通用真菌引物和探针检测人全血标本中侵袭性真菌DNA载量的方法

目的 建立实时定量PCR(RQ-PCR)以真菌通用引物和探针快速准确检测人全血标本中侵袭性真菌DNA载量的方法,并与细菌相鉴别及进行初步临床应用.方法 选择临床常见的真菌基因组多拷贝基因5.8S rDNA作为靶基因设计特异性通用真菌引物和TaqMan探针,采用QIAamp(R)血液DNA小提试剂盒提取多种致病真菌基因组DNA,建立20μl RQ-PCR反应体系,对含有不同载量致病真菌的模拟人全血标本和71份外科发热患者全血标本进行侵袭性真菌基因组的定量检测.结果 本方法的特异性良好,检测限为101拷贝/μl上机待测液(即约105拷贝/ml全血);检测灵敏度和特异度分别为95.5％和97.6％,阳性预告值和阴性预告值分别为98.7％和92.0％;标准曲线R2在0.9931～ 0.9977;批内及批间平均变异系数分别为(10.4±4.0)％和(27.9±2.0)％;人血标本中真菌基因组DNA平均回收率为(91.0±7.6)％,相对回收率平均变异系数为(14.9±4.0)％.71份外科发热患者血标本中未检测出侵袭性真菌基因组.结论 RQ-PCR可以借通用真菌引物和TaqMan探针快速、特异、灵敏地定量检测人血标本中侵袭性真菌DNA的载量并可与细菌相鉴别,且有着较好的准确度与精密度.外科发热患者血中侵袭性真菌基因组的存在率可能很低.     

多重实时定量PCR同时检测人全血中大肠杆菌与白念珠菌基因方法的建立

目的 建立多重实时定量PCR (MRQ-PCR)同时快速检测血中大肠杆菌与白念珠菌DNA的方法,以评估肠屏障损伤可能导致的移位微生物的种类和程度并提供针对性用药的建议.方法 选择大肠杆菌β-右旋半乳糖苷酶基因作为检测大肠杆菌的靶基因设计引物和探针,选择白念珠菌ITS2基因设计引物和探针.采用QIAamp(R) DNA Blood Mini Kit试剂盒提取大肠杆菌与白念珠菌基因组DNA;建立25 μl TaqMan探针MRQ-PCR反应体系;对18份模拟血标本及10份外科发热患者临床标本进行MRQ-PCR检测.结果 引物和探针特异性好,大肠杆菌与白念珠菌标准曲线相关系数分别在0.994～0.999和0.994～0.998,扩增效率分别为0.894～1.022和0.905 ～1.028.标准样品检测限分别为大肠杆菌13.9拷贝/μl和白念珠菌0.8 cfu/μl,两种菌的检测灵敏度分别为100％和99.69％,特异度分别为100％和94.73％,标准品中大肠杆菌与白念珠菌特异基因平均回收率分别为(101.89±5.69)％和(103.74±4.64)％,两种菌基因检测的批内变异系数分别为(13.14±10.27)％和(19.18±8.54)％,批间变异系数分别为(14.35 ±9.34)％和(18.31 ±10.25)％.全血标本中大肠杆菌与白念珠菌特异基因的检出限分别为12 455.2拷贝/ml和800.3 cfu/ml,平均回收率分别为(111.60±11.06)％和(99.96 ±6.16)％,两种菌基因检测的批内变异系数分别为(11.02±5.65)％和(8.14±7.29)％,平均批间变异系数分别为(12.88±7.59)％和(18.62±9.14)％.结论 多重实时定量PCR可以同时快速、灵敏、特异地定量检测人全血标本中大肠杆菌与白念珠菌基因,准确度高、重复性好、节省血标本用量及检测成本、总检测时间缩短,在临床全血标本的真菌与细菌快速鉴别检测、抗微生物药物的针对性应用及疗效评估、肠屏障损伤后果及疗效的评估中有较实用的推广前景.     

