大麻素受体1对肥胖大鼠胰岛素抵抗的影响

目的：探讨大麻素受体1（CB1受体）对肥胖大鼠胰岛素抵抗的影响。方法：32只雄性SD大鼠给予高脂鼠饲料喂养8周,制作肥胖大鼠模型。以给予普通鼠饲料喂养的6只大鼠作为正常组。将肥胖大鼠随机分为4组,S（模型组）、AW、W、A组,每组大鼠8只。正常组、模型组腹腔内注射等量生理盐水,W、A、AW组分别腹腔内注射CB1受体激动剂WIN55212-2、CB1受体抑制剂AM251、AM251＋WIN55212-2;1次/d。2周后,测定大鼠血胰岛素、胰岛素原、C-肽水平,计算胰岛素原/C-肽、胰岛素原/胰岛素;进行高葡萄糖钳夹实验,计算相关参数,包括第1、2时相胰岛素分泌量（1PH和2PH）、胰岛素最大分泌量（MIS）及稳态葡萄糖输注率（GIR60-90）。结果：注药2周后,与正常组比较,模型组血胰岛素、胰岛素原、C-肽、胰岛素原/C-肽、胰岛素原/胰岛素及2PH、MIS水平升高,1PH及GIR60-90水平下降（P〈0.05）。W组上述指标变化方向与模型组相同,但变化幅度大于模型组（P〈0.05）;A组上述指标变化方向与模型组相反,各指标水平与正常组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;AW组上述指标水平与模型组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：CB1受体激动可加重肥胖大鼠胰岛素抵抗,抑制CB1受体可逆转此效应。     

内源性大麻素系统在2型糖尿病与肥胖中生化机制

内源性大麻素的合成与分解的酶及大麻素受体组成了内源性大麻素信号系统,这个系统参与着血脂、血糖代谢不同水平的控制。摄取能量的失衡,内源性大麻素系统就会出现调节障碍,在一些脏器的能量自身平衡方面会出现过度活跃,特别是腹内脂肪组织,这种调节障碍将有助于腹部脂肪堆积和脂联素释放减少,成为心脏代谢以及肥胖和糖尿病的危险因素。     

增食欲素受体1在营养性肥胖型大鼠胰腺组织中的表达

目的 探讨高脂膳食诱导的肥胖大鼠胰腺组织中增食欲素受体1(OX1R)蛋白的表达规律,阐明OX1R对营养性肥胖型大鼠的体重及代谢指标的影响和调节机制.方法 建立高脂膳食诱导的营养性肥胖型大鼠模型;应用微型血糖仪测定全血葡萄糖、生化酶法测定甘油三酯、化学发光免疫分析法测定血清胰岛素的变化;免疫组化鉴定胰腺组织OX1R蛋白的表达;肥胖大鼠侧脑室灌注增食欲素受体1反义寡核苷酸(OX1R-PS-ODNs),检测其对肥胖大鼠胰腺组织中OX1R蛋白产生的影响.结果 大鼠饲养8周后,高脂组大鼠体重、血糖、胰岛素、甘油三酯、总胆固醇高于正常组(P＜0.05),大鼠出现营养性肥胖.OX1R蛋白的表达定位于胰腺胰岛β细胞细胞质中,肥胖组OX1R蛋白的表达水平较正常组减低约16%(P＜0.05).肥胖大鼠侧脑室灌注反义OX1R-PS-ODNs 72 h后,胰腺组织表达的OX1R蛋白由82±6降至65±4,下降约21%(P＜0.01).结论 胰岛β细胞中有OX1R蛋白的表达.下丘脑增食欲素系统可以干预肥胖型大鼠胰腺组织中OX1R蛋白的表达,并参与肥胖的发生和血糖、血清胰岛素的代谢调节.

