胶体金免疫层析试验的室内质量控制探讨

目的通过对胶体金粪便隐血试验(FOB)室内质量控制的研究,探讨胶体金免疫层析试验(GICA)的室内质量控制。方法用递减稀释血红蛋白的方法找到胶体金粪便隐血测试条的弱阳性检测浓度(或称检测下限、临界浓度),然后配制出上限质控液、下限质控液、阴性质控液,再用这些质控液在临床工作中开展胶体金粪便隐血试验的室内质量控制。结果胶体金粪便隐血试验的室内质量控制开展2年,有效地监控了胶体金试条的质量变化和检验过程中各种因素对检验结果的影响。结论通过自配多浓度的质控液,可以比较有效地开展胶体金免疫层析试验的室内质量控制工作。     

粪便隐血质控品的制备和评价

目的制备较理想的粪便隐血质控品,以保证粪便隐血检验质量。方法将红细胞溶血后配制成1 000 mg/L Hb溶液并梯度稀释,用化学法和胶体金法进行隐血试验,选择粪便隐血质控品的最佳Hb浓度;用不同防腐剂防腐,观察结果的稳定性。结果最终选择Hb 100 mg/L为粪便隐血质控品配制浓度,同时可作为化学法质控品浓度、胶体金法质控品高值浓度。选取Hb 1 mg/L为胶体金法粪便隐血质控品低值浓度。甲苯防腐的Hb溶液在5个月内结果最稳定,可用于粪便隐血试验室内质控。结论初步制备了较理想的粪便隐血质控品,可用于粪便隐血检验的质量控制。     

便隐血胶体金免疫层析试条制备及其临床应用研究

[目的]为建立一种快速简便胶体金免疫层析法检测大便中血红蛋白及其临床应用评价。[方法]将人血红蛋白单克隆抗体标记胶体金并包被硝酸纤维膜，制成免疫层析试条，用Hb标准品进行校准，同时与万华普曼公司生产的同类金标试条以及邻联甲苯胺法作对比试验，检测临床病人粪便标木中FOB(便隐血)。[结果]木FOB金标试条灵敏度达40ng／ml，特异性强，重复性好，经广州军区总院100份住院病人大便FOB检测，结果准确率达100％。[结论]金标免疫层析法检测FOB具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点。     

3种粪便隐血试剂的实验评估及影响因素探讨

目的 比较3种不同品牌的免疫胶体金粪便隐血试纸条敏感性、特异性、干扰试验检测结果,了解和探讨免疫胶体金潜血试剂的优缺点及影响因素.方法 使用不同浓度的血红蛋标准液对3种隐血试纸条的灵敏度进行比对测定;选取中山市古镇医院本院消化科确诊上消化道出血患者粪便标本25例;下消化道出血患者粪便标本50例,体检中心健康体检者粪便标本60例,对3种隐血试纸条进行临床标本验证试验;采用8种动物抗凝血、4种不同浓度维生素C、5种不同浓度过氧化物酶、铁剂对这3种隐血试纸条进行干扰试验.结果 3种试剂条的最低敏感度血红蛋白均达到0.18 μg/mL,干扰试验结果显示均为阴性;在临床标本验证实验结果中,健康体检者的粪便标本检测结果均为阴性.结论 对高度怀疑上、下消化道出血的患者,胶体金试纸条检测结果为阴性的临床标本,建议稀释该标本或使用其他方法进行复测.     

免疫胶体金法检测粪便隐血的应用评价

目的对门诊粪便隐血试验即将采用的免疫胶体金法试纸条进行应用评价。方法对同一标本采用传统方法即邻甲联苯胺化学法和免疫胶体金法同时进行隐血检测,并作方法学评价。结果 1000份粪便隐血试验,胶体金法阳性率为40.1%,化学法为32.7%,二者差异有统计学意义。胶体金法在灵敏度和特异性方面都高于化学法,且不受各种干扰因素的影响。但其也存在少数假阴性和假阳性的情况。结论可以用胶体金法取代化学法做粪便隐血试验,但还需根据临床情况具体分析,有时需与化学法相结合,为临床提供客观、准确的检验结果 。     