实时定量PCR检测人全血标本中烟曲霉基因组载量的方法及临床应用

目的建立实时定量PCR（RQ-PCR）快速检测人全血标本中烟曲霉基因组载量的方法及进行初步临床应用。方法基于烟曲霉多拷贝基因ITSl-5．8S基因设计引物和TaqMan探针,用QIAamp^DNA Blood Mini Kit提取烟曲霉基因组DNA,建立20μlRQ-PCR反应体系,对含有不同载量烟曲霉基因组的模拟人全血标本和66份外科发热患者全血标本进行烟曲霉基因组的定量检测。结果检测限为10^-1基因组／μl上机待测液（即约78CFU／ml全血）;检测特异度和灵敏度分别为94．25％和99．04％,阳性预告值和阴性预告值分别为97．63％和97．62％;测定结果的平均相对误差为（3．67±13．19）％;批内及批间平均重复性变异系数分别为（12．38±1．53）％和（16．27±2．72）％;人血标本中烟曲霉基因组平均回收率为（107．81±25．92）％,回收率平均变异系数为（26．24±5．62）％。66份外科发热患者血标本中未检测出烟曲霉基因组。结论RQ-PCR可以快速、特异、灵敏地定量检测人血标本中烟曲霉基因组的载量,且有着较好的准确度与精密度。本研究外科发热患者血中未检测到烟曲霉基因组。     

实时定量PCR检测人全血标本中烟曲霉基因组载量的方法及临床应用

目的 建立实时定量PCR(RQ-PCR)快速检测人全血标本中烟曲霉基因组载量的方法及进行初步临床应用.方法 基于烟曲霉多拷贝基因ITS1-5.8S基因设计引物和TaqMan探针,用QIAamp(R)DNA Blood Mini Kit提取烟曲霉基因组DNA,建立20μl RQ-PCR反应体系,对含有不同载量烟曲霉基因组的模拟人全血标本和66份外科发热患者全血标本进行烟曲霉基因组的定量检测.结果 检测限为10-1基因组/μl上机待测液(即约78 CFU/ml全血);检测特异度和灵敏度分别为94.25%和99.04%,阳性预告值和阴件预告值分别为97.63%和97.62%;测定结果的平均相对误差为(3.67±13.19)%;批内及批间平均重复性变异系数分别为(12.38±1.53)%和(16.27±2.72)%;人血标本中烟曲霉基因组平均回收率为(107.81±25.92)%,回收率平均变异系数为(26.24±5.62)%.66份外科发热患者血标本中未检测出烟曲霉基因组.结论 RQ-PCR可以快速、特异、灵敏地定量检测人血标本中烟曲霉基因组的载量,且有着较好的准确度与精密度.本研究外科发热患者血中未检测到烟曲霉基因组.

Abstract：

Objective To establish a real-time quantitative polymerase chain reaction (RQ-PCR) assay for fast detection of Aspergillus fumigatus genome in human whole blood samples and explore its clinical application.Methods The primers and the TaqMan-probe were designed on the basis of the multi-copy ITS1-5. 8S region of the rDNA of Aspergillus fumigatus. The Aspergillus fumigatus genomic DNA were extracted with QIAamp(R) DNA Blood Mini Kit.A 20 μl RQ-PCR amplification system was established, and the simulated blood samples containing various given load of Aspergillus fumigatus genome and the 66 whole blood samples of the surgical febrile patients were examined. Results The detection limit of the RQ-PCR instrument is 10-1 genomes/μl DNA sample,namely 78 CFU/ml whole blood. The specificity and the sensitivity were 94. 25% and 99. 04% respectively; and the positive predictive value and negative predictive value were 97. 63% and 97. 62% respectively. The average relative error of the quantitative results was (3. 67 ±13. 19)%, and the intra- and the inter-assay average coefficients of variation were (12.38 ± 1. 53)% and (16. 27 ±2. 72)% , respectively. The average recovery rate of Aspergillus fumigatus genomic DNA in human whole blood samples was (107. 81 ±25. 92)% , and the average coefficient of variation of the average recovery rate was (26. 24 ± 5.62) % . No Aspergillus fumigatus genomic DNA was detected among the 66 blood samples of the surgical febrile patients. Conclusions The RQ-PCR assay for fast quantitative detection of Aspergillus fumigatus genome in human whole blood samples is of high sensitivity, specificity,accuracy and precision. The Aspergillus fumigatus genome was not detected in this group of surgical febrile patients.     

