不同鼠龄小鼠甲型流感病毒H1N1/FM1株感染TLR4-NF-κB信号通路改变比较研究

目的 比较不同鼠龄小鼠感染流感病毒后TLR4-NF-κB P65信号通路的改变情况。方法 采用免疫组化和RT-PCR技术检测不同鼠龄鼠肺组织中TLR4和NF-κB P65的蛋白及mRNA的表达,比较不同鼠龄感染流感病毒后信号通路的改变情况。结果(1)肺组织TLR4蛋白表达:幼龄模型组TLR4蛋白表达最强,与正常组和成龄模型组比较,差异均具有显著性(P<0.05)。(2)肺组织NF-κB P65蛋白表达:幼龄模型组表达最强,且随着时间变化表达逐渐增强,每一时间点与前一时间点比较差异具有显著性(P<0.05)。(3)肺组织TLR4 mRNA表达:幼龄模型组表达最强,明显高于正常组和成龄模型组,差异具有显著性(P<0.05)。(4)肺组织NF-κB P65 mRNA表达:幼龄模型组表达最强,随着病程进展表达逐渐增强;与正常组和成龄模型组比较,差异具有显著性(P<0.05)。结论 TLR4-NF-κB P65信号通路的过度活化,可能是幼龄鼠肺脏免疫病理损伤严重的机制之一。     

基于TWEAK/Fn14信号通路探讨大黄酚对OVA诱导哮喘小鼠的保护作用

[目的] 观察大黄酚对卵清蛋白（OVA）诱导哮喘小鼠模型的保护作用,并探讨肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导因子（TWEAK）/成纤维细胞生长诱导因子14（Fn14）信号通路与其保护作用的关系。[方法] 60只C57BL/6小鼠按体质量随机分为正常对照组（CON组）、模型组（OVA组）、地塞米松阳性对照组（DEX组）、大黄酚低剂量组（RHU-L组）、大黄酚中剂量组（RHU-M组）和大黄酚高剂量组（RHU-H组）,每组10只。实验结束后,对各组小鼠的哮喘症状进行评分;Diff-Quick染色法计量各组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞数。苏木精-伊红（HE）染色法观察肺组织病理学变化;酶联免疫吸附法检测各组小鼠BALF中白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-5（IL-5）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的含量;免疫组化法检测各组小鼠肺组织中TWEAK蛋白的表达水平。蛋白免疫印迹法检测各组小鼠肺组织TWEAK/Fn14信号通路蛋白TWEAK和Fn14的表达水平。[结果] 大黄酚可明显降低哮喘症状评分（P<0.05）,减少哮喘小鼠BALF中总细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞的数量（P<0.05）,改善肺组织的病理学变化,降低BALF中IL-4、IL-5、TNF-α和IL-1β炎症因子的水平（P<0.05）,减少肺组织中TWEAK和Fn14蛋白表达（P<0.05）。[结论] 大黄酚对OVA致哮喘小鼠模型具有较好的保护作用,其可能与调节TWEAK/Fn14信号通路有关。     

甘草酸对大鼠急性肺水肿的影响

目的 探讨甘草酸对大鼠急性肺水肿呼吸指数的调控。方法 将18只大鼠随机分为正常组、模型组、甘草酸组。大鼠腹腔注射6%氯化铵复制急性肺水肿模型，通过肺功能仪测定大鼠的肺功能指标，湿重/干重衡量水肿程度，HE染色观察肺组织病理损伤情况。结果 模型组肺功能残气量、最大变化压力、最大变化体积、低于正常组和甘草酸组（P <0.05）。各组大鼠阻塞时间比较，差异无统计学意义（P >0.05）。模型组弦性顺应性、深吸气量、肺活量低于正常组、甘草酸组（P <0.05）。模型组最大呼气流速、用力呼吸残气量、100毫秒用力呼气容积高于正常组（P <0.05），但低于甘草酸组（P <0.05），模型组用力肺活量低于正常组、甘草酸组（P <0.05）。各组大鼠20毫秒用力呼气容积比较，差异无统计学意义（P >0.05）。模型组肺组织含水率高于正常组、甘草酸组（P <0.05）。HE染色结果显示，肺组织水肿程度明显降低，肺泡间隔缩小。结论 甘草酸可通过改善肺通气量，减弱肺表面的水肿程度来缓解大鼠急性肺水肿，减少炎症细胞浸润。     

