用等位基因特异聚合酶链反应检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变

葡萄糖 6 磷酸脱氢酶 (Ｇ6ＰＤ)缺乏症是中国南方人群中一种常见的遗传病之一 ,与药物性溶血、感染性溶血及新生儿高胆红素血症等有密切的关系。引起Ｇ6ＰＤ缺乏症的主要原因是Ｇ6ＰＤ基因点突变[1] 。现已发现引起中国人Ｇ6ＰＤ缺乏症的突变主要是 1376Ｇ→Ｔ、1388Ｇ→Ａ、95Ａ→Ｇ、392Ｇ→Ｔ、5 92Ｃ→Ｔ及 10 2 4Ｃ→Ｔ等六种突变[2 5] 。以往检测这些已知的突变 ,主要用错配扩增酶切法、等位基因寡核苷酸探针杂交等方法[2 5] 。最近 ,杜传书等[6] 报道用突变特异性扩增系统(ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｒｅｆｒａｃｔｏｒｙｍｕｔ…     

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)c.1311C＞T/IVS-1193T＞C与3'-UTR的多态性探讨

目的 对中国人群葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenas,G6PD)c.1311C＞T/IVS-11 93T＞C基因多态性与3’-非翻译区(3'-untranslated regions,3’-UTR)的多态连锁相关性进行研究.同时了解粤东、华北地区健康人群中该突变基因的携带情况. 方法 应用全自动生化仪速率法测定G6PD活性,基因测序检测G6PD c.1311C＞T/IVS-11 93T＞C基因多态性.根据G6PD基因UTR区设计特异性引物,测序确证携带c.1311C＞T/IVS-11 93T＞C基因多态性的G6PD缺乏标本是否连锁有UTR单个碱基上的变异(single nucleotide polymorphisms,SNP)位点的变异. 结果 华南地区有39例G6PD缺乏样本检测到携带c.1311C＞T/IVS-11 93T＞C基因突变,其3’-UTR和5'-UTR端没有检测到SNP位点的变异.同时,我们研究发现G6PD酶活性正常的人群中也携带有c.1311C＞T/IVS-11 93T＞C变异,其在潮州、梅州各100名正常人群中发生率分别为15.7％和12％,在郑州和石家庄各50名正常人群中发生率分别为2％和8％.该变异在中国南方与北方的正常人群之间相比较有统计学差异.粤东地区G6PD缺乏者中携带c.1311C＞T/IVS-11 93T＞C基因突变的样本并未发现连锁有UTR SNP位点突变.结论 关于G6PD c.1311C＞T/IVS-11 93T＞C基因突变与G6PD缺乏之间的相关性值得进一步探讨.     

广西瑶族与汉族葡萄糖—6—磷酸脱氢酶基因三种常见突变型？…

目的 研究广西瑶族葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）基因突变特点,并与汉族作比较。方法 用突变特异性扩增系统（ＡＲＭＳ）法对广西瑶族３４例和汉族３７例Ｇ６ＰＤ缺乏进行中国常见的三种Ｇ６ＰＤ基因突变型筛查。结果 广西３４例瑶族Ｇ６ＰＤ缺乏的基因型分别为Ｇ１３７６Ｔ １４例（４１．２％）,Ｇ１３８８Ａ９例（２６．５％）,Ａ９５Ｇ５例（１４．７％）,Ｃ１３１１Ｔ１例（２．９％）。     

我国葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症研究40年的回顾和展望

葡萄糖 6 磷酸脱氢酶 (ｇｌｕｃｏｓｅ 6 ｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ ,Ｇ6ＰＤ)缺乏症的研究 ,从首批蚕豆病病例报告算起 ,足足研究了 4 0年。　　Ｇ6ＰＤ缺乏症的研究还得从蚕豆病的发现谈起。　　自 1952年四川杜顺德报告 12例蚕豆病后 ,我国西南和华南各地相继有蚕豆病的病例报告。系统的研究源于广东东部地区出现蚕豆病的爆发流行 ,月内有上千人罹患此病。在四川简阳地区也发现较多病例。这一时期研究的主要成绩是摸清了蚕豆病的发病和流行规律 ;提出并证实蚕豆花粉不能致病 ;探讨了一套有效的治疗方案 ,将病死率…     

葡萄糖—6—磷酸脱氢酶基因突变与NlaⅢ多态性位点连锁关系 …

目的 研究葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）基因内的特定多态性位点与Ｇ６ＰＤ缺陷基因突变的连锁关系,进一步揭示Ｇ６ＰＤ缺陷症分子病理学本质及Ｇ６ＰＤ基因斩多态性位点在人类学和人类迁移研究中的意义。方法 应用变性梯度凝胶电泳和ＤＮＡ点杂交技术检测５４例Ｇ６ＰＤ活性正常男性对照者及６６例男笥Ｇ６ＰＤ缺陷者Ｇ６ＰＤ基因中距离１２外显子上游１３ｂｐ的ＮｌａⅢ多态性位点。     

