丙泊酚对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其Caspase-3表达干预机制的研究

目的通过观察ip丙泊酚对脑缺血再灌注大鼠海马区神经细胞的影响,探讨丙泊酚对临床围手术期预防脑缺血再灌注损伤的作用。方法 SD大鼠60只随机分为丙泊酚组、假手术组和模型组。采用大脑中动脉线栓法制作左侧大脑动脉栓塞模型。在缺血再灌注前10 min时,丙泊酚组ip丙泊酚50 mg/kg,模型组ip给予等量生理盐水。假手术组只进行颈部切开、缝合操作而不进行缺血再灌注实验。缺血再灌注24 h采集脑组织。TTC染色法测定大鼠左侧脑组织梗死面积,免疫组化检测大鼠脑组织海马区Caspase-3的表达,原位杂交检测大鼠海马组织Caspase-3 m RNA的转录水平。结果与模型组比较,丙泊酚组脑组织灰白色区域明显缩小,改善了脑组织梗死面积,海马区Caspase-3的阳性表达和Caspase-3 m RNA的转录水平明显降低(P0.01)。结论丙泊酚干预对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能通过干预Caspase-3相关的细胞凋亡信号传导途径来完成。     

地塞米松对氯胺酮麻醉后幼鼠认知功能及海马Caveolin-1表达的影响

目的:探讨地塞米松对氯胺酮麻醉致幼鼠认知功能的影响及机制。方法:选取30只SD幼鼠,随机分为正常对照组、氯胺酮组、氯胺酮+地塞米松组,每组10只。除正常对照组外,其余两组采用腹腔注射氯胺酮(50 mg·kg^-1)麻醉并行剖腹探查术,术前和术后氯胺酮+地塞米松组腹腔注射给药地塞米松(2.0 mg·kg^-1),1次/d,连续3 d,正常对照组和氯胺酮组腹腔注射等体积生理盐水。各组幼鼠进行Morris水迷宫实验,HE染色观察大鼠脑组织病理变化,Western blotting实验、免疫组化实验、Realtime PCR实验检测脑部海马组织中小窝蛋白-1(Caveolin-1)蛋白及基因表达水平。结果:定位巡航阶段第1天,氯胺酮组、氯胺酮+地塞米松组幼鼠逃避潜伏期均显著高于正常对照组(P<0.05),氯胺酮组与氯胺酮+地塞米松组幼鼠逃避潜伏期差异无统计学意义(P>0.05);从第2天开始,氯胺酮组幼鼠逃避潜伏期显著高于氯胺酮+地塞米松组与正常对照组(P<0.05)。与氯胺酮组比较,氯胺酮+地塞米松组幼鼠首次穿过平台所在象限需要的时间显著缩短,穿台次数显著增多(P<0.05);幼鼠海马组织Caveolin-1蛋白和mRNA表达水平显著升高(P<0.05)。病理组织学检查结果显示,氯胺酮+地塞米松组幼鼠大脑组织海马区神经元细胞形态明显改善。结论:地塞米松提高幼鼠脑组织Caveolin-1的表达改善氯胺酮麻醉手术后对学习记忆影响。     

丙泊酚对老年患者术后认知功能的影响

目的 探讨丙泊酚对老年患者术后认知功能的影响。方法 74例行择期手术的老年患者根据麻醉药物的不同随机分为丙泊酚组和异氟醚组,每组37例,比较观察两组患者术后认知功能。结果 两组术后4、24 h简易智能量表(MMSE)评分均较麻醉前下降,差异有统计学意义(P<0.05);丙泊酚组术后4、24 h MMSE评分均高于异氟醚组,差异有统计学意义(P<0.05);两组术后48 h MMSE评分均恢复至麻醉前,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 丙泊酚与异氟醚相似,均可使老年患者术后早期出现认知功能障碍,但丙泊酚恢复更快。     

丙泊酚对大鼠肠缺血再灌注损伤时肝细胞凋亡及Caspase-3的影响

目的探讨丙泊酚对大鼠肠缺血再灌注损伤时肝细胞凋亡及Caspase-3的影响。方法成年健康Wistar大鼠42只,随机分为3组:实验对照组(C组,6只)、肠缺血再灌注组(IR组,18只)、丙泊酚干预组(P组,18只)。各组根据再灌注时间分为1,3,6h三个时相。通过夹闭肠系膜上动脉制作肠缺血再灌注损伤模型,实验结束后即刻取肝左叶做标本。用免疫组织化学法检测Caspase-3蛋白表达量,末端转移酶标记技术(TUNEL)法检测肝细胞凋亡指数(AI)。结果与C组比较,IR组和P组肝组织Caspase-3蛋白含量、AI均增加(P<0.05);与IR组比较,P组Caspase-3蛋白表达减少、AI减少(P<0.05)。结论丙泊酚可以下调大鼠肠缺血再灌注时Cas-pase-3蛋白表达,使肝细胞凋亡减轻,从而对肝损伤有一定的保护作用。     

