用固定化生长微生物细胞改善氨基酸调味液品质

利用固定化生长的酵母细胞和黑曲霉菌丝体 ,对酸法水解的氨基酸水解液进行发酵 ,除去水解液异臭味 ,使调味液的口味和风味得到明显改善 ,产品既有氨基酸调味液的特点 ,又具有酱油的风味     

人工贵腐葡萄酒的研制(Ⅱ)——人工贵腐葡萄酒的试酿

本文系统地介绍了人工贵腐葡萄酒的试酿情况。实验表明,用固定化灰葡萄孢可以在24h内完成贵腐发酵,固定化菌体性能稳定。加葡萄干提高糖浓度经酵母发酵后能获得良好的干果风味。冷热处理可以促进贵腐酒的陈酿。硅藻土过滤法是试酿酒的适宜澄清方法。快速酿制的人工贵腐葡萄酒可以获得良好的稳定性。     

放射型根瘤菌WSH2601生产辅酶Q10的摇瓶发酵条件

以放射型根瘤菌 (Rhizobusradiobacterium ,WSH2 6 0 1)作为辅酶Q10 的生产菌株 ,研究了氮源、碳源、接种量、溶氧、初始 pH、发酵温度及添加物等因素对细胞生长与产物辅酶Q10 合成的影响 .结果表明 :玉米浆和酵母膏是较好的氮源 ,葡萄糖与蔗糖是辅酶Q10 发酵的较好的碳源 ,接种量对辅酶Q10 发酵的影响不大 ,为 4 % .适宜的初始 pH值为 7,番茄汁能较好地促进细胞的生长 ;添加玉米浆、L 甲硫氨酸、番茄汁和异戊醇有利于产辅酶Q10 ;溶氧对细胞生长与产物辅酶Q10 合成的影响较显著 .通过正交试验初步确定了发酵条件 :碳源为 1.5 g/dL葡萄糖和 2 .5 g/dL蔗糖混合物 ,酵母膏 0 .8g/dL ,初始pH 7,每 5 0 0mL装液量为 5 0mL .最后经综合优化条件 ,在摇瓶发酵条件下 :菌体生长量 (以干重计 )为 13.8g/L ,发酵液中辅酶Q10 产量达到 2 2 .7mg/L ,比优化前分别提高 34%和 5 3% .     

酵母单细胞蛋白絮凝分离的研究

本文提出了分离酵母单细胞蛋白的一种新方法——用絮凝沉降法分离酵母单细胞蛋白;研究了鞣酸+A对酵母细胞的絮凝作用。探讨鞣酸+A絮凝酵母细胞的机理;较为系统地研究了环境因素对鞣酸+A絮凝酵母细胞的影响;首次将质心映射优化法(CMO法)和响应面法(RSM法)结合起来,运用计算机优化了絮凝条件,并就鞣酸+A对酵母细胞的絮凝作用进行表征;通过对酵母细胞表面的X-射线能谱分析,证实金属离子Ca~(2+)、Cd~(2+)、Mn~(2+)和K~+参与了鞣酸+A对酵母细胞的絮凝作用。通过鞣酸+A絮凝酵母细胞的小试研究,可以认为采用絮凝沉降法分离酵母单细胞蛋白是可行的,且节能效果显著,具有较大的现实意义。     

填充床反应器中固定化假单胞菌细胞连续制备L-瓜氨酸

对实验室筛选的产精氨酸脱亚胺酶的假单胞菌( Pseudomonas sp.)进行了固定化,以及对固定化细胞转化L-精氨酸生产L-瓜氨酸进行了研究.比较4种不同固定化方法,确定卡拉胶包埋结合戊二醛后处理为假单胞菌的细胞固定化方法.固定化反应的最适pH值为6.5,细胞固定化后细胞精氨酸脱亚胺酶的热稳定性增加.在50 mm×240 mm固定填充床反应器中,底物浓度为0.5 mol/L L-精氨酸盐酸盐,pH值6.5,温度37 ℃,稀释速率为0.147/h的条件下,连续运转54 d,固定化细胞对底物的摩尔转化率在95%以上,平均生产强度 0.010 8 g/(h*g)(每单位质量的固定化细胞每小时生产的瓜氨酸质量).转化液经732阳离子树脂吸附,氨水洗脱,及浓缩、结晶,得到纯度为99%的L-瓜氨酸晶体,提取总收率约为87%.     