大便隐血质控物的配制及应用

目前,在市场上很难有大便隐血质控物出售,而在日常工作中经常需要使用。经过长期的实践,我们自行配制了隐血质控物,进行日常质量控制,效果好,结果稳定。1质控品的配制1.1材料与方法1.1.1试剂全血质控物、蒸馏水、普通琼脂、棕黄色浓缩广告颜料、粪便隐血II号检测试剂盒(Fecal OB-II)、大便隐血(FOB)检测试剂盒(胶体金法)、邻甲联苯胺溶液、3%过氧化氢。1.1.2方法将普通琼脂按半固体培养基和固体培养基的配制的量,称取二者的平均量加入至1000ml蒸馏水中,按配制培养基的方法,反复煮沸,充分进行灭菌,再加入0.8g/L天然棕黄色浓缩广告颜料混…     

两种方法检测粪便隐血比较与评价

目的比较评价化学法和免疫胶体金法检测粪便隐血结果，并分析两种方法的影响因素。方法用化学法和免疫胶体金法对同一标本同时进行隐血试验。结果1500例粪便隐血试验，其中免疫胶体金法阳性率为39．1％，化学法为31．4％。结论两种方法联合检测并结合临床资料才能提高粪便隐血的有效检出（是否有隐血及出血的程度）。     

基于EP-17A2的胶体金法检测 粪便隐血的空白限、检出限及定量限的建立及评价

目的 参考美国临床实验室标准化委员会(CLSI)发布的《临床实验室检验程序检测能力评价指南(第二版)》(EP-17A2)文件,探讨粪便隐血(FOB)胶体金法检测能力,建立该实验室的空白限(LOB)、检出限(LOD)及定量限(LOQ),减少弱阳性标本漏检率,并为胶体金法的检测限提供定量评价方法。方法 使用人游离血红蛋白(f-Hb)ELISA试剂盒检测新鲜全血制备的系列低浓度的血红蛋白溶液,制定校准曲线,将粪便隐血的空白样本及一系列的血红蛋白低浓度样本使用胶体金试纸条进行检测,利用Nato Checker710对显色带进行定量检测,并对定量结果进行统计分析,建立胶体金法检测粪便隐血的空白限、检出限及定量限。结果 空白限为99.01ng/ml,检出限为340.48 ng/ml,定量限为354.9 ng/ml。结论 参考CLSI EP17-A2文件建立的检测限比常规方法建立的检测限科学合理,优于肉眼判断结果,更能满足临床实验室的质量要求和临床早期诊疗的需求; 为提高实验室质量管理水平,每批次粪便隐血应根据此方法建立检测限,以及应用于其它项目胶体金法检出限的建立。     

胶体金法测粪便隐血的假阴性分析

目的探讨胶体金法检测粪便隐血时出现的假阴性原因。方法用胶体金和转铁蛋白法测已知浓度的人血红蛋白(Hb)稀释液及用胶体金法测稀释后的粪便标本。结果对用胶体金法检测45例柏油样粪便显示阴性的12例标本,用转铁蛋白法测阴性数为1例,稀释后用胶体金测阴性数为1例。结论胶体金法测粪便隐血出现假阴性标本时应稀释后再次检测或者用其他方法进行验证,以保证结果的准确性。     

化学法和免疫法检测粪便隐血对比分析

目的：比较化学法和免疫法检测粪便隐血在上消化道出血中的阳性率及二者联合检测在上消化道出血中的应用。方法：分别用邻联甲苯胺试剂和胶体金试纸条对56份粪便标本进行隐血试验。结果：化学法检测粪便隐血阳性率为85．7％,免疫法阳性率为51．8％,二者联合检测阳性率为91．1％。结论：在检测上消化道出血时化学法优于免疫法,二者联合检测可提高阳性率。     

2010~2011年血培养病原菌分布和耐药性分析

目的 研究该院2010~2011年血培养病原菌分布及耐药性.方法 回顾性分析该院2010~2011年血培养标本病原菌检出情况及其药敏试验结果.结果 10 128例血培养标本共检出病原菌1 276株,革兰阴性杆菌、革兰阳性球菌及真菌分别占57.1%(728/1 276)、33.4%(426/1 276)、9.5%(121/1 276).革兰阳性球菌以表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌等为主,对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺均敏感;粪肠球菌耐药率低于屎肠球菌.革兰阴性菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌为主;超广谱β内酰胺酶阳性肠杆菌科细菌耐药率高于阴性株.碳青霉烯类对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的抗菌活性强于铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌.真菌以白色假丝酵母菌为主.结论 2010~2011年该院血液感染患者较多,应重视血培养标本检测及致病菌耐药性分析,应根据药敏实验结果 及耐药趋势合理应用抗菌药物.     