Abstract：

Objective To identify the presence of orexin receptor 1 (OXR1) in obese rat pancreas and clarify its effect and mechanism on body weight and metabolic index in obese rats.Methods The obese rat model was established a high-fat diet.And the serum levels of glucose,triglyeride and insulin were measured by Mini-Blood Glucose meter,biochemical enzymatic method and chemiluminescent immunoassay.The pancreatic expression of OX1R protein was bidentified by immunohistochemistry.After an intracerebroventricular infusion of orexin receptor 1 antisense oligodeoxynucleotide ( OX1R-PS-ODNs),the effect on OX1R protein was detected in rat pancreatic tissue with obesity.Results After feeding for 8 weeks,high-fat diet rats appear alimentary obesity body weight,serum glucose,insulin,triglyeride and cholesterol of high-diet rats were higher than those in the control group( P＜0.05 ).The expression of OX1R protein was located in the cytoplasm of pancreas Islet 3-cells.The expression of OX1R protein in obese rat pancreas decreased around 16% versus the normal group( P＜0.05 ).After the obese rats were treated by OX1R-PS-ODNs for 72 hours,the expression of OX1R protein in pancreas declined from 82 ±6 to 65 ±4,reduced about 21% compare with control group( P＜0.01 ).Conclusion The expression of OX1R protein is found in pancreas Islet β-cells.Hypothalamic orexin system can intervene the expression of OX1 R protein in rat pancreatic tissue with alimentary obesity.And it may participate in the occurrence of obesity and the metabolic regulation of serum glucose and insulin.     

内源性大麻素及其受体在神经病理痛治疗中的研究进展

在神经病理痛的发生、发展和维持中,内源性大麻素系统在神经系统从定位到表达水平都发生着动态变化。这些变化存在有利的一面,也存在不利的一面。外源性给予内源性大麻素在不同的疼痛模型中都产生了镇痛作用,且通过阻断大麻素受体发现内源性大麻素镇痛作用的发挥主要由大麻素CB1及CB2受体介导。抑制内源性大麻素降解酶在不同的疼痛模型中也表现出了镇痛作用,这种作用主要是因为增加了局部内源性大麻素含量水平。     

内源性大麻素受体及其神经保护作用的研究进展

<正>内源性大麻素(eCBs)系统主要包括eCBs、大麻素受体(CB)及eCBs合成、降解和运输有关的酶类,它是发挥负反馈调节的内源性脂性信号传导系统,功能和调节复杂多样.大麻素通过结合并激活CB来实现信号传递;在中枢神经系统(CNS)内,内源性脂质介质通过结合和激活CB调节突触功能,从而调节情绪情感、记忆、食欲、植物神经系统和自主行为等神经活动进程.本研究就eCBs受体及其神经保护     

捏法对大鼠至阳穴皮肤内源性大麻素受体的影响

目的观察捏法对大鼠至阳穴皮肤内源性大麻素受体的影响。方法将24只6～7周龄SD大鼠随机分为空白组、轻刺激组、中刺激组、重刺激组,每组各6只。空白组不做任何手法刺激,轻刺激组、中刺激组、重刺激组分别在至阳穴行捏法刺激7、14、21次,每天1次,每周刺激5 d,休息2 d。捏法刺激3周后各组大鼠局部脱毛取至阳穴体积约0.7 cm×0.7 cm×0.5 cm的皮肤组织,研磨后高速离心法提取蛋白,采用蛋白免疫印迹技术（Western blot）检测内源性大麻素受体1（CB1）和内源性大麻素受体2（CB2）蛋白相对表达量。结果 4组CB1蛋白相对表达量比较,重刺激组为（0.78±0.12）,均高于其余3组（P<0.05）,中刺激组、轻刺激组、空白组两两比较均无显著性差异（均P>0.05）;4组CB2蛋白相对表达量比较,中刺激组为（0.67±0.18）,轻刺激组为（0.64±0.23）,均高于空白组（P均<0.05）,重刺激组与空白组比较无显著性差异（P>0.05）。结论重刺激捏法干预能够提高大鼠至阳穴皮肤CB1蛋白相对表达量,轻刺激及中刺激捏法干预能够提高大鼠至阳穴皮肤CB2蛋白相对表达量。捏脊手法可修复损伤皮肤及抗炎,其机制可能与内源性大麻素系统激活有关。     

内源性大麻素抗肺纤维化的作用研究进展

肺纤维化作为临床常见的呼吸系统危重症,病因及发病机制复杂,最终导致呼吸衰竭,严重影响患者的生活质量.在肺组织、支气管平滑肌细胞、内皮细胞存在内源性大麻素和相应的大麻素受体,内源性大麻素与大麻素受体结合后可能通过磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路和TGF-β1/Smad3信号通路参与调节免疫反应,抑...     