1128例幼儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶筛查结果分析

目的了解盐田区幼儿园儿童葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的发生率。方法采用G6PD/6PGD定量比值法测定G6PD活性,筛查盐田区幼儿园1 128例儿童的G6PD缺乏症发生情况。结果 1 128例儿童中,共筛查出G6PD缺乏症患儿56例,发生率为4.96%。其中男性发生率(6.47%)明显高于女性的发生率(3.50%),差异有统计学意义(P0.05);男性患儿中,重度缺乏的发生率(5.21%)高于中度缺乏的发生率(1.26%),女性患儿中,中度缺乏的发生率(2.28%)高于重度缺乏的发生率(1.22%),差异均具有统计学意义(P0.05)。结论盐田区属G6PD缺乏症的高发地区,应加强人群的筛查,早期发现和诊断G6PD缺乏症对防治该病引起的溶血具有重要意义。     

福建畲族葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变型

目的研究福建畲族葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）基因突变型特点，调查其G6PD缺乏症发生率及基因频率。方法用硝基四氮唑蓝（NBT）纸片法进行G6PD缺乏症定性筛查，用突变特异性扩增系统、错配碱基PCR介导酶切位点／限制性内切酶图谱分析、聚合酶链反应．单链构象多态性分析（PCR-SSCP）和DNA测序进行基因突变型鉴定结果在1820名青水畲族和764名穆云畲族人中，分别发现101例和104例酶活性异常，两地的致病基因频率分别为0．0607和0．1706。在穆云乡54例纯畲族血缘的样本中，共检出nt1376G→T突变38例、nt1388G→A突变12例、nt95A→G突变6例，三种基因突变型分别占70．3％，18．5％和11．1％；并发现1例nt1376G→T复合nt95A→G突变、1例nt1376G→T复合nt1388G→A突变。在青水畲族中发现6例nt1024C→T突变，占8．6％；发现1例392G→T突变，结论①nt1376G→T、nt1388G→A是幅建畲族中主要的基因突变型，中华民族具有共同的G6PD基因突变型，因而可能源于共同的祖先。②在畲族人群中发现nt1376G→T、nt1388G→A、nt95A→G、nt1024C→T和nt392G→T 5种基因突变型。③发现nt1376G→T复合nt95A→G突变、nt1376G→T复合nt1388G→A突变④nt95A→G是穆云畲族中另一种常见的基因突变型；1024C→T是青水畲族中常见的一种G6PD基因突变型。⑤明确青水畲族中G6PD基因频率为0．0607，穆云畲族中为0．1706，为上述地区G6PD缺乏症的防治提供决策参考。     

成都市新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症筛查分析

目的 了解成都地区新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症的发病分布情况.方法 采用NADP＋氧化还原酶法,对11 085例（男6 440例,女4 645例）就诊患儿进行红细胞中G6PD活性的定量检测.结果 在11 085例受检者中,检出G6PD缺乏者677例,总检出率6.1%.其中男婴545例,占男婴检查人数的8.46%（545/6 440）;女婴132例,占女婴检查人数的2.84%（132/4 645）.结论 成都地区G6PD缺乏症检出率较高,应在新生儿期常规开展G6PD检测,及早诊断,采取有效防范措施,预防由G6PD缺乏引起的新生儿高胆红素血症及核黄疸的发生.     

佛山地区三种葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变型的研究

目的：探讨佛山地区小儿G—6—PD缺乏症患儿基因突变类型。方法：使用突变特异性扩增系统(amplitication refractorey mutation system ,ARMS)方法测定经C—6—PD／6磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGD)比值法二次检验证实的患儿42例静脉血，并对其中3例阳性标本进行分子克隆核测序。结果：42例标本中，G1388A突变17例，占40．5％；G1376T突变12例，占29％；A95G突变3例，占7.1％,未定型10例，经核苷酸序列分析证实检测正确。结论：ARMS法是一种用于检测G-6-PD基因突变较理想的方法。G-6—PD基因突变型G1388A、G1376T及A95G是佛山地区G-6—四缺乏症的常见基因突变型。     

葡萄糖6磷酸脱氢酶缺陷的研究现状

红细胞葡萄糖6磷酸脱氢酶（G6PD）缺陷,是常见的红细胞酶病。常因某些诱因发生溶血,而引起G6PD缺陷的主要原因是G6PD基因突变1,以往检测已知突变主要用错配PCR／酶切法、寡核苷酸探针杂交法（ASD）。最近,杜传书等2已报道用突变特异性扩增系统（ARMS）来检测中国人G6PD基因3种常见的突变,大大加快了寻找新突变的速度。 1 G6PD的分子生物学 人的G6PD是一种X连锁性酶,1986年Persico等分离出G6PD的cDNA克隆,进行了其核苷酸的序列分析,阐明了G6PD基因的结构,并以cDNA推导出酶蛋白的一级结构是由479个氨基酸所…     

漫谈“蚕豆病”和“葡萄糖—6—磷酸脱氢酶缺乏症”

