脊髓NF-κB信号通路在大鼠持续性术后痛中的作用

目的 评价脊髓NF-κB信号通路在大鼠持续性术后痛中的作用.方法 选择鞘内置管成功的成年雄性SD大鼠90只,体重200～250 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=30):假手术组(S组)、持续性术后痛组(SMIR组)和吡咯烷二硫代氨基甲酸盐组(PDTC组).SMIR组和PDTC组采用皮肤/肌肉切口牵拉法制备大鼠持续性术后痛模型;S组仅分离暴露肌肉,未牵拉.术后1d时开始,PDTC组于30s内鞘内注射NF-KB抑制剂PDTC 10 ng,S组和SMIR组鞘内注射等容量生理盐水,1次/d,连续7d.于术前1 d(T0)、术后1 d(T1)、3 d(T2)、7 d(T3)、12 d(T4)和22 d(T5)时,测定机械缩足反应阈值(MWT);各时点MWT测定结束后,随机取5只大鼠,断头处死后取脊髓组织,采用ELISA法测定TNF-α含量.结果 与S组比较,T1-5时SMIR组MWT降低,T2时PDTC组MWT降低,T3-5时SMIR组和PDTC组脊髓TNF-α含量升高(P＜0.05或0.01);与SMIR组比较,T2-5时PDTC组MWT升高,T3.4时脊髓TNF-α含量降低(P＜0.05或0.01).结论 脊髓NF-κB信号通路参与了大鼠持续性术后痛的发生发展.     

NF-κB相关信号通路在胰腺癌发病中的作用

胰腺癌是外科恶性程度最高的肿瘤之一,随着分子生物学的发展,对胰腺癌的发病机制也有了很大的了解.胰腺癌细胞中存在着多种信号通路传导的异常,包括:Notch信号通路,k-ras信号通路,hedghog信号通路,NF-κB信号通路等,其中由于NF-κB信号的改变在胰腺癌细胞中普遍存在,故考虑NF-κB在胰腺癌各信号通路相互作用中有着重要地位,本文针对NF-κB在胰腺癌细胞中参与的相关信号通路进行综述.     

NF-κB信号通路在鞘内注射血小板活化因子诱发大鼠痛敏中的作用

目的 评价NF-κB信号通路在鞘内注射血小板活化因子(PAF)诱发大鼠痛敏中的作用.方法 鞘内置管成功的雄性SD大鼠64只,体重200～250 g,随机分为6组:人工脑脊液(ACSF)对照组(AC组,n=16)鞘内注射ACSF 10μl;PAF诱发大鼠痛敏组(PAF组,n=16)鞘内注射PAF 10μg(溶于10μl ACSF);二甲基亚砜(DMSO)对照组(DC组,n=8)和低、中和高剂量SC-514组(S1-3组,n=8)分别于鞘内注射PAF前2 h腹腔注射0.1%DMSO溶液2 ml、SC-514(溶于2 ml 0.1%DMSO溶液)10、50、100 mg/kg.分别于鞘内给药前、给药后5、15、30、45和60 min时测定机械痛阈和热痛阈,随后每间隔30 min测定1次,连续4 h,ELISA法检测脊髓TNF-α和IL-lβ的表达.结果 鞘内注射PAF可诱发机械痛敏和热痛敏,上调大鼠脊髓TNF-α和IL-1β的表达;Iκβ激酶-β抑制剂SC-514可剂量依赖性地减轻PAF诱发的痛敏,抑制脊髓TNF-α和IL-1β的表达上调.结论 NF-κB信号通路参与了鞘内注射PAF诱发大鼠痛敏的过程.     

NF-κB信号通路在胰腺癌转移调控中的作用机制

胰腺癌是恶性程度较高的肿瘤之一,绝大多数患者最终死于其广泛转移.多种基因介导的细胞信号通路参与了胰腺癌侵袭和转移的调控.核因子-κB是其中关键的调控通路之一.研究发现,核因子-κB通路对细胞增生、凋亡抵抗、血管形成、上皮间质转化、炎症反应和应激反应等一系列与转移相关的生物学过程具有重要的调控作用,并且可以上调Hedgehog、MMPs等介导转移的信号通路,为临床医师更好地理解胰腺癌转移的调控机制,进一步寻找高敏感性的肿瘤标志物及选择性强的治疗靶点提供了新的思路.     