芦丁水解液发酵法制备L-鼠李糖的工艺

利用发酵法从芦丁水解液中制备L-鼠李糖,选取酵母用量、发酵时间和发酵温度3个影响因素,采用均匀设计和T型关联度分析法进行了优化.得到最佳发酵工艺为:酵母用量为母液的3%,发酵时间为5 h,发酵温度为35 ℃,产品质量浓度为9.52 g/L.     

红酵母类胡萝卜素发酵助剂的筛选及应用

研究了几种促进剂和前体对红酵母RY－98类胡萝卜素发酵的影响，从中选出了番茄汁、花生油和核黄素3种对红酵母生长及类胡萝卜素合成具有显著促进作用的发酵助剂，并确定了适宜的用量。应用试验和发酵过程动态分析表明，这3种发酵助剂增产效果明显。当同时添加番茄汁3mL/L、花生油1.2mL/L和核黄素3.5mg/L时，菌体量、类胡萝卜素质量分数和产量可分别比对照组提高39.4%、32.8%和85.1%，且对发酵过程菌体生长及生理代谢规律无不良影响。     

产脂肪酶菌Geotrichum candidum NS3的固定化及其稳定性

从南昌地区含油土样中,筛选到一株脂肪酶产生菌白地霉(Geotrichum candidum NS3).菌株摇瓶发酵的水解酶活为321 U/g干细胞,合成酶活为0.54 U/g干细胞.以聚氨酯泡沫为载体对菌株Geotrichum candidum NS3进行固定化培养和稳定性研究,结果显示,聚氨酯泡沫颗粒尺寸6 mm×6 mm×6 mm,密度27 kg/m3,摇瓶培养60 h,有73.8%的细胞进入聚氨酯泡沫中生长固定,载体固定细胞干重达到2.32 g/g载体.电镜图片显示白地霉(Geotrichum candidumNS3)在载体孔隙内和脊壁上缠绕充盈,生长良好,固定结构稳定.固定化细胞颗粒连续5批次催化反应,相对水解酶活保持率和固定细胞干重保持率分别达到63.1%和71%,具有良好的细胞固定稳定性和酶活保持率.     

多菌种混合发酵生脉饮药渣生产蛋白饲料工艺条件优化

以生脉饮药渣为原料,利用康宁木霉(Tk)、产黄纤维单胞茵(Cf)、产朊假丝酵母(Cu)和黑曲霉(An)多菌种混合发酵生产蛋白饲料.通过单因素和正交试验对发酵条件进行优化,试验结果表明:先接种20%的Tk Cf(比例2:1),发酵2 d后再接种20%的Cu An(比例1:1),在(NH4)2SO4添加量为5 g/dL、初始PH值为6、料水比为1:2、温度为30℃的条件下发酵5 d,其发酵产物中真蛋白质量分数增加86.96%,粗纤维质量分数降低20.09%.     

解脂假丝酵母中神经酰胺合成的外部影响因素

为研究利用酵母发酵生产神经酰胺的可行性,利用高效液相色谱/蒸发光散射检测器作为分析手段,考察了解脂假丝酵母(Yarrowia lipolitica)在各种发酵条件下生产神经酰胺的能力.在各种可能的影响因素中,提高溶氧与乙醇刺激均能增加细胞内神经酰胺质量分数,在这两种条件下其占细胞干重的比例分别比对照提高2.5倍及3.3倍,最高可将其从占细胞干重的 0 25%提升到0 84%.其它培养条件对神经酰胺质量分数的影响则不明显或造成一定程度的下降.     

提纯异麦芽低聚糖的酵母菌株筛选及发酵条件

酵母菌同化单糖的能力和速度高于低聚糖,因而可以消除异麦芽低聚糖产品中多余的葡萄糖.通过筛选驯化,得到较快发酵葡萄糖和麦芽糖的D酵母,并对该酵母的最适发酵条件和最佳培养基组成进行了研究,在优化培养基条件下,得到94.13%的高纯度异麦芽低聚糖.     

酵母流加发酵过程中的模糊控制器

通过分析酵母发酵过程中的影响因素，建立了控制酵母发酵过程中流加速率的模糊控制器.该模糊控制器的模糊规则可以根据专家经验方便地修改以提高控制效果.实验表明在模糊控制器控制下酵母产量比恒速流加时提高了一倍.     

