p27^Kip1基因及蛋白在骨肉瘤中的表达及其意义

目的 探讨p27^KIP1基因在骨肉瘤MG-63、U2细胞株及骨肉瘤组织中的表达情况及其与骨肉瘤生物学行为的关系。方法 培养人骨肉瘤细胞MG-63、U2和人成骨细胞OB；以半定量RT-PCR技术检测3种细胞中p27^KIP1基因的mRNA表达情况。以免疫细胞化学染色技术检测MG-63、U2及OB中p27^KIP1蛋白的表达情况。以免疫组织化学方法检测骨肉瘤、骨软骨瘤、正常骨3种组织中p27^KIP1蛋白的表达情况，并探讨其与临床病理学特征之间的关系。结果 p27^KIP1基因mRNA的表达在人骨肉瘤细胞MG-63、U2和人成骨细胞OB中没有差别。p27^KIP1蛋白的表达在OB中高于MG-63和U2，MG-63和U2间p27^KIP1蛋白的表达没有差别。骨肉瘤组织的p27^KIP1蛋白表达低于骨软骨瘤组织和正常骨组织，p27^KIP1蛋白表达与Enneking外科分期及是否发生转移相关。结论 骨肉瘤细胞、组织p27^KIP1蛋白表达明显降低；p27^KIP1蛋白的表达可作为骨肉瘤预后判断的一个有价值的指标。     

Skp2 、p27 在骨肉瘤中的表达及其临床意义

 目的 探讨骨肉瘤中Skp2和p27蛋白的表达与患者临床病理和预后的关系以及两种蛋白之间的相关性。方法 用免疫组织化学SP法检测16例骨软骨瘤和48例骨肉瘤组织中Skp2和p27蛋白的表达情况。结果 Skp2蛋白在骨软骨瘤中的表达均为阴性，而在骨肉瘤中的表达阳性率为43．75％（21／48），后者的阳性率显著高于前者（P〈0．01）。Skp2蛋白表达与临床分期、肺转移及分化程度显著正相关（P〈0．05）。p27蛋白在骨软骨瘤、骨肉瘤中阳性率分别为81．25％（13／16）、47．92％（23／48），两者比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。p27蛋白表达与临床分期、肺转移及分化程度呈负相关（P〈0．05）。Skp2蛋白在骨肉瘤中表达与p27蛋白呈负相关（P〈0．05）。结论 Skp2可能通过对细胞周期抑制因子p27蛋白的降解而参与骨肉瘤的发生、发展，联合检测Skp2及p27蛋白的表达对骨肉瘤患者的早期诊断，判定恶性程度及预后具有指导意义。     

Rb2／p130基因在骨肉瘤中的表达及临床意义

目的：研究骨肉瘤中Rb2／p130基因表达情况及其在骨肉瘤发生发展中的作用。方法：用免疫组织化学S—P法检测Rb2／p130基因在62例骨肉瘤、39例骨软骨瘤及51例非肿瘤患者正常骨组织中的蛋白表达情况,采用SPSS11．0统计学软件包对实验结果进行统计学分析。结果：骨肉瘤组中pRb2／p130阳性率为27．42％,骨软骨瘤组阳性率为76．92％,正常骨组织阳性率为82．35％,骨肉瘤组与骨软骨瘤组及正常骨组织组中Rb2／p130基因表达差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论：Rb2／p130基因在骨肉瘤中以低表达方式存在,它与骨肉瘤的发生、发展及预后关系密切,并且有可能因其低表达而促使骨肉瘤的发生、发展,其机理有待进一步研究。     

p53基因在骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的：探讨p53基因在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化方法（s—P法）测定p53蛋白在36例骨肉瘤和17例骨软骨瘤组织中的表达,并随访骨肉瘤患者生存时间。36例骨肉瘤中男19例,女17例,年龄平均19．9岁。Enneking分期II,3例,Ⅱ,27例,Ⅲ,6例,并发病理性骨折7例。结果-36例骨肉瘤随访时间平均3年6个月,其中存活3年及以上者13例,存活3年以下者23例,死亡病例均因骨肉瘤远处转移全身衰竭致死。36例骨肉瘤p53蛋白阳性表达率为52．8％,显著高于骨软骨瘤组,有显著性差异（P〈0．01）。p53蛋白表达在不同Enneking外科分期组间无显著性差异（P〉0．05）,在生存时间3年以上组及3年以下组间有显著性差异（P〈0．01）。结论：p53基因突变对骨肉瘤的发病可能产生影响,对患者预后评估具有一定价值。     