丙泊酚影响认知功能的特性分析

目的 分析相应镇静程度下的丙泊酚对术后认知功能中的视空间感觉、逻辑认知和学习记忆方面的影响,为临床麻醉提供神经心理学依据.方法 门诊肠镜检查患者57例,术前无神经系统及精神相关疾患,学历初中以上,按年龄分为≤40a组和＞40 a组,行双频谱指数(BIS)监测下丙泊酚靶控输注麻醉,测试患者麻醉前后记忆与学习成绩及常规监测血流动力学参数.结果 患者丙泊酚麻醉后清醒进行的记忆测试中,麻醉前后逻辑认知(笔算、心算)测试成绩分别为(47.39±0.92)、(34.79±2.92)分;(31.68±0.61)、(25.93±2.43)分,简易智能状态检查法(MMSF)量表测试总分为(29.95±0.17)、(26.47±1.14)分,MMSE中瞬间记忆与即时运算成绩分别为(2.99±0.01)、(2.30±0.23)分;(4.99±0.01)、(3.19±0.20)分,P均＜0.01,＞40 a与＜40 a年龄组患者测试成绩总分分别为(29.85±0.17)、(25.30±0.71)分;(29.97±0.08)、(29.20±0.30)分(P＜0.05).结论 丙泊酚对患者麻醉后的瞬间记忆、即时运算与逻辑认知能力有短暂的影响,年龄越大影响越明显.     

葛根素对大鼠脑缺血再灌注后Caspase-3表达的影响

目的:研究葛根素对缺血再灌注大鼠海马神经元Caspase-3表达的影响。方法:用插线法制作大鼠大脑中动脉闭塞(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)局灶性脑缺血再灌注模型,左侧MCAO1h,再灌注23h后处死,对照组给予生理盐水,葛根素组给予葛根素。苏木精-伊红染色观察缺血侧海马区组织形态学改变,海马区Caspase-3的表达通过免疫组化来测定。结果:对照组、葛根素组、假手术组缺血侧海马区平均密度值分别为0.13±0.01、0.07±0.01、0.05±0.01。对照组大鼠缺血侧海马区Caspase-3的表达较假手术组显著增强(P<0.01),给予葛根素处理后,Caspase-3的表达减弱(P<0.01)。对照组缺血侧海马区许多神经元有凋亡现象,葛根素组凋亡神经元减少,假手术组偶见凋亡神经元。结论:脑缺血再灌注损伤可致海马区Caspase-3的表达增加,凋亡神经元增多。葛根素可下调海马区Caspase-3的表达,抑制神经元的凋亡,对脑组织可能有保护作用。     

丙泊酚麻醉对新生期大鼠海马BDNF及Trk-B的影响

目的观察新生期大鼠丙泊酚麻醉对空间学习记忆能力发育的影响。方法 7日龄SD大鼠45只,随机平均分为3组:空白对照组,不做任何处理;丙泊酚麻醉组,腹腔注射丙泊酚25 mg.kg-1,每20 min给予首次剂量的1/2,麻醉维持2 h;中长链脂肪乳注射组,腹腔注射脂肪乳25 mg.kg-1,每隔20 min给予首次剂量的1/2。待麻醉后4 h,每组随机处死6只,免疫组化法分析海马的caspase-3表达,蛋白免疫印迹法测定BDNF和Trk-B的水平。其余同窝饲养至40 d时行Morris水迷宫测定。结果与对照组比较,丙泊酚麻醉组海马BDNF及Trk-B表达明显减少、caspase-3表达明显增加(P<0.05),脂肪乳组与对照组差异无显著性。Morris水迷宫实验中,丙泊酚组大鼠寻找隐藏平台潜伏期较对照组明显延长(P<0.05),在记忆保留实验中丙泊酚组大鼠穿越平台次数明显少于对照组(P<0.05),脂肪乳组与对照组均无明显差异。结论新生期大鼠丙泊酚麻醉可影响空间认知功能发育,该效应可能与新生期海马内神经元凋亡增加,BDNF途径抑制有关。     

