补肾方药对D-半乳糖致衰大鼠心肌组织氧化应激和细胞凋亡的影响

目的:观察补肾方药对D-半乳糖致衰大鼠心肌组织氧化应激及细胞凋亡的影响。方法:2 months雄性SD大鼠40只,随机分为青年对照组、衰老组、左归丸组、右归丸组,每组10只。衰老组每日腹腔注射D-半乳糖400mg·kg-1,连续60天;青年对照组每日腹腔注射等体积生理盐水;左归丸组和右归丸组处理同衰老组,同时分别按每日相当生药量4.97g·kg-1和4.94g·kg-1灌胃给药。采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸(TBA)法检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;采用Western Blot检测Bcl-2和Bax蛋白表达水平并测定组织Caspase-3相对活性。结果:与青年组对照组相比,D-半乳糖致衰组大鼠心肌组织SOD活性下降、MDA含量升高,Bcl-2蛋白表达下调、Bax蛋白表达上调,Caspase-3活性升高;给予左归丸、右归丸能显著改善D-半乳糖致衰大鼠心肌组织氧化应激水平,减少细胞凋亡。结论:补肾方药左归丸、右归丸可通过提高抗氧化能力和减少细胞凋亡而发挥其延缓心肌组织衰老的作用。     

左归饮对D-半乳糖致亚急性衰老模型大鼠肝肾功能及其自由基代谢的影响

目的:研究滋阴补肾方左归饮对D-半乳糖致亚急性衰老模型大鼠肝肾功能及自由基代谢水平的影响,初步探索其抗衰老作用机制。方法:取健康SD大鼠72只,雌雄各半,随机分为六组,即对照组,模型组,维生素E组,左归饮高、低剂量组及六味地黄丸组。除对照组颈背部皮下注射生理盐水外,其余各组颈背部皮下分别连续注射D-半乳糖造成亚急性衰老模型。造模同时,各给药组分别灌胃给予维生素E、高、低剂量左归饮及六味地黄丸药液进行干预,对照组与模型组同时分别给予等体积的蒸馏水。连续给药8周后,腹主动脉采血,取大鼠肝、肾组织,测定血清中肝肾功能主要指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、肌酐(CREA)、尿素氮(BUN),以及肝肾组织中超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)水平。结果:与模型组比较,左归饮给药组能够降低大鼠血清中ALT、AST、ALP、CREA及BUN的含量,提高大鼠肝、肾组织中SOD和T-AOC的活性,降低MDA的含量。结论:左归饮可能通过改善衰老大鼠的肝肾功能,影响肝肾自由基代谢水平而起到延缓衰老的作用。     

左归饮对围绝经期大鼠卵巢VEGF及SPARC表达的影响

目的:观察滋阴理气中药左归饮对围绝经期大鼠卵巢血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC)表达的影响.方法:采用围绝经期大鼠动物模型,分别给予低、中、高剂量左归饮(13.78,20.67,31.00 g·k~(g-)1)灌胃处理8周.用RT-PCR和免疫组化法检测卵巢VEGF mRNA及蛋白的表达,用RT-PCR方法检测卵巢SPARC mRNA的表达水平.结果:围绝经期大鼠卵巢VEGF mRNA的表达明显高于青年组(P＜0.01),中、高剂量左归饮可有效降低其表达水平(P＜0.01).围绝经期大鼠卵巢SPARC mRNA的表达明显低于青年组(P＜0.01),中、高剂量左归饮可使其表达显著升高(P＜0.01).结论:VEGF和SPARC表达异常可能在卵巢衰老过程中起一定作用.滋阴理气中药左归饮能通过下调VEGF的表达、上调SPARC的表达,从而促进衰老大鼠卵巢的血管生成,延缓卵巢衰老过程.     