2005-2007年北京市5家三级甲等医院急诊科感染患者革兰阴性杆菌药敏变迁情况分析

目的 调查北京市大型医院急诊科感染患者革兰阴性杆菌药敏状况及抗生素耐药变迁规律.方法 对北京市5家三级甲等医院2005-2007年急诊科感染患者细菌培养结果进行回顾性分析,了解革兰阴性杆菌的分布状况及抗生素耐药变迁规律.结果 共分离革兰阴性杆菌2 285株,占64.62%,居前5位的为铜绿假单胞菌(占23.89%)、大肠埃希菌(占19.91%)、鲍曼不动杆菌(占17.59%)、肺炎克雷伯菌(占8.05%)、嗜麦芽窄食单胞菌(占3.94%).2005-2007年,细菌的抗生素敏感率出现了明显的下降趋势,尤以常用抗生素如头孢菌素类、碳青霉烯类和喹诺酮类下降显著,其中铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率2005、2006、2007年分别为17.30%、22.53%、31.92%,鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率分别为13.87%、12.09%、23.56%.结论 大型综合医院急诊科细菌谱趋向于医院感染的特点,细菌的抗生素敏感率出现明显下降的趋势,抗生素耐药形势不容乐观.     

分离自肺部感染患者呼吸道标本的致病菌分布及其耐药谱分析

目的 了解肺部感染患者病原菌的分布及耐药性.方法 对临床分离致病菌1020株,进行鉴定和药敏试验,对其结果进行分析.结果 1 020株病原菌中,革兰阳性球菌248株(24.3%),以葡萄球菌为主;革兰阴性杆菌588株,以铜绿假单胞菌(12.0%),克雷伯菌(11.0%),大肠埃希菌(7.8%),不动杆菌(7.1%)为主.革兰阳性球菌对青霉素和氨苄西林高度耐药;革兰阴性杆菌对亚胺培南耐药率最低,其次是哌拉西林/他唑巴坦,但对部分抗菌药物产生多重耐药.结论 引起肺部感染病原菌以革兰阴性杆菌为主,在治疗肺部感染时应对病原菌进行分离检测,并根据药敏试验结果合理选用抗菌药物,减少耐药菌株产生.     

常见革兰阴性杆菌临床分离株对碳青霉烯类等抗菌药物的耐药性分析

目的 调查常见革兰阴性杆菌临床分离株对碳青霉烯类等抗菌药物的耐药性,为临床治疗提供依据。 方法 采用回顾性分析方法,调查2009年1月至2011年12月从温州医学院附属第一医院住院患者分离的2361株革兰阴性杆菌对碳青霉烯类等抗菌药物的耐药性,其中肠杆菌科细菌1832株,非发酵菌529株。 结果 肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药较低。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、粘质沙雷菌、摩根摩根菌和产酸克雷伯菌对亚胺培南的耐药率分别为0.2%(2/1053)、3.0%(15/504)、2.9%(3/102)、9.5%(7/74)、21.7%(10/46) 、10.7%(3/28)和16.0%(4/25);对美罗培南的耐药率分别为0.4%(4/1053)、3.4%(17/504)、3.9%(4/102)、8.1%(6/74)、19.6%(9/46)、14.3%(4/28)和16.0%(4/25)。非发酵菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率高,鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌对亚胺培南的耐药率分别为76.8%(209/272)、37.2%(55/148)和73.4%(80/109);对美罗培南的耐药率分别为73.9%(201/272)、33.8%(50/148)和69.7%(76/109)。肠杆菌科细菌和非发酵菌对其他10种抗生素均呈较高的耐药率。 结论 碳青霉烯类抗菌药物对检测的肠杆菌科细菌具有很好的体外抗菌活性,但对非发酵菌的体外抗菌活性较差。     

