类风湿性关节炎发病机制研究进展

目的探讨类风湿性关节炎的发病机制,以期为类风湿性关节炎的治疗提供理论依据。方法检索CNKI、万方、维普、Web of science、Pub Med数据库,对近几年和类风湿性关节炎相关的文献进行总结归纳。结果文章从细胞、细胞因子、信号通路三方面来阐述。与RA发病相关的细胞:免疫细胞,滑膜细胞,破骨和成骨细胞;与RA发病相关的的细胞因子:TNF-α,IL-6,IL-8,IL-17等;与RA发病相关的的信号通路:MAPK信号通路,NF-κB信号通路,JAK-STAT信号通路,Toll样受体信号通路,Wnt信号通路。结论抑制免疫细胞活性,降低炎性细胞因子水平,开发MAPK、NF-κB、JAK-STAT、Toll样受体信号通路抑制剂,以及上调Wnt经典通路,对于RA的治疗有着积极的意义。     

Toll样受体在新生儿呼吸窘迫综合征中作用的研究

目的 探讨Toll样受体在新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)中的作用.方法 选取酉阳县人民医院2014年10月至2015年10月的42例NRDS患儿作为病例组,选取同期的42例非NRDS患儿作为对照组,对两组研究对象的TLR2、TLR3和TLR4、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、JNK和核因子-κB(NF-κB)血清学水平进行检查,TLRs/JNK/NF-κB/TNF-α信号通路进行表达,分析TLR2、TLR3和TLR4血清学水平与NRDS发病的相关性,以及TNF-α、IL-6、JNK和NF-κB与NRDS发病的相关性.结果 两组患者的治疗后3d和7d的TNF-α、IL-6、JNK和NF-κB血清学水平与治疗前存在明显差异,而且病例组的TNF-α、IL-6、JNK和NF-κB血清学水平与对照组差异有统计学意义(P＜0.05);两组患者治疗后3d和治疗后7d的TLR2、TLR3和TLR4明显低于治疗前,而且病例组治疗后3d和治疗后7d的TLR2、TLR3和TLR4明显低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05);TNF-α、IL-6、JNK和NF-κB血清学水平与NRDS发病具有良好的相关性,TLR2、TLR3和TLR4与NRDS发病具有良好相关性.结论 对NRDS的Toll样受体分析可以更好的发现TLRs/JNK/ NF-κB/TNF-α信号通路与新生儿呼吸窘迫综合征的相关性.     

雷藤舒对TNF-α诱导的人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞促凋亡、抗炎及对Ras-MAPKs信号通路的调节作用

目的:观察雷藤舒(LLDT-8)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-HFLS)的促凋亡、抗炎作用,以及可能的作用机制。方法:在体外培养的RA-HFLS体系中,实验组加入终浓度为50 nmol/L的LLDT-8与终浓度为20 ng/ml TNF-α共孵育,同时设置细胞空白对照组和TNF-α刺激组。采用TUNEL法检测RA-HFLS细胞的凋亡;RT-PCR检测Bcl-2 mRNA表达水平;ELISA和RTPCR分别检测IL-6、MMP-3的表达;Western-blot检测Ras-MAPKs信号通路的磷酸化水平和蛋白表达。结果:与空白对照组比较,LLDT-8组细胞凋亡率明显增加(P0.01)。LLDT-8能显著抑制TNF-α诱导的RA-HFLS分泌IL-6、MMP-3的表达(P0.01);能明显抑制Ras蛋白和p-P38磷酸化水平,而各组之间pERK、p-JNK、c-Fos、c-Jun和c-Myc的磷酸化水平和蛋白表达差异无统计学意义。结论:LLDT-8能够抑制Ras-p38 MAPK信号转导通路的异常活化,从而抑制RA滑膜的增殖,减轻滑膜细胞的炎症。     

