FPIA和HPLC法在CsA血药浓度测定的比较分析

目的分别建立用荧光偏振免疫法（FPIA）和高效液相色谱法（HPLC）测定环孢素A血药浓度,并通过比较分析这两种方法的结果相关性,探讨血药浓度监测在临床药物治疗过程中的意义。方法采集在我院治疗的78例应用环孢素A的器官植患者血样,分别用FPIA和HPLC法测定血药浓度,测定结果用t检验的线性回归方法进行分析。结果用FPIA测定的78份环孢素A血药浓度为（142.26±50.64）ng/mL,HPLC法为（123.25±58.22）ng/mL,两种方法测定的结果相关系数r=0.948,P〈0.01,差异有统计学意义;FPIA测定的结果比HPLC法的平均高12.32%。结论环孢素A血药浓度在中高浓度时,FPIA和HPLC法具有良好的相关性,可应用于指导临床用药;但这两种方法有差异,FPIA测定的结果略高于HPLC法测定的结果,在临床应用中应值得注意。     

化学发光微粒子免疫法和反相高效液相色谱法测定环孢素A全血浓度的相关性

目的比较化学发光微粒子免疫(CMIA)法和反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定环孢素A(Cs A)全血浓度的相关性。方法分别采用CMIA法和RP-HPLC法测定52份肾移植患者的Cs A全血样本,测定值采用Passing-Bablok法进行线性回归、用Bland-Altman法计算偏倚。结果 ARCHITECT环孢霉素测试与HPLC检验的平均差异偏倚为10.8 ng/m L(95%置信区间为1.5~20.24 ng/m L),CMIA测定值/HPLC测定值平均为1.19(95%置信区间为0.84~1.53),CMIA法测定结果平均高于HPLC20%左右。结论 CMIA法测定值均高于RP-HPLC法,用其进行Cs A血药浓度测定时应予以折算,并结合临床表现综合判断。     

环孢素A单克隆全血试剂盒残余试剂再利用研究

目的：考察在应用荧光偏振免疫法（FPIA）对环孢素A进行血药浓度监测过程中,试剂盒残余试剂能否再次利用。方法：20例肾移植术后常规服用环孢素A的患者全血样品分别用环孢素A标准试剂盒和混合试剂盒进行血药浓度测定,并对测定结果进行比较分析。结果：两试剂盒测定结果经配对t检验无显著性差异（P〉0．05）。结论：环孢素A试剂盒残余试剂经过适当处理,可以再次利用。     

反相高效液相色谱法测定全血中环孢素A浓度

环孢素A（cyclosporine-A，CsA）是目前最有效的免疫抑制剂。它广泛地用于肝、肾、骨髓等器官移植，能显著地抑制免疫排斥反应，提高移植器官的成活率。由于口服CsA的生物利用度和药代动力学个体差异大，因此，监测血药浓度，研究药动学对安全、有效地用药具有重要临床意义。目前国内外测定全血中CsA的方法主要有放射免疫法、荧光偏振免疫法和高效液相色谱法（HPLC），但前两者因代谢物常影响测定结果。HPLC法常规采用氰基、C8或C18分析柱，柱温较高，内标多用CsD，且样品处理过程较繁琐。我们经多次实验研究，参考有关报道，用CsB做内标，建立了简便、快速、准确的CsA血药浓度测定方法。     

探讨用高效液相色谱法与用胶乳凝集法测定糖化血红蛋白的效果分析

目的：比较用高效液相色谱法（HPLC）与用免疫胶乳凝集法测定糖化血红蛋白（HbA1c）结果的差异。方法：选取我院2013年9月间30例正常体检者和30例糖尿病患者的血液标本,每组每人各两份标本,每份标本2ml（EDTA-K2抗凝）,将这些标本分别用HLC-723G8糖化血红蛋白仪（高效液相色谱法）和贝克曼 DXC-800全自动生化仪（胶乳凝集法）测定 HbA1c,然后将两组检测的结果进行比较和相关性分析。结果：用高效液相色谱法（HPLC）和用免疫胶乳凝集法测定HbA1c的检验结果有良好的相关性,p<0.05,r=0.999。结论：用高效液相色谱法（HPLC）和免疫胶乳凝集法测定糖化血红蛋白的检验结果均有较高的精密度,且高液相色谱法的精密度要高于胶乳凝集法,但是各有优缺点。因此,在临床检验中,可以将用高液相色谱法测得的HbAlc结果作为参考值,用经胶乳凝集法测得的HbAlc结果进行校准。     