支气管肺发育不良模型小鼠青春期肺部菌群特点

目的：探究支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia，BPD）模型小鼠青春期肺部菌群特点。方法：32 只 C57BL/6J 新生小鼠，分为空气雌性组、空气雄性组、高氧雌性组、高氧雄性组，每组8只。高氧组小鼠生后即置于FiO₂>95%的环境中7 d，空气组小鼠置于同室内空气（FiO₂=21％）环境；之后所有小鼠室内空气环境下饲养直至6周。苏木精-伊红（hema- toxylin-eosin，HE）染色法观察小鼠肺组织病理变化；16S rDNA测序分析肺组织菌群特点。结果：BPD模型小鼠青春期肺组织肺泡化程度降低（P<0.01），双因素方差分析显示性别对小鼠辐射状肺泡计数（radial alveolar count，RAC）变化无显著差异（F= 2.001，P＞0.05）。Anosim相似性分析结果显示空气组和高氧组雄性小鼠肺部菌群差异有统计学意义（r=0.906，P=0.03），雌性小鼠菌群差异无统计学意义（r=-0.094，P=0.722）。Alpha多样性结果显示高氧组和空气组的肺部菌群物种丰富度无统计学差异（P＞0.05），Beta多样性分析中，PCoA图显示4组肺部菌群存在统计学差异（P<0.05）。LEfSe分析结果显示，高氧组棒状杆菌属（Corynebacterium）丰度下降，葡萄球菌种（Staphylococcus）升高。结论：BPD模型小鼠青春期肺部微生物群失调，棒状杆菌属 （Corynebacterium）丰度下降，葡萄球菌种（Staphylococcus）升高，并且菌群失调可能与性别相关。     

乌头汤对DPN大鼠NGF受体TrkA、p75NTR表达的影响

[目的] 通过观察乌头汤对糖尿病周围神经病变（DPN）大鼠胫神经神经生长因子（NGF）受体、酪氨酸蛋白激酶A（TrkA）和p75神经营养因子受体（p75NTR）表达及血清NGF含量的影响,探索该方改善DPN的可能机制。[方法] Wistar大鼠腹腔注射链尿佐菌素（STZ）建立糖尿病模型,观察乌头汤对胫神经纤维组织TrkA、p75NTR及血清NGF的影响。[结果] 干预前后模型组和乌头汤组均较空白组FBG显着升高（P<0.01）,各组内FBG在干预前后无统计学差异（P>0.05）;与模型组比较,乌头汤组血清NGF含量明显升高（P<0.05）,神经组织p75NTR明显降低（P<0.05）.乌头汤组p75NTR免疫组化染色阳性表达程度较模型组明显降低。[结论] 乌头汤改善DPN的作用可能与其能够调节神经纤维p75NTR含量和血清NGF含量有关。     

酸枣仁总黄酮抗抑郁作用的实验研究

[目的]研究酸枣仁总黄酮对行为绝望小鼠抑郁模型的影响。[方法]采用小鼠强迫游泳实验和悬尾实验等抑郁模型,小鼠行为绝望的不动时间作为指标,考察酸枣仁总黄酮抗抑郁活性。[结果]酸枣仁总黄酮低、中、高剂量组均能减少小鼠强迫游泳和悬尾不动时间,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05);与阳性药组比较差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]酸枣仁总黄酮具有显著的抗小鼠实验性抑郁作用。     

肺闭宁颗粒止咳、抗炎及促进PM2.5颗粒物排出作用的研究

[目的]考察肺闭宁颗粒在止咳、抗炎以及对促进PM2.5排出方面的药效学作用研究,为其临床用药提供数据支持。[方法]采用二氧化硫引咳小鼠模型、内毒素诱导的肺损伤小鼠模型以及斑马鱼PM2.5排出模型,给予不同浓度的肺闭宁颗粒干预后,观察其止咳、抗炎以及对纳米颗粒从斑马鱼体内排出进入肠道的影响。[结果]肺闭宁颗粒中（3.69 g/kg）、高（7.38 g/kg）剂量组可明显改善二氧化硫引咳模型小鼠咳嗽潜伏期时间及咳嗽次数;可降低内毒素诱导的肺损伤小鼠肺灌流液中白细胞介素-6（IL-6）浓度（P<0.05）;在斑马鱼PM2.5超细颗粒物排出模型中,肺闭宁颗粒125 mg/mL时,纳米活性炭排出发生率为63.3%,与模型对照组（16.7%）比较有统计学差异（P<0.05）。[结论]肺闭宁颗粒具有止咳、抗炎的作用,此外在促进PM2.5超细颗粒物排出、减少PM2.5对机体的损伤方面也有一定的效果,提示其在对抗雾霾天气引起的呼吸道系统疾病治疗中具有一定作用。     