p16、p27蛋白在骨巨细胞瘤和骨肉瘤中的表达

目的：探讨抑癌基因p16、p27在骨巨细胞瘤（GCT）和骨肉瘤（OS）中的蛋白表达特点及其在骨肿瘤发生中的意义。方法：应用SABC免疫组织化学方法检测p16、p27蛋白在16例骨肉瘤、46例骨巨细胞瘤（其中JaffeⅠ级18例、Ⅱ级6例、Ⅲ级12例）。中的表达。结果：p16和p27蛋白的阳性表达均定位于骨肉瘤细胞、骨巨细胞瘤的基质细胞的细胞核和细胞质内。在骨巨细胞瘤Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级和骨肉瘤中p16蛋白的阳性表达率依次为16．7％、62．5％、66．7％和25％;p27蛋白的阳性表达率依次为11．8％、56．3％、50％和25％。p26和p27蛋白的骨巨细胞瘤I级中的阳性表达率显著地低于Ⅱ级和Ⅲ级（P＜0．05）,p16蛋白在骨肉瘤与骨巨细胞瘤Ⅲ级之间的阳性率差异有显著性意义（P＜0．05）,而p27蛋白在骨肉瘤和骨巨细胞Ⅲ级之间的率差异则不具有显著性意义（P＞0．05）。结论：p16、p17基因在骨巨细胞瘤和骨肉瘤的发生中起重要作用,但其阳性表达率不足以单独作为判断恶性程度和预后的指标。     

p15蛋白在骨巨细胞瘤中表达的研究

目的　研究p1 5蛋白在骨巨细胞瘤和骨软骨瘤中的表达 ,探讨其在骨肿瘤发生、发展中的作用。方法　采用S -P免疫组织化学方法对 42例骨巨细胞瘤p1 5蛋白进行检测 ,并与 2 0例骨软骨瘤标本作对照。结果　p1 5蛋白在骨巨细胞瘤中表达的阳性率为 43 % ,在骨软骨瘤中表达的阳性率为 1 5 %。骨巨细胞瘤中p1 5蛋白的表达与骨软骨瘤相比差异显著 ( χ2 =5 1 1 ,P <0 0 5 )。结论　p1 5蛋白的表达可能与肿瘤的恶性度相关 ,在骨巨细胞瘤的发生、发展中起作用。     

p57^KIP2和Ki-67在人脑胶质瘤中的表达及其意义

[目的]研究p57^KIP2、Ki-67在人脑胶质瘤中的表达及其意义。[方法]免疫组化S-P法检测50例脑胶质瘤中p57^KIP2与Ki-67的表达情况。[结果]p57^KIP2蛋白在脑胶质瘤中的表达阳性率为34％，显著低于其在正常脑组织中的阳性率80%（P〈0．01）。Ki-67在脑胶质瘤中的表达阳性率为66％，显著高于其在正常脑组织中的阳性率15％（P〈0．01）。两者的表达率均与肿瘤的恶性程度及2年生存率有关。p57^KIP2与Ki-67的表达密切相关（P〈0．05，rs=-0．292）。[结论]p57^KIP2的表达水平与肿瘤细胞增殖活性有密切的关系，其表达水平的改变在肿瘤的生长中起关键作用。p57^KIP2和Ki-67的联合检测有利于更准确地判断细胞的增殖活性和预后。     

p57^KIP2和Ki-67在人脑胶质瘤中的表达及其意义

[目的]研究p57^KIP2、Ki-67在人脑胶质瘤中的表达及其意义。[方法]免疫组化S-P法检测50例脑胶质瘤中p57^KIP2与Ki-67的表达情况。[结果]p57^KIP2蛋白在脑胶质瘤中的表达阳性率为34％，显著低于其在正常脑组织中的阳性率80%（P〈0．01）。Ki-67在脑胶质瘤中的表达阳性率为66％，显著高于其在正常脑组织中的阳性率15％（P〈0．01）。两者的表达率均与肿瘤的恶性程度及2年生存率有关。p57^KIP2与Ki-67的表达密切相关（P〈0．05，rs=-0．292）。[结论]p57^KIP2的表达水平与肿瘤细胞增殖活性有密切的关系，其表达水平的改变在肿瘤的生长中起关键作用。p57^KIP2和Ki-67的联合检测有利于更准确地判断细胞的增殖活性和预后。     

