小柴胡汤对大鼠子宫内膜异位症COX-2、P450arom表达的影响

目的探讨小柴胡汤对大鼠子宫内膜异位症(内异症)的治疗作用及其机制。方法建立大鼠内异症动物模型,随机分为空白对照组、模型对照组、小柴胡汤组、丹那唑组、联合用药组(小柴胡汤+丹那唑),利用免疫组化方法,观察分析各组大鼠在位、异位内膜中COX-2、P450 arom的表达水平。结果 COX-2、P450 arom在正常子宫内膜无表达,而在内异症内膜有强表达;小柴胡汤组和联合用药组COX-2、P450 arom的表达水平明显低于模型对照组(P<0.05);而西药丹那唑组COX-2的表达水平无明显变化,但P450 arom的表达明显低于模型组(P<0.01)。结论小柴胡汤可能通过下调异位内膜COX-2、P450 arom的表达,抑制局部雌激素的产生而达到治疗目的。     

来曲唑对大鼠子宫内膜异位症的作用及对异位内膜细胞凋亡的影响

目的:初步探讨第3 代芳香化酶抑制剂来曲唑治疗大鼠子宫内膜异位症(endometriosis, EM) 模型异位病灶的作用机制, 及对异位内膜细胞凋亡的影响。方法:用自体子宫内膜移植方法建立大鼠EM 模型, 选择建模成功的大鼠随机分为来曲唑组(n=15) 和对照组(n=15), 比较治疗前后两组大鼠异位病灶的体积、外观变化、病理组织学差异, 并采用免疫组织化学法和RT-PCR 法检测异位病灶中P450 芳香化酶(P450arom)、环氧合酶-2(COX-2)、bcl-2及bax 的表达。结果:与对照组比较, 来曲唑组异位病灶体积明显缩小(P<0.05), 异位病灶中P450arom 和COX-2的蛋白及mRNA 表达均明显减低(P<0.05)。P450arom 与COX-2 在异位病灶中的表达呈正相关(r=0.943, P<0.001;r=0.913, P<0.001)。异位病灶中bcl-2 的蛋白及mRNA 表达较对照组均明显减低(P<0.05), bax 的蛋白及mRNA 表达较对照组明显增高(P<0.05), 来曲唑组bax/bcl-2 的比值较对照组显著增加(P<0.05)。结论:来曲唑可明显缩小异位病灶体积, 可能通过降低异位病灶局部P450arom, COX-2 的表达, 抑制雌激素生成及异位病灶的增殖, 从而促进异位病灶细胞凋亡, 达到治疗目的。     

大七气汤对大鼠子宫内膜异位症P450与COX-2表达的影响

目的探讨大七气汤加减方(modified da qiqi decoction,MDQD)对子宫内膜异位症大鼠P450、COX-2表达的影响。方法采用SD雌性大鼠子宫内膜自体移植法建模,3周后按随机数字表法分为大七气汤加减方高剂量组(n=9)与低剂量组(n=9)、孕三烯酮组(n=9)、模型组(n=10)及假手术组(n=10)。给药3周后,用发光免疫分析法和ELISA法检测大鼠血清与异位内膜组织雌二醇(E2)与前列腺素E2(PGE2),用免疫组化法和RT-PCR技术检测异位组织芳香化酶P450(P450arom)、环氧化酶-2(COX-2)蛋白与mRNA的表达。结果 MDQD高剂量组大鼠血清E2、PGE2,组织E2、PGE2,P450与COX-2蛋白及mRNA明显低于模型组(P<0.01),与孕三烯酮组比较无明显差异(P>0.05)。结论大七气汤加减方能降低内异症大鼠P450、COX-2和PGE2的含量,通过抑制雌激素生成代谢降低外周血与局部病灶雌激素水平,抑制异位内膜生长。     

细胞色素芳香化酶基因及环氧合酶-2基因mRNA在子宫内膜异位症异位与在位内膜的表达

目的 探讨细胞色素芳香化酶（P450arom）基因、环氧合酶-2（COX-2）基因mRNA在子宫内膜异位症（内异症）患者异位、在位子宫内膜组织中的表达及其意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测内异症患者在位及异位子宫内膜及正常子宫内膜中P450arom mRNA、COX-2 mRNA的表达情况。结果 P450arom mRNA在内异症患者异位及在位子宫内膜均有强表达，正常子宫内膜无表达，分泌期、增殖期无差别；COX-2 mRNA在内异症患者异位及在位子宫内膜均有强表达，正常子宫内膜弱表达（P〈0．05），且内异症患者在位子宫内膜及正常子宫内膜COX-2 mRNA表达分泌期均略强于增殖期，但差别均无统计学意义（P〉0．05），异位内膜分泌期、增殖期无差别。不同rAFS分期内异症子宫内膜P450arom mRNA、COX-2 mRNA的表达无差别。结论 子宫内膜P450arom mRNA、COX-2 mRNA的高表达与内异症的发生、发展可能密切相关。     

