TTV感染研究进展

１９９７年底日本Ｎｉｓｈｉｚａｗａ等首次从输血后非甲－庚型肝炎病人血清中分离到一种新的ＤＮＡ病毒,暂命名为ＴＴ病毒（ＴＴＶ）,并认为ＴＴＶ可能与非甲－庚型肝炎有关,本文对ＴＴＶ的病原学,流行病学及其与肝病的关系等方面的研究近况作一综述。     

丙型及非甲-庚型肝炎患者血清TTV检测及临床分析

目的 了解郑州地区不同肝病患者中ＴＴＶ（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ ｖｉｒｕｓ）感染状况及其临床特点。方法 自行设计ＴＴＶ ＯＲＦ１保守区的两对引物,对２０例非甲－庚型肝炎和９７例丙型肝炎患者血清进行ＰＣＲ检测,并对３０例资料完整的丙肝患者是否合并ＴＴＶ感染及其临床特点进行分析。结果 丙型和非甲－庚型肝炎患者血清ＴＴＶ ＤＮＡ检出率分别为１６．５％（１６／９７）和２０％（４／２     

TTV在非甲-庚型肝炎患者中的检测、克隆及测序

目的分析ＴＴＶ（Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎｔｒａｎｓｍｉｔｅｄｖｉｒｕｓ）深圳分离株ＯＲＦ１部分基因序列。方法在ＴＴＶＯＲＦ１设计引物，建立巢式聚合酶链反应（Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ），检测４０例广东地区非甲－庚型肝炎患者血清中ＴＴＶＤＮＡ。对ＰＣＲ产物进行分子克隆，以荧光法（ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，３７３Ａ）测序。结果４０例非甲－庚型肝炎中２１例ＴＴＶＤＮＡ阳性（５２．５％）。对其中一株ＴＴＶ（ＳＺ１）ＯＲＦ１部分基因克隆、测序，并与Ｏｋａｍｏｔｏ等报道的２株（Ｎ２２、Ｇ１ａ）相比较，其核苷酸序列的同源性分别为９６．７％与９７．４％。结论本研究证实我国华南地区存在ＴＴＶ感染。ＴＴＶ的分子克隆与测序及ＰＣＲ诊断技术的建立对国内进一步开展ＴＴＶ感染的诊断与流行病学调查均具有重要意义     

一种新的可经输血传播病毒(TTV)的分子流行病学研究

目的 分析深圳地区不同人群中ＴＴＶ（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ ｖｉｒｕｓ，ＴＴＶ）感染情况及其基因型。方法 在ＴＴＶ ＯＲＦ１设计引物，建立巢式聚合酶链反应，检测深圳地区不同人群血清中ＴＴＶ ＤＮＡ。对ＰＣＲ产物进行分子克隆，以荧光法（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，３７３Ａ）测序。结果 ９０例一般人群、８８例有偿献血员、７９例静脉毒瘾者、５２例非甲￣非庚型肝炎、６７例     

30例非甲～戊型肝炎中庚型肝炎病毒感染分析

了解庚型肝炎病毒在本地区非甲－戊型肝炎中的流行情况及其临床特征。方法用ＲＴ－ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ法对３０例非甲－戊型肝炎患者的血清进行ＨＧＶ－ＲＮＡ和抗－ＨＧＶ检测。结果３０例非甲－戊型肝炎患者中检出３例,ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性,其中２例为急性肝炎,１例为慢性肝炎。     

非甲—庚型肝炎患者TT病毒感染的检测及序列分析

在急慢性输血后肝炎、散发性肝炎及爆发性肝炎中，有相当比例的患者用现有甲、乙、丙、丁、戊、庚型肝炎实验室诊断方法尚不能分型，在排除已知的致病因素外，仍有３．５０～１５％的肝炎病人病因不明。通常将这些不明原因的肝炎称之为非甲－庚型肝炎。１９９７年日本学者报道发现一种新的肝炎病毒，并命名为ＴＴ病毒（ＴＴＶ）［１］。我们根据日本报道的ＴＴＶ基因序列，建立套式聚合酶链反应（ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）方法，在我国北京地区非甲庚型肝炎患者中检测出ＴＴＶ基因，并进行了序列分析，现将结果报道如下。材料与方法一、标…     