大麻素受体在溃疡性结肠炎患者血清和肠组织中的表达

目的检测大麻素受体1(CNR1)和大麻素受体2(CNR2)在溃疡性结肠炎(UC)患者血清和肠组织中的表达,探讨其与UC的关系及临床意义。方法连续收集35例UC(UC组)、20例已排除炎症性肠病的普通肠炎患者(疾病对照组)和15例肠黏膜病理正常者(正常对照组),用酶联免疫吸附(ELISA)法检测其血清中CNR1、CNR2、C反应蛋白(CRP)和白介素(IL)-10表达水平;免疫组化法检测肠道黏膜中CNR1和CNR2的表达情况。结果 UC患者血清中CNR1、CNR2含量明显高于两个对照组(P<0.05)。UC活动期血清中CNR1、CNR2、IL-10表达量要低于缓解期,而CRP高于缓解期(P<0.01)。UC肠道黏膜CNR1、CNR2表达率明显高于普通肠炎黏膜以及正常肠黏膜(P<0.05),而后两者相比差异无统计学意义。结论 CNR在UC中表达显著上调,表明CNR对UC的发生发展可能起着重要作用。     

内源性大麻素系统CB1受体阻滞剂治疗肥胖研究

1肥胖概说肥胖由内脏及皮下脂肪过度沉积所致、其发生可能与遗传、饮食和运动习惯有关。按照脂肪在身体不同部位的分布、肥胖可分为腹部型肥胖和臀部型肥胖两种。腹部型肥胖又称向心性肥胖或苹果形肥胖，脂肪主要沉积在腹部的皮下以及腹腔内，四肢则相对较为细瘦。臀部型肥胖者的脂肪主要沉积在臀部以及大腿部，又称非向心性肥胖或梨形肥胖。已知脂肪细胞可分泌许多种不同的物质，代谢非常活跃。     

大麻素受体1/食欲素受体1-G蛋白偶联受体异聚体及其交叉激活作用研究进展

大麻素受体1(cannabinoid receptor 1,CB1)和食欲素受体1(orexin receptor 1,OX1)同属G蛋白偶联受体(G-proteincoupled receptors,GPCRs),两者在体内分布广泛,均参与调节摄食、能量平衡、睡眠和觉醒、食物和药物的成瘾性等。两者作用位点接近,足以形成异聚体共同参与各项功能调节,多项研究表明,CB1/OX1存在交叉激活作用。本文对CB1和OX1的作用以及CB1/OX1异聚体的交叉激活作用进行综述,以期对其有更深入的认识,从而对CB1/OX1-GPCR新药研发起到一定指导作用。     

糖尿病大鼠肠道、胰腺GLP-1受体mRNA的表达

目的:研究胰高血糖素样多肽1(GLP-1)受体mRNA表达水平在大鼠肠道不同部位和胰腺分布的特点及两者间的差异.方法:以Wistar大鼠为对照,口服葡萄糖耐量试验确定自发性2型糖尿病模型GK大鼠已发病,采用实时定量PCR方法(SYBR Green法)检测大鼠不同肠段和胰腺的GLP-1受体mRNA表达水平.结果:GLP-1受体mRNA表达中,正常大鼠不同肠段以空肠表达量最低,与回肠和结肠相比较差异有统计学意义(P<0.05),回肠与结肠相比较差异无统计学意义(P>0.05).糖尿病组大鼠空肠GLP-1受体mRNA相对表达量为0.27,而对照组大鼠空肠的相对表达量为0.59;糖尿病组大鼠结肠GLP-1受体mRNA相对表达量为0.5,对照组大鼠结肠的相对表达量为1;糖尿病组大鼠胰腺GLP-1受体mRNA相对表达量为0.37,而对照组大鼠胰腺的相对表达量为0.97,两组间空肠、结肠和胰腺GLP-1受体mRNA相对表达量差异均有统计学意义(P<0.05).糖尿病组回肠GLP-1受体mRNA相对表达量为0.73,对照组回肠的相对表达量为0.86, 两组间差异无统计学意义(P>0.05).结论:糖尿病大鼠GLP-1受体mRNA相对表达量在空肠、结肠和胰腺的下调,提示空肠、结肠和胰腺GLP-1受体的表达变化可能与GK大鼠的糖尿病发生发展有关.     