环孢素A血药浓度监测在不同实验室的比较

环孢素A的监测方法有高效液相色谱法（HPLC）、放射免疫法（RIA）、荧光偏振免疫法（FPIA）等。FPIA因方法快捷、灵敏可靠、重现性好而被广泛采用。我院于2004年4月购进美国Abbott公司二代快速血药浓度测定仪TDX／FLX进行临床治疗药物监测,在初步开展的环孢素A治疗药物监测时,部分肾移植患者对新设备的准确性提出质疑。为消除患者疑虑,同时也可对新设备进行一次技术检验,我们特组织部分患者同时抽取两份血样,一份送郑州市第七人民医院测定,一份由我院测定,对两个医院不同实验室测定结果进行比较,考察同样操作方法不同操作条件下差异,为患者参考不同实验室测定结果进行药物调整时提供依据。     

全血环孢素A浓度荧光偏振免疫法监测及评价

应用特异性单克隆抗体荧光偏振免疫法（ＭＡＦＰＩＡ）对６８例肾移植患者进行３６２次临床环孢素Ａ（ＣｓＡ）全血药物浓度监测。结果表明，合并用药会影响ＣｓＡ全血液度。术后时间与ＣｓＡ全血浓度有一定关系。ＭＡＦＰＩＡ是一种简便、快速、准确的监测方法，对指导临床鉴别排异与中毒反应以及个体化给药，具有重要意义。     

固相萃取反相高效液相色谱法测定环孢素A滴眼剂中环孢素A的含量

目的:应用固相萃取改进环孢素A滴眼剂中环孢素A含量的测定方法。方法:环孢素A滴眼剂中的环孢素A经固相萃取,以反相高效液相色谱法测定。色谱柱Waters Sep—Pak C18萃取小柱,Nova—Pak C18分析柱;流动相乙腈:甲醇:水(265:22:120);流速0.5ml/min;检测波长206nm。结果:该法回收率为98.6％,相对标准差(RSD)为2.4％,线性范围为0.5-40μg/ml,r=0.9993。结论:该法快速、敏感、高效,可用于环孢素A滴眼剂中环孢素A含量的测定。     

两种方法检测糖化血红蛋白结果的对比分析

目的 比较2种方法测定糖化血红蛋白(HbAlc)的结果之间的差异.方法 采集糖尿病患者静脉全血标本,使用两种方法,即胶乳增强免疫比浊法在日立7170A全自动生化分析仪上,与高效液相色谱法(HPLC)在全自动糖化血红蛋白仪BIO-RAD D10上,同时测定其HbAlc,对结果进行比较分析.结果 HPLC(X)与胶乳增强免疫比浊法(Y)测定结果呈明显正相关(r=0.9682);回归方程:y=1.127x-0.004.但胶乳增强免疫比浊法测定HbAlc的结果值较HPLC法明显偏高(P＜0.01),以HPLC法为参照,胶乳增强免疫比浊法结果的相对偏倚为12.65％.结论 实验室应尽量采用HPLC法为检测方法,或以其为参考方法对胶乳增强免疫比浊法进行校准或设置相应的参考区间,以提高结果的准确性与可靠性.     

酶比色法与HPLC法测定血清同型半胱氨酸的相关性研究

目的:研究酶比色法原理生化试剂与高效液相色谱法(HPLC)测定血清中同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)的相关性。方法:取临床血清样本30份,每一份血清样本分别用酶比色法原理检测试剂和HPLC法测定Hcy浓度,计算分析两种方法测定结果之间的相关系数。结果:酶比色法原理检测试剂和HPLC法检测血清HCY结果的相关系数R2=0.9978。结论:酶比色法原理检测试剂和HPLC法检测结果比较,可见两种检测HCY方法具有高度的一致性。     

Determination of blood sirolimus concentrations in liver and kidney transplant recipients using the Innofluor® fluorescence polarization immunoassay: Comparison with the microparticle enzyme immunoassay and high-performance liquid chromatography-ultraviolet method

Background. Although high-performance liquid chromatography (HPLC) is the method of choice for blood sirolimus determination, the microparticle enzyme immunoassay (MEIA) run on the IMx® analyser is widely used in therapeutic monitoring of this immunosuppressant agent. The aim of our study was to evaluate the possible determination of sirolimus using the fluorescence polarization immunoassay (FPIA) commercialized for everolimus quantification.

Methods. Sirolimus concentrations were determined in whole-blood samples from liver and kidney transplant recipients using the Innofluor® Certican® FPIA (Seradyn Inc.) run on a TDx® analyser (Abbott Laboratories), Sirolimus MEIA run on an IMx® analyser (Abbott Laboratories), and HPLC (UV detection) methods.