Fcα受体在类风湿性关节炎人成纤维样滑膜细胞的表达与功能研究

目的探讨Fcα受体在类风湿性关节炎人成纤维样滑膜细胞的表达特征及其功能。方法采用RT-PCR和免疫荧光技术,从基因和蛋白水平检测Fcα受体在类风湿性关节炎人成纤维样滑膜细胞(RA FLS)的表达;采用ELISA方法,检测IgA对RA FLS分泌IL-6的影响。结果采用RT-PCR和免疫荧光染色方法,均检测到Fcα受体在RA FLS的表达。sIgA与RAFLS孵育12h后,细胞分泌IL-6的水平明显增高,差异具有显著性(P<0.01)。mIgA与RA FLS孵育12h后,细胞分泌IL-6的量无明显改变(P>0.05)。sIgA+TNF-α同时与RA FLS孵育12h后,细胞分泌IL-6含量明显高于sIgA或TNF-α单一组(P<0.01)。结论 Fcα受体在类风湿性关节炎人成纤维样滑膜细胞存在表达,sIgA增高RA FLS分泌IL-6的水平,并与TNF-α产生协同作用。     

RhoA/ROCK信号通路对TLR-2配体诱导的类风湿关节炎患者成纤维滑膜细胞分泌趋化因子的调控作用

目的 研究RhoA/Rho激酶(ROCK)信号通路对Toll样受体2(TLR-2)配体诱导的类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)分泌趋化因子的影响.方法 RA FLS来源于活动性RA患者滑膜组织;肽聚糖被用于TLR-2配体;RhoA活性检测采用pull down方法;ROCK活性用磷酸化肌球蛋白结合亚单位1(MYPT1)蛋白表达来表示,磷酸化MYPT1蛋白检测采用免疫印迹法;细胞活性检测采用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法,趋化因子水平采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测.结果 肽聚糖(5 mg/L)刺激使体外培养的RA FLS分泌白细胞介素8(IL-8)、单核细胞趋化蛋白-2(MCP-2)和受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)明显增高,对RhoA和ROCK活化也有显著的刺激作用,肽聚糖诱导的上述作用能被TLR-2单克隆抗体所阻抑.RhoA抑制剂C3转化酶和ROCK抑制剂Y27632对PG诱导的IL-8、MCP-2和RANTES等趋化因子分泌有显著的抑制作用.结论 RhoA/ROCK信号通路对TLR2介导的RA FLS分泌趋化因子具有调控作用,通过抑制该通路活化可能有利于RA的治疗.

Abstract：

Objective To evaluate the modulation of RhoA/Rho kinase (ROCK) signaling pathway,a small Rho GTPase that is considered as an important modulator in inflammatory responses,on Toll-like receptor-2 mediated chemokine secretion in fibroblast-like synoviocytes (FLS)from rheumatoid arthritis (RA) patients.Methods The RhoA activity was measured by a pull-down assay.And the ROCK activity was assessed by Western blot.The secretion of chemokines was measured by ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay).MTT test was used to detect the cellular viability.Results The stimulation of peptidoglycan(PG,5 mg/L) increased the levels of IL-8 (interleukin-8),RANTES (regulated upon activation normal T cell expressed & secreted) and MCP-2 (monocyte chemotactic protein-2)and boosted the activities of RhoA and ROCK versus the unstimulated RA FLS.And these effects of PG were suppressed by anti-TLR-2 monoclonal antibody.Inhibition of RhoA and ROCK with a specific inhibitor inhibited the secretion of IL-8,RANTES and MCP-2 in PG-induced RA FLS.Conclusion The present study provides novel evidence that the RhoA/ROCK signal pathway modulates the TLR-2-mediated secretion of chemokines in RA FLS.It suggests that the inhibition of RhoA/ROCK may be a new therapeutic approach for RA.     

