bleeding times frequently prolonged. Platelet aggregation and thromboxane A2 release, however, were inhibited even in patients with normal platelet counts on admission. Platelet aggregation and thromboxane A2 release returned to normal or became hyper-responsive during two to three weeks of abstinence. Platelet counts rose during this period, the largest responses occurring in those patients with the lowest counts on admission. Bleeding times reverted to normal during abstinence and correlated significantly with changes in platelet aggregation, thromboxane A2 release, and platelet count and with the estimated ethanol consumption during the week before admission. Chronic, heavy alcohol ingestion evidently exerts an inhibitory effect on platelet function even in the absence of alcohol in the blood, and this phenomenon is reversible on abstaining. The impaired platelet function, together with the reduced platelet count, may contribute to the bleeding diathesis associated with chronic alcoholism and to the increased incidence and recurrence of gastrointestinal haemorrhage associated with excessive alcohol intake.     

小剂量利妥昔单抗治疗复发难治性免疫性血小板减少症疗效分析

目的 探讨小剂量利妥昔单抗治疗复发难治性免疫性血小板减少症（ITP）的疗效、安全性及治疗前后B细胞、血小板膜糖蛋白特异性自身抗体的变化.方法 利妥昔单抗100mg静脉滴注,每周1次,连用4周,治疗23例复发难治性ITP患者,无使用免疫抑制剂、化疗药、抗凝药及激素冲击疗法.监测治疗前后的血常规,血清免疫球蛋白（IgG、IgM、IgA）,血小板膜糖蛋白抗体及CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD19＋、CD20＋细胞数.结果 9例完全有效,5例有效,9例无效.中位疗效持续时间8（5～23）个月,有效患者有中3例复发,其余均维持较好.有效患者治疗后血小板自身抗体均转阴.治疗前后外周血血红蛋白、白细胞计数无明显变化,血清IgG、IgM、IgA无明显变化,CD3＋、CD4＋、CD8＋细胞数无明显变化.治疗后CDI9＋/CD20＋细胞明显下降.多数患者耐受好.结论 小剂量利妥昔单抗治疗复发难治性ITP疗效肯定,不良反应可以耐受.     

特发性血小板减少性紫癜患者血小板生成素及血小板相关抗体检测

目的 检测特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者血小板生成素水平、T淋巴细胞亚群及血小板相关抗体的变化,探讨其在ITP发病机制中的作用及临床意义。方法应用夹心酶联免疫吸附试验、流式细胞术分别检测50例ITP患者和24例正常对照血小板生成素浓度、T淋巴细胞亚群及血小板相关抗体的比值。结果ITP患者的血小板计数为30．65±18．34×10^9／L明显低于正常对照组的226．63±45．63×10^9／L（P〈0．05）;血小板生成素水平二者的差异无显著性（分别为76．65±52．50pg／ml,71．62±23．03pg/ml,P〉0．05）;在T淋巴细胞亚群变化中,ITP患者CD3^＋T淋巴细胞百分比、CD4^＋T淋巴细胞百分比及CD4^＋／CD8^＋的比值分别为60．06±12．08％、27．74±9．67％、1．11±0．34％,均明显低于正常对照组（分别为69．89±5．56％、35．87±4．07％、1．64±0．32％,P〈0．05）,CD8^＋T淋巴细胞为31．12±12．49％则显著高于正常对照组（22．55±4．12％,P〈0．05）;ITP患者血小板相关抗体PAIgG27．19±17．43％、PAIgM41．15±15．62％、PAIgA33．18±16．37％,均显著高于正常对照组（PAIgG9．28±3．85％、PAIgM16．78±9．26％、PAIgA22．12±8．86％,P〈0．05）。结论血小板生成素、T淋巴细胞亚群及血小板相关抗体能较好地反映ITP的发病机制,对提高ITP诊断水平及指导临床治疗有一定的意义。     

免疫性血小板减少性紫癜血小板参数的临床意义

目的：探讨血小板参数对免疫性血小板减少性紫癜（ITP）的临床意义。方法：对ITP组、非ITP组、健康对照组采用血细胞分析仪检测血小板相关参数,即血小板计数（PLT）、血小板平均体积（MPV）、血小板压积（PCT）、血小板平均分布宽度（PDW）及ITP治疗后血小板参数的变化。结果：与非ITP组及健康对照组相比,ITP组2（PLT〉10×109/L）MPV、PDW明显增加（P〈0.01）,ITP组1（PLT〈10×109/L）MPV、PDW明显减低（P〈0.01）,在ITP的治疗过程中,MPV比PLT更早出现明显升高。结论：血小板参数对血小板减少症有鉴别意义,动态观察血小板参数对疗效观察有重要的临床意义。     

血小板膜蛋白受体信号转导通路的研究进展

血小板在止血和动脉血栓形成中扮演重要角色。当血管内皮损伤暴露内皮下细胞外基质时,血小板与细胞外基质结合而被激活。在血小板激活过程中,血小板膜蛋白受体发挥着至关重要的作用。当配体与血小板膜蛋白受体结合后,产生各自的信号转导路径,使血小板发生形态变化,内容物释放,并最终形成一条由内向外的共同信号通路使血小板糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa受体激活;激活的GPⅡb/Ⅲa受体与其配体结合后诱导由外向内的信号转导,进一步使血小板形态发生变化、内容物释放,并使已黏附和聚集的血小板更稳定,从而形成血小板血栓。血小板有多条膜蛋白受体信号转导通路,这些信号通路是研究抗血小板药物作用的靶点。