阿那曲唑对子宫内膜异位症芳香化酶P450、雌二醇及雌激素受体的影响

目的探讨阿那曲唑对子宫内膜异位症（EMs）患者细胞色素芳香化酶P450（P450arom）、雌二醇（E2）和雌激素受体（ER）的影响。方法子宫内膜异位症患者20例采用阿那曲唑治疗3个月为治疗组,子宫内膜异位症未采取药物治疗的20例为对照组,用放射免疫法检测血清中E2水平,用免疫组化方法检测两组患者在位内膜和异位子宫内膜组织中P450arom、ER的表达。结果治疗组与对照组相比血循环中E2、P450arom和ER表达下降,差异有统计学意义（P〈0．01o结论阿那曲唑治疗EMs,可能通过降低血E2,减少异位内膜的P450arom和ER表达而起到使异位内膜病灶萎缩的作用。     

祛异康对子宫内膜异位症模型大鼠COX-2及KGF表达的影响

目的观察祛异康对子宫内膜异位症大鼠异位内膜COX-2及KGF表达的影响,探讨祛异康治疗子宫内膜异位症的机制．方法采用手术移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,随机分为空白对照组、模型组、祛异康高、中、低剂量组、丹那唑组。造模成功各组给药4W,免疫组化方法检测大鼠在位、异位子宫内膜组织COX-2及KGF的表达。结果各组大鼠异位子宫内膜组织COX-2及KGF与空白对照组比较．表达明显上升（P〈0．05）;祛异康低、中、高剂量组、丹那唑组与模型组相比COX一2及KGF表达明显下降（P〈0．05）。结论祛异康能明显抑制异位症模型大鼠异位内膜的生长,其治疗机理可能是通过降低COX-2及KGF在异位内膜组织中的表达而实现的。     

隔药饼灸对子宫内膜异位症大鼠血清IL-6水平影响的研究

建立SD大鼠子宫内膜异位症模型,用隔药饼灸进行治疗,并和西药丹那唑对照,结果表明隔药饼灸能降低子宫内膜异位症大鼠血清IL-6水平．和丹那唑比较无显著差异。实验提示降低血清IL-6水平是隔药饼灸治疗子宫内膜异位症的机理之一。     

子宫内膜异位症和子宫腺肌病P450arom和COX-2mRNA的表达及意义

目的研究细胞色素芳香化酶P450（P450arom）基因和环氧化酶-2（cox-2）基因在子宫内膜异位症（EMs）和子宫腺肌病（AM）在位和异位内膜中的表达及相关性。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术,检测22例正常子宫内膜、42例EMs及33例AM的在位和异位内膜中P450arom mRNA和COX-2mRNA的表达,并进行相关性分析。结果P450arom mRNA在正常子宫内膜无表达,在EMs和AM的在位和异位内膜中均有表达,与正常子宫内膜比较差异均有显著性（F=28．777,q=4．624～10．282,P〈0．01）。P450arom mRNA在EMs和AM异位内膜中的表达均高于在位内膜,差异有显著性（q=2．964、2．655,P〈0．01、0．05）。COX-2mRNA在正常子宫内膜无表达或弱表达,在EMs和AM的在位和异位内膜中均有表达,与正常子宫内膜比较差异均有显著性（F=21．307,q=2．583～7．905,P〈0．01）;在正常子宫内膜、EMs在位和异位子宫内膜中分泌期表达高于增殖期,差异均有显著性（t=4．401～15．865,P〈0．05）;在AM表达不随月经周期变化。COX-2mRNA在EMs和AM异位内膜中的表达均高于在位内膜,差异均有显著性（q=2．623、5．908,P〈0．05）。P450arom mRNA和COX-2mRNA在EMs的表达与rAFS分期均无相关性。P450arom mRNA与COX-2mRNA在EMs中的表达水平呈正相关（r=0．964,P〈0．01）;在AM中的表达水平亦呈正相关（r=0．813,P〈0．01）。结论P450arom和COX-2与EMs和AM的发病相关,二者协同作用促进EMs和AM的发生发展。     

细胞色素芳香化酶及环氧合酶-2在子宫内膜异位症的表达

目的 探讨细胞色素芳香化酶(P450arom)及环氧合酶-2(COX-2)在子宫内膜异位症(内异症)患者异位及在位子宫内膜组织中的表达及其意义.方法 采用免疫组化法检测内异症患者在位及异位子宫内膜及对照组正常子宫内膜中P450arom,COX-2的表达情况.结果 P450arom在内异症患者异位及在位子宫内膜中均有强表达,正常子宫内膜无表达,增生期、分泌期差异无显著性(P＞0.05).COX-2在内异症患者异位及在位子宫内膜亦有强表达,增生期、分泌期差异无显著性(P＞0.05);正常子宫内膜弱表达,分泌期表达强于增生期(P＜0.05).P450arom与COX-2在异位内膜中的表达呈正相关.结论 内异症组织中芳香化酶、COX-2的高表达可能是病变发生发展的重要因素,因此,抑制芳香化酶及COX-2活性可为内异症治疗提供新靶点,对在位内膜芳香化酶的检测也可能成为内异症辅助诊断的重要手段.     