TRAIL、Caspase-8和NF-κB蛋白在人骨肉瘤中的表达及其与细胞凋亡的相关性研究

目的探讨TRAIL、Caspase-8和NF—κB在人骨肉瘤组织及骨软骨瘤组织中的表达规律及其与骨肉瘤细胞凋亡的相互关系。方法应用免疫组化方法,检测TRAIL、Caspase-8和NF—κB蛋白在43例骨肉瘤及15例骨软骨瘤中的表达,并经图像分析系统测量TRAIL、Caspase-8和NF—κB蛋白的平均光密度（0D）值;用TUNEL方法检测骨肉瘤及骨软骨瘤中细胞凋亡。结果TRAIL、Caspase-8蛋白在骨肉瘤中的阳性表达均低于骨软骨瘤组织（P〈0．05）;而NF—κB蛋白在骨肉瘤中的表达高于骨软骨瘤（P〈0．05）。TRATL与Caspase-8蛋白在骨肉瘤中表达呈正相关（P〈0．01）;而TRATL与NF-κB蛋白在骨肉瘤中表达呈负相关（P〈0．01）。骨肉瘤组细胞凋亡指数（AI）显著低于骨软骨瘤组（P〈0．05）;TRAIL、Caspase-8蛋白表达与细胞凋亡均呈正相关（P〈0．01）;而NF—κB蛋白表达与骨肉瘤细胞凋亡呈负相关（P〈0．01）。结论TRAIL基因可能是诱导骨肉瘤细胞凋亡的分子基础,参与了其发生发展过程中细胞凋亡的调控。Caspase-8作为影响细胞凋亡过程的因子,在骨肉瘤发生、发展中发挥作用。NF-κB在骨肉瘤细胞增殖与凋亡中具有重要作用。TRAIL、Caspase-8蛋白呈低表达,可能受NF—κB高表达的调控而不能诱导细胞凋亡。提示三者在骨肉瘤的发生、发展中起协同作用。     

骨肉瘤组织中Survivin基因表达及其与细胞周期蛋白D1表达的关系

目的：探讨骨肉瘤中抗凋亡基因Survivin的表达状态及其与细胞周期蛋白D1(cyclin D1)表达的关系。方法：采用原位杂交、免疫组织化学技术、DNA原位末端标记(TUNEL)法检测38例骨肉瘤、15例骨软骨瘤、5例正常骨组织中Survivin mRNA表达及骨肉瘤组织中cyclin D1表达和细胞凋亡情况，比较Survivin mRNA表达与骨肉瘤临床病理参数及cyclin D1表达的关系。结果：Survivin mRNA在正常骨和骨软骨瘤组织无明显表达，但显著表达于骨肉瘤中65．8％(25／38)，其表达率与骨肉瘤组织学分级无关，与WH0分型及转移有关，P＜O．05；骨肉瘤细胞凋亡指数(AI)均值为8．3％(O～17％)，Survivin阴性组AI值显著高于阳性组，P＜O．01；骨肉瘤中cyclin D1过度表达(71．1％，27／38)，其与Survivin表达正相关，rs=O．370，P＜O．05。结论：Survivin选择性表达于骨肉瘤组织，通过抑制细胞凋亡，并与cyclin D1协同作用参与骨肉瘤的发生发展，Survivin可能是评价骨肉瘤预后的重要参考指标。     