蛋白酶体抑制剂对骨关节炎大鼠NF-κB信号通路的影响

目的 观察蛋白酶体抑制剂MG-132对骨关节炎软骨及滑膜组织NF-κB信号通路的影响.方法 SD大鼠144只,离断前十字韧带及内侧半月板建立膝关节骨关节炎模型,随机分为四组:MG-132组,造模术后24h于膝关节腔内注射100 μl质量浓度为0.007 g/L的MG-132溶液;DMSO(二甲基亚砜,Dimethyl sulfoxide)组,造模术后24h于膝关节腔内注射100μl体积分数为0.1％的DMSO溶液;假手术组,仅行关节囊切开;正常对照组,仅于膝关节腔内注射100μl质量浓度为0.007 g/L的MG-132溶液.术后2、4和12周处死动物,于膝关节软骨组织及滑膜组织取材,行病理形态学观察,根据Mankin评分标准进行半定量评估;应用RT-PCR法检测NF-κB p65、I-κB、TNF-α、IL-1β等基因mRNA的表达水平;荧光分光光度法检测20S蛋白酶体活性,并行相关性分析.结果 MG-132组各时相的Mankin评分均比DMSO组低,假手术组与正常对照组相近且较前两组低,差异有统计学意义.MG-132组各时相的软骨及滑膜组织中NF-κB p65、IL-1β、TNF-α mRNA表达水平均低于DMSO组,除2周滑膜组织NF-κB p65和12周软骨组织IL-1β mRNA外差异均有统计学意义.MG-132组术后2周软骨组织及4周滑膜组织I-κB mRNA表达水平高于DMSO组,差异有统计学意义.结论 MG-132具有减轻滑膜炎症、保护关节软骨的作用,从而延缓骨关节炎进程.     

NF-κB在急性胰腺炎病程进展中的作用

细胞因子的级联释放是急性胰腺(acute pancreatitis,AP)病情加重的重要因素,最终导致多器官功能障碍和死亡.核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)作为一种多项性调节作用的核转录因子,能与多种基因启动子部位kB位点特异性结合,引起炎症反应和凋亡等多种病理生理反应.研究发现选用NF-kB抑制剂对其活性进行抑制,能抑制机体的炎症反应,明显改善急性胰腺炎的预后,可以作为一个潜在的新靶点治疗急性胰腺炎.然而,亦有研究发现抑制NF-κB能明显加重急性胰腺炎病情,因此,研究NF-κB在炎症反应中占有重要的研究地位.     

应激性溃疡大鼠胃黏膜中核因子κB信号通路的活化情况

目的观察核因子κB(NF-κB)信号通路在应激性溃疡大鼠胃黏膜中的活化情况。方法采用浸水-束缚应激的方法制作大鼠应激性溃疡模型。应激前(0min)及应激5-360 min过程中设不同时相点处死大鼠,共9组,每组5只。采用凝胶电泳迁移分析(EMSA)法检测大鼠胃黏膜NF-κB与DNA的结合活性,蛋白质印迹(Western blot)法检测胃黏膜核因子抑制蛋白(hoBs)降解水平,RNA印迹杂交(Northern blot)法检测胃黏膜NF-κB下游效应分子肿瘤坏死因子(TNF)α、白细胞介素(IL)1β、细胞因子诱导中性粒细胞化学趋化因子(CINC)1、细胞间黏附分子(ICAM)1和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达水平。结果应激处理15 min内可见大鼠胃黏膜NF-κB迅速呈双相模式活化,其峰值出现于应激45 min和360 min,分别为应激前正常水平的(10．6±1．3)倍和(8．9±1．2)倍(P<0.01);抗体supershift实验结果表明,活化的NF-κB主要为p50／p65异二聚体。NF-κB活化第1相和第2相分别伴有明显的IκBα和IκBβ降解。应激15-30 min时TNF-α、IL-1β、CINC-1和ICAM-1基因转录明显上调,iNOS基因上调发生在应激30-90 min时,应激360 min时这些基因表达仍持续增加。结论NF-κB信号通路活化发生于浸水-束缚应激大鼠应激早期的胃黏膜中,可能在胃黏膜促炎性基因的过度表达中发挥了重要作用。     

