酶联免疫斑点法检测甲型H1N1流感患者Th1/Th2细胞的变化

目的 通过酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测,探讨甲型H1N1流感患者Th1/Th2细胞的变化及其临床意义.方法 对40例H1N1患者、42例流感样患者及45例健康体检者采用ELISPOT技术检测Th1/Th2细胞,同时进行外周血中的白细胞、淋巴细胞及其亚群计数.结果 H1N1患者的白细胞、淋巴细胞、T细胞计数(包括T4、T8)与流感样患者及健康体检者比较明显偏低(P＜0.05);B细胞计数与健康体检者比较明显偏低(P＜0.05);而H1N1患者NK细胞与流感样患者、健康体检者比较,差异均无统计学意义(均P ＞0.05).H1N1组、流感样组和健康对照组中IFN-γ特异的ELISPOT检测SFC数量M值分别为23、36.5、43,H1N1组与流感样组、健康对照组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).H1N1组、流感样组和健康组中IL-4特异的ELISPOT检测SFC数量M值分别为36.5、27、23,H1N1组与健康对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);但与流感样组比较,差异无统计学意义(P ＞0.05).结论 H1N1感染可引起机体淋巴细胞及其亚群的数量发生异常改变,引起患者机体免疫系统的紊乱.通过ELISPOT技术可从单细胞水平明确CD4+T淋巴细胞亚群中的Th1和Th2细胞的异常改变.     

35例甲型H1N1流感重症患者APACHEⅢ评分分析

目的评估分析急性生理学和慢性健康状况评分Ⅲ（APACHEⅢ）对甲型H1N1流感病情严重程度和预后的价值.方法收集整理35例重症甲型H1N1流感患者临床资料（其中存活组29例,死亡组6例）采用APACHEⅢ评分评估重症甲型H1N1流感的严重程度和预后.结果重症甲型H1N1流感死亡组APACHEⅢ评分分值明显高于存活组（P〈0.01）;其中死亡组急性生理学评分（APS）分值明显高于存活组（P〈0.01）;APACHEⅢ分值与实际病死率呈正相关,APACHEⅢ分值〉60分者病死率明显增加.结论重症甲型H1N1流感患者APACHEⅢ评分分值与病情严重和预后有关.     

甲型H1N1流感患者T细胞亚群变化特点

目的：探讨甲型H1N1流性行感冒（流感）患者T细胞亚群的变化特点。方法：采用美国BD公司生产Fascalibur流式细胞仪检测重症甲型H1N1流感患者外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞并与轻症患者对照进行比较。结果：重症甲型H1N1流感患者外周血CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋比值下降,与轻症比较,差别有统计学意义（P〈0.05,染的防治。     

雾化吸入糖皮质激素在儿童重症甲型H1N1流感中的临床应用

目的观察糖皮质激素雾化吸入治疗重症甲型H1N1流感患儿的疗效及对单核细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞的影响。方法 8例重症H1N1流感患儿给予抗病毒、对症及雾化吸入布地奈德（普米克令舒）1周。观察治疗前后体温、心率、炎性细胞水平变化情况。结果治疗前患儿体温升高,嗜酸性粒细胞计数降低,单核细胞百分比增加;治疗后7 d体温、心率恢复至正常,单核细胞百分比和嗜酸性粒细胞百分比降低（P〈0.01）,咳嗽、气喘、啰音消失。结论甲型H1N1流感重症组患儿早期短疗程雾化吸入糖皮质激素能抑制急性炎症反应,迅速缓解临床症状。     

支原体肺炎患儿外周血Th1／Th2及B细胞的数量分析

目的探讨外周血Th1/Th2及B细胞数量在支原体（MP）肺炎免疫学发病机制中的作用。方法应用单克隆抗体免疫荧光标记法通过流式细胞术对42例MP肺炎患儿的外周血B淋巴细胞CD19^＋及Th1亚群CD4^＋CD45RA^＋、Th2亚群CD4^＋CD45RO^＋的表达情况进行分析。结果MP肺炎患儿外周血B淋巴细胞CD19^＋表达明显升高。Th1亚群CD4^＋CD45RA^＋表达明显升高,Th2亚群CD4^＋CD45RO^＋表达无显著性变化。CD4^＋CD45RA^＋/CD4^＋CD45RO^＋明显升高。结论MP肺炎患儿主要表现为Th1细胞为主的免疫反应及B淋巴细胞过度增殖,符合自身免疫性疾病的免疫病理基本特征,故推测支原体肺炎与自身免疫性疾病密切相关。     