采用原位杂交法检测肝组织中的TT病毒

目的：检测肝组织中ＴＴ病毒。并探讨其致病性。方法：采用对称和不对称ＰＣＲ法,以地高辛素分别标记ＴＴＶ双链和单链探针,原位杂交法检测５６例肝组织。结果：５１例非甲￣非庚型肝炎肝组织中ＴＴＶ总检出率２７．５％（１４／５１）;５例非肝炎肝组织杂交阴性。ＴＴＶ ＤＮＡ主要见于肝细胞核内,在急性、慢性及重型肝炎组织中均有检出。双链探针杂交结果与单链探针检测病毒基因链的结果一致,２／６例组织ＴＴＶ基因链与互补链同时存在,结论：ＴＴＶ是导致肝炎的一种新病原,并且在肝脏内有复制。     

非甲～庚型肝炎患者血清中TTV的检测及序列分析

我们采用套式ＰＣＲ技术对 5 0例非甲～庚型肝炎患者进行ＴＴＶ ＤＮＡ检测 ,并对ＴＴＶ ＤＮＡ序列进行比较。　　对象与方法1.对象 :5 0例血清样本采自传染科诊断为急慢性非甲～庚型肝炎患者 ,血清病毒标志经ＥＬＩＳＡ和 (或 )ＰＣＲ法检测排除甲～庚型肝炎病毒、ＥＢ病毒及ＣＭＶ感染 ,并排除药物性、酒精性、自身免疫性肝炎及脂肪肝 ,无输血及血制品史。男性 41例 ,女性 9例 ,年龄 ( 30± 13)岁。2 .方法 :ＴＴＶ ＤＮＡ检测 :ＴＴＶ引物位于ＯＲＦ1区 ,外引物按ＮｉｓｈｉｚａｗａＴ报道序列合成 ,引物序列为 :正义链 (Ｐ1)ＡＣ ＣＧ…     

山东地区部分人群中TTV感染调查及TTV山东株部分基因序列分析

了解山东地区输血后丙型肝炎和非甲～庚型病例中肝炎ＴＴＶ感染及基因变异的状况。应用套式ＰＣＲ方法检测 4 1例输血后丙型肝炎和 16例非甲～庚型肝炎患者血清中ＴＴＶＤＮＡ ,并对扩增的产物直接克隆测序 ,分析其基因变异的情况。结果表明 ,4 1例输血后丙型肝炎患者血清中ＴＴＶＤＮＡ阳性检出率为 19.5% ( 8/41) ,而 16例非甲～庚型肝炎患者血清中阳性检出率为 31.3% ( 5/16)。ＴＴＶ山东第一株序列与山东第二株序列相应位置核苷酸同源性与日本株和中国第一株相比较分别为 94 %和 91% ;山东ＴＴＶ的两株序列间同源性均为 91%。研究证实山…     

山东地区TTV检测和部分基因克隆及序列测定

了解ＴＴＶ山东分离株感染状况及基因变异的情况。应用逆转录聚合酶链反应检测 2 6例山东地区非甲～庚型肝炎和 12例肝细胞癌患者血清中ＴＴＶＤＮＡ ,并对阳性扩增的产物利用ＰＣＲ技术片段直接克隆和测序 ,分析其基因变异的情况。结果显示 ,2 6例非甲～庚型肝炎中 11例ＴＴＶＤＮＡ阳性 ( 4 2 .3% )。对其中 2株 (ＴＴＶＳＤ4、ＴＴＶＳＤ5)部分基因克隆测序 ,并与日本株(ＡＢＯＯ8394 )相比较 ,其核苷酸序列同源性分别为 99.9%和 10 0 % ,而 12例肝细胞癌患者中 3例ＴＴＶＤＮＡ阳性(2 5.0 % ) ,对其中 1株 (ＴＴＶＳＤ6)部分基因克隆与…     

