舌下含服免疫治疗对哮喘小鼠嗜酸性粒细胞凋亡及Fas、Bel-2蛋白表达的影响

目的：研究舌下含服疫苗对哮喘小鼠肺组织嗜酸性粒细胞凋亡及Fas、Bcl-2蛋白表达的影响。方法：21只BALb／c小鼠随机分为正常组、哮喘组和舌下含服粉尘螨疫苗治疗组。对正常组小鼠不做任何处理,对哮喘组小鼠用尘螨提取液诱发哮喘以制作哮喘模型,治疗组则以尘螨抗原致敏后进行免疫治疗。应用免疫组化Envision法检测肺组织Fas和Bcl-2蛋白的表达,再以体视学方法测算肺组织Fas和Bcl-2蛋白阳性细胞的体密度（Vv）和数密度（Nv）。用TUNEL法检测肺组织嗜酸性粒细胞凋亡情况。结果：①3组小鼠肺组织均可见嗜酸性粒细胞凋亡,治疗组嗜酸性粒细胞凋亡指数显著高于哮喘组（P〈0．01）。②肺组织Fas、Bcl-2蛋白阳性细胞的体视学测量,治疗组Fas蛋白阳性细胞的体密度与数密度均比哮喘组高,差别均有统计学意义（P〈0．05）。③治疗组Bcl-2蛋白阳性细胞的体密度与数密度均比哮喘组低,差别均有统计学意义（P〈0．05）。结论：舌下含服免疫治疗可通过调节凋亡基因Fas、Bcl-2在嗜酸性粒细胞上的表达及肺组织内其它细胞上的表达,进而促进嗜酸性粒细胞及肺内其它炎性细胞在哮喘气道的凋亡来减少气道炎性细胞浸润,控制气道慢性炎症,达到防治哮喘的作用。     

青蒿琥酯对哮喘小鼠嗜酸性粒细胞凋亡和Fas、Bcl-2基因蛋白 表达的影响

目的 观察青蒿琥酯对哮喘小鼠嗜酸性粒细胞（EOS）凋亡以及相关基因Fas和Bcl-2蛋白表达的影响。方法 6~8周龄雌性BALB/c小鼠30只按随机数字表法分为对照组、哮喘组和青蒿琥酯组。除对照组外,其余各组均用卵白蛋白致敏并雾化激发制备哮喘小鼠模型。治疗组从造模第21天开始雾化激发前1 h腹腔注射给药。末次激发24 h后行肺组织染色,流式细胞术检测肺泡灌洗液（BALF）EOS的百分比和凋亡率,TUNEL法检测肺组织EOS凋亡情况,免疫组化法检测肺组织Fas和Bcl-2蛋白的表达。结果 与哮喘组比较,青蒿琥酯组BALF中EOS的百分率下降（P<0.05）,BALF和肺组织中EOS凋亡率升高（P<0.05）。肺组织中Fas蛋白的阳性面积和IOD升高（P<0.05）,Bcl-2蛋白的阳性面积和IOD降低（P<0.05）。结论 青蒿琥酯可调节Fas和Bcl-2的蛋白表达减少肺组织EOS浸润,促进EOS凋亡。     