肝癌患者血清Th1/Th2细胞因子含量检测及其与机体免疫功能的关系

目的：研究肝癌患者血清中Th1/Th2细胞因子的含量及其与机体免疫功能的关系。方法：将在本院就诊的肝癌患者纳入研究的观察组,同期在我院体检的健康者纳入研究的对照组,采用酶联免疫吸附法检测两组受试者血清中Th1、Th2细胞因子以及补体C3和C4的含量,流式细胞法检测T细胞亚群含量。结果：（1）Th1/Th2细胞因子：观察组的Th1细胞因子肿瘤坏死因子-a（TNF-a）、干扰素-γ（IFN-γ）含量低于对照组,Th2细胞因子白介素-6、10（IL-6、IL-10）含量高于对照组（P〈0.05）;（2）免疫功能：观察组的CD4＋T细胞、CD16/65＋NK细胞、补体C3和C4含量低于对照组,CD8＋T细胞的含量高于对照组（P〈0.05）;（3）细胞因子与免疫功能的关系：TNF-a、IFN-γ含量与CD4＋T细胞、CD16/65＋NK细胞、补体C3和C4的含量呈正相关,与CD8＋T细胞含量呈负相关;IL-6、IL-10含量与CD4＋T细胞、CD16/65＋NK细胞、补体C3和C4的含量呈负相关,与CD8＋T细胞含量呈正相关。结论：肝癌患者存在Th1/Th2漂移,血清中Th1细胞因子TNF-a和IFN-γ含量降低、而Th2细胞因子IL-6、IL-10含量升高,且与机体的天然免疫和细胞免疫功能密切相关。     

炎症细胞在儿童重症甲型H1N1流感中的作用及临床意义

目的:探讨急性炎症反应与甲型H1N1流感的关系及其临床意义.方法:12例正常儿童为空白对照组(A组),观察组12例甲型H1N1流感患儿分为B组(6例检测前已使用激素)和C组(6例检测前未使用激素).结果:①与A组比较,C组患儿单核细胞百分比(MONO%)明显升高,嗜酸性粒细胞计数(EOS)明显降低;B组EOS及EOS%均明显降低(P＜0.05).②与C组比较,B组患儿MONO%下降.结论:甲型H1N1流感重症患儿单核/巨噬细胞系统被激活,激素可抑制其急性炎症反应,本研究对甲型H1N1重症患儿临床治疗有指导价值.     

许昌市2009年甲型H1N1流感流行特征分析

目的了解许昌市2009年甲型H1N1流感流行特征,为制定和完善预防控制措施和策略提供科学依据。方法用描述流行病学方法对许昌市2009年甲型H1N1流感疫情资料进行分析。结果许昌市2009年报告甲型H1N1流感确诊病例为243例,发病率为5.76/10万,死亡2例,死亡率为0.05/10万,病死率为0.82%。学校、看守所报告暴发疫情4起,报告病例数为50例,死亡1例。发病高峰期出现在第45～51周,共报告发病216例（占总病例数的88.9%）;10～30岁年龄组病例数最多,共176例（占病病例数的72.4%）。结论应加强重点场所和重点人群甲型H1N1流感预防控制和高危人群的医疗救治。     