肺结核患者合并肺部感染的病原菌分布及耐药性分析

目的探讨肺结核患者合并肺部感染的病原菌分布特点及耐药性,为临床合理用药和控制医院内感染提供依据。方法对2009年1月至2011年12月该院肺结核患者合并肺部感染时下呼吸道标本中分离出的阳性标本进行病原菌及耐药性分析。结果分离病原菌510株,其中革兰阴性杆菌占65.88%,真菌占19.02%,革兰阳性球菌占15.10%。感染前5位病原菌为铜绿假单胞菌(18.04%)、肺炎克雷伯菌(11.96%)、鲍曼不动杆菌(11.18%)、金黄色葡萄球菌(10.39%)和白假丝酵母菌(10.00%)。革兰阴性杆菌对氨苄西林、头孢唑啉耐药率大于97.00%。铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药率(15.22%)最低,鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦耐药率(21.05%)最低,肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希菌对亚胺培南全部敏感(100.00%),革兰阳性球菌对万古霉素敏感率为100.00%。结论革兰阴性杆菌、真菌是该院肺结核患者合并肺部感染的常见病原菌,多药耐药性较高,临床医生应根据药敏试验结果选择合理的抗菌药物。     

2007年广州地区耐药性监测分析

目的 了解广州地区2007年细菌耐药性监测协作组所属15所医院临床分离株的耐药情况,明确广州地区的耐药特点.方法 采用纸片扩散法(KB法)和美国临床和实验室标准协会(CLSI)2008年的判断标准对18 500株临床分离株作药敏试验.结果 18 500株细菌中革兰阳性菌占31.6%,革兰阴性菌占68.4%,其中非发酵菌占革兰阴性菌45.7%.耐甲氧西林会葡菌(MBSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为55.9%和75.9%.按照2008年CLSI标准,所有肺炎链球菌都对青霉素敏感.在大肠埃希菌和克雷伯菌属中产ESBLs菌的检出率分别为43.8%和39.8%,对大肠埃希菌和克雷伯菌属ESBL产生菌的耐药率最低的药物分别是美罗培南、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西彬他唑巴坦,耐药率为0-14.1%.铜绿假单胞菌对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和美罗培南的耐药率最低,分别为20.4%、24.4%和25.4%,但3者敏感率相比,由高到低分别为:哌拉西林/他唑巴坦(75.4%)、美罗培南(72.4%)和头孢哌酮/舒巴坦(63.2%).不动杆菌属对头孢哌酮/舒巴坦和美罗堵南的耐药率分别为2.6%和5.1%.出现少数铜绿假单胞菌(5.5%)和鲍曼不动杆菌(1.5%)的泛耐药株.痰标本来源的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对大多抗菌药物的耐药性都高于血液标本来源菌.结论 非发酵菌分离率上升,细菌耐药性持续增加,出现泛耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌.加强地区性细菌耐药性监测,对于正确合理选用抗菌药和控制细菌耐药性产生十分重要.     

肿瘤患者痰标本分离出革兰阴性杆菌的耐药性分析

目的：了解本院肿瘤患者痰液分离出革兰阴性杆菌的临床分布以及对常用抗菌药物的耐药情况。方法收集本院两年间痰液标本分离出的革兰阴性杆菌,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验,并用WHONET 5．6对其耐药性进行分析。结果共分离出革兰阴性杆菌420株,占71．3％;以肺炎克雷伯菌占优势,为39．5％、铜绿假单胞菌为30％、鲍曼不动杆菌为16．4％;其中铜绿假单胞菌对亚胺培南呈现低耐药率,对喹诺酮类药物耐药率也较低,对头孢菌素类、青霉素类及其抑制剂类药物有较高的耐药性;肠杆菌属细菌对碳氢酶烯类药物敏感性较高,对氨苄两林等青霉素类呈现极高耐药性,对其他抗菌药物均呈现不同耐药性。结论痰液的病原菌仍以革兰阴性杆菌为主,因此应加强对革兰阴性杆菌的耐药性监测,指导临床合理使用抗生素十分重要。     

