低产桔霉素红曲霉菌种筛选

对部分红曲霉菌种的液态发酵液和固态红曲米中桔霉素质量分数进行了测定 ,从中筛选了数株低产桔霉素的红曲霉菌种 ,重点对红曲霉ZK0A菌种生产的红曲米的色价及桔霉素质量分数进行了测定 .连续培养 3批该菌种 ,所生产的红曲米色价高于 10 0 0U / g ,桔霉素质量分数低于5mg/kg.而另一株红曲霉ZH 12生产的红曲米 (色价 170 0U/ g)中桔霉素质量分数则高达 1g/kg以上 .对这两株红曲霉菌种的菌落形态进行了鉴定 ,初步认定这两株菌种都是紫色红曲霉 .     

部分红曲霉菌株产桔霉素的研究

对中国各地收集到的数十个红曲米样品中的桔霉素进行了定性及定量测定 ,测定结果表明 ,除少数几个红曲米样品中未测出桔霉素外 ,其它红曲米样品都测出桔霉素 ,红曲红产品中也发现含有桔霉素 .用酵母膏蔗糖培养基 (能检测霉菌是否产生真菌毒素 )培养了近 4 0株红曲霉 ,从菌落形态特征看 ,大多数是Moanascusanka ,定性检测结果表明 ,大多数菌株的培养液中都检测出桔霉素 ,说明这些红曲菌种本身具有产生桔霉素的能力 .初步总结了定性和定量测定高色价红曲米中桔霉素的方法 .     

猪心肌苹果酸脱氢酶的制备及应用

设计并优化了从猪心中提取高纯度苹果酸脱氢酶的技术路线,采用组织破碎、二度硫酸铵盐析、DEAE Sepharose F.F.离子交换层析、Phenyl Sepharose 6 F.F.疏水层析及Sephadex G-75 Fine凝胶过滤等方法进行分离纯化,苹果酸脱氢酶比酶活达1 212.97 U/mg,纯化倍数达122.64倍,酶活力收率为53.64%.Sephadex G-75 Fine凝胶过滤和SDS-PAGE电泳结果显示纯化的苹果酸脱氢酶相对分子质量约为 69 000 ,含有2个亚基,每个亚基的相对分子质量约为 34 000 .以制备的苹果酸脱氢酶和谷草转氨酶配成双酶反应体系,对葡萄酒中L-苹果酸的含量进行了测定;通过标准样品和葡萄酒样品精密度及回收率(93.2%～104%)实验.     

酱油米曲霉961酶制剂蛋白酶动力学的研究

采用酶制剂代替固体曲酿制酱油是一项新技术。本文对米曲霉961菌株产生的酶制剂蛋白酶动力学进行了研究。详细探讨了酱油用米曲霉酶制剂蛋白酶的酶反应速度的规律以及各种影响因子,并采用Lineweaver-Burk作图法,求得了961酶制剂蛋白酶的米氏常数为3.77×10~(-3)。     

L-丝氨酸产生菌的分离筛选及发酵条件

在含50mL／L的甲醇、5g／L的甘氨酸的基本培养基平板上，从土壤中分离出130多株细菌，测定了它们利用甘氨酸生产L-丝氨酸的能力，获得了一株产L-丝氨酸较好的菌株A3，L-丝氨酸产量最高为1．4g／L，分类学鉴定为微球菌科(Micrococcaceae)，对菌株A3利用甘氨酸发酵生产L-丝氨酸的发酵条件进行了初步研究，包括甘氨酸和甲醇添加量，不同碳源、氮源，初始pH值以及发酵时间对产酸的影响．结果表明，菌株A3在不添加甲醇、只以甘氨酸为惟一碳源的发酵培养基中也能产L-丝氨酸，培养基中较高质量浓度的甘氨酸存在对L-丝氨酸生产是必需的．添加葡萄糖、甘油等外源碳源对菌体生长有利但不利于L-丝氨酸的生产。     

米曲霉RIBl28耐酸性木聚糖酶的研究

通过RBB-Xylan筛选平板和固体培养方法获得了产木聚糖酶菌株米曲霉(Aspergillus     

短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）基因鉴定及畜血Hb降解技术

从多年被畜禽血液污染的土样中分离筛选出一株降解Hb能力强的自然菌株,并对其进行连续5代定向诱变.利用PCR扩增法和Neighbor-joining方法测定和分析了诱变菌种16S rDNA序列,对筛选出的自然菌株及诱变菌株进行了鉴定,为短小芽孢杆菌(B.pumilus);二阶导数红外光谱法探测到其分子结构具有短小芽孢杆菌(B.pumilus)典型分子结构特征;SDS-PAGE凝胶电泳中发现短小芽孢杆菌(B.pumilus)产蛋白酶对Hb降解的断裂位点发生了变化.对Hb降解产物及产蛋白酶活力的测定结果表明:经连续5代诱变的短小芽孢杆菌(B.pumilus)对Hb降解能力比筛选出的自然菌株强,其蛋白酶活力比自然菌株提高了近3倍,Hb降解产物中的可溶性蛋白质质量分数、游离氨基酸质量浓度分别从3.69%、14.4 mg/dL 提高到4.12%、24.6 mg/dL.     