山东泰安地区TTV检测和部分基因克隆及序列测定

目的 探讨山东非甲-庚肝炎和肝癌患者输血传播病毒(TTV)感染状况和基因变异情况。方法 应用逆转录聚合酶链反应(PCR)检测26例山东泰安地区非甲-庚型肝炎和12例肝细胞癌(HCC)患者血清中TTVDNA，并对阳性扩增的产物利用PCR技术片段直接克隆和测序，分析其基因变异的情况。结果 26例非甲-庚型肝炎中11例TTVDNA阳性(42．3％)。对其中两株(TTVSD4、TTVSD5)部分基因克隆测序，并与日本株(AB008394)相比较，其核苷酸序列同源性分别为99．9％和100％。而12例肝细胞癌患者中3例TTVDNA阳性(25．0％)，对其中一株(TTVSD6)部分基因克隆与测序，与日本株(AB008394)相比较，其核苷酸序列同源性为99％；TTV山东泰安三株问核苷酸同源性均为99％。结论 研究证实山东泰安地区非甲～庚型肝炎和肝细胞癌患者中存在着较高TTV感染，TTV感染可能具有嗜肝性，而且可能与肝功能损害有关，是引起非甲～庚型肝炎的重要病原。     

非甲～庚型肝炎患者中TTV感染的调查

目的了解TTV在我院非甲-庚型肝炎患者中的感染状况。研究TTV感染对非甲-庚型肝炎临床表现的影响,探讨TTV在病毒性肝炎中的致病作用。方法采用聚合酶链反应(PCR)斑点杂交法对我院108例非甲-庚型肝炎患者血清标本进行TTV DNA检测。结果非甲-庚型肝炎患者TTV DNA阳性率为14.8％(16/108),急、慢性肝炎及重型肝炎患者中TTV DNA的检出率无统计学差异。TTV阳性组与TTV阴性组肝脏临床及生化指标无显著性差异。结论TTV可能并非是导致肝脏功能损害的真正病原。     

TTV与其它肝炎病混合感染及其基因型的研究

研究TTV与其它肝炎病混合感染对肝脏病变的影响及本地区TTVDNA的基因型。选TTV ORF1的保守序列作内外引物,采用微板核酸杂交－ELISA方法检测患者血清TTVDNA并对检测结果和临床资料进行统计学分析。选取异源性大于50％的序列作显色探针Ⅰ和显色探针Ⅱ,进行分型研究。学生、非甲－非戊型肝炎、慢性乙型肝炎和肝硬化患者血清TTV阳性率分别为3．3％、14．3％、12％、16％。TTV阳性和TTV阴性的慢性乙型肝炎及肝硬化患者,在年龄、性别、ALT和TBil之间无显著差异（P＞0．05）。本地区流行的TTV可分为两个主要的基因型,即I型（66．75）、Ⅱ型（25％）,部分存在混合感染（8．3％）。TTV可能与HBV、HCV有类似的传播途径,故常重叠感染。TTV与乙型肝炎及肝硬化混合感染后不影响两者的肝脏病变。TTV不是本地区非甲－非戊型肝炎的主要病因。     