实时定量PCR检测外科发热患者静脉血中大肠杆菌DNA的方法

目的建立实时定量PCR(RQPCR)检测大肠杆菌DNA的方法,评估临床标本检测效果。方法选择大肠杆菌β右旋半乳糖苷酶基因作为检测靶基因设计引物和探针,采用HighPurePCRTemplatePreparationKit提取基因组DNA,建立20μlTaqMan探针RQPCR反应体系。对26份外科发热患者标本(血标本20份,腹腔引流液3份,胸水2份,胆汁1份)进行荧光RQPCR检测。结果引物和探针特异性好,标准曲线相关系数在0.991～0.999之间。在最低检测限(102拷贝/反应体系)以上,仪器对不同含量大肠杆菌样本检测的平均准确性为(112.19±7.48)%;批内及批间重复性平均变异系数(CV)分别为(16.33±4.80)%和(16.03±7.80)%。血标本中大肠杆菌DNA平均提取效率为(38.40±14.05)%,提取效率平均CV为(20.57±16.92)%。含有同等量大肠杆菌模拟标本存放在-20℃或-70℃6个月内,大肠杆菌DNA拷贝数差异无显著性(P=0.130)。外科发热患者血中大肠杆菌阳性率高达30%,最高含量约为1.24×106个/ml;另外在胆汁及腹腔引流液标本中检测出的大肠杆菌DNA含量明显高于相同患者血中含量。结论RQPCR是一种快速、灵敏、特异、重复性好、能定量起始模板拷贝数的检测大肠杆菌DNA方法,可用于定量检测全血及其他体液标本中大肠杆菌含量。     

实时定量PCR检测人全血中金黄色葡萄球菌DNA方法的建立

目的建立实时定量PCR（RQ—PCR）快速检测人全血中金黄色葡萄球菌DNA的方法,以便早期定量评估肠屏障损伤所致肠道内细菌移位引起或加重的全身感染。方法对15份模拟全血标本及26份外科发热患者全血标本进行RQ—PCR检测。选择金黄色葡萄球菌高度保守的看家基因femA基因作为靶基因设计引物和Taqman探针,建立20ul的RQ—PCR反应体系,采用含靶基因扩增片段的重组质粒建立标准曲线,提取血标本中的细菌基因组DNA。结果引物和探针特异性好,检测限为10^0拷贝／ul（10^3CFU／ml）,灵敏度为99．7％,特异度为94．6％。标准曲线线性关系好,R。在0．9918—0．9997。不同浓度的金黄色葡萄球菌样本检测的平均准确性为（96．25±2．26）％,批内及批间重复性的平均变异系数分别为（8．06±0．07）％和（10．01±4．40）％。全血标本中金黄色葡萄球菌DNA平均回收率为（111．72±20．72）％。临床血标本RQ-PCR检测阳性率为15．4％（4／26）,血培养结果皆为金黄色葡萄球菌阴性。结论RQ—PCR可用于定量检测全血标本中的金黄色葡萄球菌DNA含量,具有快速、灵敏、特异性强、重复性好的优点。     