丹参饮对大鼠胃溃疡边缘黏膜细胞凋亡和部分生长因子表达的影响

目的:观察丹参饮(丹参、檀香、砂仁)对大鼠乙酸性胃溃疡的影响并探讨其作用机制。方法:制备大鼠乙酸性胃溃疡模型,给予生理盐水、丹参饮治疗14 d后,观察胃黏膜损伤程度(m)、溃疡边缘黏膜细胞凋亡(AI)、凋亡相关基因Bc l-2以及表皮生长因子受体(EGFR)、碱性成纤维细胞(bFGF)的表达情况。结果:丹参饮可明显促进大鼠溃疡愈合(P<0.01),显著抑制胃溃疡边缘黏膜细胞凋亡(P<0.05、P<0.01),同时促进凋亡抑制基因Bc l-2的表达,其中7、3.5 g/kg剂量组更为显著(P<0.01)。丹参饮在促进溃疡愈合的同时,还显著增强EGFR的上增性表达(P<0.05、P<0.01),且随着溃疡的愈合,bFGF的表达逐渐减少,其中7 g/kg剂量组bFGF表达接近正常(P>0.05)。结论:通过抑制凋亡及生长因子途径来促进胃溃疡愈合可能是丹参饮治疗胃溃疡的作用机制之一。     

橄榄解酒饮对急性酒精性肝损伤大鼠细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响

目的观察橄榄解酒饮对大鼠急性酒精性肝损伤的干预效果,探讨其对肝细胞凋亡进程的调节作用。方法采用白酒灌胃造模法,每天连续两次灌胃白酒,每次间隔1h,连续5d后取肝组织切片,检测凋亡细胞指数和Bcl-2蛋白,并与护肝胶囊对照。结果橄榄解酒饮可显著降低凋亡指数、增加Bcl-2蛋白阳性表达,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论橄榄解酒饮通过抑制肝细胞凋亡而减轻肝组织损伤。     

左归饮对围绝经期大鼠卵巢促卵泡激素受体表达的影响及机制

目的探讨左归饮对围绝经期大鼠卵巢促卵泡激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)表达的影响及机制。方法采用围绝经期大鼠动物模型,分别给予低、中、高剂量左归饮灌胃处理8周,用RT-PCR和免疫组化法检测卵巢FSHR mRNA及蛋白的表达。未成年大鼠注射孕马血清后收集培养卵巢颗粒细胞,用RT-PCR方法检测给予不同处理因素后FSHR mRNA的表达水平。结果(1)围绝经期大鼠卵巢FSHR的表达明显低于青年组(P0.01),给予不同剂量左归饮处理后,FSHR表达均显著升高(P0.01)。(2)培养颗粒细胞给予不同处理因素,结果显示,与对照组相比,左归饮提取物可促进FSHR mRNA表达(P0.01);与单纯加入左归饮提取物相比,同时加入左归饮提取物和福司考林(Forskolin)可进一步促进FSHR mRNA的表达(P0.01),同时加入左归饮提取物和酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein则能明显削弱左归饮的促进作用。结论左归饮可通过上调围绝经期大鼠卵巢FSHR的表达,提高卵巢对卵泡刺激素的反应性,改善围绝经期卵巢功能。左归饮对FSHR mRNA表达的促进作用可能是通过激活腺苷酸环化酶-蛋白激酶A(cAMP-PKA)及酪氨酸蛋白激酶途径实现的。     

王氏连朴饮对脾胃湿热证大鼠胃黏膜细胞凋亡调控基因蛋白的影响

目的：观察脾胃湿热证大鼠胃黏膜细胞凋亡指数（AI）及凋亡调控基因蛋白Bcl-2、P53变化规律,探讨王氏连朴饮治疗脾胃湿热证的作用机制。方法：采用TUNEL法检测胃黏膜组织AI及SABC法N步检测胃黏膜上皮细胞凋亡基因相关蛋白Bcl-2、P53。结果：模型组胃黏膜细胞促凋亡基因相关蛋白过度表达,明显高于正常组及王氏连朴饮各剂量组（P〈0．05）,正常组与王氏连朴饮各剂量组之间无显著性差异。结论：脾胃湿热证模型组大鼠AI升高,Bcl-2、P53表达增强。王氏连朴饮有抑制胃黏膜细胞凋亡调控基因蛋白Bcl-2及P53过度表达、修复胃黏膜的作用,从而调节细胞凋亡趋于正常。     