甲型H1N1流感患者T淋巴细胞亚群与中医辨证分型相关性的回顾性研究

目的：观察不同中医证型甲型H1N1流感患者治疗前后T淋巴细胞亚群的变化。方法：回顾性纳入甲型H1N1流感患者111例,根据中医辨证的方法分为风热犯卫型（55例）、热毒袭肺型（36例）和风寒束表型（20例）,按照患者自愿的原则,采用西药（对氨基乙酰酚或布洛芬）、中药汤剂（辨证用药）以及中西药结合的方法对患者进行治疗。另外选择20位健康志愿者做正常对照。应用流式细胞术检测不同证型甲型H1N1流感患者治疗前后T淋巴细胞亚群的变化。结果：治疗前,3种证型患者CD3＋、CD4＋T淋巴细胞的表达均低于正常对照组（P〈0.01）;风寒束表证患者CD8＋T淋巴细胞的表达与正常对照组比较,差异无统计学意义;风热犯卫和热毒袭肺证患者CD8＋T淋巴细胞的表达低于正常对照组（P〈0.01）;风寒束表证患者CD4＋/CD8＋的比值与正常对照组比较,差异无统计学意义;风热犯卫和热毒袭肺证患者CD4＋/CD8＋的比值高于正常对照组（P〈0.01）。治疗后,3种证型患者的CD4＋T淋巴细胞的表达升高,与正常对照组比较差异无统计学意义;风热犯卫和风寒束表证患者CD3＋T淋巴细胞的表达升高,与正常对照组比较差异无统计学意义;热毒袭肺证患者CD3＋T淋巴细胞的表达低于正常对照组（P〈0.05）;风热犯卫和热毒袭肺证患者CD8＋T淋巴细胞的表达低于正常对照组（P〈0.05）;热毒袭肺证患者的CD4＋/CD8＋比值与正常对照组比较差异无统计学意义;风热犯卫证患者的CD4＋/CD8＋比值高于正常对照组（P〈0.05）。结论：不同中医证型甲型H1N1流感患者的T淋巴细胞亚群的检测可为评价各中医证型甲型H1N1流感患者的细胞免疫功能提供客观依据,也对中医临床辨证分型提供了一定的参考价值。     

Th1/Th2型细胞因子及免疫状态在支气管哮喘患儿治疗前后的变化

目的 探讨Th1/Th2型细胞因子及免疫状态在支气管哮喘患儿治疗前后中的变化.方法 选取榆林市儿童医院2011年5月～2013年3月收治的48例支气管哮喘患儿为研究对象（研究组）,另外选取同期进行健康体检的48例健康儿童作为对照组,检测两组研究对象治疗前及治疗后1、4周时Th1细胞因子[白介素-2（IL-2）、干扰素-γ（IFN-γ）]、Th2细胞因子[白介素-4（IL-4）、白介素-5（IL-5）、白介素-10（IL-10）、白介素-13（IL-13）]和免疫指标,并进行统计学比较.结果 治疗前研究组患儿IL-2 、IFN-γ和IL-10均明显低于对照组（t=8.52、11.84、6.57）,IL-4、IL-5和IL-13明显高于对照组（t=12.98、15.87、11.88）,差异均有统计学意义（P＜0.05）.治疗1、4周后研究组患儿Th1/Th2型细胞因子均明显改善,治疗4周时Th1/Th2型细胞因子水平与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.治疗前研究组患儿CD3＋、CD4＋及CD4/CD8均明显低于对照组（t=9.23、10.52、8.11）,而CD8＋则高于对照组（t=9.61）,差异有统计学意义（P＜0.05）.治疗1、4周后研究组患儿各项免疫指标均明显改善,治疗4周时CD3＋、CD4＋、CD8＋及CD4/CD8水平与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.研究组各时间段Th1、Th2细胞因子比较,差异有统计学意义（F=1.96、3.19、3.25、4.01、2.15、1.81,均P＜0.05）.研究组各时间段各免疫指标比较,差异有统计学意义（F=3.74、2.53、3.06、1.98,均P＜ 0.05）.结论 支气管哮喘患儿治疗前后Th1/Th2型细胞因子及免疫状态存在显著变化.     

肺炎支原体感染患儿Th1/Th2细胞免疫类型及SOCS1/3 mRNA的表达

目的:观察肺炎支原体(MP)感染患儿早期血清中IFN-γI、L-4的含量和单个核细胞(MNC)中SOCS1、SOCS3的表达,以探讨MP感染的免疫学机制。方法:选取MP感染患儿30例,留取其入院时血样,以健康体检儿童为对照。RT-PCR法测血样MNC中SOCS1,SOCS3的表达,采用ELISA法检测血清中IFN-γ,IL-4的表达水平,并分析其相互关系。结果:MP感染患儿早期IFN-γ的表达和IFN-γ/IL-4的比值比对照组明显增高(P<0.01),IL-4亦稍高(P<0.05);SOCS1的表达较正常对照高(P<0.01),SOCS3的表达较对照无明显差异(P>0.05)。结论:在MP感染早期Th1/Th2均参与了患儿机体的免疫应答,以Th1细胞为主;SOCS1、SOCS3参与了Th1/Th2细胞免疫调节。     

