FQ—PCR检测乙型肝炎患者血清HBVDNA

目的评价荧光定量聚合酶链反应 (FQ- PCR)检测 HBV DNA的临床应用价值。方法用 FQ- PCR和酶联免疫吸附试验 (EL ISA)分别检测乙型肝炎患者血清 2 5 1份和健康体检者血清 116份的 HBV DNA和 HBV血清标志物。结果 HBs Ag、HBe Ag和抗 - HBc3项阳性、HBs Ag、抗 - HBe和抗 - HBc3项阳性以及抗 - HBs、抗 - HBe、抗- HBc同时或分别阳性的样品 ,HBV DNA阳性率分别为 96 .5 %、5 6 .6 %和 12 .3% ,HBV DNA拷贝数分别为 1.12× 10 8/ ml、1.45× 10 6/ m l和 6 .6 1× 10 4/ m l。用 EL ISA检测 HBe Ag阳性率仅为 FQ- PCR检测 HBV DNA阳性率的5 5 .4%。结论 FQ- PCR对乙型肝炎早期诊断 ,传染性的判断及疗效考核有临床实用意义     

荧光定量PCR检测HBVDNA与血清HBV标志物的关系

目的　探讨荧光定量 PCR检测血清 HBVDNA与血清 HBV标志物的关系。方法　采用酶联免疫吸附法(ELISA)和荧光定量 PCR(FQ- PCR)两种方法同时检测 357份肝炎患者血清 ,并对结果进行对比分析。结果　肝硬化组HBVDNA含量明显低于 HBs Ag携带者组 (P<0 .0 5)。血清 HBs Ag、抗 - HBc、HBe Ag阳性组 HBVDNA含量明显高于HBs Ag、抗 - HBc、抗 - HBe和 HBs Ag、抗 - HBc阳性组 (P<0 .0 1 ) ,而后两组 HBVDNA检出率仍较高。结论　 FQ- PCR可真实反映 HBV感染、复制及病程变化 ,对乙型肝炎临床诊断及治疗均有较大的指导意义     

血清中结核杆菌的PCR检测

自1983年以来，结核杆菌感染又死灰复燃，严重威胁着人民身体健康。现就血清中结核杆菌PCR的检测情况介绍如下：1材料与方法：1．IBO－RAD扩增仪，紫外透射分析仪WP－93－1型和高速离心机等。扩增引物：由中国科学院上海细胞生物研究所提供，其片段顺序为：P15－GGTCCT－GACGGTAATGGGGGT一丁和巴5’－GGA－＊＊＊＊＊＊＊＊＊＊AT＊CA一丁。l．21995，1996年门诊及住院患者同时送检的血及体液双份标本。1．3方法：痰标本首先通过加热高压液化，再同其它体液标本一起高速高。乙，去除上清液、体液沉渣，样本与血清按说明书进…     

应用荧光定量PCR技术检测HBVDNA的临床意义

ＰＣＲ定量技术作为基因诊断的主要方法 ,对疾病诊断、预后及药物疗效的评估起着十分重要的作用。我们应用荧光定量ＰＣＲ技术对 144 0例各型乙肝患者进行了ＨＢＶＤＮＡ的定量检测 ,现将结果报告如下。1　材料和方法1.1　一般资料病例选自 1999年 11月至 2 0 0 1年 11月我院门     

溶血对荧光定量PCR检测HBVDNA结果的影响

实时荧光定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polymerase chain reaction，FQ-PCR)技术融汇了PCR技术的核酸高效扩增，探针技术的高特异性，光谱技术的高敏感性和高精确定量的优点，直接探测PCR过程中荧光信号的变化以获得定量的结果。由于此方法具有简便、快速、敏感、特异、无PCR后处理步骤等特点，目前HBVDNA荧光定量已成为监测治疗效果的常规手段，应用越来越广泛。在制订HBVDNA标本留取标准时，许多医院都规定溶血标本为不合格标本。因为血红素及其代谢产物为DNA     