自身淬灭探针荧光定量PCR检测BK多瘤病毒方法的建立与评价

目的 利用自身淬灭探针技术建立一种敏感、特异、快速、价廉的BK多瘤病毒(BKV)荧光定量PCR检测方法.方法 构建重组质粒pGEM-11Zf-BK作为标准品,自行设计自身淬灭探针,优化定量PCR体系,并进行方法学评价及初步临床应用.结果 成功构建了重组质粒pGEM-11Zf-BK,建立自身淬灭探针荧光定量PCR方法,其线性检测范围为103～109拷贝/ml2;灵敏度为1000拷贝/ml;重复性:高拷贝样品的天间CV为3.06%,批内CV为1.49%,批问CV为3.27%;低拷贝样品的天间CV为2.55%,批内CV为0.65%,批间CV为3.36%,特异性为100.00 oA;用该方法检测52例肾移植受者的血、尿标本,结果发现肾移植受者血、尿BKV DNA的阳性率明显高于健康对照者,分别为15.38%、32.69%,尿BKV DNA的载量明显高于血BKV DNA的载量(P＜0.05).结论 首次建立了以自身淬灭探针技术为平台的BKV荧光定量PCR检测方法,该方法灵敏、特异,快速;该研究对应用自身淬灭探针技术开发其他病原体检测试剂有一定的参考价值.     

实时荧光定量PCR快速检测腺病毒方法的建立与评价

目的建立针对人腺病毒Hexon基因的实时荧光定量Taq Man PCR检测方法,用于腺病毒感染的早期诊断及病毒核酸定量分析。方法根据人腺病毒Hexon基因高度保守区设计引物和Taq Man探针,建立人腺病毒实时荧光定量Taq Man PCR快速检测方法。对方法的灵敏度及特异性进行评价;选取3个浓度的标准品,进行5次重复检测,对方法的重复性进行验证;用该方法对90份临床标本进行检测。结果建立的检测方法对人腺病毒的检测与其它呼吸道病原无交叉反应;检测灵敏度为10拷贝/μl;对103、104、105拷贝/μl 3个浓度标准品分别进行5次重复检测,其Ct值的变异系数均小于5%。对临床90份发热病例的咽拭子标本检测的腺病毒阳性率为90%,与普通PCR检测法的结果(90%)一致;检测准确率达100%。结论本研究建立的Taq Man荧光定量PCR方法的特异性、灵敏度和重复性均好,适用于人腺病毒的日常监测和暴发疫情的应急诊断。     

弓形虫B1基因实时荧光定量PCR无创检测方法的建立及临床初步应用

目的:建立可用于检测无创标本尿液中弓形虫DNA的TaqMan实时荧光定量聚合酶链反应(Real-Time-FQ-PCR)并初步评价其临床应用价值。方法:根据登录GenBank的弓形虫B1基因序列,设计1对引物和1条TaqMan探针。提取感染弓形虫小鼠尿液总弓形虫DNA,先用普通PCR扩增目的基因片段,将回收产物与PMD-18T载体连接。经测序证实为目的片段后,制备系列浓度参照物,优化FQ-Real-Time-PCR反应体系,并对灵敏度、重复性、特异性、线性、探针稳定性进行评价。检测3份外周血全血中弓形虫DNA阳性者的尿样,再作初步临床应用评价。结果:成功构建尿液中弓形虫DNA参照物,灵敏度为弓形虫DNA 104拷贝/ml。批内变异系数(CV)为2.42%,批间CV为4.18%。线性为103～107拷贝/ml,特异性100%。检测3份外周血弓形虫DNA阳性就诊者的尿样,阳性率为100%(3/3)。结论:用Real-Time-FQ-PCR能检测小鼠尿液弓形虫DNA和人尿液弓形虫DNA,该方法具有方便、灵敏、特异、结果重复性好等优点。     

实时荧光定量PCR检测沙门菌方法的实验研究

目的:建立沙门菌实时荧光定量PCR快速检测方法,探讨沙门菌在食源性感染快速诊断中的应用价值。方法:采用沙门菌fimY基因序列设计特异引物和探针,建立实时荧光实时定量PCR技术检测沙门菌的检测方法。通过特异性、敏感性、稳定性和重复性,以验证方法的可行性。结果:成功构建了沙门菌重组质粒标准品,为方法学建立奠定基础;通过特异性、敏感性、稳定性和重复性验证,结果表明具有较好的特异性,最低检测限为103拷贝/ml,相当于100 cfu/ml的菌细胞,并有良好的稳定性和重复性。结论:沙门菌实时荧光定量PCR检测方法的建立,不仅为食源性沙门菌污染的快速检测提供依据,而且还可直接用于临床粪便标本检测。     