大黄素对肠上皮细胞炎症模型Caspase-3表达的影响

目的研究大黄素对肠上皮细胞炎症模型Caco-2细胞Caspase-3表达的影响。方法对LPS诱导的Caco-2炎症细胞模型,采用不同浓度的大黄素干预处理,用RT-PCR和westernblot法检测Caspase-3表达的情况。结果 LPS诱导的Caco-2细胞Caspase-3的表达升高,不同浓度大黄素作用于LPS诱导的Caco-2细胞24h后,Caspase-3mRNA和蛋白表达随大黄素浓度的增加而下降。结论大黄素抑制Caco-2炎症细胞模型凋亡因子Caspase-3的表达,抑制Caco-2细胞凋亡。     

葛根素对大鼠脑缺血再灌注后Caspase-3和c-fos表达的影响

目的:研究葛根素对缺血再灌注大鼠脑组织中Caspase-3和c-fos表达的影响。方法:SD大鼠随即分为对照组、模型组和治疗组,用免疫组化法测定Caspase-3和c-fos的表达。结果:葛根素能下调Caspase-3和c-fos蛋白的表达。结论:葛根素对大脑有保护作用。     

七氟烷和丙泊酚麻醉对老年肺癌患者术后认知功能的影响

目的：对比老年肺癌患者术中丙泊酚、七氟烷对术后认知功能的影响。方法：选取我院接诊肺癌根治术患者54例,随机分为两组,每组27例,A组术中采用七氟烷行麻醉维持,B组术中采用丙泊酚行麻醉维持,观测两组术后各时段简易精神状态检查表（MMSE）评估结果及术后认知功能障碍（POCD）、躁动发生情况。结果：B组术后6h、24h、72hMMSE评估结果均低于A组（P<0.05）;A组躁动发生率为11.11%,B组躁动发生率为18.52%（P<0.05）;B组术后72hPOCD符合率高于A组（P<0.05）。结论：丙泊酚与七氟烷均会引起早期认知功能障碍,但应用七氟烷术后认知功能障碍的发生率相对较低,病例可更快恢复。     

金纳多对脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡和caspase-3表达的影响

目的 探讨金纳多对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及caspase-3表达的影响。方法 线拴法制作大鼠脑缺血再灌注模型；30只健康成年SD大鼠随机分3组：假手术组、模型组、金纳多治疗组；每组于脑缺血2h再灌注24h行脑灌注固定取材，采用苏木素-伊红（HE）染色以观察梗死灶的部位和范围；采用原位末端标记法（TUNEL）及免疫组化染色检测脑组织凋亡细胞数及caspase-3蛋白表达。结果 与其它两组相比，金纳多治疗组脑组织病理变化明显减轻，神经细胞凋亡、caspase-3蛋白表达明显减少，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 金纳多对大鼠缺血性脑损伤有保护作用，下调caspase-3蛋白表达减少神经细胞凋亡可能是其主要机制之一。     

七氟烷短时吸入对新生大鼠海马caspase-3活性和认知功能发育的影响

目的探讨七氟烷短时吸入对新生大鼠海马caspase-3活性和认知功能发育的影响。方法 7日龄新生SD大鼠64只,随机分为A、B、C、D 4组(n=16):A组吸入40%氧气1 h,B、C、D组分别吸入1.0%、2.0%、4.0%七氟烷1 h。各组随机取8只大鼠,于吸入七氟烷后24 h采用流式细胞仪定量分析海马caspase-3的活性,观察海马神经细胞凋亡情况;各组余8只大鼠于7 wk采用Morris水迷宫测试其认知功能。结果 B、C、D组Morris水迷宫测试成绩低于A组,而且随着吸入七氟烷浓度的增加,逃避潜伏期和探索时间逐渐延长,差异有统计学意义(均P<0.01);吸入1.0%、2.0%、4.0%七氟烷大鼠海马神经细胞凋亡率分别为(31.0±2.7)%、(52.8±4.9)%、(71.4±3.2)%,均高于A组(1.9±0.8)%,而且随着吸入七氟烷浓度的增加,神经细胞凋亡率逐渐增加,差异有统计学意义(均P<0.01)。结论七氟烷短时吸入导致海马神经细胞凋亡,并阻抑新生大鼠认知功能发育。     