１引言人们常说,某人患了或曾患过“蚕豆病”,将“蚕豆病”当成“葡萄糖－６－磷酸脱氢酶缺乏症（G６PD）”的代名词。这反映了人们对这两个概念还没有完全理解,同时也反映此病的中文全称太长、英文名不好读的缺点。因而通称为“蚕豆病”也情有可原。其实,两者正确的相互关系是G６PD缺乏症是“蚕豆病”发生的遗传基础（或遗传背景）;有这种遗传背景的人,不仅可以患上“蚕豆病”,而且还可以患其他溶血疾病,如多种药物引起的溶血、新生儿黄疸、某些感染性疾病引起的溶血（如肝炎、肺炎、伤寒、流感、腮腺炎）等。其中,新生儿黄疸…     

应用变性高效液相色谱法检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的三种常见基因突变

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症呈X连锁不完全显性遗传。G6PD具有遗传多态性，其基因定位在染色体Xq28，现已鉴定的G6PD基因突变型有131种，在我国已报道的有20种，其中多为点突变，G6PD缺乏症呈全球性、多种族、多民族分布，其基因突变型具有民族和种族异质性，我国是一个多民族闰家，在G6PD基因上一定存在着多种类型的突变，研究这些突变型对我国群体遗传学、人类学、民族渊源和变迁至关重要，也可填补我国“人类基因组多样性计划”G6PD座位的空白。变性高效液相色谱法（DHPLC）是近年发展起来的检测突变的新技术，我们初步探索了DHPLC在中国人G6PD基因突变检测中的应用。     

广州花都地区育龄夫妇及新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症筛查结果分析

目的了解广州花都地区育龄夫妇及新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的发病情况。方法对2013年4月1日至2015年4月30日在该院做孕前检查的夫妇及在该院新生儿科出生的新生儿的G6PD检测结果进行回顾性统计分析。将成人G6PD1 300U/L分为轻度缺乏组,G6PD500U/L分为重度缺乏组;将新生儿G6PD2 500U/L分为轻度缺乏组,G6PD1 000U/L分为重度缺乏组。结果在该院育龄夫妇G6PD筛查中,G6PD缺乏的总检出率为6.07%,其中男性缺乏的检出率为5.92%(57/963),重度检出率为4.67%(45/963);女性缺乏检出率为6.16%(102/1 657),重度检出率1.21%(20/1 657);该院新生儿G6PD筛查中,G6PD缺乏的总检出率为13.01%(131/1 005),其中男性缺乏的检出率为12.63%(71/562),重度检出率为9.79%(55/562);女性缺乏的检出率为13.54%(60/443),重度检出率为1.35%(6/443)。结论广州花都地区为G6PD缺乏病的高发地区,女性的G6PD缺乏的检出率高于男性,但男性重度缺乏的检出率高于女性。     

1例新生儿红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症致高胆红素血症的护理

正红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)缺乏症是一种遗传性酶缺乏病,多见于9岁以内儿童,以男孩多见,发病率为0.2%~44.8%~([1])。G6PD缺乏症因G6PD基因突变导致红细胞破坏,常有溶血性贫血、黄疸和肝脾肿大等临床表现。G6PD缺乏症在新生儿期发病,病情多凶险且进展迅速,易引起核黄疸,是新生儿急症之一~([2]),其所致胆红素脑病发生率较AB0溶血病高2~3倍~([3]),且可在血清胆红素     

两种常见葡萄糖—6—磷酸脱氢酶基因突变检测及临床分析

通过扩增葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）基因第１０，１１，１２，１３外湿子６３９ｂｐＤＮＡ片段结合寡核苷酸探针斑点杂交技术，在４０例广西籍Ｇ６ＰＤ缺陷中检测中国人常见Ｇ６ＰＤ突变ｃＤＮＡ１３７６（Ｇ→Ｔ）和ｃＤＮＡ１３８８（Ｇ→Ａ）。结合检出ｃＤＮＡ１３７６（Ｇ→Ｔ）男性半合子１２例，ｃＤＮＡ１３８８（Ｇ→Ａ）男性半合子１０例，ｃＤＮＡ１３８８（Ｇ→Ａ）女性纯合子１例，ｃＤＮＡ１３７６（Ｇ→Ｔ     

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶定量比值法的临床应用

目的了解葡萄糖-6-磷酸脱氢酶定量比值法临床应用的意义.方法采用四氮唑蓝定量显色,检测红细胞G6PD、6PGD活性,求其比值,取代高铁血红蛋白还原试验,检测G6PD缺乏患儿的酶活性.结果3年来,检出G6PD缺乏者80例,其中,蚕豆病17例、新生儿G6PD缺乏11例、药物性溶血3例、地贫复合G6PD缺乏7例、慢性溶贫42例.并对其中18例患者做了家系调查,13例男性患者中检出母亲杂合子9例,父亲半合子2例(包括父母G-6-PD活性均下降),5例女性患者中检出母亲杂合子2例,父亲半合子1例,父母酶活性正常6例.结论G6PD/6PGD定量比值法,检测酶活性的准确率高、快速、简便,有利于临界上对G6PD缺乏的明确诊断.