拆方研究通降和胃方对胃食管反流性咳嗽豚鼠气道炎症及肺通透性的影响

[目的] 观察通降和胃方及其拆方对胃食管反流性咳嗽豚鼠模型气道炎症及肺组织通透性的影响,探讨通降和胃方治疗胃食管反流性咳嗽的作用机制。[方法] 健康雄性豚鼠60只,随机分为通降和胃方组、疏肝泄热拆方组、和胃降逆拆方组、西药组、模型组和正常组。除正常组外,其余各组采用食管下端酸灌注法制作胃食管反流性咳嗽模型,并分别予相应药物混悬液及等量生理盐水处理,光镜下观察食管及气管组织学改变,伊文思蓝浸入法测定各组豚鼠的肺毛细血管通透性。[结果] 1)模型组食管、气管炎症积分较正常组明显升高;疏肝泄热拆方组、和胃降逆拆方组在改善豚鼠气管炎症上存在交互作用(P<0.05);通降和胃方与奥美拉唑在改善豚鼠食管、气管炎症积分上比较差异均有统计学意义(P<0.05)。2)模型组肺组织通透性较正常组明显升高(P<0.05),通降和胃方与奥美拉唑在改善豚鼠肺组织通透性上比较差异有统计学意义(P<0.05),疏肝泄热拆方组、和胃降逆拆方组在改善肺组织通透性上存在交互作用(P<0.05)。[结论] 通降和胃方全方能有效改善豚鼠食管、气管组织学改变,降低肺组织通透性,从而减少炎性渗出,达到治疗胃食管反流性咳嗽的目的。     

涤痰散结活血软坚中药对非酒精性脂肪肝大鼠血清白介素-6、超氧化物歧化酶表达的影响

[目的] 通过观察涤痰散结活血软坚中药对非酒精性脂肪肝大鼠血清白介素-6（IL-6）、超氧化物歧化酶（SOD）表达的影响,探讨复方中药的作用机制。[方法] 雄性SPF级Wistar大鼠60只,按体质量分层随机分为4组：正常对照组14只,自由饮水和普通饲料饮食。模型对照组18只,中药高剂量组14只,中药低剂量组14只,均予自由饮水和高脂饲料饮食,8周后随机处死模型对照组大鼠4只,确定脂肪肝模型成立。造模成功后,分别对中药低剂量组和高剂量组行中药灌胃,模型对照组、正常对照组以生理盐水灌胃,每周称大鼠体质量,治疗8周后处死,采用ELISA法检测血清IL-6、SOD.[结果] 大鼠血清IL-6比较：高剂量组、低剂量组与模型对照组比较差异有显着性（P<0.01）,高剂量组与低剂量组比较,差异有显着性（P<0.05）.大鼠血清SOD比较：高剂量组与模型对照组比较,差异有显着性（P<0.01）,低剂量组与模型对照组比较差异有显着性（P<0.05）,高剂量组与低剂量组比较无统计学意义（P>0.05）.[结论] 涤痰散结活血软坚中药可以显着减低血清IL-6浓度,此作用表现出剂量相关性趋势,可以明显升高血清SOD浓度,此作用没有体现出剂量相关性趋势。     

抑癌扶正平衡Ⅱ号方对乳腺癌小鼠移植瘤生长转移的实验研究

[目的]观察抑癌扶正平衡Ⅱ号方对乳腺癌小鼠移植瘤生长及肺转移的抑制作用,并探索其抗肿瘤效应与硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的相关性。[方法]建立4T1乳腺癌小鼠模型,随机分为空白组、模型组、低分子肝素组、抑癌扶正平衡Ⅱ号方高、中、低剂量组,连续给药14 d后处死取材。测定移植瘤瘤质量和计数肺转移结节个数,并计算瘤质量抑制率及肺转移抑制率。ELISA法检测各组小鼠移植瘤、转移瘤、血清中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）的表达。[结果]中药各组瘤质量、肺转移结节数随中药剂量增高而下降（P<0.05）;高剂量中药组瘤质量抑制率及肺转移抑制率均优于低分子肝素组（P<0.05）。中药各组移植瘤、转移瘤、血清中HSPG的表达随中药剂量增高而上升（P<0.05）;高剂量中药组移植瘤、转移瘤、血清中HSPG的表达高于低分子肝素组（P<0.05）。[结论]抑癌扶正平衡Ⅱ号方可显著抑制乳腺癌小鼠移植瘤的增殖和肺转移,其作用机制可能与增高硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的表达有关。     

