HLA-B宽特异性抗原Bw4与HIV-1感染者疾病进展关系的研究

目的 对我国HIV-1感染者HLA-B基因不同基因型(Bw4、Bw6)的分布及其与疾病进展相关性进行研究,探讨HIA-Bw4基因在HIV-1疾病进程中的作用.方法 应用高分辨率HLA分型方法 对340名HIV-1感染者和69名健康对照进行HLA-B位点的等位基因分型,确定Bw4和Bw6特异性分布,分析HLA-B Bw4和Bw6特异性与感染者CD4+T细胞计数和血浆病毒载量的相关性.结果 在HIV-1感染者人群共检测到65种HLA-B等位基因,Bw4携带者(Bw4Bw4纯合子和Bw4Bw6杂合子)相对Bw6纯合子具有更高的CD4+T细胞计数(P=0.004)和更低的病毒载量(P=0.003).与Bw4纯合子相比,Bw4Bw6杂合子的CD4+T细胞计数差异无统计学意义,但病毒载量更低(P=0.037).在CD4+T细胞数小于500个/μl组中,Bw4Bw6杂合子的百分比显著低于CD4+T细胞数大于500个/μl组(P=0.0002),而Bw6纯合子的百分比则显著高于CD4+T细胞数大于500个/μl组(χ2检验,P<0.0001).结论 HLA-Bw4对宿主感染HIV-1后,从病毒载量分析可能具有一定的保护性作用,其保护机制值得进一步深入研究.     

中国HIV-1感染者KIR基因多态性与疾病进展关系的研究

目的 通过对中国HIV-1感染缓慢进展者(TP)和典型进展者(TP)杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因频率的研究,探讨中国人群K/R基因多态性与HIV-1感染者疾病进程的关系.方法 采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术,分析43例HIV-1感染SP和38例TPKIR基因位点的多态性.结果 SP组和TP组的KIR2DS3等位基因频率分别为3.6%和14.2%,SP组显著低于TP组,两组的KIR2DS3等位基因频率差异具有统计学意义(P=0.018,OR=0.210,95%CI=0.053-0.833);SP组的活化性KIR基因数目低于TP组,但差异无统计学意义(P=0.208).结论 低表达KIR2D53基因可能是延缓中国HlV-1感染者疾病进程的保护因素之一.     

CCR5△32、CCR5m303、CCR2-64I、SDF1-3''A基因多态性对中国HIV-1感染者预后的影响

目的研究CCR5A32、CCR5m303、CCR2-64I、SDF1—3’A基因多态性对中国HIV-1感染者预后的影响。方法对在深圳地区发现的HIV-1感染者进行流行病学调查，应用PCR／RFLP技术分析感染者CCR5G32、CCR5m303、CCR2-64I、SDF1-3’A4种基因的多态性，对部分人群进行HIV-1血浆病毒载量和CD4^＋细胞计数的检测，判断感染者的潜伏期，使用SPSS11．0统计软件分析基因多态性对感染者病毒载量和潜伏期的影响。结果在189例HIV-1感染者中没有发现CCR5A32和CCR5-m303突变基因型，SDF1—3’A的等位基因频率为26．14％，CCR2—64I的等位基因频率为19．82％。方差分析发现，CCR2-64I基因野生型与杂合型的两组HIV-1感染者人群病毒载量对数的大小差异无统计学意义（P=0．272），两组人群潜伏期的长短差异无统计学意义（P=0．662）。SDF1基因野牛型、杂合型和纯合型的3组HIV-1感染者人群病毒载量对数的大小差异有统计学意义（P=0．001），但3组人群潜伏期的长短差异无统计学意义（P=0．228）。结论CCR2-64I基因突变对中国汉族HIV-1感染者病毒载量没有明显影响，因而也不影响感染者的潜伏期。SDF1-3’A基因突变对于病毒载量有降低作用，但对延长感染者潜伏期可能没有作用。     