p27KIP1和SKp2蛋白异常表达与人胶质瘤临床病理学关系的研究

目的探讨脑胶质瘤组织中p27~(KIP1)蛋白和S期激酶相关蛋白2(skp2)异常表达与临床病理因素的关系。方法应用免疫组化SP法检测45例胶质瘤和10例正常脑组织中p27~(KIP1)和Skp2蛋白表达情况。结果p27~(KIP1)和Skp2蛋白在正常脑组织和胶质瘤组织中的阳性表达率差异有显著性(P=0.033、P=0.005);p27~(KIP1)和Skp2蛋白表达水平与胶质瘤组织学分级相关(P<0.01),但与患者的性别、年龄及肿瘤大小无明显关系(P>0.05);Skp2阳性表达组和阴性表达组之间p27~(KIP1)蛋白阳性率差异有显著性(x~2=4.8458,P=0.028);胶质瘤组织中p27~(KIP1)蛋白和Skp2蛋白的表达呈负相关(r=-0.5477,P<0.05)。结论Skp2蛋白在胶质瘤组织中表达上调,加速了对p27~(KIP1)泛素化依赖的蛋白降解,使p27~(KIP1)蛋白表达降低,失去对细胞周期的调控并促进细胞异常增殖,从而参与了胶质瘤的发生和发展。     

人骨肉瘤中P27和cyclinE蛋白的表达

目的 探讨P27和cyclinE蛋白在人骨肉瘤中的表达及其在骨肉瘤发生、发展中的作用。方法 采用免疫组化S-P法检测30例骨肉瘤和10例骨软骨瘤中P27和cyclinE蛋白的表达。结果 在骨肉瘤和骨软骨瘤两组中的P27蛋白阳性表达率分别为33.3％和80.0％,两者差异显著(P<0.05)。而且,两组中P27蛋白表达强度的差异有显著性(P<0.05)。在骨肉瘤和骨软骨瘤两组中的cyclinE蛋白阳性表达率分别为93.3％和30.0％,两者差异显著(P<0.05)。两组中cyclinE蛋白表达强度的差异有显著性(P<0.05)。在骨肉瘤中P27和cyclinE蛋白的表达强度呈显著负相关(r_s=-0.432,P<0.05)。结论 P27蛋白在骨肉瘤中低表达,cyclinE蛋白在骨肉瘤中高表达,两者有相关性,均与骨肉瘤发生、发展有关。     

p16蛋白和p27蛋白在恶性骨肿瘤中的表达及其与预后的关系

目的 探讨p16和p27蛋白在恶性骨肿瘤组织中的表达及其与肿瘤的发生、发展及预后的关系.方法 应用免疫组织化学S-P法,检测48例软骨肉瘤、68例骨肉瘤,20例软骨瘤做对照;对p16蛋白在软骨肉瘤及p27蛋白在骨肉瘤不同病理分级、临床分期、预后分组中的表达进行对比分析和相关研究.结果 软骨肉瘤组织中p16蛋白高表达( )率与软骨瘤相比,差异有统计学意义(P＜0.01).软骨肉瘤复发组p16蛋白的高表达率与未复发组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).p16蛋白高表达率与瘤组织分化程度呈正相关(P＜0.01),在软骨肉瘤不同组织学分级间p16蛋白高表达率相比差异均有统计学意义(P＜0.05).骨肉瘤组织中p27蛋白高表达( )率与软骨瘤相比,差异有统计学意义(P＜0.01).骨肉瘤低生存组p27蛋白高表达率与高生存组相比,差异有统计学意义(P<0.01).p27表达与瘤组织分化程度呈正相关(P＜0.01),与临床分期呈负相关(P＜0.01).结论 p16蛋白减少或缺失是软骨肉瘤发生、发展及不良预后的重要指标,p27蛋白减少或缺失是骨肉瘤的发生、发展及不良预后的重要指标,对临床具有重要的指导意义.     

Removal of Cdk inhibitors through both sequestration and downregulation in zearalenone-treated MCF-7 breast cancer cells