胃癌组织中KiSS-1 mRNA及蛋白的表达

目的探讨胃癌组织中KiSS-1 mRNA及蛋白的表达情况。方法分别采用原位杂交方法和免疫组织化学SP法对40例胃癌组织、22例癌旁不典型增生组织及40例正常胃黏膜组织进行KiSS-1 mRNA和蛋白的检测。结果胃癌组织、癌旁不典型增生组织及正常胃黏膜组织中KiSS-1 mRNA的阳性表达率分别为57.5%（23/40）、77.3%（17/22）、97.5%（39/40）,依次升高（X2=18.323,P〈0.01）;KiSS-1蛋白的阳性表达率分别为52.5%（21/40）、81.8%（18/22）、95.0%（38/40）,依次增高（X2=20.131,P〈0.01）;胃癌组织中KiSS-1 mRNA及蛋白表达与胃癌分化程度无关（P〉0.05）,与浸润深度、淋巴结转移有关（P〈0.05）;胃癌组织中KiSS-1 mRNA与蛋白的表达呈正相关（rs=0.702,P〈0.05）。结论 KiSS-1表达缺失与胃癌的发生、转移有关;KiSS-1有望成为胃癌早期诊断和判断预后的辅助指标。     

Nogo-A mRNA在大鼠神经组织中的表达和定位

目的：观察Nogo-A mRNA在脑,脊髓,视神经,坐骨神经的表达和细胞定位。方法：采用原位杂交技术观察8只正常Wistar大鼠脑,脊髓,视神经,坐骨神经中Nogo-A mRNA的表达和定位,结果：8只大鼠脑,脊髓,视神经切片中Nogo-A mRNA均表面阳,是性信号位于胞浆,胞核不着色,8只大鼠坐骨神经切片中均表达阴性。结论：在大鼠中枢神经如脑,脊髓,视神经中Nogo-A mRNA广泛分布,而在周围神经坐骨神经则无Nogo-A mRNA表达,提示Nogo-A mRNA阳性表达及分布与中枢神经系统再生功能低下密切相关。     

人食管鳞状细胞癌组织中KiSS-1 mRNA及蛋白的表达

目的：探讨食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中KiSS-1mRNA及蛋白的表达情况。方法：分别采用原位杂交方法和免疫组织化学SP法对49例ESCC、26例癌旁不典型增生组织及49例正常食管黏膜组织进行KiSS-1mRNA和蛋白的检测。结果：ESCC组织、癌旁不典型增生组织及正常食管黏膜组织中KiSS-1mRNA的阳性表达率分别为61.2%（30/49）、80.8%（21/26）、95.6%（47/49）,依次升高（χ2=17.856,P〈0.01）;Kiss-1蛋白的阳性表达率分别为69.4%（34/49）、80.8%（21/26）、98.0%（48/49）,依次增高（χ2=14.340,P〈0.01）;ESCC组织中KiSS-1mRNA及蛋白表达与食管癌组织学分级、浸润深度无关（P〉0.05）,与淋巴结转移有关（P〈0.05）;ESCC组织中KiSS-1mRNA与蛋白的表达呈正相关（rs=0.653,P〈0.05）。结论：KiSS-1表达缺失与ESCC的发生、转移有关;KiSS-1有望成为ESCC早期诊断和判断预后的辅助指标。     