左归降糖益肾方对2型糖尿病肾病小鼠足细胞凋亡的影响

目的探讨左归降糖益肾方治疗糖尿病肾病（DN）的效果及可能作用机制。方法40只MKR小鼠随机分为MKR鼠组、模型组、中药组和西药组,每组10只,同期另设10只C57小鼠为对照组。模型组、中药组、西药组均予高脂饮食联合右肾切除建立糖尿病肾病模型,术后8周中药组给予左归降糖益肾方溶液28g/（kg·d）,西药组给予格列喹酮片7.9mg/（kg·d）和贝那普利片1.3mg/（kg·d）,其余各组均以等量蒸馏水灌胃,每日1次,连续8周。检测各组小鼠空腹血糖、尿微量白蛋白（UmA1b）、肾小球足细胞凋亡水平及Bcl-2mRNA、BaxmRNA和蛋白表达水平。结果模型组可见凋亡细胞明显增多,多数为肾小球内的足细胞,中药组及西药组足细胞凋亡情况较模型组明显减少。与对照组比较,MKR鼠组和模型组小鼠空腹血糖、UmA1b和Bcl-2、BaxmRNA和蛋白表达均明显升高,并且模型组明显高于MKR鼠组（P<0.01）;给药后,中药组与西药组空腹血糖、UmA1b及BaxmRNA和蛋白表达均较模型组明显降低,Bcl-2mRNA和蛋白升高（P<0.01）,而中药组与西药组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论足细胞凋亡参与了DN的发病,左归降糖益肾方可能通过影响Bcl-2、Bax的表达以及抑制足细胞凋亡从而保护肾脏。     

半枝莲提取物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其对凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨半枝莲提取物(Scutellaria barbata D.Don extract,SBE)对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2,Survivin和Caspase-3表达的影响。方法体外培养SMMC-7721细胞,以2.5,5和10 mg.L-1SBE处理48 h,并以2.5 mg.L-1顺铂(DDP)作为阳性对照。用MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,二步法免疫组化检测Bcl-2,Survivin和Caspase-3蛋白表达。结果与正常对照组相比,SBE各浓度组细胞抑制率显著升高(P(0.001),细胞凋亡率明显上升(P(0.01),Caspase-3蛋白表达显著上升(P<0.01或P<0.05),Bcl-2和Survivin蛋白表达明显下降(P<0.01或P<0.05)。结论SBE具有诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用,其分子机制可能与上调Caspase-3蛋白表达以及下调Bcl-2和Survivin蛋白表达有关。     

中药天年饮对衰老大鼠睾丸生精细胞凋亡及相关因素的影响

目的研究中药天年饮对衰老大鼠睾丸生精细胞凋亡及相关因素的影响。方法40只SD大鼠随机分为4组,正常组、衰老模型组、天年饮用药组及阴性对照组,每组均为10只。D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老的大鼠模型。采用ELISA方法检测各组大鼠血清睾酮含量、SP免疫组化法检测睾丸生精细胞p53蛋白的表达情况、TUNEL法检测各组大鼠睾丸生精细胞的凋亡情况。结果衰老大鼠血清睾酮含量明显降低(模型组与正常组比较:P<0.05),衰老大鼠睾丸p53阳性细胞率及凋亡指数明显高于正常大鼠(P<0.01)。天年饮用药组大鼠血清睾酮含量较衰老大鼠明显升高(P<0.05),天年饮用药组大鼠睾丸p53阳性细胞率及凋亡指数较衰老大鼠明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论中药天年饮可改善衰老大鼠的生精功能,具有一定延缓衰老的作用。