Results. The Innofluor® FPIA has a similar cross-reactivity with everolimus and sirolimus, and the within- and between-run coefficients of variation obtained for sirolimus determination were 2.7%–13.3%. In analysing different blood samples from liver and kidney transplant patients the linear regressions obtained were: FPIA = 1.12 HPLC + 0.43 (n=104, r=0.874), MEIA = 1.14 HPLC (n=146, r=0.892), and FPIA = 1.00 MEIA + 0.29 (n=106, r=0.941). Better correlation coefficients were obtained between the methods in the liver transplant samples (r≥0.900) than in the kidney transplant samples (r≥0.849). No significant effect was found for sirolimus clearance or the blood hematocrit on the relationship between the results produced by both immunoassays and HPLC.

Conclusion. The Innofluor® FPIA is a valid alternative with an analogous performance to the MEIA for the therapeutic monitoring of sirolimus.     

HPLC法与化学发光微粒子免疫法测定癫痫患者血浆中卡马西平浓度的一致性评价

目的 评价两种方法[高效液相色谱法(HPLC法)和化学发光微粒子免疫法(CMIA法)]测定患者血浆中卡马西平浓度的一致性。方法 采用Bland-Altman法和Passing-Bablok回归法分析两种检测方法的测定值,并进一步分析两种方法的一致性。结果 Bland-Altman法分析表明测定患者血浆中卡马西平浓度的两种方法(HPLC法和CMIC法)一致性良好;两种方法的回归方程为Y=0.9912X-0.1083(R2=0.970,n=117),显示两种方法相关性良好。结论 测定患者血浆中卡马西平浓度的两种方法(HPLC法和CMIA法)具有较好的相关性与一致性,两种测定方法可以相互替代。     

高效液相色谱法监测环孢素A的全血浓度

目的:建立高效液相色谱法测定环孢素A全血浓度的方法。方法:采用SpherisorbC8(150mm×4.6mm,5μm)分析柱,流动相为甲醇∶水(75∶25,V/V),检测波长214nm,流速1ml/min,柱温为60℃。结果:环孢素A浓度在50ng/ml～2000ng/ml范围内线性良好(r=0.9998),平均方法回收率为99.7%,日内及日间精密度<6%(n=5)。结论:本方法简便、准确、可靠,能较好的满足临床血药浓度监测的需要。     

HPLC法和FPIA法检测卡马西平血药体积百分比的比较研究

目的高效液相色谱法(HPLC)和荧光偏振免疫法(FPIA)测定血清中卡马西平体积百分比的比较研究。方法收集广州市精神病医院服用CBZ的21例癫痫患者血样。用本实验室已经建立的HPLC法和FPIA法分别检测卡马西平对照品的甲醇溶液、卡马西平对照品标准血清、患者血清中卡马西平体积百分比,采用配对t检验考察两种方法分别测定卡马西平对照品的甲醇溶液、卡马西平对照品标准血清、患者血清中卡马西平体积百分比有无显著性差异。结果HPLC法与FPIA法检测卡马西平对照品甲醇溶液、卡马西平对照品标准血清中卡马西平体积百分比无显著性差异(t值分别为-1.009、0.767,P值分别为0.325、0.452);检测患者血清中卡马西平血药体积百分比有显著性差异(t=4.919,P<0.05),FPIA法检测患者血清中卡马西平血药体积百分比较HPLC法偏高。结论FPIA法检测患者血清中卡马西平血药体积百分比过程中,CBZ的活性代谢产物环氧化卡马西平(carbamazepine-10,11-epoxide,CBZ-E)可能对FPIA法测定CBZ有干扰,导致结果偏高。     

葛根素含量检测酶联免疫法与高效液相色谱法相关性的研究

目的:ELISA与HPLC法检测葛根素含量的相关性研究。方法:利用SPSS软件分析二者的相关性,并将数据进行线性拟合,得到相应的线性方程。结果:ELISA与HPLC法检测结果之间的P0.01,相关系数为0.993,二者极显著相关;所得线性方程为Y=0.911X+0.852(R~2=0.9865),将ELISA结果带入方程可直接转化为药典法定HPLC检测结果。结论:通过二者相关性的研究,可使ELISA法与药典HPLC方法检测结果相互转化,其结果准确可靠,重复性好,可实现对药材及配方颗粒的高通量快速质量评价。     