TH1/TH2在慢性丙型肝炎发病机制中的作用

目的 研究Th1/Th2变化在慢性丙型肝炎发病机制中的作用。方法 采用双抗体酶联分析法检测了20例正常人,35例慢性丙型肝炎,30例慢性乙型肝炎患血清中的IFN－γ,IL-2,IL－4和IL－6的水平。结果 慢性丙型肝炎组Th2类细胞因子（IL－4,IL－6）水平明显高于正常对照组（P＜0．05）,Th1类细胞因子水平IL－2也增高（P＜0．05）,然而,Th1类细胞因子IFN－γ水平有增加趋势,但无统计学差异（P＞0．05）。Th2类细胞因子水平比Th1类细胞因子水平高。结论 Th2类细胞因子水平增高以及由此引起的Th1/Th2比值下降可能与慢性丙型肝炎的病程持续有关。     

20例儿童甲型H1N1流感危重症的病例分析

目的分析甲型H1N1流感危重症的临床特点,总结治疗经验。方法回顾性分析20例甲型H1N1流感危重症的临床表现、实验室检查、影像表现。结果甲型H1N1流感危重症不仅见于婴幼儿和有原发基础病的儿童,也可见于体健的年长儿;常合并细菌、真菌、支原体、或其他病毒的感染;均伴有多脏器功能不全;好转后短期内随诊未留有后遗症。结论对甲型H1N1流感患儿早期作出正确的判断、及时积极的治疗有利于阻断和延缓病情进展、降低病死率、改善预后。     

IFN-γ/TL-4在儿童免疫性血小板减少性紫癜中的表达

目的：分析儿童急性特发性血小板减少性紫癜（ITP）血中细胞因子IFN-γ/IL-4的含量,从细胞因子水平探索急性ITP患儿Th1/Th2细胞分化趋势,可望揭示其部分发病机理。方法：应用实验研究策略,选择急性ITP患儿发作期组30例,缓解期组28例,于同群体中选择健康儿童20名为对照组,用ELISA法检测血浆IFN-γ和IL-4含量,进行分析比较。结果：①IFN-γ血浆含量发作期组（269.33±13.03）pg/ml明显高于缓解期组（178.84±7.22）pg/ml和对照组（149.26±10.66）pg/m,且缓解期组亦高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.01,95%可信区间内不包含1）;②IL-4发作期组（12.34±1.14）pg/ml明显低于缓解期组（21.38±1.36）pg/ml和对照组（26.41±1.53）pg/ml,且缓解期组亦低于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.01,95%可信区间内不包含1）。结论：血中IFN-γ增高,IL-4降低,显示儿童急性ITP存在明显的Th1优势分化现象。     

特应性皮炎患儿外周血Th17、Th1/Th2细胞亚群的研究

目的检测特应性皮炎(AD)患儿外周血中辅助性T细胞亚群(Th1、Th2和Th17)数量和比例的变化,探讨其在AD发病机制中的作用。方法选择40例AD患儿,分离外周血单核细胞(PBMC),采用流式细胞术(FCM)检测Th1、Th2、Th17细胞的数量及Th1/Th2比值,用ELISA测定培养上清中IFN-γ、IL-4、IL-17水平,与同期选择的健康对照组比较并进行相关分析。结果AD患儿PBMC中CD4+IL-4(+Th2)细胞的数量、CD4+IL-17(+Th17)细胞的数量均高于健康对照组([19.56±4.9)%vs(12.91±1.7)%,P0.05;(26.61±2.6)vs(11.4±1.2),P0.05],Th1/Th2细胞的比值低于健康对照组([0.98±0.13)vs(1.84±1.6),P0.05]。结论IL-17+Th17细胞与Th1/Th2比值变化可能参与AD患儿的免疫学发病机制。     