L-精氨酸高产菌的诱变育种及其摇瓶产酸条件

以亚硝基胍(NTG)逐级处理钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)JDN28,分别选用D-精氨酸、甲基半胱氨酸为结构类似物进行抗性选育,获得一株L-精氨酸的高产菌株YDM403(His-,SGr,D-Argr,methyl-Cysr).在含葡萄糖120 g/L的优化培养基中,摇瓶发酵96 h,L-精氨酸达28～32 g/L,较出发菌株提高了113％.     

阴沟肠杆菌的临床分布及其产碳青霉烯酶研究

目的探讨阴沟肠杆菌分离菌株的临床分布及其对常用抗菌药物的耐药及产碳青霉烯酶情况。方法收集2014年6月至2016年2月武汉大学人民医院298例患者分类标本培养的菌株,应用BD Phoenix~(TM) 100细菌鉴定及药敏系统鉴定菌种和药物敏感性,并适当补充K-B法药敏试验;对碳青霉烯类抗菌药物敏感性下降的菌株进行Carba NP实验表型确证,并且进行PCR测序确定基因型;采用阴沟肠杆菌的MLST技术进行分子分型。结果共检出非重复分离的阴沟肠杆菌298株,其中标本主要为痰液(29.87%),其次为尿液(25.50%)。科室分布中,神经外科(17.79%)检出最多,其次为肝胆外科(12.75%)。阴沟肠杆菌对头孢唑林的耐药率最高(98.1%)、其次为氨苄西林(89.7%);对碳青霉烯类抗菌药物耐药的菌株中,9株菌通过Carba NP实验检测,其中8株为阳性,1株为阴性。PCR扩增出4株产NDM-1基因的菌株,其中1株联合产VIM-19基因的菌株,一株单产VIM-19型基因,均经过测序比对验证。将4株产NDM-1碳青霉烯酶的细菌进行MLST分型,得到3个不同的ST型,分别为ST508,ST509和ST145。结论阴沟肠杆菌的耐药较为严峻,感控部门应加强对本地区产碳青霉烯酶菌的监测,以减少耐药菌的产生和播散。     

全细胞脂肪酸气相色谱法鉴别乳杆菌和明串珠菌

运用气相色谱—质谱联用技术对6种乳杆菌(14株)和3种明串珠菌(3株)进行全细胞脂肪酸组成分析。根据细胞脂肪酸组成和特征峰的峰形可以把测试菌株分为5群。用这方法9株中只有3株的菌种得到鉴别。而用微机对脂肪酸组成进行聚类分析,可使除干酪乳杆菌1042(不典型菌株)和阿拉伯聚糖乳杆菌以外的所有测试菌株均能鉴别到种的水平。     

钝齿棒状杆菌产赖氨酸突变株的选育

用N-甲基-N′-硝基—N—亚硝基胍(NTG)对钝齿棒状杆菌(Corynebacterium crenatum)W L1.0245进行了诱变处理,获得了高丝氨酸、蛋氨酸、亮氨酸及丙氨酸营养缺陷型和S-(2-氨基乙基)-L-半胱氨酸(AEC)抗性突变株,并经摇瓶筛选出几株能产生L-赖氨酸的钝齿棒状杆菌AEC抗性株、高丝氨酸缺陷型株和高丝氨酸缺陷型兼AEC抗性突变株。TR-275菌株(Thr~-AECr)在筛选培养基中发酵累积L-赖氨酸盐酸盐25.6mg/ml(对葡萄糖的转化率25.6%)。     