HIV感染者CD4~+T细胞TIGIT受体及其配体CD155表达情况研究

目的研究人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)未治疗感染者CD4~+T细胞表面TIGIT受体及其配体CD155表达的情况。方法选取24例未经高效抗逆转录病毒治疗的HIV感染者和20例HIV抗体阴性健康对照(HIVnegative normal control,NC),用流式细胞仪检测受试对象外周血CD4~+T细胞表面TIGIT受体及其相关配体CD155的表达情况。结果未治疗HIV感染者CD4~+T细胞TIGIT受体表达百分数较健康人组表达明显增高(P0.000 1),并且与CD4~+T细胞绝对计数呈负相关(r=-0.444 1,P=0.029 7)。在未治疗HIV感染者中,CD4~+T细胞计数350/μl组CD4~+T细胞TIGIT表达百分数明显低于CD4~+T细胞计数≤350/μl组(P=0.029 2);病毒载量10~5/ml组CD4~+T细胞TIGIT表达百分数明显高于病毒载量≤10~5/ml组(P=0.015 5)。未治疗HIV感染者CD4~+T细胞表面CD155表达百分数与健康人组相比明显增高(P=0.004 2),且与病毒载量呈正相关(r=0.467 7,P=0.021 2),其中病毒载量10~5/ml组CD4~+T细胞CD155表达百分数明显高于病毒载量≤10~5/ml组(P0.000 1)。结论未治疗HIV感染者CD4~+T细胞TIGIT受体及其配体CD155表达百分数明显升高,且与CD+4绝对计数及病毒载量存在关联性,可为HIV患者的治疗和预后评估提供重要科学依据。     

中国HIV-1感染者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与疾病进展相关性研究

目的对中国HIV-1感染者CD4~ CD25~ Foxp3~ 调节性T细胞水平及与疾病进展相关性进行研究,探讨CD4~ CD25~ Foxp3~ 调节性T细胞在HIV-1疾病进程中发挥的作用。方法选取35名HIV-1感染者及14名健康对照,应用流式细胞仪胞内染色技术在单细胞水平检测CD~ CD25~ Foxp3~ 调节性T细胞表达及淋巴细胞活化、凋亡水平。结果中国HIV-1感染者CD4~ CD25~ Foxp3~ T细胞水平与CD4~ T细胞显著负相关(r=-0.544,P=0.001),与病毒载量明显正相关(r=0.484,P= 0.026),与CD4~ T细胞凋亡(CD95表达)水平明显正相关(r=0.431,P=0.011)。艾滋病人CD4~ CD25~ Foxp3~ T细胞水平明显高于无症状HIV感染者(P<0.05),与健康人相比差异无统计学意义。艾滋病人CD4~ 、CD8~ T细胞凋亡水平明显高于无症状HIV感染者及健康人(P<0.05),艾滋病人及无症状HIV感染者CD4~ 、CD8~ T细胞活化明显高于健康人(P<0.05)。结论中国HIV-1感染者CD4~ CD25~ Foxp3~ 调节性T细胞水平与疾病进展明显相关。     