桂枝芍药知母汤对尿酸钠诱导的大鼠巨噬细胞Toll-MyD88信号通路炎性信号表达的影响

目的:基于Toll-My D88信号通路观察桂枝芍药知母汤对尿酸钠诱导的大鼠巨噬细胞炎性信号表达的影响,以期分析其抗炎的药效作用机制。方法:以尿酸钠混悬液诱导大鼠巨噬细胞制备痛风性关节炎巨噬细胞模型,以桂枝芍药知母汤含药血清进行干预,ELISA法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、钙结合蛋白S100A8的表达,DNA-蛋白质互作ELISA(DPI-ELISA)方法检测核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)活性;Western-Blot法检测髓性分化因子-88(myeloid differentiation factor 88,My D88)信号衔接蛋白、核因子κB酶抑制剂-β(inhibitor kappa B kinaseβ,IKK-β)、核因子κB抑制蛋白α亚基(NF-kappa-B inhibitor alpha,IKB-α)表达水平;逆转录PCR检测Toll样受体-2(toll-like receptor-2,TLR-2)、TLR-4mRNA的表达。结果:尿酸钠混悬液诱导巨噬细胞造模2 h后,模型细胞对照组IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、S100A8含量,NF-κB活性,My D88、IKK-β蛋白表达及TLR-2、TLR-4 mRNA表达较正常细胞对照组显著增高(P0.05),IKB-α表达较正常细胞对照组显著降低(P0.05);与模型细胞对照组比较,桂枝芍药知母汤各剂量组细胞表达TLR-2、TLR-4 mRNA水平显著降低(P0.05);在不加受体抑制剂的实验中,桂枝芍药知母汤各剂量组IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α含量,My D88、IKK-β蛋白表达水平显著降低(P0.05),高剂量组NF-κB活性显著降低(P0.05),高剂量组S100A8、IKB-α表达水平显著升高(P0.05)。结论:桂枝芍药知母汤抗炎作用机制与降低TLR-2、TLR-4 mRNA表达,抑制My D88、IKK-β蛋白表达,增加S100A8、IKB-α蛋白表达水平,抑制NF-κB激活,进而降低Toll-My D88信号通路相关炎性因子表达密切有关。     

白术多糖对类风湿性关节炎大鼠的抗炎作用及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的 探讨白术多糖(PAMK)对类风湿性关节炎(RA)大鼠的抗炎作用及其对Toll样受体4/核因子κB(TLR4/NF-κB)信号通路的影响。方法 采用Ⅱ型胶原诱导建立RA大鼠模型,造模成功后将大鼠分为模型组、阳性药物组(雷公藤多苷片)、PAMK低、高剂量组,同时设置正常对照组,每组12只。给予雷公藤多苷片或PAMK灌胃给药,1次/d,连续4周。测量大鼠体质量、足趾容积和关节炎指数;计算胸腺指数和脾脏指数;HE染色观察踝关节滑膜组织病理学变化;ELISA法检测血清及踝关节滑膜组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;Western blot检测踝关节滑膜组织中总蛋白Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、磷酸化核因子κB p65[p-NF-κB p65(Ser536)]及核蛋白NF-κB p65表达水平。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠可见滑膜增生、层次不清等病理学改变,体质量降低(P<0.05),足趾容积、关节炎指数以及胸腺、脾脏指数升高(P<0.05),血清及踝关节滑膜组织中IL-1β、...     

肥胖症患者血清对人源单核细胞细胞上Toll样受体4/转录因子-κB信号通路的影响

目的 探讨肥胖症及伴相关代谢紊乱患者血清对人源单核细胞(THP-1)细胞表面Toll样受体4/转录因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路的活化作用.方法 分别用10例单纯性肥胖及伴不同代谢紊乱患者血清干预THP-1细胞株24、48 h后,测定THP-1细胞表面TLR4和细胞内NF-κB p65磷酸化的表达水平及其分泌白细胞介素(IL-1)β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的能力.Western印迹检测TLR4蛋白和细胞内NF-κB p65磷酸化蛋白水平;RT-PCR检测TLR4 mRNA的表达水平;ELISA检测细胞上清液中IL-1 β和TNF-α的水平.结果 THP-1细胞表面TLR4、细胞内NF-κB p65磷酸化的蛋白及TLR4 mRNA表达水平以及分泌IL-1β和TNF-α的能力差异有统计学意义(P＜0.05);THP-1细胞表面TLR4、细胞内NF-κB p65磷酸化蛋白及TLR4 mRNA表达水平以及分泌IL-1β和TNF-α的能力随肥胖症代谢紊乱组分的增加而增高,并随干预时间的延长而增高(P＜0.05).正常对照组、单纯性肥胖组、肥胖伴高血糖组、肥胖伴血脂紊乱组以及肥胖伴3种代谢紊乱组血清孵育THP-1细胞48 h,TNF-α的浓度(ng/L)分别为(222±32)、(246±52)、(322±32)、(322±34)和(490±83),IL-1β(ng/L)分别为(94±19)、(133±19)、(174±22)、(180±30)、(279±38)(P＜0.05).结论 单纯性肥胖及肥胖伴不同组分代谢紊乱患者的血清可不同程度地诱导TLR4/NF-κB信号通路的活化,伴代谢紊乱组分越多的肥胖患者的血清诱导TLR4/NF-κB信号通路活化的能力越强.     