舌下含服粉尘螨疫苗免疫治疗法对哮喘小鼠树突状细胞及NF-κB的影响

目的通过对哮喘模型小鼠舌下含服粉尘螨疫苗进行治疗,研究治疗前后树突状细胞(dendritic cell,DC)和NF-κB在颌下淋巴结和肺部的变化,比较高剂量疫苗和低剂量疫苗对哮喘小鼠的治疗疗效。方法采用常规方法制备舌下含服粉尘螨疫苗。28只BALB/c小鼠按随机数字表法分为正常组(A组)、哮喘模型组(B组)、粉尘螨高剂量治疗组(C组)、粉尘螨低剂量治疗组(D组),每组7只。检测小鼠气道高反应性,观察支气管肺胞灌洗液(BALF)中细胞计数和分类,肺组织HE染色观察小鼠肺部炎症状况;通过免疫组织化学染色和体视学测量观察各组小鼠肺组织NF-κB阳性细胞的变化和颌下淋巴结33D1阳性DC的表达。结果 C组BALF中嗜酸性细胞计数、肺组织炎症细胞浸润较B组显著减少(P<0.05),气道高反应性下降(P<0.01)。C、D组哮喘小鼠颌下淋巴结33D1阳性DC和肺部NF-κB阳性细胞的数密度、体密度、表面积密度均下降,C组比D组下降更明显(P<0.01)。结论高剂量舌下含服粉尘螨疫苗治疗哮喘小鼠有显著疗效,与DC的免疫耐受和NF-κB的下调密切相关。     

母牛分枝菌菌苗对哮喘豚鼠肺组织嗜酸粒细胞凋亡及Fas、bcl-2蛋白表达的影响

目的:研究母牛分枝杆菌菌苗对哮喘豚鼠肺组织嗜酸粒细胞凋亡及Fas、bcl-2蛋白表达的影响.方法:30只豚鼠随机分为生理盐水组、哮喘组及母分枝杆菌菌苗组.应用卵白蛋白(OVA)建立哮喘模型,母牛分枝杆菌菌苗组每只豚鼠在OVA致敏前10天肌注22.5μg母牛分枝杆菌菌苗.最后一次激发后,TUNEL法检测肺组织嗜酸粒细胞凋亡,免疫组化法检测肺组织Fas、bcl-2蛋白的表达.结果:母牛分枝杆菌菌苗组豚鼠肺组织嗜酸粒细胞凋亡指数(23.8±5.4)%显著高于哮喘组(4.6±0.7)%(P＜0.01);肺组织Fas蛋白表达(OD值)(0.202±0.013)显著高于哮喘组(0.051±0.025)(P＜0.01);肺组织bcl-2蛋白表达(OD值)(0.054±0.032)显著低于哮喘组(0.181±0.041)(P＜0.01).结论:母牛分枝杆菌菌苗通过上调Fas蛋白、下调bcl-2蛋白在哮喘豚鼠肺组织的表达而诱导哮喘豚鼠肺组织嗜酸粒细胞凋亡.     

清气化痰汤对哮喘小鼠肺部炎症的影响

目的 观察清气化痰汤对哮喘小鼠气道炎症和肺组织炎性反应的干预作用.方法 将45只BALB/c小鼠分为正常对照组(CON组)、哮喘模型组(MOD组)、地塞米松组(TRE组)、清气化痰汤组(X1组)、清气化痰汤联合地塞米松组(X2组).通过卵清清蛋白和氢氧化铝凝胶进行致敏和雾化建立哮喘小鼠模型.取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数、嗜酸性粒细胞计数及观察肺组织病理变化.结果 与CON组比较,MOD组BALF细胞计数和嗜酸性粒细胞计数明显增多,TRE组、X1组、X2组BALF细胞计数和嗜酸性粒细胞计数均明显减少,TRE组和X2组治疗后第15天与第5天比较差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);各治疗组均能减轻小鼠肺组织病理炎性浸润,减少肺大泡产生、气道上皮增厚,X2组炎症损伤轻.结论 清气化痰汤能减轻气道炎症,改善模型小鼠的肺组织炎性反应.     