脊髓NINJ2在大鼠神经病理性痛中的作用：与NF-κB信号通路的关系

目的:评价脊髓神经损伤诱导蛋白2(NINJ2)在大鼠神经病理性痛中的作用及其与NF-κB信号通路的关系。方法:清洁级健康雄性SD大鼠32只,体重230~260 g,7~8周龄,采用随机数字表法分为4组( n＝8)：假手术组(Sham组)、神经病理性痛组(NP组)、神经病理性痛+NINJ2干扰病毒组(NP+s...     

NF-κB活化及iNOS基因表达在急性胰腺炎肺损伤中的作用

目的　探讨急性坏死性胰腺炎 (ANP)大鼠肺组织核因子 κB (NF κB)活化及诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)mRNA表达与肺损伤的关系。方法　 33只Wistar大鼠随机分为正常对照空白组、盐水对照和胰腺炎组。以 3 5 %牛磺胆酸钠溶液逆行注入胰胆管制作ANP模型 ,并将N 乙酰半胱氨酸(NAC ;30 0mg/kg体重 )于造模前和后 1h用于ANP模型 ,造模后 12h取材 ,采用SP免疫组化方法检测肺组织NF κB活性。利用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法检测ANP肺组织iNOSmRNA表达 ,同时观察血淀粉酶、肺及胰腺组织湿 /干重比率、肺组织髓过氧化物酶 (MPO)及病理改变等。结果　正常对照组肺组织几乎无NF κB活化及iNOSmRNA的表达 ,ANP时肺组织NF κB活化及iN OSmRNA高表达 ,NAC对肺NF κB活性有抑制作用 ,可使肺iNOSmRNA表达降低 ,并可降低淀粉酶、胰腺组织湿 /干重比率及肺MPO。肺组织NF κB活化与iNOSmRNA表达及肺iNOSmRNA表达与MPO均呈正相关 ,相关系数分别为 0 79及 0 6 6 (P <0 0 1)。结论　肺组织NF κB活化及iNOSmRNA过度表达可能是ANP肺损害发生的原因之一。NAC可能通过抑制肺NF κB活性及iNOSmRNA的表达 ,减轻肺损害。     

TLR4/NF-κB信号通路在脊髓损伤中的作用

[目的]探讨TLR4/NF-κB信号通路在急性脊髓损伤发病机制中的作用.[方法]SD大鼠随机分为假手术组、损伤组和单唾液酸神经节苷酯组(monosialoganglioside,GM1组).其中,前一组仅行假手术,后两组采用改良Allen法建立大鼠脊髓损伤模型.术后,GM1组给予静脉GM1,假手术组、损伤组静脉给予等量...     

NF-κB在氯胺酮诱导大鼠原代培养大脑皮层神经元凋亡中的作用

目的 评价NF-κB在氯胺酮诱导大鼠原代培养大脑皮层神经元凋亡中的作用.方法 体外培养6 d的大鼠大脑皮层神经元15孔,随机分为3组(n=5):对照组(C组)正常培养;氯胺酮组(K组)和氯胺酮+NF-κB抑制剂SN50组(KS组)分别加入1 mmol/L氯胺酮、1 mmol/L氯胺酮+2.5 μmol/L SN50,作用24 h.洗脱后24 h时采用凝胶迁移实验检测神经元NF-κB活性,采用Westernblot法测定凋亡相关蛋白Bcl-XL和Bax的表达,计算Bcl-XL/Bax,计数凋亡神经元,电镜下观察神经元的超微结构.结果 与C组相比,K组NF-κB活性、Bcl-XL/Bax、神经元凋亡率升高(P＜0.05),KS组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与K组相比,KS组NF-κB活性、Bcl-XL/Bax、神经元凋亡率降低(P＜0.05).电镜结果显示:KS组神经元损伤较K组明显减轻.结论 NF-κB参与了氯胺酮诱导大鼠原代培养大脑皮层神经元凋亡的过程.     