隔药灸对子宫内膜异位症大鼠模型治疗作用及机制研究

目的:研究隔药灸治疗子宫内膜异位症大鼠模型的疗效及机制。方法:构建子宫内膜异位症大鼠模型并随机分为治疗组、孕三烯酮组、模型组和假手术组。经治疗后,采集大鼠病灶标本,观察隔药灸对大鼠异位子宫内膜体积的抑制作用,计算抑制率;RT-PCR法检测各组大鼠异位子宫内膜的KDR和PTGS2 m RNA表达。结果:经隔药灸治疗后大鼠模型的异位子宫内膜体积较模型组明显缩小;治疗组大鼠模型的异位子宫内膜PTGS2和KDRm RNA表达均明显低于模型组。结论:隔药灸能明显抑制大鼠模型异位子宫内膜的发展,并且这种治疗作用可能与抑制KDR和PTGS2表达,从而调控异位子宫内膜血管生成有关。     

雌激素及其受体、芳香化酶在子宫腺肌病中的作用

目的 探讨雌激素、雌激素受体(ER)及芳香化酶(P450arom)在子宫腺肌病中的作用.方法 收集子宫腺肌病患者病灶组织及石蜡切片,通过酶联免疫法、免疫组织化学法检测雌激素、ER、P450arom在子宫腺肌病组织中的水平,以宫颈CINIII为对照组.通过体外培养子宫腺肌病病灶细胞,采用CCK-8法观察雌激素激活组、ER抑制剂组、ER抑制剂+E2激活组、雌激素剥夺组、雌激素剥夺+ER抑制剂组各组状态下子宫腺肌病病灶细胞的增殖抑制率.结果 与对照组子宫肌层及内膜相比较,子宫腺肌病异位病灶、在位内膜中雌激素、ER、P450arom表达水平明显升高(P＜0.05);子宫腺肌病异位病灶与在位内膜比较雌激素、P450arom表达水平无明显差异(P＞0.05),但ER表达水平明显升高(P＜0.05).ER抑制剂组及ER抑制剂+雌激素激活组均能抑制子宫腺肌病病灶细胞增殖,两组之间抑制率差异无统计学意义(P＞0.05),雌激素剥夺组与雌激素剥夺+ER抑制剂组均能抑制子宫腺肌病病灶细胞增殖,其中雌激素剥夺+ER抑制剂组抑制效果大于雌激素剥夺组(P＜0.05).结论 通过雌激素激活及剥夺状态下证实子宫腺肌病异位病灶及在位内膜过高表达的雌激素、ER、P450arom促进子宫腺肌病病灶细胞增殖,其中雌激素通过与ER结合发挥生物学效应,ER除与雌激素结合外,还可通过其他途径促进子宫腺肌病发生发展.     

痛经宁对子宫内膜异位症大鼠在位及异位内膜中ICAM-1、MMP-9及VEGF表达的影响

目的:观察中药痛经宁对子宫内膜异位症(EMs)大鼠在位与异位内膜中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:自体移植法建立EMs大鼠模型,随机数字表法随机分为模型组、西药组及痛经宁低、中、高剂量组;另设正常对照组。分别给予灌胃蒸馏水、孕三烯酮及痛经宁高、中、低浓度的药液,共28 d。观察各组大鼠异位内膜的生长情况,游标卡尺测量其体积;免疫组化S-P法、免疫印迹(Western blot)法测定各组大鼠在位与异位内膜中ICAM-1、MMP-9及VEGF蛋白表达,RT-q PCR法测定ICAM-1、MMP-9及VEGF mRNA表达。结果:模型组大鼠异位内膜处出现广泛黏连及小血管生成,各用药组的黏连及小血管生成情况有不同程度的改善,以痛经宁高剂量组效果最佳;各用药组大鼠异位内膜体积较模型组有不同程度的减少,其中痛经宁高剂量组较其他药物组减少最多(P0.05)。在位及异位内膜中,模型组大鼠ICAM-1、MMP-9、VEGF蛋白及mRNA均较正常组呈高表达(P0.05),且异位内膜强于在位内膜;与模型组比较,各用药组上述指标表达均有不同程度的下降,且痛经宁高剂量组显著低于其他药物组(P0.05)。结论:痛经宁可显著缩小异位内膜的体积,改善黏连、血管生成等情况;可下调在位及异位内膜中ICAM-1、MMP-9、VEGF蛋白及mRNA表达。     