白介素-17A在哮喘小鼠中的表达及意义

目的 初步探讨哮喘小鼠中血清白介素(IL)-17A的水平及在肺、脾及胸腺组织中的表达情况.方法 28只BALB/c雌性SPF级小鼠随机分为正常对照组(A组)和哮喘模型组(B组),各14只;观察两组小鼠气道病理改变及BALF中细胞比例变化:采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测两组小鼠血清IL-17A水平及肺、脾和胸腺组织匀浆预孵后的表达情况.结果 B组小鼠气道炎症以嗜酸性粒细胞及嗜中性粒细胞浸润为主,而A组无此变化.B组外周血及肺、脾、胸腺组织匀浆中IL-17A的水平显著增高,与A组比较差异有显著性(P<0.01).B组肺组织中IL-17A水平与BALF中嗜中性粒细胞(r=0.693.P=0.040)和嗜酸性粒细胞旱正相关(r=733,P=0.030).结论 IL-17A在哮喘小鼠血清及肺、脾及胸腺组织中高表达,IL-17A可能足参与支气管哮喘急性发作的主要细胞因子之一,在哮喘中的作用可能与其促进中性粒细胞及嗜酸性粒细胞在气道内聚集有关.     

CpGODN对尘螨哮喘小鼠Foxp3表达的影响

目的研究CpG寡脱氧核苷酸(CpGODN)对尘螨哮喘小鼠Th1/Th2型细胞因子及肺组织中Foxp3蛋白表达的影响。方法用雌性C57BL/6J小鼠建立尘螨哮喘小鼠模型,在抗原致敏阶段加入CpGODN进行干预,并设立GpCODN治疗对照组及布地奈德治疗对照组,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比(EOS%)的变化;用酶联免疫吸附(ELISA)法检测BALF中IL-4、IL-5、IFN-γ的含量变化;用免疫印迹(Western-blot)法检测肺组织Foxp3蛋白的表达水平。结果与哮喘模型组及GpCODN治疗对照组比较,CpGODN治疗组的BALF中IL-4、IL-5的浓度降低,IFN-γ浓度升高,肺组织中Foxp3蛋白表达增高;相关性分析显示肺组织Foxp3表达与BALF中IFN-γ水平呈正相关,与BALF中IL-4、IL-5水平、EOS绝对值均呈负相关。结论 CpGODN能够改善尘螨哮喘小鼠气道炎症,调节Th1/Th2型细胞因子的平衡,可能是通过诱导Foxp3的表达来起到免疫调节的作用。     

甲泼尼龙对哮喘模型MMP-9的表达及对气道炎症的影响

目的 探讨甲泼尼龙(MP)对哮喘小鼠基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达和气道炎症的影响.方法 30只BALB/c雌性小鼠,按随机数字表法分为哮喘组、MP治疗组和生理盐水对照组,每组10只.采用鸡卵清白蛋白(OVA)腹腔注射和滴鼻的方法 建立小鼠急性哮喘模型,HE染色观察肺组织病理学改变,并进行支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数.采用免疫组化法和明胶酶谱法测定MMP-9蛋白的表达;RT-PCR法测定MMP-9 mRNA的表达.结果 哮喘组病理切片显示明显的气道痉挛,大量炎性细胞浸润,BALF细胞计数中嗜酸性粒细胞明显增高,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);而MP治疗组病理切片显示气道痉挛程度和炎性细胞浸润均减轻,BALF中嗜酸性粒细胞减少,与哮喘组比较差异均有统计学意义(P<0.05).免疫组化和明胶酶谱分析均显示哮喘组较对照组MMP-9蛋白表达明显增加.RT-PCR结果 显示,哮喘组MMP-9 mRNA表达增多,而MP治疗组较哮喘组表达降低.结论 MMP-9在哮喘小鼠肺组织中表达增高可能是导致哮喘急性炎症的机制之一.MP也可能通过抑制MMP-9表达抑制哮喘的炎症反应.     