免疫状态及Th1/Th2型细胞因子在支气管哮喘患儿治疗前后的变化

目的:探讨支气管哮喘患儿治疗前后免疫状态及Th1/Th2型细胞因子的变化规律。方法:选取2012年5月～2013年11月于本院进行治疗的50例支气管哮喘患儿为观察组,同期体检的50名健康儿童为对照组,将观察组治疗前及治疗不同时间段和对照组的外周血T淋巴细胞亚群、红细胞免疫指标及Th1/Th2型细胞因子进行比较。结果:治疗前观察组的CD3+、CD4+及CD4/CD8均低于对照组,CD8+高于对照组,RBC-C3bR及FEER均低于对照组,RBC-ICR及FEIR均高于对照组,IFN-γ、IL-2及IL-10均低于对照组,IL-4、IL-5及IL-13高于对照组,而治疗后不同时间段上述指标呈现持续改善,P均<0.05,均有显著性差异。结论:支气管哮喘患儿治疗后免疫状态及Th1/Th2型细胞因子呈现持续改善的趋势。     

溃疡性结肠炎患者Th17和Th1／Th2细胞亚群的研究

目的检测溃疡性结肠炎（Ulcerativecolitis,UC）患者外周血中辅助性T细胞亚群（Th1、Th2和Th17）数量和比例的变化,探讨其在UC发病机制中的作用。方法选择40例UC患者,分离外周血单核细胞（PBMc）,采用流式细胞术（FCM）检测Th1、Th2、Th17细胞的数量及Th1／Th2比值,用ELISA测定培养上清中IFN-γIL-4、IL-17水平,与同期选择的健康对照组比较并与患儿的病情进行相关性分析。结果UC患者PBMC中IFN-γ＋Th1细胞的数量、IL--γ7＋Th17细胞的数量均高于健康对照组[（27．0±2．9）％,（23．2±1．7）％,P〈O．05;（26．61±2．6）,（11．4±1．2）,P〈0．011;Th1／Th2比值高于健康对照组[（12．8±1．6）,（8．60±1．9）,P〈0．01],Th17细胞的数量与疾病程度呈正相关（P〈0．05,r=0．42）。结论IL-17＋Th17细胞与Th1／Th2比值变化可能参与UC患者的免疫学发病机制。     

重症H1N1流感病毒感染小儿器官功能评估

目的研究重症H1N1流感病毒感染小儿器官系统功能衰竭情况。方法 PCR检测H1N1流感病毒RNA阳性重症患者32例,按小儿多器官功能衰竭诊断标准对各器官系统进行评估。结果 (1)重症H1N1流感病毒感染小儿呼吸系统与中枢神经系统功能衰竭发生机率最高,分别为46.88%与12.5%;(2)其他器官系统功能衰竭未见单独出现,多与呼吸与神经系统异常伴发;(3)急性坏死性脑病是重症H1N1流感病毒感染小儿死亡的重要原因。结论重症H1N1流感病毒感染小儿呼吸系统与神经系统功能衰竭发生机率高,值得临床医生注意。     

女性生殖器尖锐湿疣患者外周血Th1/Th2水平的研究

目的观察女性生殖器尖锐湿疣（CA）患者外周血Th1/Th2细胞因子水平与其相应的组织内Th1/Th2细胞因子水平的相关性,探讨不同感染阶段外周血Th1/Th2细胞因子的变化。方法选取正常对照组20例,女性生殖器CA初发组37例,复发组25例,组织匀浆标本20例,用ELISA法测定各组血清标本和组织标本的细胞因子IL-2、IL-12、IL-4、IL-10的浓度,分析血清各细胞因子与其相应的组织内细胞因子的相关性,比较正常组与CA初发组和复发组的血清细胞因子水平的变化。结果CA组织内细胞因子IL-2、IL-12、IL-4、IL-10水平与相应的血清细胞因子水平密切相关（P〈0.05）;血清Th1细胞因子水平在CA初发组和复发组明显低于正常对照组,而Th2细胞因子水平明显高于正常对照组。结论CA患者血清Th1/Th2细胞因子水平能反映病灶局部的Th1/Th2细胞因子水平。CA患者血清Th1细胞因子水平明显下降,Th2细胞因子水平相对上升,Th1/Th2比值明显下降,导致Th1/Th2失衡。