质谱技术快速鉴定临床分离丝状真菌的应用

目的探讨质谱（MALDI-TOF MS）在临床分离的丝状真菌快速鉴定中的应用。 方法收集首都医科大学宣武医院2017年1月至2019年1月经形态学鉴定为丝状真菌的菌株，分别采用双甲酸夹心法和甲酸乙腈萃取法提取真菌蛋白并行MALDI-TOF MS鉴定，并与聚合酶链反应（PCR）内转录间隔区（ITS）基因序列测定结果比较；分析丝状真菌菌种分布和标本来源。 结果共收集临床分离的丝状真菌90株，其中曲霉菌属70株（77.78%），青霉菌属6株（6.67%），链格孢霉5株（5.56%），镰刀菌属4株（4.44%），赛多孢菌2株（2.22%），米根霉、根毛霉和哈茨木霉各1株（1.11%）；其中曲霉菌以烟曲霉47株（52.22%）、黄曲霉13株（14.44%）和黑曲霉4株（4.44%）为主。标本主要来源于呼吸道标本（90.0%）（包括痰标本和肺泡灌洗液），其次为角膜和耳道分泌物（3.33%），痰标本中分离率最多的为曲霉菌（59株、65.56%）。MALDI-TOF MS鉴定到种水平82株，与基因测序结果一致率为91.11%（82/90），鉴定准确率显著高于形态学鉴定结果（68.89%，62/90），差异有统计学意义（χ² = 12.02、P = 0.01）；质谱鉴定丝状真菌中的曲霉菌、镰刀菌、赛多孢菌和链格孢霉时准确率高（98.57%～100%）；双甲酸夹心法和甲酸乙腈萃取法前处理的质谱鉴定丝状真菌到种水平的比率分别为91.11%（82/90）和90.00%（81/90），鉴定曲霉菌种水平分别为98.57%（69/70）和97.14%（68/70），但鉴定准确率差异无统计学意义（χ² = 0.34、P = 0.95）；两种前处理方法均可100%鉴定烟曲霉、黄曲霉、赛多孢菌和链格孢霉到种水平，其中89.36%（42/47）烟曲霉和76.92%（10/13）黄曲霉鉴定得分≥ 2.0分。 结论MALDI-TOF MS技术鉴定丝状真菌快速准确，双甲酸夹心法前处理操作更简便，适合实验室常规检测，可用于实验室常规鉴定曲霉菌等常见丝状真菌。     

槐耳颗粒在体外对结肠癌SW480细胞侵袭转移的影响*

目的观察槐耳颗粒在体外对结肠癌SW480细胞侵袭转移的影响,并初步探讨其机制。方法SubG1法确定槐耳颗粒促进结肠癌SW480细胞凋亡的最佳作用浓度和时间,通过划痕愈合实验和Transwell侵袭实验观察槐耳颗粒对结肠癌SW480细胞侵袭转移的影响。Western blot法和Real-Time PCR(荧光定量PCR)法检测E-cadherin、twist、snail、vimentin在蛋白和mRNA水平的变化。结果槐耳颗粒3.0 g·L-1处理SW480细胞36 h后凋亡最明显。槐耳颗粒3.0 g·L-1处理SW480细胞36 h后,划痕愈合实验相对迁移率为(31.36±2.39)%,而对照组36 h后相对迁移率则为(61.11±1.09)%(P＜0.01)。Transwell侵袭实验证实槐耳颗粒3.0 g·L-1处理SW480细胞36 h后每个视野穿透细胞数为(129±12)个,而对照组为(354±20)个(P＜0.01)。槐耳颗粒3.0 g·L-1处理SW480细胞36 h后E-cadherin 在蛋白和mRNA水平表达均升高,而twist、snail和vimentin表达均降低。结论槐耳颗粒在体外能够通过抑制上皮-间质转化有效抑制结肠癌SW480细胞的侵袭转移。     

重度痤疮患者血清中IL-18、IL-18BP及IFN-γ的表达分析

目的:探讨重度(I V级)痤疮患者血清中白介素18(I L-18)、白介素18结合蛋白(I L-18BP)和γ干扰素(I FN-γ)的表达水平及其与发病机制的关系。方法:选择重度痤疮患者30例,健康对照者12例,用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测其血清I L-18、I L-18BP及I FN-γ表达水平,分析两组间表达水平有无差异及其相关性。结果:重度痤疮组血清中I L-18、I L-18BP及I FN-γ表达水平明显高于健康对照组(P<0.01)。直线相关分析显示:重度痤疮组和健康对照组的I L-18、I L-18BP及I FN-γ表达水平两两之间均无直线相关性。(P>0.05)。结论:I L-18、I L-18BP及I FN-γ三者均参与了重度痤疮的发病机制,可能由于三者所形成的负反馈循环失衡所致。     