水溶性乌梢蛇总蛋白对成纤维样滑膜细胞分泌白介素-1β、α-肿瘤坏死因子和白介素-10的影响

目的 观察水溶性乌梢蛇总蛋白对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞分泌IL-1β、TNF-α和IL-10的影响,以探讨治疗RA的可能机制.方法 用常规方法提取水溶性乌梢蛇总蛋白,取RA患者滑膜组织进行成纤维样滑膜细胞培养;选择对数生长期的细胞进行实验,实验分五组,分别加入昆明山海棠(200μg/ml,阳性对照组)、水溶性乌梢蛇总蛋白(50、150、450μg/ml)DMEM溶液,及加入等体积的DMEM溶液(空白对照组)进行细胞培养,72小后采用ELISA方法测定培养液上清中IL-1β、TNF-α和IL-10的水平,RT-PCR检测滑膜细胞IL-1β、TNA-α和IL-10的mRNA表达.结果 水溶性乌梢蛇总蛋白150 μg/ml、450 μg/ml组和阳性对照组细胞培养液上清中TNF-α、IL-1β水平明显降低,mRNA表达减少,而IL-10水平升高,mRNA表达增加,与空白对照组差异具有统计学意义(P<0.05).结论 水溶性乌梢蛇总蛋白可能通过抑制成纤维样滑膜细胞TNF-α和IL-1β及促进IL-10分泌来减轻炎症反应.到达治疗RA的目的.

Abstract：

Objective To evaluate the effect of soluble total proteins of Zaocys dhumnades on the expressions of interleukin-1β (IL-1β), tumor necrosis factor-α (TNF-α) and IL-10 in human fibroblast-like synoviocytes (FLS) cultured in vitro. Methods Primary cultured FLS isolated from the synovium of patients with rheumatoid arthritis (RA) were incubated in the presence of different concentrations (50, 150 and 450 μg/ml) of soluble total proteins of Zaocys dhumnades, with Tripterygium hypoglaucum Hutch (THH) and DMEM as the positive and negative controls, respectively. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and RT-PCR were used to detect the expressions of IL-1β, IL-10 and TNF-α in the FLS. Results The protein and mRNA levels of IL-1β and TNF-α in the supernatant of the FLS exposed to 150 and 450 μg/ml of the soluble total proteins of Zaocys dhumnades decreased, while IL-10 protein and mRNA increased significantly as compared with those in the negative control group (P<0.01). Conclusion The soluble total proteins of Zaocys dhumnades produce therapeutic effect on RA possibly by inhibiting IL-1β and TNF-α and promoting IL-10 expressions in the FLS.     

读片窗(5)

简要病史 女，39岁，不明原因下出现头痛、头晕3天。MRI图像见图1～3。 图示说明：左侧小脑半球见类圆形异常信号，T1WI呈高、低信号，T2WI大部分为低信号，周边呈高信号，病灶内侧见片状长T1长T2水肿区，第四脑室及脑桥受压变形，中线结构局部向右侧移位。     

Co-existence of calcitonin gene-related peptide (CGRP) and 5-hydroxytryptamin (5-HT) in rabbit lung

It was investigated that the localization and distribution of calcitonin gene-relatedpeptide (CGRP) in the rabbit lung by ABC-GDN immunohistochemistry.The results demon-strated that CGRP immunoreactivity was located in neuroendocrine cells (NEC_s) and neu-roepthelial bodies (NEB_s),including all airways from bronchi,bronchioles,and alveolar ducts.The nerve fibers in walls of the intrapulmonary bronchi and blood vessels also had CGRP-immunoreactivity.Adjacent sections immunostained with antibodies to CGRP and 5-HT provedthe coexistence of CGRP and 5-HT in NECs and NEBs.This finding suggested the possibilityof functional interaction between the peptide and amine.     

