双水相萃取法分离纯化白芸豆中α-淀粉酶抑制剂的研究

采用PEG/(NH4)2SO4双水相系统萃取α-淀粉酶抑制剂,考察了PEG浓度、(NH4)2SO4浓度和NaCl溶液浓度对α-淀粉酶抑制剂分配系数、相比和活力回收率的影响.确定了白芸豆中α-淀粉酶抑制剂提取的最佳条件,即PEG质量分数为12.O%,(NH4)2SO4的质量分数为13.3%,NaC1质量分数为O.003%时,分配系数、相比和活力回收率分别为4.40,O.57,71.41%.     

葛根素在环氧乙烷-环氧丙烷共聚物/磷酸氢二钾体系中的分配行为研究

目的:研究葛根素在环氧乙烷-环氧丙烷共聚物(EOPO)/磷酸氢二钾(K2HPO4)体系中的分配行为。方法:利用温度诱导相分离,结合双水相萃取技术,确定EOPO型号、诱导温度及时间。结果:当EOPO型号为EOPOSDP30,诱导温度为70℃,诱导时间为60min,EOPO质量分数为28%,K2HPO4质量分数为24%时,葛根素最大总收率可达42.26%。结论:该方法解决了传统双水相萃取技术中聚合物回收的难题,可以使EOPO循环使用,且方法设备投资少、操作简单,为工业化提取葛根黄酮提供了一条新途径。     

柿子黄酮类化合物的双水相系统纯化及止血凝血抗炎作用研究

目的 采用聚乙二醇600(PEG 600)-(NH4)2SO4的双水相体系纯化柿子黄酮(flavonoids extracts from persimmon,FEP)并考察其止血凝血抗炎作用。方法 以FEP得率为指标,采用单因素试验设计,探讨PEG 600-(NH₄)₂SO₄双水相体系中的PEG 600质量分数、(NH₄)₂SO₄质量分数、温度、MgCl₂用量、pH对FEP提取率的影响,并采用Box-Behnken中心组合方法设计3因素3水平的响应面法试验,选择Design-Expert 8.05软件进行响应面分析。以KM小鼠为试验对象,采用剪尾法、毛细管法、二甲苯致炎法对FEP进行止血、凝血、急性抗炎作用的初步研究,并分别与三七粉和阿司匹林进行比较。结果 最佳纯化条件：PEG 600质量分数为12%,(NH₄)₂SO₄质量分数为28%,pH值为8,最终得率为95.97%。FEP可使小鼠的出血时间和凝血时间明显缩短,对二甲苯所致的小鼠耳肿胀具有较显著的抑制作用。结论 本法所形成的双水相体系,操作简便,高效温和并有效保持生物活性;可以考虑将FEP作为活性成分添加入口腔用生活用品或药品。     

聚乙二醇4000-磷酸二氢钠双水相系统萃取头孢羟氨苄的研究

采用聚乙二醇(PEG)-无机盐双水相体系,从药物水溶液中萃取头孢羟氨苄。同时考察PEG4000的浓度、Na H2PO4的浓度、萃取温度对头孢羟氨苄萃取率的影响,并对最佳萃取条件进行预测。结果显示,用PEG4000-Na H2PO4双水相作为萃取体系的最佳条件为:PEG4000质量分数为17%,Na H2PO4质量分数为26%,温度25℃,萃取率约为93.7%。萃取过程重现性较好,快速、高效且未出现乳化现象。     

正交试验优选双水相分配与超声提取集成法提取分离连钱草总黄酮的工艺

目的:优选双水相分配与超声提取集成法提取分离连钱草总黄酮的最佳工艺。方法:以超声提取时间、丙醇体积分数、料液比、(NH4)2SO4浓度为考察因素,连钱草总黄酮提取率为考察指标,通过正交试验优选其最佳提取工艺条件。结果:本法最佳提取工艺条件为超声提取时间30min,丙醇体积分数为50%,料液比1:30,(NH4)2SO4用量为30%。结论:本法操作简便、条件温和、效率高,具有较大优势。     

双水相体系萃取白英总皂苷

目的利用双水相萃取技术提取分离白英中的总皂苷。方法以乙醇/硫酸铵为双水相萃取体系,研究乙醇质量分数、硫酸铵质量分数、pH值、温度等因素对萃取效果的影响。结果萃取条件为乙醇质量分数为30%,硫酸铵质量分数为20%,pH=7.0,温度为30℃时,白英总皂苷在两相的分配系数为17.3,回收率为95.2%。结论该方法可用于白英中总皂苷的提取分离。     