Treatment of MCF 7 cells with the fungal estrogen zearalenone induced cyclin E-associated kinase activity transiently within 9-12 h; total cyclin-dependent kinase (Cdk) 2 activity was elevated for 24 h and beyond. This increased cyclin E/Cdk2 activity was associated with sequestration of the Cdk inhibitor p27 Cdk inhibitor 1B (p27(KIP1)) by newly formed cyclin D1/Cdk4 complexes and with downregulation of p27(KIP1) expression. The activation of cyclin A/Cdk2 activity corresponded with virtual elimination of p27(KIP1). The activity of cyclin E/Cdk2 complexes from zearalenone-treated lysates was inhibited in vitro by recombinant p27(KIP1), and this inhibition was relieved by the addition of recombinant cyclin D1/Cdk4 complexes. Thus, sequestration of p27(KIP1) by cyclin D1/Cdk4 resulted in activation of Cdk2 in vitro. Cdk inhibitory activity in lysates of zearalenone-treated cells was depleted by anti-p27(KIP1) and anti-Cdc2 interacting protein (p21(CIP1)) antibodies. Overexpression of the Cdk4/6-specific Cdk inhibitor of Cdk4 p16(INK4A) was associated with increased association of p27(KIP1) with Cdk2, concomitant with disruption of D cyclin/Cdk4 complexes. The proteasome inhibitor 2-leu-leu-leu-H aldehyde (MG-132) was relatively ineffective in inhibiting the initial, sequestration-dependent activation of cyclin E/Cdk2 yet was as effective as p16(INK4A) in inhibiting activation of cyclin A/Cdk2 later in G(1). Downregulation of p27(KIP1) proceeded in p16(INK4A)-expressing cells after zearalenone treatment, and G(1) arrest afforded by p16(INK4A) expression was reversible upon prolonged treatment with zearalenone. Zearalenone treatment of MCF-7 cells elicited expression of F-box protein S phase kinase-associated protein 2 (p45(SKP2)), a substrate-specific component of the ubiquitin-ligase complex that targets p27(KIP1) for degradation in the proteasome. These studies suggest that both sequestration of Cdk inhibitors by cyclin D1/Cdk4 complexes and downregulation of p27(KIP1) play major roles in the induction of Cdk2 activity and S phase entry elicited by estrogens in MCF-7 cells.     

p57KIP2、cyclin D1、cyclin E在男性乳腺癌组织中的表达及其临床意义

  目的  探讨p57KIP2、cyclin D1、cyclin E在男性乳腺癌（male breast cancer，MBC）组织中的表达及其临床意义。  方法  收集2000年1月至2016年12月60例温州医科大学附属第一医院MBC患者的组织标本，分为乳腺浸润性导管癌组（infiltrating ductal carcinoma，IDC）40例、乳腺导管原位癌组（ductal carcinoma in situ，DCIS）20例，选取20例男性乳腺发育症（gynecomastia，GYM）作为对照组。应用RT-PCR、免疫组织化学法分别检测IDC、DCIS、GYM组织中的p57KIP2、cyclin D1、cyclin E mRNA及蛋白的表达情况。  结果  IDC的p57KIP2 mRNA表达水平为0.18±0.07，低于DCIS的0.42±0.05、GYM的0.75±0.04；IDC的p57KIP2蛋白阳性率为25%（10/40），低于DCIS的60%（12/20）、GYM的90%（18/20）；p57KIP2 mRNA及蛋白表达三组间两两比较，差异均具有统计学意义（P < 0.05）。IDC的cyclin D1、cyclin E mRNA表达水平分别为0.92±0.12、0.96±0.08，高于DCIS的0.72±0.06、0.64±0.01及GYM的0.38± 0.03、0.21±0.02；IDC的cyclin D1、cyclin E蛋白阳性率分别为90%（36/40）、88%（35/40），高于DCIS的80%（16/20）、85%（17/20）及GYM的25%（5/20）、20%（4/20），差异均具有统计学意义（P < 0.05）。在IDC组织中p57KIP2、cyclin D1、cyclin E表达均与临床分期、组织学分级相关（P < 0.05），p57KIP2蛋白的表达与淋巴结转移相关（P < 0.05）；p57KIP2与cyclin D1、p57KIP2与cyclin E呈负相关（P < 0.05），cyclin D1与cyclin E呈正相关（P < 0.05）。  结论  p57KIP2、cyclin D1、cyclin E可能参与了MBC的发生发展过程，联合检测p57KIP2、cyclin D1、cyclin E可为进一步发现MBC的发病机制及治疗提供重要参考。      