清营解表合剂对流感病毒A/PR/8/H1N1感染小鼠肺指数影响的动态观察

[目的]动态观察清营解表合剂改善流感病毒感染小鼠病毒性肺炎的情况.[方法]采用亚洲甲型鼠肺适应株(A/PR/8/H1N1)滴鼻感染小鼠制作小鼠病毒性肺炎模型,随机分组,光学显微镜下观察小鼠肺组织的病变程度并留取照片,同时计算小鼠肺指数,比较同一时相不同组间及不同时相同一组内肺指数的变化趋势.[结果]中剂量清营解表合剂与银翘解毒颗粒改善小鼠肺炎的效果相当,高剂量清营解表合剂组小鼠感染病毒后第5 d肺指数基本恢复正常.[结论]高剂量清营解表合剂对小鼠病毒性肺炎的疗效优于中剂量清营解表合剂与银翘解毒颗粒.     

调肝导浊方对apoE-/-小鼠血脂及主动脉斑块面积的影响

[目的] 观察调肝导浊方对apoE^-/-小鼠血脂及主动脉斑块的影响。[方法] 将apoE^-/-小鼠随机分成模型组和调肝导浊组并予以高脂饮食12周,C57BL/6L小鼠作为对照组给予普通饮食,12周后,检测各组小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)的水平;油红O染色评估主动脉斑块的范围;小动物超声仪检测主动脉的斑块面积及狭窄程度。[结果] 模型组与对照组相比,TC、TG、HDL-C、LDL-C均升高(P<0.05或P<0.01);调肝导浊组与模型组相比,LDL-C水平降低(P<0.05),TC、TG、HDL-C无明显差异。油红O染色显示模型组的斑块范围最大,其次是调肝导浊组,最后是对照组。B超结果显示与对照组相比,模型组主动脉的斑块面积及狭窄程度明显增大(P<0.01);调肝导浊方干预后,斑块面积减小(P<0.05),狭窄程度明显减轻(P<0.01)。[结论] 调肝导浊方可以降低apoE^-/-小鼠的血清LDL-C水平,减少主动脉的斑块面积,并改善血管的狭窄程度。     

保肝汤对小鼠四氯化碳致慢性化学性肝损伤的保护作用

[目的] 研究保肝汤对四氯化碳（CCl₄）致慢性化学性肝损伤的保护作用。[方法] 将84只昆明小鼠随机分为正常组、模型组、护肝片组、保肝汤高、中、低剂量组共6组,每组14只。除正常组外,其余各组分别在实验第1、3、10、16、22、25、28天腹腔注射0.5% CCl₄;于造模后第10天开始灌胃,其中正常组和模型组给予蒸馏水灌胃,护肝片及保肝汤高、中、低剂量组给予灌胃药液。第30天灌胃2 h后称质量、处死,并收集各组肝组织及血清标本,检测指标含量,计算肝脏指数并进行肝组织病理学检查。[结果] 与正常组比较,模型组丙氨酶转氨酶（ALT）、天门冬氨酶氨基转移酶（AST）、丙二醛（MDA）明显升高（P<0.05）。模型组肝组织病理学,可见多处大片肝细胞脂肪变性,并见多处灶状坏死;与模型组比较,保肝汤高、中、低剂量组ALT、AST降低,AST/ALT升高（P<0.05）,保肝汤中、低剂量组MDA降低（P<0.05）;保肝汤各剂量组明显改善肝组织及形态结构。[结论] 保肝汤能够减轻CCl₄对肝细胞的损伤程度,以保肝汤中剂量组作用最优;作用机制与抑制肝损伤后脂质过氧化反应有关。     