基于HPLC法测定醋酸甲羟孕酮的平衡溶解度与油水分配系数

目的对醋酸甲羟孕酮(MPA)在不同溶剂中的平衡溶解度及其在正辛醇-缓冲液体系中的油水分配系数进行测定。方法采用HPLC法测定MPA的质量浓度,测定MPA在水、有机溶剂、缓冲溶液和加十二烷基硫酸钠的缓冲溶液中的平衡溶解度,采用摇瓶法结合HPLC法测定MPA在正辛醇-缓冲液体系中的质量浓度,从而计算油水分配系数。结果 37℃时,MPA在蒸馏水和丙酮中的平衡溶解度分别为0.52±0.04和238.70±0.47μg·mL~(-1);在体积分数为90%的乙醇溶液中的平衡溶解度最大;在加十二烷基硫酸钠的缓冲溶液中的平衡溶解度增大;在水中的表观油水分配系数为1.99(lgP=0.30),脂溶性较强;在pH值为1.2~6.8的缓冲溶液中,平衡溶解度随pH值的升高而减小,油水分配系数随pH值的升高而增大。结论该实验建立的测定方法可准确测定MPA的平衡溶解度和油水分配系数。     

响应面法优化阿维链霉菌生产多拉菌素的培养基

运用统计试验设计和分析方法优化阿维链霉菌XJ-8-115产多拉菌素的最佳发酵培养基。利用Plackett-Burman设计法(PBD)评价了8种原料组分对多拉菌素生产的影响,再采用最陡爬坡法确定培养基组成的最佳区域,最后以3因素5水平的中心组合设计(CCD)为基础,利用响应面法(RSM)获得多拉菌素最大发酵产量的培养基最佳配比。结果表明：8种原料组分中,干酵母粉、MgSO4和NH4Cl对结果有极显著影响。响应面试验得到到最佳培养基为：75g玉米淀粉,18g干酵母粉,1.35g KCl,0.16g MgSO4,1.8g K2HPO4·3H2O,0.012g FeSO4·7H2O,0.045g Na2Mo4·2H2O,0.09g NH4Cl,0.005g CoCl2·6H2O和2g CaCO3。通过该培养基发酵获得的最大多拉菌素产量为103.54g/mL,与原培养基相比,产量提高了1.80倍,为36.93g/mL,与RSM预测值差异仅为2.22%。     

HPLC法同时测定胃痛欣颗粒剂中大黄酸、大黄素、大黄酚的含量

目的建立胃痛欣颗粒剂中大黄酸、大黄素、大黄酚的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法 ,AccusilC1 8(4 6mm× 2 5 0mm ,1 0 μm)柱 ,流动相为 :甲醇 水 冰醋酸 (80∶2 0∶1 ,V∶V∶V) ,检测波长为 2 5 4nm。结果大黄酸、大黄素、大黄酚分别在 0 0 3～ 0 4 8μg ,0 0 2 5～ 0 4 0 μg ,0 0 2 5～0 4 0 μg内与峰面积呈线性关系 ,平均回收率 (n =3 )分别为 98 3 % (RSD =1 4 3 % ) ,97 6% (RSD=1 84 ) ,98 7% (RSD =0 5 7% )。结论可用于大黄药材及其复方制剂的质量控制     

当归、川芎中藁本内酯含量测定及醇提工艺研究

目的研究当归、川芎中藁本内酯醇提的最佳工艺条件。方法建立HPLC法测定提取液中指标成分藁本内酯的含量 ,并用正交设计优化醇提工艺条件。结果与结论用甲醇 - 水 - 乙酸(V∶V∶V =75 . 0∶2 4 . 8∶0 . 2 )作流动相能使藁本内酯得到良好的分离 ;8倍量 85 % (φ)乙醇提取3次 ,每次 1 0h为醇提最佳工艺条件。     

青霉素酰化酶提取及其与固定化酶的动力学参数测定和比较

采用冻融-溶媒法从大肠杆菌中提取青霉素酰化酶(经硫酸铵沉淀、透析、冷冻干燥),制得酶粉,活力为1100.37u/g,经六批提取试验,平均提取收率47.93％。分别测定游离酶及其固定化酶米氏常数Km值。游离酶的Km值为2.39mM,固定化酶按其颗粒大小不同,Km值分别为5.62、8.46、8.42mM。 在对pH稳定性测定中,游离酶最适pH为7～8,而固定化后在pH5～9之间都较稳定。对温度的稳定性测定中,游离酶与固定化酶在40℃以下都较稳定,但在45℃保温一小时后,游离酶只存留活力39.51％,而固定化酶却存留活力86.92％,二者有显著差异、温度再高相差更大。因此酶经固定化后,对pH和温度的稳定性都有明显提高。金属离子对青霉素酰化酶的活力有所影响。特别是铁离子和铜离子影响较大,故酶反应容器不能采用铁和铜的材料。     