CD4+CD25 nt/hi CD127lo调节性T细胞对HIV感染者免疫状态及病程进展的影响

目的:探讨具有CD4 CD25nt/hi CD127lo特征的调节性T细胞频率对中国HIV-1感染者免疫状态及病程进展的影响.方法:选取100名未经治疗的HIV-1感染者和4个年龄组的312名健康人对照,采集静脉血,经三重免疫荧光染色,用流式细胞术分析CD4 CD25 Treg表型和CD4 CD25nt/hiCD127loTreg频率并进行CD4 T细胞绝对计数;应用酶联免疫斑点技术(ELISpot)在单细胞水平观察受试者的HIV-1特异性细胞免疫功能;平行检测HIV感染者的病毒载量(NASBA方法).结果:不同病程的HIV-1感染者外周血中CD4 CD25nt/hiCD127loTreg频率存在差异,进展期高于新近感染者(P＜0.001),其平均水平显著高于健康人(P＜0.001);CD4 CD25nt/hiCD127loTreg频率与HIV感染者CD4 T细胞数量呈显著负相关(r=0.354,P＜0.01),与病毒载量呈明显正相关(r=0.287,P＜0.01);高频率CD4 CD25nt/hiCD127loTreg HIV-1感染者(进展期)的外周血PBMCs经HIV-1多肽刺激后分泌IFN-γ的CD8 T细胞频率明显低于无症状的新近感染者.结论:初步证实HIV-1感染者外周血中CD4 CD25nt/hiCD127kloTreg细胞频率增加与CD4 T细胞数量降低及病程进展相关;高频率CD4 CD25nt/hiCD127lo Treg细胞对HIV-1感染者的细胞免疫功能具有抑制作用.本结果为进一步阐明HIV持续感染的免疫机制提供了新依据.     

无症状期HIV感染者CD4+和CD8+T细胞计数与病毒载量的关系

艾滋病是由人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染所导致的以免疫系统功能缺陷为特征的慢性高致死率传染病.CD4+T细胞是HIV损害的主要靶细胞,HIV可引起CD4+T淋巴细胞进行性丢失与功能受限[1-2].在HIV感染早期,CD8+T细胞增多并通过分泌各种细胞因子杀死被病毒感染的靶细胞,其高表达与病毒量载量呈正相关[3],而随着疾病进展,CD8+T细胞会消耗性减少.CD4+T细胞、CD8+T细胞计数与病毒载量的相关性一直为研究者关注[4-6].本研究检测了无症状期感染者,外周血CD4+T细胞和CD8+T细胞计数与病毒载量并分析它们的相关性.     

CCR5△32、CCR5m303、CCR264I、SDF13′A基因多态性对中国HIV-1感染者预后的影响

目的研究CCR5△32、CCR5m303、CCR264I、SDF13′A基因多态性对中国HIV1感染者预后的影响。方法对在深圳地区发现的HIV1感染者进行流行病学调查,应用PCR/RFLP技术分析感染者CCR5△32、CCR5m303、CCR264I、SDF13′A4种基因的多态性,对部分人群进行HIV1血浆病毒载量和CD4 细胞计数的检测,判断感染者的潜伏期,使用SPSS11.0统计软件分析基因多态性对感染者病毒载量和潜伏期的影响。结果在189例HIV1感染者中没有发现CCR5△32和CCR5m303突变基因型,SDF13′A的等位基因频率为26.14%,CCR264I的等位基因频率为19.82%。方差分析发现,CCR264I基因野生型与杂合型的两组HIV1感染者人群病毒载量对数的大小差异无统计学意义(P=0.272),两组人群潜伏期的长短差异无统计学意义(P=0.662)。SDF1基因野生型、杂合型和纯合型的3组HIV1感染者人群病毒载量对数的大小差异有统计学意义(P=0.001),但3组人群潜伏期的长短差异无统计学意义(P=0.228)。结论CCR264I基因突变对中国汉族HIV1感染者病毒载量没有明显影响,因而也不影响感染者的潜伏期。SDF13′A基因突变对于病毒载量有降低作用,但对延长感染者潜伏期可能没有作用。     