扶正固肾祛邪合剂对反复呼吸道感染小鼠免疫功能的影响

[目的]实验通过观察肾虚型小鼠模型CD4、CD8、CD4/CD8等的变化,以探讨扶正固肾祛邪合剂对肾虚型反复呼吸道感染(CRRTI)小鼠的作用机制。[方法]选择净质量16～18 g健康雄性ICR小鼠60只随机分成6组:空白对照组,模型组,阳性对照组,扶正固肾祛邪合剂高剂量组,扶正固肾祛邪合剂中剂量组,扶正固肾祛祛合剂低剂量组。正常组给予生理盐水0.5 mL/只,模型组灌生理盐水0.5 mL/只;扶正固肾祛邪合剂高剂量组灌该合剂每日0.5 mL/只(含生药为4 kg/L);扶正固肾祛邪合剂中剂量组灌该合剂每日0.5 mL/只(含生药为2 kg/L);扶正固肾祛邪合剂低剂量组灌该合剂每日0.5 mL/只(含生药为1 kg/L);玉屏风组灌玉屏风口服液每日0.5 mL/只。连续给药28 d后,称质量,摘眼球取血后,颈椎脱臼法处死小鼠,测小鼠血清CD4、CD8。[结果]CD4:模型组低于治疗组、阳性对照组(玉屏风组),有显著性差异(P0.05),中药治疗组与阳性对照组(玉屏风组)比较,差异无显著性意义(P0.05)。CD8:模型组高于治疗组及阳性对照组(玉屏风组),有显著性差异(P0.05),中药治疗组与阳性对照组(玉屏风组)比较,差异无显著性意义(P0.05)。CD4/CD8:中药各治疗组与阳性对照组(玉屏风组)比较,差异无显著性意义(P0.05)。[结论]扶正固肾祛邪合剂能升高免疫功能低下小鼠CD4、CD4/CD8,降低CD8。     

益肾化湿颗粒改善糖尿病小鼠早期肾小管损伤的实验研究

[目的]探讨益肾化湿颗粒对自发型2型糖尿病db/db小鼠早期肾小管损伤的作用.[方法]6～7周龄SPF级雄性自发型2型糖尿病db/db小鼠18只,随机分为模型组、缬沙坦组[13.33 mg/(kg·d)]、益肾化湿组[5 g/(kg·d)],每组6只,另设雄性非糖尿病db/m小鼠6只为正常组.正常组及模型组予去离子水1...     

肝爽颗粒通过Nrf2/HO-1信号通路缓解慢性肝损伤作用及机制研究

[目的]探讨肝爽颗粒(GSG)对四氯化碳(CCL4)所导致的慢性肝损伤(CLI)模型小鼠的保护作用及机制.[方法]将50只雄性BALB/c小鼠平均分为正常组、模型组以及肝爽颗粒低、中、高剂量组.除正常组外,其余各组小鼠腹腔注射20％CCL4橄榄油溶液(2 mL/kg),每周2次,持续6周,成功建立CLI模型小鼠后,正常...     

穿心莲内酯干预异丙肾诱导的心力衰竭小鼠的效应及其机制研究

[目的]评价穿心莲内酯干预过量异丙肾上腺素(ISO)致心力衰竭小鼠的药效,运用网络药理学的方法预测其作用靶点并验证。[方法]制备过量盐酸异丙肾上腺素诱导的心力衰竭小鼠模型,随机分为空白组、模型组、穿心莲内酯组、地高辛组。通过心脏超声、形态学与病理分析,评价各组小鼠心功能。采用生物信息学分析工具(BATMAN-TCM)预测药物靶点,运用实时荧光定量PCR法检测候选靶点m RNA水平。[结果]与空白组比较,模型组小鼠射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)和舒张早期二尖瓣血流速度与舒张晚期二尖瓣血流速度比值(E/A)显著降低(P0.05),左室收缩末内径(LVIDs)显著增大(P0.05),心肌细胞肥大,伴有血窦扩张和结缔组织增生,心肌组织羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR,HMG-Co A还原酶)基因表达显著上调(P0.05)。与模型组相比,穿心莲内酯组小鼠EF、FS和E/A显著升高(P0.05),LVIDs显著降低(P0.01),心肌细胞肥大减轻,心肌组织HMGCR基因表达显著下调(P0.05)。[结论]穿心莲内酯可以改善过量异丙肾上腺素诱导的心力衰竭,其机制可能与抑制HMG-Co A还原酶、调节胆固醇合成有关。     

《金匮要略》大黄甘遂汤对小鼠实验性肝纤维化治疗作用的实验研究

[目的]观察研究《金匮要略》大黄甘遂汤对四氯化碳(CCl₄)导致的小鼠肝纤维化的治疗作用及机制。[方法]昆明种小鼠42只随机分为3组,正常组、模型组、治疗组。除正常组外,其余两组依高连相法改进后造模,观察53d后各组小鼠肝脏病理、脾脏质量及体质量变化。[结果]光镜下每高倍镜视野贮脂细胞密度,造模组明显高于其他两组(P<0.01)。脾脏质量各组间无显著性差异(P>0.05)。小鼠体质量,正常组明显高于其他两组(P<0.01)。[结论]大黄甘遂汤对CCl₄导致的小鼠肝纤维化有明显的治疗作用,其机制可能与抑制了贮脂细胞的激活和转化,减少了成纤维细胞的生成有关。