Effects of Medicinal Cake-Separated Moxibustion on Plasma 6-Keto-PGF1α and TXB2 Contents in the Rabbit of Hyperlipemia

Hyperlipemia rabbit models established with high cholesterol and fat diet were treated vith directmoxibustion and medicinal cake-separated moxibustion. The post-treatment plasma 6-keto-prostaglandin F_(1α)(6-keto-PGF_(1α)) and thromboxane B2 (TXB_2) contents were determined by radioimmunoassay. Resultsindicated that the plasma 6-keto-PGF_(1α) content significantly increased,the TXB_2 level decreased (P<0.05)and the TXB_2 /6-keto-PGF_(1α) ratio also decreased (P<0.01) in the medicinal cake-separated moxibustiongroup as compared with those in the model group respectively,but there was no significant differencebetween the medicinal cake-separated moxibustion group and the direct moxibustion group (P>0.05),suggesting that both the medicinal cake-separated moxibustion and direct moxibustion can regulate theplasma 6-keto-PGF_(1α) and TXB_2 contents,and the TXB_2/6-keto-PGF_(1α) ratio with similar actions,and have acertain protective action on endothelial cells of the aorta in the rabbit of hyperlipemia     

P450A在巧克力囊肿异位内膜和在位内膜中的表达

目的研究卵巢巧克力囊肿异位内膜腺上皮、间质细胞及其在位内膜P450芳香化酶蛋白和mRNA表达,探讨其在子宫内膜异位症发病中的作用及其临床意义.方法采用逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)和免疫组化技术检测45例巧囊壁、32在位内膜和35例正常内膜中P450芳香化酶(P450A)mRNA及蛋白的表达.结果巧囊壁异位内膜P450AmRNA表达量高于在位内膜(P＜0.01);35例正常内膜中仅有2例表达;免疫组化检测巧囊壁P450A蛋白其表达特征与mRNA一致.结论子宫内膜异位症P450A的表达在其发病中起到重要作用.     

红藤方对子宫内膜异位症大鼠间质-上皮转化的影响

目的:探讨中药红藤方对子宫内膜异位症大鼠异位内膜形成包囊过程中间质-上皮转化的影响。方法:采用自体移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,3周后取造模成功的大鼠18只随机分为模型组、红藤方组、孕三烯酮组,分别连续灌胃等容量0.9%Na Cl溶液、红藤方27.72 g·kg~(-1)·d~(-1)、孕三烯酮0.5 mg·kg~(-1)·d~(-1),均持续21 d,结束后取异位内膜组织。采用HE染色方法对异位内膜组织进行病理学观察,免疫组化方法观察上皮标志物上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、间质标志物波形蛋白(Vimentin)在异位内膜包囊中的定位和表达情况,Western blot法检测异位内膜包囊形成组织中E-cadherin、Vimentin的蛋白表达。结果:HE染色结果显示,模型组异位内膜组织中腺体减少、间质较多,红藤方组异位内膜组织腔上皮变薄、间质细胞减少,孕三烯酮组异位内膜组织腔上皮完整。免疫组化结果显示,红藤方组和孕三烯酮组异位内膜包囊腔上皮E-cadherin、Vimentin阳性信号较模型组减弱。Western blot结果显示,红藤方组Vimentin和孕三烯酮组E-cadherin蛋白含量较模型组显著降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:红藤方可能通过上调间质-上皮转化,导致间质细胞减少,从而抑制子宫内膜异位症大鼠异位内膜包囊的生长。     

宫瘤消胶囊对子宫内膜异位症大鼠异位内膜中Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:观察宫瘤消胶囊对子宫内膜异位症(内异症)模型大鼠异位内膜中凋亡基因Bcl-2、Bax蛋白的表达的影响,为该药治疗内异症提供理论依据。方法:于大鼠动情期行自体移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型,造模成功后随机分为模型组、桂枝茯苓胶囊组及宫瘤消胶囊小、中、大剂量组,各组分别给予指定药物进行灌胃干预,另取一组正常大鼠为正常内膜组,用生理盐水灌胃。用免疫组织化学法检测各组大鼠异位内膜中凋亡基因Bcl-2和Bax的蛋白表达情况。结果:与正常内膜组比较,模型组Bax蛋白表达明显降低,Bcl-2蛋白的表达明显升高,Bax/Bcl-2比值降低(P0.01);与模型组比较,宫瘤消胶囊各剂量组Bax蛋白表达明显升高,Bcl-2蛋白表达明显降低,Bax/Bcl-2比值增加(P0.05,P0.01),且作用随药物剂量增加而增加(P0.05,P0.01)。结论:宫瘤消胶囊可能通过调节凋亡基因Bcl-2和Bax的表达来实现对异位内膜的凋亡的控制。