HIV-1 RNA被有效抑制下T细胞与外周血中HIV-1前病毒DNA

目的:考察HIV-1 RNA被有效抑制下T细胞与外周血中HIV-1前病毒DNA的相关性。方法:对云南地区90例确诊为AIDS,HAART持续治疗时间超过6个月,血浆HIV RNA<50 Copies/ml的患者进行研究,采用Spearmans秩和相关回顾性分析CD4+、CD3+、CD8+、CD4+CD28+、CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+、CD38+、CD8+CD38+T细胞的绝对计数和相对计数与外周血中HIV-1前病毒DNA的相关性,同时考察HIV-1前病毒DNA拷贝数与HAART持续治疗时间的相关性。将90例患者根据HAART后CD4+T细胞绝对计数分为A(CD4+<200 cells/μl)、B(200≤CD4+≤349 cells/μl)、C(CD4+≥350 cells/μl)3组,考察3组间T细胞亚群的差别。结果:HIV-1前病毒DNA的log拷贝数与CD4+CD45RA+T细胞绝对计数呈负相关(r=-0.231,P<0.05),与CD4+CD45RA+T细胞相对计数呈明显负相关(r=-0.270,P<0.01);与CD38+T细胞绝对计数呈正相关(r=0.250,P<0.05);与HAART持续治疗时间无相关性。B、C组的CD3+T细胞绝对计数明显高于A组(P<0.01);C组的CD8+T细胞绝对计数高于B组的(P<0.05);B、C组的CD4+CD28+T细胞绝对计数和相对计数明显高于A组(P<0.01),C组的CD4+CD28+T细胞绝对计数高于B组(P<0.05);B、C组的CD4+CD45RA+T细胞、CD4+CD45RO+T细胞绝对计数明显高于A组(P<0.01),C组的CD4+CD45RA+T细胞、CD4+CD45RO+T细胞绝对计数高于B组(P<0.05),B、C组的CD4+CD45RO+T细胞相对计数高于A组(P<0.05);B、C组的CD8+CD38+T细胞绝对计数低于A组(P<0.05),B组的CD8+CD38+T细胞相对计数低于A组(P<0.05);C组的CD38+T细胞绝对计数高于A组(P<0.05)。A、B、C组的HIV-1前病毒DNA的log拷贝数分别为3.561±0.297 9,3.605±0.277 6,3.434±0.289 1(copies/ml),3组间无显著性差异(P>0.05)。结论:经过HAART治疗后HIV-1前病毒DNA可能处于稳定状态,HIV-1前病毒DNA拷贝数只是某些T细胞亚群数量改变的原因之一。     

HIV-1感染者外周血单核细胞miR-155及miR-29表达及其与疾病进展的相关性研究

目的探讨人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)感染者外周血单核细胞(PBMC)miR-155及miR-29表达水平,分析其与疾病进展的相关性。方法募集82名HIV-1感染者和30名HIV-1阴性体检健康者(对照组),HIV-1感染者中37人接受高效抗逆转录病毒(HAART)治疗(治疗组),45人未接受HAART治疗(未治疗组)。检测病毒载量和CD4~+T淋巴细胞计数,采用实时荧光定量PCR法检测PBMC中miR-155及miR-29表达水平,分析其与病毒载量和CD4~+T淋巴细胞计数的相关性。结果未治疗组平均CD4~+T淋巴细胞计数明显低于治疗组和对照组(224±107 vs 360±118和826±135)(t=6.825、12.317,P0.01)。未治疗组PBMC中miR-155及miR-29表达水平明显高于治疗组和对照组(4.28±1.36 vs 1.15±0.43和0.86±0.14以及2.37±0.81 vs 0.61±0.12和0.42±0.05)(t=8.916、10.752、7.824、8.235,P0.01)。随着CD4~+T淋巴细胞计数的下降,HIV-1感染者PBMC中miR-155及miR-29表达水平明显升高(P0.01)。相关分析显示,未治疗HIV-1感染者PBMC中miR-155、miR-29与病毒载量均呈正相关(r=0.693、0.627,P0.01),miR-155、miR-29与CD4~+T淋巴细胞计数均呈负相关(r=-0.805、-0.748,P0.01),miR-155与miR-29呈正相关(r=0.706,P0.01)。结论 HIV-1感染者PBMC中miR-155及miR-29表达水平明显上调,且与疾病进展呈正相关,有望作为HIV-1感染病程进展的生物标志物。