肛周脓肿的病原菌分布与防护措施

正1资料与方法1.1一般资料收集河北省容城县人民医院2017年9月—2018年8月收治的肛周脓肿患者其中男70例,女23例;年龄3～70岁,平均(38.2±12.3)岁。无菌操作抽取肛周脓液进行细菌培养,培养阳性的菌株进行细菌菌种鉴定及抗菌药物敏感试验。采用质控标准菌株大肠埃希菌(ATCC25922)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)进行细菌鉴定和药敏质量控制。     

泌尿系感染假丝酵母菌的临床特点及耐药性分析

目的 了解泌尿系感染假丝酵母菌菌株分布及耐药现状,为临床合理选择抗菌药物提供依据.方法 回顾性调查2011年10月～ 2013年12月本院住院患者泌尿系发生假丝酵母菌感染的相关资料及药敏结果.结果 从送检的1688份泌尿系感染患者的尿培养标本中共分离268株假丝酵母菌,检出率为15.87％,菌种以热带假丝酵母菌为主,占52.6％,其次为白色假丝酵母菌61株,占22.76％,克柔假丝酵母菌26株,占9.70％,光滑假丝酵母菌为19株,占7.09％.所有菌株体外药敏实验对两性曲霉B100％敏感,对5-氟胞嘧啶、氟康唑、伊曲康唑、酮康唑的耐药率分别是38.43％、76.49％、73.88％、74.25％.结论 假丝酵母菌是泌尿系发生感染最常见的真菌,耐药性有增长趋势,应对分离菌株进行药敏试验,根据实验室的药敏试验结果指导临床合理.     

发酵液中L-组氨酸的定性定量测定

以组氨酸的茚三酮显色和Pauly特征显色为根据，研究了发酵液中L-组氨酸的定性、定量测定。确立了以Pauly试剂和茚三酮试剂纸层析显色来定性测定组氨酸；茚三酮显色-分光光度法来定量测定发酵液中L-组氨酸，并对测定条件进行了研究。     

微生物处理甲苯废气的菌种选育

从土壤中分离筛选出以甲苯为惟一碳源的5种细菌菌株，测定茵体浓度随时间变化曲线，以较优菌种ZD5作为出发菌株进行紫外诱变，获得优势诱变菌株ZD5A．初步鉴定菌株ZD5A为假单胞菌，命名为Pseudomonas sp．ZD5A．得出甲苯降解和茵体浓度变化有相关性，且这种较简便降解挥发性有机废气的菌种评选方法是可行的．     

老年肾癌服用苹果酸舒尼替尼的护理体会

目的探讨老年肾癌患者服用苹果酸舒尼替尼过程中不良反应与护理特点,为临床安全合理用药提供参考。方法回顾分析应用苹果酸舒尼替尼治疗的36例老年晚期肾癌患者的临床资料,了解不良反应特点,对老年肾癌患者进行干预护理。结果本组不良反应发生率为手足综合征14(38.9%)、高血压19(52.8%)、腹泻21例(58.3%)、乏力22(61.1%)、口腔炎9(25%)、恶心呕吐7(19.5%)、甲状腺功能异常7(19.4%)、血液学毒性14(38.9%)等,其中手足综合征,高血压,腹泻和乏力发生率稍高于文献。护理干预后症状可减轻。结论老年患者服用苹果酸舒尼替尼安全有效,积极护理干预有助于提高老年患者耐受性。     

碳水化合物磺基转移酶11对胰腺癌细胞增殖、侵袭的影响及其机制

目的观察碳水化合物磺基转移酶11(CHST11)在胰腺癌组织中表达, 对胰腺癌细胞的增殖、侵袭等生物学行为的影响, 并探讨其作用机制。方法收集经手术切除的胰腺癌组织标本30例, 免疫组织化学法检测组织中CHST11的表达。采用RNA干扰技术敲低胰腺癌细胞株PANC-1、AsPc-1中CHST11的表达, 通过蛋白质印迹法(Western blot)实验筛选出转染效率最高的一条小干扰RNA(siRNA)进行后续实验。将实验分为CHST11-siRNA组和阴性对照组(NC组), 细胞增殖实验(CCK-8法)、原位缺口末端标记法(TUNEL)方法、Transwell小室法分别检测敲降CHST11对PANC-1、AsPc-1细胞株增殖、凋亡、侵袭及迁移能力的影响;通过Western blot实验检测敲降CHST11对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中c-Jun氨基末端激酶(JNK)、细胞外信号调节激酶(ERK)激活水平的影响。定性资料使用χ2检验, 定量资料采取独立样本t检验或单因素方差分析。结果 CHST11在胰腺癌组织中阳性检出率(43%)高于正常组织(16%), 差异有统计学意义(...