甲泼尼龙对哮喘模型MMP-9的表达及对气道炎症的影响

目的 探讨甲泼尼龙(MP)对哮喘小鼠基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达和气道炎症的影响.方法 30只BALB/c雌性小鼠,按随机数字表法分为哮喘组、MP治疗组和生理盐水对照组,每组10只.采用鸡卵清白蛋白(OVA)腹腔注射和滴鼻的方法 建立小鼠急性哮喘模型,HE染色观察肺组织病理学改变,并进行支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数.采用免疫组化法和明胶酶谱法测定MMP-9蛋白的表达;RT-PCR法测定MMP-9 mRNA的表达.结果 哮喘组病理切片显示明显的气道痉挛,大量炎性细胞浸润,BALF细胞计数中嗜酸性粒细胞明显增高,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);而MP治疗组病理切片显示气道痉挛程度和炎性细胞浸润均减轻,BALF中嗜酸性粒细胞减少,与哮喘组比较差异均有统计学意义(P<0.05).免疫组化和明胶酶谱分析均显示哮喘组较对照组MMP-9蛋白表达明显增加.RT-PCR结果 显示,哮喘组MMP-9 mRNA表达增多,而MP治疗组较哮喘组表达降低.结论 MMP-9在哮喘小鼠肺组织中表达增高可能是导致哮喘急性炎症的机制之一.MP也可能通过抑制MMP-9表达抑制哮喘的炎症反应.     

CpGODN对尘螨哮喘小鼠T-bet/GATA-3表达的影响

目的探讨CpG寡脱氧核苷酸(CpGODN)对尘螨哮喘小鼠Th1/Th2型细胞因子的影响及其机制。方法用雌性C57BL/6J小鼠建立尘螨哮喘小鼠模型,在抗原致敏阶段加入CpGODN进行干预,并设立GpCODN治疗对照组及布地奈德治疗对照组,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞(EOS)数量的变化;用酶联免疫吸附(ELISA)法检测BALF中IL-4、IL-5、IFN-γ的含量变化;用免疫印迹(Western blotting)法检测肺组织T-bet和GATA-3蛋白的表达水平。结果与哮喘模型组及GpCODN治疗对照组比较,CpGODN治疗组的BALF中炎症细胞明显减少,IL-4、IL-5的浓度降低,IFN-γ浓度升高,肺组织中GATA-3蛋白表达降低,T-bet表达增高;与布地奈德治疗组比较,CpGODN治疗组的BALF中IFN-γ浓度升高。相关分析显示肺组织中T-bet/GATA-3比值与BALF中IFN-γ/IL-4比值呈正相关。结论 CpGODN可通过诱导T-bet表达、抑制GATA-3表达以恢复Th1/Th2平衡,从而减轻尘螨过敏性哮喘小鼠的气道炎症。     

胞宫虚寒证与胞宫寒凝证的诊治

从临床角度,对胞宫虚寒证和胞宫寒凝证的诊断要点和治疗方法进行了论述和区别,对二者所属的妇科常见病一一作了分析,并提出相应的治则和方药,为临床妇科病的诊治提供了经验和方法。     

论中医腹诊源流与原理

论述了腹诊的起源与发展,并从脏象、经络、气血津液三个方面分析了胸腹的生理、病理意义。胁腹与脏象、经络的关系,对诊腹以判断病位尤为重要,而气血津液理论可以说明证候的虚实,鉴别某些病邪性质。认为作为局部诊法的腹诊,能够反映整体功能状況及其病理变化,体现了整体观的特点。     

大鼠正中神经和桡神经纤维起始细胞的分布与分布模式

将辣根过氧化物酶(HRP)注入大鼠正中神经或桡神经干内,标记细胞出现在注射侧脊髓前角和脊神经节内。正中神经组:出现在脊髓C_4～T_2节段,在前角外侧群中的分布偏向背侧;在脊神经节分布于C_6～T_2节段。桡神经组:出现在脊髓C_4～T_1节段,在前角外侧群中的分布偏向腹侧;在脊神经节分布于C_6～T_1节段。     

胰体尾部肿瘤早期诊断与治疗

目的探讨胰腺体尾部肿瘤的早期诊断和选择合适的治疗方法。方法总结1998年9月—2012年10月收治的29例胰腺体尾部肿瘤患者的临床资料并进行回顾性分析。结果 29例均进行手术治疗,治愈28例,死亡1例。致死原因为胰瘘和多器官功能障碍综合征。胰瘘和腹腔感染是主要的并发症。结论胰腺体尾部肿瘤早期诊断困难,腹部B超和CT检查有助于早期发现本病。手术是胰体尾部肿瘤最佳的治疗方式。关键是采取个体化的手术方式,选择合理的治疗方法可提高治愈率。     