外科发热患者静脉血中大肠埃希菌DNA实时定量PCR检测与体征及血细胞计数的相关性

目的 定量检测外科发热患者静脉血中大肠埃希菌DNA含量，研究其与体征及皿细胞计数之间的相关性，并比较不同检测方法对血中大肠埃希菌的阳性检出率的差异。方法 以实时定量PCR（RQ-PCR）定量检测40份健康人静脉血标本，确定临床阳性检测限。31例发热患者共72份血标本同时进行常规细菌培养及大肠埃希菌DNA定量检测，比较两种检测方法对血中大肠埃希菌的阳性检出率的差异，两个取血时间点间大肠埃希菌DNA含量的变化，并计算大肠埃希菌DNA含量与体温、心率、白细胞计数、中性粒细胞及淋巴细胞百分比之间的相关性。结果 RQ-PCR定量检测大肠埃希菌DNA阳性率为52．78％（38／72），显著高于细菌培养阳性率2．78％（2／72）（P=0．000）。同一患者两个时间点血标本检测结果显示，静脉血中大肠埃希菌DNA在2～6小时内的升降变化达10～20倍。血中大肠埃希菌DNA含量与体温和心率之间均显著相关（P=0．000），相关程度中度密切（，值分别为0．565和0．546），与白细胞计数、中性粒细胞及淋巴细胞百分比之间无显著相关关系。结论 RQ-PCR检测外科发热患者静脉血中大肠埃希菌阳性率远高于血培养。血中大肠埃希菌DNA拷贝数变化速度较快。血细胞计数不能很好反映血中大肠埃希菌的含量，而体温心率的影响因素较多，因此RQ-PCR能更及时准确反映大肠埃希菌血症的严重程度，有助于对肠屏障损伤导致肠道细菌移位的动态程度或后果进行评估。     

实时定量PCR在细菌移位研究中的潜力

实时定量PCR（RQ-PCR）是一种新型核酸定量技术,具有实时监测、快速、灵敏、精确、特异等特点.与原有PCR技术相比,其最主要的优势是能对待测样本起始PCR反应模板进行准确定量,扩大了PCR的应用范围.目前在细菌移位研究中,对肠黏膜屏障损伤的早期诊断一直没有很理想的方法.RQ-PCR能准确定量外周血中细菌DNA,有利于对肠黏膜屏障损伤的早期诊断和损伤程度评估.     

重症监护病房念珠菌感染和危险因素分析

目的 探讨重症监护病房(ICU)患者念珠菌菌血症患病现状、变化及病原菌分析.方法 收集2002年4月至2007年3月浙江大学医学院附属第一医院ICU念珠菌菌血症患者临床资料,调查念珠菌菌血症的患病情况及病原菌,进行单因素x2检验及多因素logistic回归分析.结果 5年间ICU出院6034人次,符合念珠菌菌血症的患者75例,年患病率0.67%、1.46%、1.21%、1.15%、1.56%.死亡36例,总病死率48%,年病死率50%、64%、33%、41%、52%.血培养标本分离出念珠菌78株,其中白色念珠菌36株(46.2%),光滑念珠菌17株(21.7%),热带念珠菌14株(17.9%),近平滑念珠菌10株(12.8%),葡萄牙念珠菌1株(1.3%).APACHE Ⅱ评分9～27分,平均17.21分±4.38分.5年间念珠菌菌血症的患病率从0.67%上升到1.56%,非白色念珠菌菌血症患者的比例从50.0%上升至56.5%.经过对白色念珠菌组和非白色念珠菌组各项特征的单因素及多因素logistic回归分析发现,年龄(66岁±14岁 vs.53岁±16岁,P=0.001,OR=1.077,95% CI:1.031～1.124)、低蛋白血症(61.8% vs.81.6%,P=0.033,OR=0.206,95% CI:0.048～0.880)差异有统计学意义.结论 在ICU患者中念珠菌菌血症的患病率有上升趋势,病死率高,非白色念珠菌所致的念珠菌菌血症也有所上升,年龄是发生白色念珠菌感染独立的危险因素,低蛋白血症是非白色念珠菌感染独立的危险因素.     