缺氧缺血性脑损伤新生鼠MMP-9 mRNA和紧密连接蛋白ZO-1 mRNA的表达

目的:研究基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA及紧密连接(TJ)蛋白ZO-1 mRNA的表达在缺氧缺血性脑损伤(HIBD)中的作用和意义.方法:36只7日龄新生SD大鼠按照完全随机化方法分为对照组、HIBD 3、6、24、48、72 h组,每组6只.观察HIBD后结扎侧大脑半球的大体形态变化,同时采用Real-time Q-PCR方法测定脑皮层组织MMP-9mRNA和ZO-1 mRNA表达.结果:(1)对照组大鼠MMP-9mRNA表达水平极低(与HIBD组比较P＜0.05),在HIBD 3 h组其表达开始增高,24 h达高峰,72 h仍维持较高的水平.(2)对照组大鼠ZO-1 mRNA表达水平较高(与HIBD组比较P＜0.05),在HIBD 3 h组其表达开始降低,24 h降至最低,72 h仍维持较低水平.(3)缺血缺氧后MMP-9mRNA的表达与ZO-1 mRNA的表达在时间上呈负相关(r=-0.659,P＜0.05).(4)新生大鼠HIBD后24～48 h结扎侧大脑半球脑水肿明显.结论:新生鼠脑缺氧缺血后MMP-9表达升高,TJ蛋白ZO-1表达减少,提示它们可能参与了HIBD的发病过程.     

Caveolin-1蛋白及mRNA在食管鳞状细胞癌组织中的表达

目的 探讨窖蛋白1(Caveolin-1)蛋白及mRNA在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及其意义.方法 应用免疫组织化学及原位杂交方法检测57例ESCC组织、34例癌旁不典型增生组织及57例正常食管黏膜组织中Caveolin-1蛋白及mRNA的表达.结果 ESCC组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中Caveolin-1蛋白的阳性表达率依次降低,分别为54.4%(31/57)、38.2%(13/34)和19.3%(11/57),组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);ESCC组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中Caveolin-1 mRNA的阳性表达率依次降低,分别为64.9%(37/57)、47.1%(16/34)和22.8%(13/57),组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);Caveolin-1蛋白及mRNA的表达均与ESCC的分化程度、浸润深度和淋巴结转移密切相关(P<0.05).结论 Caveolin-1蛋白及mRNA表达与ESCC的发生、发展和转移密切相关,可作为ESCC的一种标记物,联合检测Caveolin-1蛋白及mRNA在评估ESCC预后方面具有一定的临床价值.     

食管鳞癌组织中NDRGl mRNA和蛋白的表达

目的:探讨食管鳞癌组织中NDRG1 mRNA和蛋白的表达情况及其与临床病理因素的关系.方法:分别采用RT-PCR和免疫组织化学SP法检测49例食管鳞癌组织(分化程度Ⅰ级14例,Ⅱ级23例,Ⅲ级12例;有淋巴结转移21例,无淋巴结转移28例)、23例癌旁不典型增生黏膜组织及49例正常食管黏膜组织中NDRG1 mRNA和蛋白的表达.结果:食管鳞癌组织中NDRG1 mRNA相对含量低于癌旁不典型增生黏膜组织及正常食管黏膜组织(P＜0.05或0.01);不同分化程度的食管鳞癌组织之间NDRG1 mRNA相对含量差异无统计学意义(P＞0.05);伴淋巴结转移的食管鳞癌组织与无淋巴结转移的食管鳞癌组织NDRG1 mRNA相对含量差异无统计学意义(P＞0.05).癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中NDRG1蛋白( )阳性率(3/23和4/49)均低于正常黏膜组织的43/49(P＜0.01);食管鳞癌组织中NDRG1蛋白表达与癌组织的分级及有、无淋巴结转移无关(P均＞0.05).结论:食管鳞癌组织中NDRG1 mRNA和蛋白表达降低,其低表达可能与食管鳞癌发生有关.     