不同麻醉剂对MECT抑郁患者血压及认知功能的影响

目的观察无抽搐电休克治疗(MECT)中丙泊酚与硫喷妥钠对抑郁患者血压及认知功能的影响。方法将56例接受MECT治疗的抑郁症患者随机分为两组,在MECT时分别使用硫喷妥钠或丙泊酚诱导麻醉,疗程为8次,在治疗前和治疗结束后5 min记录患者心率(HR)、平均动脉压(MAP),治疗前和疗程结束1周后进行汉密顿抑郁量表(HAMD)、威斯康星卡片分类(WCST)、连续作业测验(CPT)、修订韦氏成人智力量表(WAIS-RC)测查评定。结果硫喷妥钠组MECT后MAP高于丙泊酚组(P<0.01),两组疗程结束1周后HAMD分均比治疗前降低(P<0.01),WCST,CPT,WAIS-RC评分比较无统计学差异(P>0.05)。结论丙泊酚用于MECT治疗麻醉诱导时,对患者认知功能无明显影响,同时对MAP影响小,可作为MECT首选麻醉药。     

米诺环素对缺血 再灌注损伤皮层的保护作用及对caspase 3活性与表达的影响

目的探讨米诺环素对脑缺血 再灌注损伤的保护机制。方法利用线栓法制备大脑中动脉栓塞局灶性脑缺血模型,根据Zea Longa神经缺损体征评分法评价综合体征,流式细胞仪测定凋亡率,Western Blot等检测缺血 再灌注损伤后,腹腔给予米诺环素对大鼠皮层caspase 3活性和表达的影响。结果米诺环素能显著改善缺血 再灌注损伤大鼠的神经缺乏体征及凋亡率（P＜0.05）,同时能抑制皮层caspase 3活性和表达（P＜0.05）。结论米诺环素可能通过调节caspase 3活性和表达,从而发挥抗缺血 再灌注损伤作用。     

大肠癌及腺瘤中caspase-3和bcl-2的表达及临床意义

为探讨大肠腺瘤和大肠癌中 bcl-2和 caspase-3基因的蛋白表达及其与临床病理指标的可能关系 ,采用免疫组织化学 S-P方法检测 15例正常大肠粘膜、3 9例大肠腺瘤和 62例大肠腺癌标本中 bcl-2和 caspase-3的表达。结果显示 ,在正常大肠粘膜、腺瘤和腺癌中bcl-2和 caspase-3的阳性表达率分别为 2 6.7% ( 4 /15 )、86.7% ( 13 /15 ) ,5 9.0 % ( 2 3 /3 9)、5 6.4% ( 2 2 /3 9) ,77.4% ( 4 8/62 )、45 .2 % ( 2 8/62 ) ;腺瘤和腺癌分别与正常大肠粘膜比较 bcl-2和 caspase-3的表达差异均有显著性 ( P<0 .0 5 ) ;bcl-2和 caspase-3的蛋白表达均与大肠癌组织学类型、淋巴结转移和 Dukes分期无明显相关 ,而与组织学分级和术后 5年生存率有明显相关性 ( P<0 .0 5 )     

红景天苷对大鼠骨折术后认知功能的改善作用及对海马大麻素2型受体表达的影响

目的探讨红景天苷对大鼠骨折术后认知功能的改善作用及对海马大麻素2型受体(CB2R)表达的影响。方法将60只大鼠随机均分为对照组、术后认知功能障碍(POCD)组和红景天苷组,各20只。POCD组和红景天苷组大鼠行胫骨骨折内固定术制备POCD模型,大鼠苏醒后,红景天苷组灌胃给予75 mg/kg的红景天苷,对照组和POCD组灌胃给予等量生理盐水,持续到术后第7天。于术前1 d、术后第1,7天时行旷场实验和恐惧测试。结果 3组大鼠各时点旷场实验探索总路程和声音恐惧测试僵直时间百分比比较,无明显差异(P> 0. 05)。与对照组相比,POCD组和红景天苷组大鼠术后1 d场景恐惧测试僵直时间百分比降低(P <0. 05);与POCD组相比,红景天苷组术后7 d百分比升高(P <0. 05)。与对照组比,POCD组和红景天苷组不同时点血清中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)含量及海马组织中CB2R和CD11b含量均增加(P <0. 05);与POCD组相比,红景天苷组不同时点各指标含量降低(P <0. 05)。结论红景天苷可改善大鼠骨折术后POCD,其机制可能通过抑制海马CB2R表达和海马小胶质细胞活化,减轻炎性反应有关。     