实时荧光定量PCR检测低含量HBVDNA的分析

目的 探讨低含量乙型肝炎病毒DNA(hepatitisBvirusDNA,HBVDNA)的稳定性及其与HBV血清标志物的关系.方法 收集实时荧光定量PCR(real-timefluorescentquantitativePCR,RT-FQ-PCR)检测HBVDNA在500～5000IU/ml的标本,分成两组:(Ⅰ)500～1000IU/ml;(Ⅱ)1000～5000IU/ml.用相同方法重复检测DNA,同时用ELISA方法检测HBV血清标志物.结果 所有样本HBVDNA在500～1000IU/ml和1000～5000IU/ml的比率,第1次分别为41.1%和58.9%,第2次为34.2%和64.4%,两次结果在两个区间的分布差异无统计学意义.Ⅰ,Ⅱ两组样本两次PCR结果在相同范围的比率分别为48.3%,75.6%,差异有统计学显著性意义(P<0.01).Ⅰ,Ⅱ两组血清标志物HBsAg阳性、HBcAb阳性的比率分别为70.0%,75.6%;HBsAg阳性、HBeAg阳性的比率为11.7%,10.5%;HBsAg阴性、HBcAb阳性的比率为15.0%,13.9%.HBsAg阳性、HBcAb阳性与其他类比较差异有统计学显著性意义(P<0.01).结论 低含量HBVDNA(500～5000IU/ml)用RT-FQ-PCR两次检测重复性尚可,随DNA含量的增高,结果稳定性相应增高.相应的血清标志物以HBsAg阳性、HBcAb阳性最常见.     

PCR和巢式PCR直接检测血清中HIV核酸序列

采用ＰＣＲ和巢式ＰＣＲ方法对５３例ＨＩＶ抗体阳性和阴性标本进行了检测，以扩增ＨＩＶ特异性ＤＮＡ序列，结果美国ＡｂｂｏｔｔＨＩＶ阳性血清２份，新加坡阳性血清２份，国内阳性血清２份及ＨＩＶ－１病毒培养物１份，两套ＰＣＲ扩增反应物均为阳性，对其中一套ＰＣＲ扩增的ｇａｇ基因序列进行巢式ＰＣＲ也为阳性。采自西南边境地区的２３份ＥＬＩＳＡ和ＷＢ阳性血清，各种ＰＣＲ反应均为阳性；１１份ＥＬＩＳＡ可疑阳性、ＷＢ阴性标本中，有两例血清呈ＰＣＲ阳性，探针杂交亦为阳性。而１２例ＳＩＶ、ＳＲＶ及猴血清标本ＰＣＲ反应均为阴性。上述结果表明，采用ＰＣＲ方法检测血清中ＨＩＶ核酸序列是一种很有前途的ＨＩＶ感染诊断方法。     

血清标本保存的温度和时间对荧光定量PCR检测HBVDNA结果的影响

[目的]探讨血清标本4℃保存7d对荧光定量PCR检测HBV DNA结果的影响。[方法]对来自本院感染科住院患者的52份血清标本进行3次检测:即时检测,4℃保存7d后检测,-30℃保存1-3个月后统一检测。比较4℃保存7d后检测结果与其他两次检测的结果,观察其结果的差异有无统计学意义及其符合率。[结果]4℃保存7d后检测结果与即时检测的结果的符合率为62.5％-73.1％,与-30℃保存1-3个月后统一检测结果的符合率为78.1％。4℃保存7d后检测结果与其他两次结果的比较,其均数差异无统计学意义(t=1.85,t=1.61,P>0.05)。[结论]以0.6对数单位为允许误差范围,血清标本4℃保存7d对荧光定量PCR检测HBV DNA结果无影响。     

用PCR法检测不同消毒方法灭活HBVDNA的效果

以不同方法清洗消毒血液透析复用血路管道后，用ＰＣＲ法进行了灭活ＨＢＶＤＮＡ效果的检测。以含有效氯１００００ｍｇ／Ｌ的次氯酸钠溶液清洗消毒后，再用２％甲醛溶液灭菌的效果较好。     