核转录因子(NF-κB)在慢性前列腺炎中的作用

核因子kappaB(nuclear factor kappaB,NF-kB)具有多中心调控作用,在细胞凋亡、肿瘤、炎症反应中均起关键性调节作用.NF-kB参与调控多种细胞因子并参与细胞信号转导.NF-kB在炎症反应中的作用研究不断深入.慢性前列腺炎的发病和多种细胞因子的表达有关,本文就NF-kB参与调控细胞因子的表达、细胞信号转导过程、调控转录起始因子及基因表达等在慢性前列腺炎中的作用做一综述.     

NF-κB信号通路在骨性关节炎发生发展中作用机制的研究

NF-κB( Nuclear Factor-κB)是广泛存在于真核细胞内的一个信号通路,它通过MAPKKK (Mitogen Activated Protein Kinase Kinase Kinase)或细胞膜受体级联激活,导致NIK( NF-κB inducing kinase-1)激活,进而活化IKK( IκB Kinase),磷酸化IκB(Inhibitory κB proteins),最终导致NF-κB向细胞核内转位指导目的基因表达.NF-κB在OA( Osteoarthritis)炎症反应及疾病发生发展过程中起到了至关重要的作用,最终导致软骨降解和关节损伤.NF-κB信号参与并调控软骨细胞的增殖、分化、凋亡,而NF-κB信号的失调在骨关节炎的发生、发展中扮演着十分重要的角色,这提示深入研究NF-κB信号在骨性关节炎发病机制中的确切作用将有助于骨性关节炎的靶向治疗,从而为骨性关节炎的治疗开辟更加广阔的前景.     

NF-κB在醛固酮所致大鼠肾损伤中的作用及相关机制

目的 探讨NF-κB在醛固酮-1%NaCl诱导的单侧肾切除肾损伤模型中的作用及可能机制。 方法 32只雄性SD大鼠单侧肾脏切除后随机分为4组：对照组（n=8）;1%NaCl组（1%NaCl饲料喂养,n=8）;醛固酮组（1%NaCl饲料喂养+0.75 μg/h醛固酮泵入,n=8）;吡咯烷二硫氨基甲酸（PDTC）组（1%NaCl饲料喂养+0.75 μg/h醛固酮泵入+PDTC 100 mg/kg灌胃,n=8）。共治疗4周。观察各组大鼠收缩压、蛋白尿、肾功能、肾组织形态学改变。.Western印迹和实时定量PCR法观察肾皮质胞间黏附分子1（ICAM-1）及结缔组织生长因子（CTGF）的蛋白表达及mRNA表达;EMSA法检测肾皮质NF-κB活性;免疫组化法观察NF-κB的表达情况。 结果 醛固酮组大鼠表现明显的高血压、蛋白尿、肾小球硬化,ICAM-1及CTGF蛋白和mRNA表达水平较1%NaCl组显著升高（均P < 0.05）,NF-κB活性明显增强,NF-κB在肾组织表达也明显增加。PDTC干预后在抑制NF-κB活性和表达的同时,ICAM-1及CTGF表达明显减少（均P < 0.05）,同时大鼠血压和肾小球硬化也得到了明显缓解。 结论 NF-κB抑制剂PDTC可通过减少ICAM-1及CTGF的表达缓解单侧肾切除-1%NaCl-醛固酮所致肾损伤。     