糖尿病大鼠HDL-C和LDL-C的变化及丝胶的调节作用

目的：探讨丝胶对2型糖尿病大鼠低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)的调节作用。方法：48只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组,每组12只大鼠。25mg/kg链脲佐菌素腹腔注射3d(1次/d)建立2型糖尿病大鼠模型;模型成功建立后,糖尿病模型组大鼠不再做任何处理,丝胶治疗组大鼠给予丝胶(2.4g/kg/d)灌胃35d,阳性对照组大鼠给予二甲双胍(55.3mg/kg/d)灌胃35d。分别检测各组大鼠的血糖以及血清HLD-C和LDL-C的水平。结果：与正常对照组大鼠比较,模型组大鼠的血糖、LDL-C明显升高,HDL-C明显降低(P＜0.01,P＜0.05);与模型组大鼠比较,丝胶治疗组、阳性对照组大鼠的血糖、LDL-C明显降低,HDL-C明显升高(P＜0.01)。结论：丝胶可通过提高HDL-C水平、降低LDL-C水平改善糖尿病时血脂代谢紊乱。     

心机械图血流动力学微机自动监测系统的设计与应用

本文报道作者自行设计软件程序与接口,将修复后的生理记录仪与AppleⅠ型微机进行联机监测,组成一个全自动无创性血流动力学智能化监测系统。多道生理记录仪将同步的心电、心音、心尖搏动和颈动脉搏动图输入计算机,进行测量及计算分析,最后打印诊断报告。可自动分析诊断24种心功能状态。通过临床110例应用表明其与临床综合观察诊断符合率达98/%,人机采点相关系数为0.90,人机分析相关系数为0.98,能满足临床及科研要求。     

月之盈缺与气血盛衰实验研究

通过血象实验研究月之盈缺与青少年气血盛衰的规律,结果表明,青少年女性气血盛衰与月节律变化(即月之盈缺),有明显的同步性。即呈中—高—低的变化规律;而青少年男性,呈高—中—低的变化规律。上述青少年气血盛衰的规律,反映了随月之盈缺时问,人体防御外邪能力的变化。说明青少年处于生长发育盛期,阴阳属性明显,易受天时影响,亦是祖国医学“天人相应”理论科学性的有力证据。     

食管癌与结肠癌及其癌旁组织端粒酶活性的检测

①目的 建立测定端粒酶活性的PCR－TRAP方法，并探讨其对食管癌、结肠癌诊断的意义。②方法 应用PCR－TRAP方法，对36例食管癌、40例结肠癌及其癌旁组织进行了粒酶活性的检测。③结果 36例食管鳞状细胞癌组织端粒酶活性阳性检出率为80．50％，癌旁组织阳性检出率为6．00％，二者相比，差异有极显著意义（χ^2＝41．3，P＜0．001）。其中17例伴淋巴结转移中端粒酶活性均呈阳性，而未伴随淋巴结转移的病人中端粒酶活性阳性检出率为63．15％，二者差异有极显著性（χ^2＝7．02，P＜0．01）。40例结肠腺癌组织中端粒酶活性阳性检出率为91．75％，癌旁组织中阳性检出率为5．00％，两者相比差异有极显著性（χ62＝60．26，P＜0．001）；40例结肠癌均为腺细胞癌，其中12例伴淋巴结转移的标本中10例检测出活性，而29例未伴随淋巴结转移的病人中，有27例均为腺细胞癌，其中11例伴淋巴结转移的标本中10例检测出活性，而29例未伴随淋巴结转移的病人中，有27例检出端粒酶的活性，两者相比差异无显著性（P＞0．05）。④ 结论 端粒酶活性增高可能是致食管、结肠组织癌变的重要因素；端粒酶活性的检出可作为食管癌、结肠癌诊断的指标之一。