温度对血清中乙型肝炎病毒感染力的影响

目的 探索温度对血清中乙型肝炎病毒(HBV)感染力的影响.方法 将含有高浓度HBV DNA(1.33×108拷贝/ml)的HBV阳性血清分装于1.5 ml无菌离心管内,每管100 μl,共23管,密封后各有5管置37、56、65 ℃恒温水浴箱内孵育,分别于0、30、60、120、600 min后各取出1管;各有4管放置在98 ℃恒温水浴箱孵育和沸水锅中,放置0、5、10、30 min后各取1管,进行HepG-2细胞感染试验,共孵育18 h后洗弃接种液加新鲜培养基,48 h后收集细胞,实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV DNA,以0 min处理组为对照组.结果 HBV阳性血清在低热处理30、60、120、600 min后感染HepG-2细胞,细胞内HBV DNA拷贝数在37 ℃时分别是(4.85±1.71)×105、(3.85±1.76)×105、(1.67±0.67)×105、(7.86±1.03)×104拷贝/ml,56 ℃时是(4.01±0.16)×105、(9.77±0.97)×104、(6.36±0.65)×104、(5.05±0.24)×103拷贝/ml;65 ℃时60、120 min处理组感染细胞内HBV DNA拷贝数分别是(5.15±7.28)×103、(7.56±10.60)×102拷贝/ml,是对照组[(6.79±1.48)×105拷贝/ml]的1%、1‰,不同温度处理HBV阳性血清后感染HepG-2细胞,细胞内HBV DNA的含量差异有统计学意义(F=104.4,P<0.001),不同处理时间后的感染细胞内HBV DNA的含量差异有统计学意义(F=144.0,P<0.001),温度和处理时间有交互作用(F=23.6,P<0.001),高温处理时,98 ℃孵育10 min、煮沸5 min处理时感染细胞内HBV DNA拷贝数分别为(3.02±4.26)×102、(4.31±6.09)×102拷贝/ml,约为对照组[(6.79±1.48)×105拷贝/ml]的1‰,98 ℃孵育30 min、煮沸10 min后感染细胞内6次检测均未检出HBV DNA.结论 血清HBV感染力在低热条件下相对稳定,相对高温条件下短时间即可使其感染力降低.