NF-κB在永生化神经前体细胞凋亡中的作用

目的 探讨NF-κB在永生化神经前体细胞凋亡中的作用.方法 永生化神经前体细胞接种于6孔板,随机分为5组,每组6孔,INPC组不进行基因转染,INPC/CMV组转染表达质粒ReCMV;INPC/p50组、INPC/p65组分别转染含p50基因和p65基因的表达质粒RcCMV,转染后2 d,加入200 μg/ml G418筛选12～14 d,进行阳性克隆扩大培养3～4周,检测p50 mRNA、p65 mRNA表达、NF-κB活性和细胞凋亡情况.INPC/p50p65组转染含p65基因的表达质粒ReCMV,加入200 μg/ml G418筛选12～14 d,进行阳性克隆扩大培养3～4周,转染含p50基因的表达质粒ReCMV,2 d后进行上述指标的检测.结果 INPC/p50组和INPC/p50p65组p50 mRNA表达高于其他组(P<0.05),INPC/p65组和INPC/p50p65组p65 mRNA表达、NF-κB活性及细胞凋亡率高于其他组(P<0.05).结论 NF-κB活性升高可促进永生化神经前体细胞的凋亡.     

MEKK3与NF-κB信号通路在前列腺癌中的表达及意义

目的 研究有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinase kinase kinase 3,MEKK3)与NF-κB信号通路在前列腺癌中的表达及意义. 方法 采用免疫组织化学法检测40例前列腺癌及40例良性前列腺增生组织中MEKK3、NF-κB P50、NF-κB P65蛋白的表达情况. 结果 MEKK3蛋白在前列腺癌及良性前列腺增生组织中的阳性表达率分别为80.0%(32/40)、5.0%(2/40),差异具有统计学意义.在高中分化组(Gleason评分≤7分)及低分化组(Gleason评分8~10分)前列腺癌患者中的阳性表达率分别为61.1%(11/18)、95.5%(21/22),差异具有统计学意义.在Ⅰ期+Ⅱ期及Ⅲ期+Ⅳ期前列腺癌患者中的阳性表达率分别为63.2%(12/19)、95.2%(20/21),差异具有统计学意义.NF-κB P50蛋白在前列腺癌及良性前列腺增生组织的阳性表达率分别为75.0%(30/40)、35.0%(14/40),差异具有统计学意义.NF-κB P65蛋白在前列腺癌及良性前列腺增生组织中的阳性表达率分别为77.5%(31/40)、2.5%(1/40),差异具有统计学意义.应用Spearman秩相关分析发现,MEKK3、NF-κB P50、NF-κB P65蛋白在前列腺癌中的表达存在相关性,两两呈正相关关系. 结论 MEKK3蛋白在前列腺癌组织中的表达明显高于前列腺增生组织,且与前列腺癌的病理组织分级、临床分期密切相关.MEKK3可能通过激活NF-κB信号通路进而启动了前列腺癌的发生、发展.     

NF-κB通路在单核细胞诱导肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的 观察单核细胞（U937细胞）对人近端肾小管上皮细胞（HK-2细胞）转分化的影响及其分子机制。 方法 将HK-2细胞与人单核细胞系U937细胞共培养;倒置相差显微镜观察HK-2细胞形态;Western印迹、实时荧光定量PCR法检测α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、纤连蛋白（FN）、E钙黏蛋白（E-cadherin）和胞间黏附分子1（ICAM-1）表达;BCECF-AM荧光染色法测定单核细胞黏附;流式细胞仪法检测HK-2细胞表面分子ICAM-1表达;基因芯片筛选HK-2细胞基因变化;利用信号阻断剂阻断基因芯片筛选出的信号通路,进一步验证单核细胞诱导肾小管上皮细胞转分化的分子机制。 结果 单核细胞可直接诱导HK-2细胞发生形态变化,减少HK-2细胞E-cadherin表达（均P < 0.05）,并上调α-SMA、FN表达（均P < 0.05）。应用CD18抗体阻断CD18-ICAM-1可抑制单核细胞黏附及其诱导的HK-2细胞形态变化。基因芯片结果显示,NF-κB信号通路分子CC亚族趋化因子配体20（CCL20）、白细胞介素（IL）2、IL-8、脂磷壁酸（LTA）及血小板内皮细胞黏附分子1（PECAM1）表达明显增加（均P < 0.05）。NF-κB信号阻断剂吡咯烷二硫氨基甲酸（PDTC）能显著抑制HK-2细胞形态变化及表面ICAM-1表达,抑制单核细胞诱导的肾小管上皮细胞转分化。 结论 单核细胞通过CD18分子与HK-2细胞表面ICAM-1结合,从而启动NF-κB信号通路介导的特定基因转录,最终导致肾小管上皮细胞发生转分化。     