巢式PCR检测血清中烟曲霉基因的实验研究

目的评价巢式PCR在烟曲霉侵袭性感染早期病原学诊断中的应用价值。方法构建烟曲霉播散性感染动物模型,收集不同感染时段动物血液标本20份,分别进行巢式PCR检测和真菌培养,并对感染动物多次进行影像学检查;测定25例临床诊断为侵袭性曲霉病患者的45份血清样本,并与血清半乳甘露聚糖（GM）测定结果进行比较。结果巢式PCR检测疾病模型动物血清曲霉特异基因,标本阳性率为80%（16/20）,最早在感染后的第二天即可检出;而在整个感染过程中,血培养结果均为阴性,影像学检查则在感染后期才提示真菌感染的存在。临床标本的检测结果显示,巢式PCR敏感性和特异度分别为64%和100%。结论巢式PCR具有较好的敏感性及特异度,可用于曲霉深部感染的早期诊断,与血清GM测定联合应用诊断意义更大。     

PCR法检测血清胃癌相关抗原

应用聚合酶链反应检测胃癌血清中的肿瘤相关抗原，结果７２例胃癌血红呈阳性者５９例，３０例对照组血清呈阳性者２例，两者对比差异显著（Ｐ〈０．０１）。     

逆转录－套式PCR检测血清中丙肝病毒RNA

利用与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因组５＇非编码区保守序列同源的套式引物，建立了检测血清中ＨＣＶＲＮＡ的聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，由于在引物设计中选择了最保守的区域且避开了与黄病毒属的同源序列，保证了ＰＣＲ检测的灵敏度和特异性。经逆转录和两轮ＰＣＲ扩增，可检出１×１０－３ｕｌ血清中的ＨＣＶＲＮＡ。研究了影响ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ检测的各种因素，并对ＲＮＡ分离及ＲＴ－ＰＣＲ反应体系进行了优化，在此基础上研制了ＨＣＶ的ＰＣＲ检测试剂盒。     

前S1抗原与HBVDNA及血清标志物检测结果分析

目的检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性患者的乙型肝炎病毒血清标志物（HBV—M）、前S1抗原（Pre-S1Ag）及HBV DNA水平,并探讨三者的相关性。方法酶联免疫吸附试验法测定HBV-M及Pre-S1Ag,荧光定量聚合酶链反应检测HBV DNA。结果Pre-S1Ag在乙型肝炎e抗原（HBeAg）阳性和阴性患者的检出率差异有统计学意义,与HBV-M有良好的相关性。结论Pre-S1Ag可作为HBV DNA和HBV—M检测的补充和对照。     

检测乙肝孕妇血清HBVDNA含量与胎儿宫内感染的关系

1资料与方法1.1研究对象2004～2006年在本院产前门诊筛选乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）阳性的孕妇89例为研究对象,其中乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）、乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）均阳性（简称大三阳）的孕妇47例，乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒e抗体（HBeAb）、乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）均阳性简称小三阳）的孕妇42例。     

检测乙肝孕妇血清HBVDNA含量与胎儿宫内感染的关系

1资料与方法1.1研究对象2004～2006年在本院产前门诊筛选乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）阳性的孕妇89例为研究对象,其中乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）、乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）均阳性（简称大三阳）的孕妇47例，乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒e抗体（HBeAb）、乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）均阳性简称小三阳）的孕妇42例。     

PCR检测脑脊液中结核杆菌

ＰＣＲ检测脑脊液中结核杆菌卢奕，彭本禾，王嘉玺（天津第二医学院免疫学教研室，天津３００２０３）吕玲，佟彤（天津市儿童医院，３０００００）结核杆菌（Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）中的免疫原性蛋白ＭＰＢ６４是结核杆菌的特异性抗原，该蛋白能诱发强的迟发型变...