Clinicopathological study on TTV infection in hepatitis of unknown etiology

AIM: To investigate the state of infection, replication site, pathogenicity and clinical significance of transfusion transmitted virus (TTV) in patients with hepatitis, especially in patients of unknown etiology. METHODS: Liver tissues taken from 136 cases of non-A non-G hepatitis were tested for TT virus antigen and nucleic acid by in situ hybridization (ISH) and nested-polymerase chain reaction (PCR). Among them, TT virus genome and its complemental strand were also detected in 24 cases of autopsy liver and extrahepatic tissues with ISH. Meanwhile, TTV DNA was detected in the sera of 187 hepatitis patients by nested-PCR. The pathological and clinical data of the cases infected with TTV only were analyzed. RESULTS: In liver, the total positive rate of TTV DNA was 32.4% and the positive signals were located in the nuclei of hepatocytes. In serus, TTV DNA was detected in 21.4% cases of hepatitis A-G, 34.4% of non-A non-G hepatitis and 15% of healthy donors. The correspondence rate of TTV DNA detection between liver tissue with ISH and sera with PCR was 63.2% and 89.3% in the same liver tissues by ISH and by PCR, respectively.Using double-strand probes and single-strand probes designed to detect TTV genome, the correspondence rate of TTV DNA detected in liver and extrahepatic tissues was 85.7%. Using single-strand probes, TTV genome could be detected in liver and extrahepatic tissues by PCR, but its complemental strands (replication strands) could be observed only in livers. The liver function of most cases infected with TTV alone was abnormal and the liver tissues had different pathological damage such as ballooning, acidophilia degeneration, formation of apoptosis bodies and focus of necrosis, but the inflammation in the lobule and portal area was mild. CONCLUSION: The positive rate of TTV DNA among cases of hepatitis was higher than that of donors, especially in patients with non-A non-G hepatitis, but most of them were coinfected with other hepatitis viruses. TTV can infect not only hepatocytes, but also extrahepatic tissues. However, the chief replication place may be liver. The infection of TTV may have some pathogenicity. Although the pathogenicity is comparatively weak, it can still damage the liver tissues. The lesions in acute hepatitis (AH) and chronic hepatitis (CH) are mild, but in severe hepatitis (SH), it can be very serious and cause liver function failure, therefore, we should pay more attention to TTV when studying the possible pathogens of so-called "liver hepatitis of unknown etiology".     

输血传播性病毒的流行病学及临床研究

目的:观察分析不同人群中TTV(transfusion transmitted virus)感染状况及相关临床意义。方法:在TTVORF1设计引物,建立巢式聚合酶链反应,检测不同人群中血清TTV DNA,并对比观察肝炎病人的临床表现。结果:29例健康人群,27例职业献血员,56例乙型肝炎,31例丙型肝炎和47例非甲～非庚型肝炎患者中,TTV DNA阳性率分别为6.9％、3.7％、23.2％、25.8％和42.6％。3种肝炎病人中,TTV DNA阳性和阴性组间4项主要临床指标无显著差异。结论:健康人群和职业献血员存在TTV健康携带者。非甲～非庚型肝炎患者TTV感染率最高。乙型和丙型肝炎患者重叠TTV感染较常见。3种肝炎病人中,合并TTV感染组与非感染组临床表现无明显差异。TTV的致病性尚待深入研究。     

长春地区TT病毒的基因分型及其临床意义

为调查各种急、慢性肝炎中TT病毒的感染状况及临床意义,并检测TTV基因的分型。利用半套式PCR（semi-nested PCR）方法检测了TTV-DNA。利用邻近丁（neighbor-joining）法画出系统树。TTV-DNA的阳性率在非甲非乙非丙型急性肝炎中为42.3%,在非乙非丙型慢性肝炎中为45.5%。基因型可分为1a、1b、2a、2b等型。TTV-DNA在非甲非乙非丙型急性非乙非丙型慢性肝炎中的感染率最高;在TT病毒与乙型、丙型肝炎病毒混合感染的慢性肝炎中,TT病毒干涉乙型及丙型肝炎病毒造成的肝细胞损伤的可能性很小。     

非甲－非庚型肝炎肝组织中经输血传播病毒DNA的原位检测

目的探讨非甲－非度型病毒性肝炎患者肝组织中经输血传播病毒（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄｖｉｒｕｓ,ＴＴＶ）ＤＮＡ的表达。方法采用地高辛素标记ＴＴＶＤＮＡ探针以原位杂交技术对１９例血清学甲、戊型肝炎病毒标志物、免疫组织化学检测肝组织中ＨＧＶＮＳＳ均用性的急、慢性病毒性肝炎患者肝组织进行检测。结果１９例肝组织中６例检出ＴＴＶ基因阳性（３１．５８％）,其中急性轻型肝炎４例（３０．８０％）,慢性肝炎２例（３３．３３％）。ＴＴＶＤＮＡ表达于肝细胞核或胞浆内。在急性肝炎,ＴＴＶ阳性细胞弥漫分布于肝小叶内,慢性肝炎于汇管区附近较为密集。６例中５例患者有转氨酶增高。结论非甲－非庚型病毒性肝炎肝组织中ＴＴＶＤＮＡ的检出表明ＴＴＶ为一种新型的嗜肝性病毒。