啤酒酵母发酵产有机酸的初步研究

利用效液相色谱技术，对通风发酵过程中的啤酒酵母细胞的胞外、胞内6种有机酸含量的动态变化进行了定性定量跟踪检测，研究结果表明，通风培养的酿酒酵母代谢产酸时，细胞胞外、胞内有机酸的动态变化存在差异性，胞外有机酸含量远大于胞内含量；酵母细胞对有机酸代谢存在着精确保守性和经济效能性，在发酵后期阶段（〉84h），大部分有机酸含量逐步降低；发酵终点时，胞外、胞内乳酸、苹果酸含量较高。摘要：利用高效液相色谱技术，对通风发酵过程中的啤酒酵母细胞的胞外、胞内6种有机酸含量的动态变化进行了定性定量跟踪检测．研究结果表明，通风培养的酿酒酵母代谢产酸时，细胞胞外、胞内有机酸的动态变化存在差异性，胞外有机酸含量远大于胞内含量；酵母细胞对有机酸代谢存在着精确保守性和经济效能性，在发酵后期阶段（〉84h），大部分有机酸含量逐步降低；发酵终点时，胞外、胞内乳酸、苹果酸含量较高。     

低聚异麦芽糖的纳滤分离技术和色谱分离技术

以淀粉为原料,运用先进的酶工程技术生产低聚异麦芽糖IMO－50.再以IMO－50为原料,应用高新分离技术,去除葡萄糖、生产高含量低聚异麦芽糖IMO－90.     

人睾丸酵母双杂交cDNA文库的构建与鉴定

目的:构建应用于酵母双杂交系统的人睾丸组织cDNA文库。方法:从正常人睾丸组织总RNA中纯化出mRNA,以SMARTШTM和CDSШ为引物,合成两端具有同源臂的双链cDNA,后者与线性质粒pGADT7-Rec共转化入感受态酵母细胞Y187,两者在酵母细胞中同源重组成环形的cDNA文库质粒,收集在营养缺陷培养板上筛选出的所有克隆,即为人睾丸酵母双杂交cDNA文库。结果:构建了具有基因多样性和库容量足够大的人睾丸cDNA文库,共获得2×106个转化子,插入的双链cDNA片段的长度在0.3～4.0 kb之间。结论:利用ClontechSMART技术,成功构建了应用于酵母双杂交的人睾丸组织cDNA文库,为探讨人精子发生的分子机制奠定了基础。     

酵母蔗糖酶的提取方法

采用甲苯自溶法、冻融法、SDS抽提法3种方法从酵母中提取蔗糖酶,经质量分数50%的乙醇分级沉淀、Mono Q阴离子交换柱层析纯化后,制得高纯度的酵母蔗糖酶。比较了上述3种提取方法并对该酶的部分性质进行了研究。纯化的酶经等电聚焦测定,等电点为5.6,SDS-PAGE鉴定其相对分子质量为60kD。以蔗糖为底物测得酵母蔗糖酶的表观米氏常数Km为0.013mol/L。结果显示3种提取方法各有优劣,冻融法和SDS抽提法的提取效率远高于传统的甲苯自溶法。其中SDS抽提法的效率最高,加之其操作简便,更适合于酵母蔗糖酶大规模的制备提取。     

酵母细胞的高效转化方法

运用醋酸锂处理酵母细胞，建立并优化了酵母完整细胞的高效质粒转化体系，转化率达１０４μｇ－１．通过对影响转化的诸因子的研究，发现载运ＤＮＡ是影响酵母完整细胞转化效率的最主要因素，热休克处理及处理时间、聚乙二醇相对分子质量及浓度等对转化率也有显著影响。     

IFA在酿酒污染野生酵母快速检测中的应用

用荧光抗体技术进行快速检测,方法简便、灵敏、快速。用三种混合血清可以检测出常见全部污染野生酵母。该技术在工厂中应用结果表明,酿酒种酵母中野生酵母污染现象是存在的,而且随着种酵母使用代数的增加而越趋严重。     

桑椹果酒酵母筛选及发酵性能

从桑椹成熟果实、桑叶以及桑果园的土壤采样，进行桑椹果酒专用酵母的筛选，得到一株在性能上优于对照菌葡萄酒干酵母的酵母菌Y11。该菌起酵快，从第2天开始糖度大幅度下降，酒精度快速上升，发酵第4天酒精体积分数即可达到10％以上。发酵过程pH值变化趋势比较平缓，发酵结束后高级醇量符合要求。综合发酵性能及感官评定，表明该菌能代替葡萄酒干酵母用于桑椹果酒的生产。