血浆内5—羟色胺含量与肺心病的关系

用荧光法测定42例肺心病急性期血浆5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的含量变化,结果显示:5-HT、5-HIAA 值显著高于支气管炎发作期和对照组;肺心病缓解后,5-HT、5-HIAA 值显著下降.肺心病伴呼吸、心脏衰竭及肾功能不全者5-HT 值高于无并发症患者,5-HT 显著升高的肺心病患者预后差     

斯蒂克勒综合征5例分析

目的 探讨斯蒂克勒综合征的眼部及其他临床表现。方法 对一个家第三代５例患者进行临床分析。结果 ５例患者主要眼部表现为不同程度的近视、白内障、玻璃体变性、尖发难治的视网膜脱离。患者身材疲长,下颌稍小,无关节病和脊柱异常。结论 我勒综合征是一种罕见的以眼部症状为特征的遗传性闰病。     

子宫内膜异位症引起输尿管狭窄临床分析

目的 探讨子宫内膜异位症引起输尿管狭窄的临床表现及治疗方案。方法 回顾性分析1990-2000年间收治的输尿管子宫内膜异位症5例。结果 所有病例均表现为患侧肾脏及上段输尿管积水。术前诊断明确者3例。4例行输尿管病灶切除、输尿管膀胱再植术。其中3例患侧肾积水消退,肾脏排泄功能恢复正常：1例肾积水无明显好转。另1例行患侧肾脏及输尿管切除术,术后临床症状消失。结论 输尿管子宫内膜异位症多数发展为隐匿性肾功能受损,IVU、RPG、MRU可发现肾积水及病灶部位。对于腔内型和混和型输尿管子宫内膜异位症建议输尿管镜取活检术前明确病理。治疗需切除病变输尿管,行输尿管膀胱再植术或输尿管吻合术。若肯定患侧肾功能已完全消失者,行患侧肾脏和输尿管切除。以上治疗的同时需行卵巢切除,有生育要求者保留卵巢而行内分泌治疗。     

颈动脉切除术的临床体会(5例报告)

颈内动脉与椎动脉是供应大脑环的主要动脉 ,二者在大脑底分别发出前及后交通支 ,构成大脑动脉环 ,以等量血流供应大脑两半球 ,是大脑的重要侧枝循环。所以阻断单侧颈动脉血流后常常因大脑动脉环的解剖变异 (如发育异常 ,或由其他原因引起的血管腔狭小 ) ,则有可能产生脑供血不足 ,而导致严重的并发症 ,甚至死亡。笔者于 1995年 4月～ 1999年 2月对 5例病人实行颈动脉切除术 ,效果满意。1　临床资料1.1　一般资料　本组患者男性 3例 ,女性 2例 ,中位年龄 45岁 (31～ 5 9岁 )。病种 :颈动脉体瘤 2例 ,颈动脉巨大蔓状血管瘤 1例 ,颈部原发血管…     

预激综合征(WPW)外科治疗

WPW是指先天性房室之间存在异常传导束(Kent束)使心房冲动提前到达心室某一部位,提前激动心室,产生过速型心律失常,重者可引起室颤,甚至猝死。WPW发病率为1.5%～5%,药物治疗对于顽固性心律失常病人仅能缓解症状而不能根治。我院心外科与心内科合作,从1989年7月～1990年5月,采用自制的单导执笔式和多导扫雷式异常传导束标测仪,为5例病人较准确     

氟胞嘧啶合成工艺的改进

氟胞嘧啶(1,5-Fluorocytosine,简称5-Fc)系一抗深部真菌的有效药物,化学名为     

手术治疗周围动脉假性动脉瘤(附55例报告)

目的 探讨周围动脉假性动脉瘤的手术治疗要点,提高手术治疗的成功率和安全性。方法 总结12例来收治的55例周围动脉假性动脉瘤的诊治经验。结果 8例经保守治疗痊愈,47例通过多种手术术式治愈,没有手术死亡。结论 保守治疗多用于瘤体较小、浅在、早期和破口较小易于压迫控制的假性动脉瘤。手术治疗要点在于有效地控制动脉出血和重建动脉血流。对接近主动脉弓的巨大假性动脉瘤,使用体外循环或血液快速回收输入装置辅助,可提高手术安全性。