辅酶Q10生产菌YZ519培养基的研究

目的为了提高微生物法生产辅酶Q10的产量，用一株酵母菌YZ519作为辅酶Q10的生产菌，研究不同的C源、N源对辅酶Q10产量的影响。方法用皂化法提取Q10，用高效液相色谱法检测。结果蛋白胨是较好的氮源。葡萄糖是较好的碳源，通过均匀设计初步确定的发酵培养基为：蛋白胨2．2％，葡萄糖3．0％，（NH4）2SO40．05％。在此发酵条件下，辅酶Q10产量达到34．0mg／L。结论通过一株酵母菌作为生产菌，经过优化培养基可提高CoQ10的产量。     

氨气敏电极法测定扑米酮及其片剂的含量

扑米酮及其片剂在浓硫酸、硫酸钾及无水硫酸铜的存在下,消解转化成铵盐,于浓碱下逸出NH_3,可用氨气敏电极测定;在1×10~(-2)～1×10~(-5)M浓度范围内校正曲线呈线性,平均百分回收率为100.2±0.65,变异系数为O.50%;三批商品片测定值均获得与中国药典(1985年版)法接近的结果。本法简便准确,适于某些含氮药物的常规分析。     

人红细胞生成素单克隆抗体的制备研究

将杂交瘤细胞接种于ＢＡＩＢ／Ｃ小鼠腹腔内,令细胞增殖,抽取接种杂交瘤细胞后两周左右的腹水有限充酸胺盐析,饱和度为５０％,然后上ＤＥＡＥ－ＣｅｌｌｕｌｏｓｅＤＥ５２柱,ＮａＣｌ浓度梯度洗脱,所得单克隆抗体纯度达９０％,可用于免疫亲和柱的制备。     

HPLC法测定卡络磺钠注射液的含量及有关物质

目的建立HPLC法测定卡络磺钠注射液中卡络磺钠的含量及有关物质。方法采用Dia-monsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),以0.01 mol.L-1磷酸二氢铵(pH 3.0)乙醇(体积比为10∶1)为流动相,流速为1.2 mL.min-1,检测波长360 nm。结果卡络磺钠在50~250 mg.L-1内质量浓度与峰面积呈良好线性关系,r=0.999 8。平均回收率为100.2%(n=9)。结论该方法可用于卡络磺钠注射液中卡络磺钠的含量及有关物质的测定。     

枇杷叶中五环三萜酸类有效成分的提取研究

目的：进行枇杷叶中五环三萜酸类有效成分的提取方法研究。方法：称取干燥粉碎的枇杷叶5g,以乙醇为溶剂,水浴中回流、过滤,滤液用旋转蒸发仪浓缩得到浸膏,浸膏用乙醇溶解、稀释,经香草醛显色后,在548nm处测定紫外吸收。单因素实验考察了不同水浴温度（60℃、70℃、80℃、90℃）、提取时间（2h、3h、4h、5h）、料液比（1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30）、乙醇浓度（60%、70%、80%、90％）的影响,并进行了L16（44）的正交实验。结果：以乌索酸为对照建立标准曲线,曲线方程为A=0.021C＋0.0249,相关系数r2=0.9995,线性范围为10～50μg/mL,线性关系良好。正交实验结果表明,乙醇体积为90%,提取温度为80℃,提取时间为5h,料液比为1∶20为最佳提取条件。在该条件下进行提取实验验证,结果表明枇杷叶中总五环三萜类成分的含量约为1.32%。结论：该方法简便易行,可用于枇杷叶中五环三萜酸类有效成分的提取。     

唐古特白刺中总黄酮提取工艺的研究

目的研究唐古特白刺中总黄酮的最佳提取工艺。方法采用单因素试验确定唐古特白刺中总黄酮的最佳提取条件,通过紫外分光光度法测定总黄酮含量,并用正交试验确定各因素的影响大小。结果温度对唐古特白刺中总黄酮的提取影响作用最大,唐古特白刺中总黄酮的最佳提取工艺为乙醇75%、料液比1∶7、温度85℃、提取4次(2h.次-1)。结论本研究可为唐古特白刺中总黄酮工业化提取提供理论依据。     

反相高效液相色谱法测定滋肾丸中芒果苷、盐酸小檗碱含量

目的采用反相高效液相色谱法测定滋肾丸中芒果苷、盐酸小檗碱的含量。方法色谱柱 :Hy persilC18柱 ;芒果苷流动相为甲醇 水 醋酸 (2 2∶78∶0 6,V∶V) ,检测波长 :3 2 0nm ;盐酸小檗碱流动相为甲醇 乙腈 水 三乙胺 (1 0∶2 3∶70∶0 2 ,V∶V) ,用磷酸调pH =4,检测波长 :3 40nm。结果芒果苷平均回收率为 97 3 % ,RSD =1 9% (n =5 ) ;盐酸小檗碱平均回收率为 1 0 0 8% ,RSD =2 8% (n =5 )。结论本法简便 ,准确 ,为滋肾丸的质量控制提供一定依据。