NF-κB信号通路在瘢痕疙瘩形成中的作用

在皮肤创伤愈合修复异常时,出现以成纤维细胞为主的细胞增殖、活性增强;以Ⅰ、Ⅲ 型胶原为主的细胞外基质 (extracellar matrix, ECM)沉积,真皮组织过度增生,便会出现病理性瘢痕或称异常瘢痕,病理性瘢痕又分为增生性瘢痕和瘢痕疙瘩[1].瘢痕疙瘩被认为是一种良性的皮肤肿瘤,具有肿瘤生长的某些特点.目前,瘢痕疙瘩形成的发病机制仍不清楚.参与调控瘢痕疙瘩的成纤维细胞的信号通路很复杂,主要有TGF-β/Smad,NF-κB,IL-6等信号通路[2].普遍存在的NF-κB(nuclear factor-κB, 核因子-κB)转录因子,调节着上百种基因的表达,其中包括免疫和炎症应答、细胞增殖和凋亡.NF-κB的活性涉及到许多疾病,包括哮喘、类风湿关节炎、炎症性肠病和人类的癌症;NF-κB的靶向治疗已经在这些疾病中显示出了效果[3].大量的证据表明,NF-κB通路在炎症和肿瘤之间提供了一个机械连接,且还可调节肿瘤的血管发生和侵袭力[4].瘢痕疙瘩具有肿瘤生长的特性,因此,NF-κB通路的激活作用与瘢痕疙瘩成纤维细胞的异常细胞增殖和ECM过度产生密切相关.在真皮角质形成细胞与成纤维细胞中,NF-κB信号通路能够促进皮肤创伤后的炎症反应与愈合,在异常的愈合及瘢痕的形成过程中也起到了一定的作用.笔者就NF-κB信号通路的研究进展及其在瘢痕疙瘩形成中的作用作一综述.     

中医药通过NF-κB信号通路治疗骨关节炎的研究进展

随着全球人口老龄化的进展,骨关节炎的发病率也逐年上升,必将成为一大社会公共卫生问题。骨关节炎发病机制复杂,中药因其多成分、多途径、多靶点的特点在治疗骨关节炎方面具有巨大潜力。大量研究表明中医药可通过调节NF-κB信号通路抑制炎症反应、氧化应激、基质降解、细胞凋亡等治疗骨关节炎。本文综述了中医药通过NF-κB通路治疗骨关节炎的研究进展,以期为未来的基础和临床研究提供参考。     

microRNA-223调控NF-κB信号通路干预骨关节炎的研究进展

骨关节炎作为老年疾病中的一种退行性疾病,对它的研究一直被认为是重点和难点,而如何延缓骨关节炎的进展成为最主要的问题。microRNA-223作为骨科疾病的关键调节因子,其表达的变化对延缓骨关节炎的进展具有调节作用。由于核因子-κB(nuclear factor-kappa B, NF-κB)信号通路作为经典的与骨关节炎相关的信号通路,对骨关节炎的发生及发展可进行调节,且研究发现microRNA-223可以通过对NF-κB信号通路的调控,延缓骨关节炎的进展。本文就microRNA-223对NF-κB信号通路在骨关节炎发病中的作用进行综述,以期为microRNA-223在治疗骨关节炎方面提供一些新的治疗思想。