荧光偏振免疫测定法与紫外分光光疫法对茶碱血药浓度测定的相关性比较

对３１个血样采用荧光偏振免疫测定法（ＦＰＩＡ）与紫外分光光度法（ＵＶ）法进行茶碱血药浓度监测，并比较两种方法对测定结果的准确程度。结果表明，ＦＰＩＡ法与ＵＶ法测定的茶碱的平均血药浓度分别为６．５３４±２．９０５μｇ／ｍｌ，５．７８９±２．５４１μｇ／ｍｌ，其比率为０．８９７±０．１７６（Ｃ（ＵＶ）／Ｃ（ＦＰＩＡ））。以Ｃ（ＦＰＩＡ）为Ｙ，Ｃ（ＵＶ）为Ｘ，进行线性回归。回归方程为Ｙ＝０．５５４＋１．０３３Ｘ（ｒ＝０．９０３８），在统计学上Ｃ（ＦＰＩＡ）与Ｃ（ＵＶ）之间有显著性差异，（Ｐ＜０．０１）。     

高白细胞值对血红蛋白测定的影响及纠正

目的　探讨高白细胞 (WBC)值对血红蛋白 (Hb)测定的影响及其纠正。方法　制备 4 8个不同浓度梯度的 WBC悬液 ;在全自动血细胞分析仪的预稀释模式下进行测定 ,观察去 WBC前后 Hb测定值的变化 ,建立校正Hb测定值的直线回归方程并应用回归方程对 1 4例高 WBC值全血标本进行可行性验证。结果　高 WBC值 (≥4 0 .0× 1 0 9/L )将使 Hb测定值明显升高 (P<0 .0 0 1 ) ;去 WBC前后 Hb测定值的差值与 WBC值的对数呈直线相关(r=0 .95 2 6 ) ,其回归方程为 Y(Hb差值 ) =- 2 5 .0 9+2 1 .89× lg[WBC(× 1 0 9/L ) ];应用回归方程计算高 WBC值全血标本去 WBC前后 Hb测定值理论差值 ,与实测差值比较二者无显著差异 (P>0 .0 5 )。结论　高 WBC的存在将使 Hb测定值假性增高 ,通过线性回归方程校正可得到 Hb的真实值     

胶束电动毛细管色谱法和荧光偏振免疫法测定癫痫患者血浆中苯妥英浓度的比较

目的:比较治疗药物监测中胶束电动毛细管色谱法(MECC)和荧光偏正免疫法(FPIA)测定血浆中苯妥英的浓度。方法:收集该院31例服用苯妥英的癫痫患者稳态浓度的血浆样品,分别以MECC和FPIA进行测定,用回归法考察两种方法测定结果的相关性。结果:两种方法无显著差异,具有良好的相关性(P>0.05)。回归分析的线性方程YFPIA=1.044×XMECC,相关性分析r=0.967。结论:MECC法可在无TDx仪的情况下替代FPIA,而且成本较低,快速简便。适用于苯妥英单用,以及苯妥英与常用抗癫痫药物(卡马西平、扑米酮、丙戊酸、苯巴比妥、氯硝西泮)合用的临床监测。     

环孢素A放射受体测定方法的建立与考核

目的：建立用于临床的环孢素Ａ的放射受体测定法,并与荧光偏振免疫测定法进行比较。方法：利用亲环素Ａ（ＣｙＰＡ）能在体外与环孢素Ａ（ＣｓＡ）高效结合的特性,以重组人亲环素Ａ（ｒｈＣｙＰＡ）作为特异性的结合蛋白,３Ｈ－ＣｓＡ作为示踪剂,建立ＣｓＡ的放射受体测定法。结果：方法的有效测定范围为４３．８～２８００μｇ／Ｌ,灵敏度为４３．８μｇ／Ｌ,批内变异系数为８．２％（ｎ＝８）,批间变异系数为１０．６％（ｎ＝８）,标本提取与测定方法的全程回收率分别为１０４．２％和１０６．３％;对ＣｓＡ及其几种类似物与ｒｈＣｙＰＡ的亲和力进行比较,以ＣｓＡ与ｒｈＣｙＰＡ的亲和力为最佳;在实际应用中与荧光偏振免疫测定法进行比较（ｎ＝３０）,二者测值高度相关,ｒ为０．９６４２,回归方程为ｙ＝３９．１１２＋０．９９ｘ。结论：该方法具有灵敏可靠,特异性、重复性、稳定性和经济性好等优点,适用于ＣｓＡ全血浓度的临床测定。     

中国健康中青年女性全血比粘度参考值与海拔高度的关系

目的：为制定中国健康中青年女性全血比粘度参考值的统一标准提供科学依据。方法：收集了中国各地用毛细管法测定的健康中青年女性全血比粘度参考值,并对其与海拔高度的关系进行了研究。结果：发现随着海拔高度的逐渐增大,健康中青年女性全血比粘度参考值也在逐渐增大,相关性很显著。用一元回归分析的方法推导出一个回归方程。结论：如果知道了中国某地的海拔高度,就可以用回归方程估算这个地区的健康中青年女性全血比粘度参考值。