Abstract：

Objective This article was to explore the impact of temperature on hepatitis B virus infectivity.Methods HBV positive serum with a HBV DNA titer of 1.33×108 copies/ml was aliquoted into 23 Ep tubes with 1.5 ml,100 μl in one tube.15 tubes were incubated at 37,56 and 65 ℃ for 0,30,60,120 and 600 minutes,respectively.The other 8 tubes were incubated at 98 ℃ for 0,5,10 and 30 minutes,respectively.Post-treated serum at all time points were selected to infect HepG-2 cell.When 18 hours after infection,these cells were extensively washed with phosphate buffered saline.Cells were harvested after the addition of fresh culture medium to culture cells for 48 hours.HBV DNA was detected by FQ-PCR.Results HBV DNA was detected in cells that were infected by serum at 37 ℃ and 56 ℃ for 30,60,120 and 600 minutes,respectively.The titers for the cells incubated at 37 ℃ were (4.85±1.71)×105,(3.85±1.76)×105,(1.67±0.67)×105,(7.86±1.03)×104 copies/ml,and those for the cells incubated at 56 ℃ were (4.01±0.16)×105,(9.77±0.97)×104,(6.36±0.65)×104,(5.05±0.24)×103 copies/ml at different incubation time points.For the cells incubated at 65 ℃ for 60 and 120 minutes,HBV DNAs were(5.15±7.28)×103 and (7.56±10.60)×102 copies/ml,respectively,which were much lower than those in the controls cells ((6.79±1.48)×105 copies/ml).The results of HBV DNA were different (F=104.4,P<0.001) in groups treated with different temperature,and results of HBV DNA were also different (F=144.0,P<0.001) in groups processed for different period of time.Temperature and processing time had interaction (F=23.6,P<0.001).After heating at 98 ℃ for 10 minutes and boiling for 5 minutes,the HBV DNA copy number((3.02±4.26)×102,(4.31±6.09)×102 copies/ml) in infected cells decreased by about 10 folds than that in the control group((6.79±1.48)×105 copies/ml).HBV DNAs were not detected in cells that were infected by serum which was heated at 98 ℃ for 30 minutes and boiled for 10 minutes.Conclusion The infectivity of HBV serum in vitro was relatively stable at low temperture,and it would lose its infectivity in short period of time at high temperature.     

原发性高血压血压波动性与C反应蛋白的关系

目的 探讨原发性高血压血压波动性(BPv)与CRP的关系.方法 选择64例原发性高血压患者,按有无靶器官损伤(TOD)分为TOD组(34例)和无TOD组(30例),行动态血压监测,以变异系数(CV)作为评价BPV的指标,并与对照组30例进行比较,采用免疫比浊法检测各组hs-CRP水平.同时以平均CV值为界将64例患者分为高CV组和低CV组,比较高CV组、低CV组和对照组hs-CRP水平的变化.结果 24 h收缩压的CV值及hs-CRP水平在TOD组[(16.12±2.17)%、(7.11±1.04)mg/L]和无TOD组[(13.30±2.64)%、(4.67±1.24)mg/L]与对照组[(10.68±2.19)%、(1.68±1.49)mg/L]比较差异均有统计学意义(P均<0.05),而且TOD组与无TOD组比较,差异也有统计学意义(P<0.05).高CV组(32例)、低CV组(32例)和对照组之间hs-CRP水平也显示了明显的差异.结论 炎性反应参与了血压波动,影响疾病的发生与发展.     

Ten repeat collections for urinary iodine from spot samples or 24-hour samples are needed to reliably estimate individual iodine status in women

Although the median urinary iodine concentration (UIC) is a good indicator of iodine status in populations, there is no established biomarker for individual iodine status. If the UIC were to be used to assess individuals, it is unclear how many repeat urine collections would be needed and if the collections should be spot samples or 24-h samples. In a prospective, longitudinal, 15-mo study, healthy Swiss women (n = 22) aged 52-77 y collected repeated 24-h urine samples (total n = 341) and corresponding fasting, second-void, morning spot urine samples (n = 177). From the UIC in spot samples, 24-h urinary iodine excretion (UIE) was extrapolated based on the age- and sex-adjusted iodine:creatinine ratio. Measured UIE in 24-h samples, estimated 24-h UIE, and UIC in spot samples were (geometric mean ± SD) 103 ± 28 μg/24 h, 86 ± 33 μg/24 h, and 68 ± 28 μg/L, respectively, with no seasonal differences. Intra-individual variation (mean CV) was comparable for measured UIE (32%) and estimated UIE (33%). The CV tended to be higher for the spot UIC (38%) than for the estimated 24-h UIE (33%) (P = 0.12). In this population, 10 spot urine samples or 24-h urine samples were needed to assess individual iodine status with 20% precision. Spot samples would likely be preferable because of their ease of collection. However, the large number of repeated urine samples needed to estimate individual iodine status is a major limitation and emphasizes the need for further investigation of more practical biomarkers of individual iodine status.