临床血培养分离病原菌耐药性分析

目的了解医院血培养阳性标本检出的病原菌构成和耐药情况,为临床血流感染诊疗提供参考。方法采用法国生物梅里埃公司的VITEK2-COMPACT全自动微生物分析仪对菌株进行鉴定和药物敏感性分析,BacT/Alert3D全自动血液培养仪进行血培养,并归纳医院2011年1月至2012年10月697株临床血液检出菌及药敏结果。结果共检出697株病原菌,其中革兰阴性杆菌376株（53.95%）;革兰阳性球菌284株（40.75%）;真菌23株（3.30%）;革兰阳性杆菌14株（2.01%）。产ESBLs大肠埃希菌检出率59.32%,产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率26.15%,未检出碳青酶烯耐药肠杆菌科细菌。铜绿假单胞菌对碳青酶烯类、氨基糖苷类、喹诺酮类、头孢他啶和头孢吡肟的耐药率均小于40%,泛耐药铜绿假单胞菌检出率19.44%;鲍氏不动杆菌的耐药性高于铜绿假单胞菌,除阿米卡星和氨苄西林/舒巴坦外,对检测的其余抗菌药物耐药率均大于50%,泛耐药鲍氏不动杆菌检出率48.00%。葡萄球菌和肠球菌对万古霉素、替加环素、利奈唑烷、喹奴普汀/达福普汀高度敏感;真菌对所有抗真菌药物的耐药率均小于10%。结论引起医院患者血流感染的病原菌以革兰阴性杆菌和革兰阳性球菌为主,耐药菌株常见,检出泛耐鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌,未检出碳青酶烯耐药肠杆菌和万古霉素耐药葡萄球菌和肠球菌。     

创伤后伤口感染病原菌监测及耐药性分析

目的探讨创伤患者伤口感染病原菌的分布及主要病原菌对常用抗生素的耐药情况，为临床伤口感染的防治及合理选择抗生素提供依据。方法对2004～2006年3年中自我院创伤患者伤口分泌物中分离的病原菌及耐药情况进行回顾性分析。结果自住院患者伤口分泌物分离的病原菌共计836株。伤口感染菌中革兰阳性菌占56．2％，革兰阴性菌占43．8％。伤口感染的主要病原菌中革兰阳性菌以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和粪肠球菌为主，革兰阴性菌以鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌为主，阴沟肠杆菌和奇异变形杆菌也占有一定的比例。药敏结果显示，所调查细菌对常用抗生素耐药较为严重，并呈多重耐药。对革兰阳性球菌的治疗，万古霉素的敏感性最好。对于革兰阴性杆菌，头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦、左氧氟沙星、亚胺培南的耐药率相对较低。结论了解创伤患者伤口感染的主要病原菌及耐药特点，有助于临床医生制定合理有效的用药方案，对控制患者伤口感染的发生和发展有着重要的意义。     

革兰阴性杆菌耐药性变迁

目的 :了解上海地区临床分离的革兰阴性杆菌的耐药情况。方法 :2 0 0 1年 1月至 12月上海 11家医院临床分离菌用Kirby Bauer法进行药敏试验。结果 :13934株革兰阴性菌中肠杆菌科细菌 86 86株 ,非发酵革兰阴性杆菌 5 2 4 8株 ,最常见的菌种依次为大肠埃希菌、克雷伯菌属、铜绿假单胞菌、不动杆菌属与肠杆菌属等。与历年比较 ,非发酵革兰阴性杆菌有逐年增多趋势 ,其中嗜麦芽窄食单胞菌也有逐年增多趋势。细菌对临床常用抗菌药物的耐药率较上一年略有增高。对肠杆菌科细菌的作用依次为亚胺培南 (IMP)、美罗培南 (MEM ) >头孢吡肟 (FEP) >头孢哌酮 舒巴坦 (CPZ SBT)、哌拉西林 三唑巴坦(PIP TAZ)、阿米卡星 (AMK) >头孢他啶 (CAZ) >环丙沙星 (CIP) ;对非发酵革兰阴性杆菌的作用依次为IMP、MEM >CPZ SBT、PIP TAZ >CAZ、CIP >FEP、AMK。IMP与MEM对革兰阴性杆菌的抗菌作用基本相同。CPZ SBT和PIP TAZ对肠杆菌科细菌的作用相近 ;非发酵革兰阴性杆菌对两者的敏感性相同 ,但对PIP TAZ耐药的菌株数较多。结论 :本研究结果对革兰阴性杆菌感染的经验用药有重要参考价值