食管鳞癌组织中Syndecan-1蛋白及mRNA表达

目的:检测食管鳞癌组织中Syndecan-1蛋白及mRNA的表达.方法:应用免疫组化SP法和原位杂交方法检测49例食管鳞癌组织及其相应的30例癌旁不典型增生组织和49例正常食管黏膜组织中Syndecan-1蛋白及其mRNA的表达.结果:①正常食管黏膜组织中Syndecan-1蛋白和mRNA均为阳性表达.食管鳞癌组织中Syndecan-1蛋白及mRNA阳性表达率均低于癌旁不典型增生组织和正常食管黏膜组织(P均＜0.05).②淋巴结转移者食管鳞癌组织与不典型增生组织中Syndecan-1蛋白和mRNA阳性表达率均低于无淋巴结转移组(P均＜0.05).③浸润至外膜的食管鳞癌组织及不典型增生组织中Syndecan-1蛋白和mRNA的阳性表达率分别低于深肌层及浅肌层(P均＜0.05).结论:人食管鳞癌组织中Syndecan-1蛋白及mRNA均呈低表达,Syndecan-1与食管鳞癌的发生发展及浸润转移有关.     

食管鳞癌组织中NDRGl mRNA和蛋白的表达

目的：探讨食管鳞癌组织中NDRGlmRNA和蛋白的表达情况及其与临床病理因素的关系。方法：分别采用RT-PCR和免疫组织化学SP法检测49例食管鳞癌组织（分化程度Ⅰ级14例，Ⅱ级23例，Ⅲ级12例；有淋巴结转移2l例，无淋巴结转移28例）、23例癌旁不典型增生黏膜组织及49例正常食管黏膜组织中NDRG1 mRNA和蛋白的表达。结果：食管鳞癌组织中NDRG1 mRNA相对含量低于癌旁不典型增生黏膜组织及正常食管黏膜组织（P〈0．05或0．01）；不同分化程度的食管鳞癌组织之间NDRG1 mRNA相对含量差异无统计学意义（P〉0．05）；伴淋巴结转移的食管鳞癌组织与无淋巴结转移的食管鳞癌组织NDRG1 mRNA相对含量差异无统计学意义（P〉0．05）。癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中NDRG1蛋白（＋＋）阳性率（3／23和4／49）均低于正常黏膜组织的43／49（P〈0．01）；食管鳞癌组织中NDRG1蛋白表达与癌组织的分级及有、无淋巴结转移无关（P均〉0．05）。结论：食管鳞癌组织中NDRG1 mRNA和蛋白表达降低，其低表达可能与食管鳞癌发生有关。     

肥胖及2型糖尿病患者脂肪组织视黄醇结合蛋白4 mRNA的表达及调控

目的 研究肥胖及2型糖尿病患者皮下和腹内脂肪组织视黄醇结合蛋白4(RBP4)mRNA的表达差异,并探讨影响其表达调控的因素.方法 选取2007年1-6月因非代谢性疾病而接受腹部择期手术的正常体重正常糖调节、单纯肥胖、2型糖尿病患者各9例,取皮下和腹内脂肪组织,用RT-PCR法检测RBP4 mRNA的表达,并在体外对正常体重正常糖调节者腹内脂肪组织分别与一定浓度的胰岛素、地塞米松、棕榈酸、肿瘤坏死因子-α、吡咯列酮共培养,用RT-PCR法检测药物对腹内脂肪组织RBP4 mRNA表达的变化.结果 肥胖和2型糖尿病患者腹内脂肪RBP4 mRNA的表达均显著高于正常体重正常糖调节者(分别为2.10±1.84和1.54±0.46比0.75±0.28,P＜0.01和P＜0.05),并明显高于相应的皮下脂肪组织;3组人群间皮下脂肪组织RBP4 mRNA的表达差异无统计学意义(1.05±0.15比0.99±0.14比1.13±0.07,P＞0.05);药物胰岛素、地塞米松、吡咯列酮、棕榈酸能显著上调RBP4 mRNA的表达,与对照组相比,分别上升了2.13、0.84、2.04、4.88倍;肿瘤坏死因子-α显著下调RBP4 mRNA的表达,较对照组下降了38%.结论 肥胖和2型糖尿病患者腹内脂肪组织RBP4 mRNA的表达显著上升,正常体重正常糖调节者腹内脂肪组织RBP4 mRNA的表达受胰岛素、地塞米松等多种参与糖脂代谢及胰岛素抵抗因素的调控.