依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织Caspase-3和Pdcd-5蛋白表达的影响

目的:探讨依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织Caspase-3和Pdcd-5蛋白表达的影响.方法:102只健康雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组6只、脑出血组48只和依达拉奉治疗组48只.后2组又分为3h、6h、12h、1d、2d、3d、5d、7d8个亚组,每组6只.采用大鼠尾动脉自体不凝血50 μL注入尾状核区建立脑出血模型.免疫组化法检测Caspase-3和Pdcd-5蛋白表达变化.结果:与脑出血组相比,依达拉奉治疗组于出血后3h血肿周围组织Caspase-3和Pdcd-5蛋白表达减少,但差异无统计学意义(P＞0.05),出血后6h、12h、1d、2d、3d、5d、7d,2组的Caspase-3和Pdcd-5蛋白差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论:依达拉奉可抑制Caspase-3和Pdcd-5蛋白表达,对脑出血后脑组织损伤有保护作用.     

丙泊酚后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的长时程保护作用

目的:观察丙泊酚后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤是否具有长时程保护作用。方法:采用Longa法加以改良建立局灶性脑缺血再灌注模型,健康成年SD雄性大鼠144只,体质量250~280g,随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、脂质溶剂对照组(I组)和丙泊酚后处理组(P组),每组36只,各组各取6只在术后1、3、7、14、21和28d分别进行改良神经功能缺损程度评分(modified neurological severity score,mNSS),在术后1、7、14和28d每个时间点每组取6只进行脑梗死体积百分比测定,余每组6只于术后8和22d进行Morris水迷宫测试。结果:经长时程观察,IR组较S组mNSS评分明显增高,脑梗死体积百分比明显增大,水迷宫定位航行测试逃避潜伏期明显延长;P组与IR组比较,mNSS评分减小,脑梗死体积百分比缩小,逃避潜伏期缩短;IR组与I组比较差异无统计学意义。结论:丙泊酚后处理具有长时程脑保护作用,且此作用时效可维持28d,与丙泊酚脂质溶剂成分无关。     

异丙酚麻醉对体外循环患者肺功能的影响

目的:研究异丙酚对心内直视手术体外循环(CPB)引起的肺损伤是否具有保护作用。方法:选择心脏瓣膜置换术患者30例,随机分为异丙酚组(P组)和对照组(C组)。P组于CPB前静脉注射异丙酚1mg/kg后,以4￣6mg/(kg·h)持续泵入。C组CPB期间静脉注射咪唑安定0.1￣0.2mg/kg、氟哌利多0.1￣0.2mg/kg维持麻醉。分别于CPB前、停止即刻及术毕测量并记录气道峰压(PAWpeak)、动态肺顺应性(Cc)、平均肺动脉压(MPAP)、肺血管阻力指数(PVRI)、氧合指数(PaO2/FiO2)、肺泡-动脉氧分压差[p(A-a)(O2)]和肺内分流量(Qs/Qt)。结果:与C组比较,P组CPB停机即刻PAWpeak,MPAP,PVRI,p(A-a)(O2),Qs/Qt降低,PaO2/FiO2,Cc升高,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。术毕时除PAWpeak与PaO2/FiO2外,两组其余指标差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:异丙酚对体外循环后肺损伤具有保护作用。     

木犀草素对K562细胞caspase-3活化的影响

目的:探讨木犀草素对K562细胞增殖和凋亡的影响.方法:采用MTT法检测K562细胞的增殖,流式细胞术和Hoechst33258/PI荧光染色分析K562细胞的凋亡,比色法测定caspase-3的相对活性,半定量RT-PCR检测caspase-3 mRNA水平的改变,Western-blot分析caspase-3酶原的变化.结果:木犀草素处理细胞24 h后的IC50值为(104.6±13.5)μmol·L-1.浓度为10,20,40μmol·L-1木犀草素处理细胞24 h后均可诱导K562细胞发生凋亡,各处理组的细胞凋亡率均明显高于对照组(P＜0.01).随着浓度及时间的增加,各个木犀草素处理组K562细胞的caspase-3活性升高(P＜0.01),其作用具浓度及时间依赖性.而随着木犀草素浓度的增加,K562细胞中caspase-3的mRNA水平逐渐增加,caspase-3酶原的蛋白水平逐渐减少.结论:木犀草素可通过诱导K562细胞凋亡而抑制其增殖,其诱导K562细胞凋亡可能与激活caspase-3有关.