成骨性肿瘤中p27蛋白的表达及其意义

目的　探讨ｐ２７蛋白在成骨性肿瘤中的表达状况，了解其与肿瘤组织学类型、分化程度及生物学行为的关系。方法　采用免疫组化二步法测定成骨性肿瘤中ｐ２７蛋白的表达状况。结果　骨瘤、骨母细胞瘤中ｐ２７蛋白高表达（１００％ 、８７．５％ ），且主要定位于胞核（８７．５％ 、７５％ ），骨肉瘤中低表达（６２．８％ ），胞核表达极低（４．７％ ），两者间差异显著（Ｐ＜ ０．００１），ｐ２７蛋白在骨肉瘤中的表达与肿瘤的浸润、复发和转移有关。结论　ｐ２７ 蛋白表达在成骨性肿瘤中的改变具有特异性，可作为骨肉瘤的诊断和评估预后的指标。     

成骨性肿瘤中p27基因mRNA与蛋白的表达及其意义

探讨ｐ２７ｍＲＮＡ与蛋白在成骨性肿瘤中的表达状况，了解其与肿瘤组织学类型，分化程度及生物学和赤的关系。方法：采用免疫组化和非放射性核酸原位交技术检测成骨性肿瘤中Ｐ２７蛋白和ｍＲＮＡ的表达状况。结果：骨瘤、骨母细胞瘤中Ｐ２７蛋白表达，主要定位于胞核（８５．７％、７５％），骨肉瘤中低表达，胞核表达极低（４．７％），两者间差异显著（Ｐ〈０．０１）。Ｐ２７蛋白有骨肉瘤中的表达与肿瘤的浸润、复发和转移有关。     

滑膜肉瘤组织中p27和cyclin E的表达及其临床意义

目的：探讨滑膜肉瘤组织中p27蛋白和cyclin E表达与临床病理指标的关系及判断预后的价值。方法：为46例滑膜肉瘤标本及10例正常滑膜组织的存档蜡块．应用免疫组化法观察p27蛋白和eyclin E的表达情况，并进行对比分析和相关性研究。结果：46例滑膜肉瘤组织中p27蛋白的阳性率为19．6％（9／46），正常滑膜组织中为90％（9／10），两者差异有统计学意义，P=0．01。p27蛋白表达与组织学分级有关，P=0．01；与性别、临床分期和组织学类型无关，P〉0．05。p27蛋白低表达者的5年生存率明显低于高表达者．P=0．01。eyclin E在滑膜肉瘤和正常滑膜组织中的表达差异有统计学意义，P=0．00；cyclin E的过表达在滑膜肉瘤的5年生存率组间差异有统计学意义，P=0．00。结论：p27低表达和cyclin E过表达与滑膜肉瘤的发生有关，是其预后差的有意义指标。联合检测p27和cyclin E表达对判断滑膜肉瘤的预后更有价值。     

EXPRESSION AND SIGNIFICANCE OF ONCOPROTEIN p16 AND FOS IN OSTEOSARCOMA

It is known that tumor is a gene disease both activation of oncogene and inactivity of tumor suppressor gene. In recent years the studies of molecular genetics have shown that different oncogene and tumor suppressor gene have different action in the occurrence and development of osteosarcoma. Immunohistochemistry technique was performed to detect p16 and C-fos protein expression in 41 cases of osteosarcoma so that their clinical significance were explored. MATERIALS AND METHODSClinical…     

p57KIP2、cyclin D1和cyclin E在宫颈鳞癌中的表达及意义

目的探讨p57^KIP2、cyclin D1及cyclin E蛋白在宫颈癌发生、发展中的作用。方法用免疫组织化学SP法检测100例宫颈鳞癌、60例宫颈上皮内瘤变和30例正常宫颈鳞状上皮组织中p57^KIP2、cyclin D1和cyclin E蛋白的表达情况。结果cyclin D1、cyclin E蛋白在宫颈SCC与NE、CIN与NE组织中阳性表达率之间比较、cyclin E蛋白在宫颈SCC与CIN组织中阳性表达率之间比较，差异均有显著性（P〈0．01）；cyclin D1与cyclin E之间的表达呈正相关（P〈0．01）；三者表达均与组织学分级、淋巴结转移、患者年龄无关（P〉0．05）。结论p57^KIP2、cyclin D1及cyclin E蛋白共同参与了宫颈癌的发生发展。cyclin D1和cyclin E蛋白高表达可能是宫颈组织恶变的重要生物学标志，cyclin E异常表达是宫颈癌发生的早期事件。