脑源性神经营养因子和神经营养因子－3的抗伤害性刺激作用

脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）或神经营养因子－３（ＮＴ－３，不是神经生长因子），注入大鼠中脑可以明显延长甩尾反应的潜伏期。注药后２４小时出现镇痛作用．第５天达到最高水平，并可继续维持至少６天，提示没有形成耐受。注入ＢＤＮＦ也能延长热板烫爪反应的潜伏期。给予纳洛酮可使翻转ＢＤＮＦ引起的甩尾潜伏期延长。注入ＢＤＮＦ诱导抗伤害性作用同时伴有脑和脊髓中５－羟色胺能神经元活动增强。这些资料既表明ＢＤＮＦ和ＮＴ－３对５－羟色胺能神经元的作用，又说明这些神经营养因子的镇痛特性与５－羟色胺和阿片样物质的机制有关。     

胶质细胞源性神经营养因子基因转移与基因治疗：帕金森病与运动神经元病的基

神经营养因子 (ＮＴＦ)对健康及受损神经元的存活及再生有重要意义 ,神经系统某些ＮＴＦ的代谢改变或缺乏构成了变性疾病的基础。自 195 2年神经生长因子 (ＮＧＦ)被发现后随着神经细胞培养 ,ＤＮＡ重组等技术的建立相继发现了众多ＮＴＦ。其中以脑源性神经营养因子 (ＢＤＮＦ)及胶质源性神经营养因子 (ＧＤＮＦ)与帕金森病 (ＰＤ)及运动神经元 (ＭＮ)病的关系最为密切。ＢＤＮＦ与ＮＧＦ同属一个家族 ,由 119个氨基酸组成 ,许多动物及人的ＢＤＮＦ基因已被克隆[1] 。用ＢＤＮＦ处理过的中脑多巴胺 (ＤＡ)神经可以减轻 1 甲基 4 苯基吡啶(…     

神经生长因子及trkA蛋白在部分去传入成鼠备用背根节中表达的研究

为探讨背根节中神经生长因子（ＮＧＦ）及ｔｒｋＡ蛋白对脊髓可塑性的作用，采用成年大鼠５只，建立单侧备用根模型（即切断一侧Ｌ１～４，Ｌ６～Ｓ１的脊髓节段背根，保留Ｌ５为备用根及备用背根节）。术后动物存活５天，灌流固定，取双侧Ｌ５背根节（ＤＲＧ）冰冻切片，用兔抗２．５ＳＮＧＦ及ｔｒｋＡ蛋白多克隆抗体分别进行Ｓ－Ｐ法免疫组化反应，ＤＡＢ显色。并对免疫反应阳性神经元进行图像分析。其结果手术侧ＤＲＧ中ＮＧＦ及ｔｒｋＡ蛋白阳性神经元的平均灰度值均分别显著小于非手术侧（Ｐ＜０．０１），表明手术侧阳性神经元中ＮＧＦ及ｔｒｋＡ的含量增加。结果提示，备用背根节神经元中ＮＧＦ及ｔｒｋＡ蛋白表达的增多可能与部分去传入后脊髓的可塑性变化有关     

神经营养因子-4在成年猫脊髓神经元的表达

为了解神经营养因子４与成年猫脊脊神经元的关系。用特异的ＮＴ－４抗血清免疫组织化学方法探讨ＮＴ－４在成年猫脊髓Ｌ６节段神经元中的分布。结果：ＮＴ－４的免疫阳性反应主要分布 腹角及中间带的大神经元,胞浆染色,神经突起内也有阳性反应。     

脑源性神经营养因子在猫备用背根节的表达变化

为探讨脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）在备用背根节（ＤＲＧ）的表达变化情况,对２０只成年雄性家猫（其中１５只行单侧Ｌ６备用根手术后分别存活３、６、１２天）Ｌ６ＤＲＧ行ＢＤＮＦ免疫组化染色。结果：①正常猫Ｌ６ＤＲＧ神经元以胞体直径３２μｍ和４４μｍ为分界划分出大中小三类;②正常Ｌ６ＤＲＧ内有５０．８７％的神经元呈ＢＤＮＦ阳性反应,备用根手术侧其ＢＤＮＦ阳性神经元数量增多,反应增强,以术后６天变化最显著     

神经生长因子及trkA蛋白在部分去传入成鼠备用背根节中表达 …

为探讨背根节中神经生长因子（ＮＧＦ）及ｔｒｋＡ蛋白对脊髓可塑性的作用，采用成年大鼠５只，建立单侧备用根模型（即切断一例Ｌ１￣４，Ｌ６￣Ｓ１的脊髓节段背根，保留Ｌ５为备用根及备用背根节）。术后动物存活５天，灌流固定，取双侧Ｌ５背根节（ＤＲＧ）冰冻切片，用兔抗２．５ＳＮＧＦ及ｔｒｋＡ蛋白多克隆抗体分别进行Ｓ－Ｐ法免疫组化反应，ＤＡＢ显色。并对免疫反应阳性神经元进行图像分析。其结果手术侧ＤＲＧ中ＮＧＦ及     

胶质源性神经营养因子在成年大鼠中枢神经系统中的表达

为探讨胶质源性神经营养因子（ＧＤＮＦ）在中枢神经系统中的表达，采用免疫组化法检测该因子在成年大鼠枢神经系统部分区域的分布。结果发现大脑皮质各层有极弱阳性的神经元；小脑皮质分子层及蒲肯野细胞呈强阳性反应；脊髓灰质中阳性神经元广为分布，尤以前角、后角Ⅰ、Ⅱ板层及Ｃｌａｒｋ核明显。此外，脊髓胶质细胞和中央管室管膜上皮均有ＧＤＮＦ阳性信号表达，表明ＧＤＮＦ对成年大鼠中枢神经系统内的多种神经元群均有功能作用     

胶质源性神经营养因子在成年大鼠中枢神经系统中的表达

为探讨胶质源性神经营养因子（ＧＤＮＦ）在中枢神经系统中的表达，采用免疫组化法检测该因子在成年大鼠中枢神经系统部分区域的分布。结果发现大脑皮质各层有极弱阳性的神经元；小脑皮质分子层及蒲肯野细胞呈强阳性反应；脊髓灰质中阳性神经元广为分布，尤以前角、后角Ⅰ、Ⅱ板层及Ｃｌａｒｋ核明显。此外，脊髓胶质细胞和中央管室管膜上皮均有ＧＤＮＦ阳性信号表达，表明ＧＤＮＦ对成年大鼠中枢神经系统内的多种神经元群均有功能作用。     

脊髓腹角神经元共存NGF,BDNF,NT_3,NT_4和GDNF

用NGF ,BDNF ,NT3,NT4 和GDNF抗血清 ,以免疫组织化学方法观察NGF ,BDNF ,NT3,NT4 及GDNF在成年猫L5脊髓腹角神经元是否共存 结果 :L5脊髓腹角神经元均含有上述被检测的 5种神经营养因子的免疫反应物 ,表明腹角神经元共存NGF ,BDNF ,NT3,NT4 及GDNF ,提示这 5种神经营养因子可能与脊髓腹角神经元的生理过程有关     

神经营养因子NGF、BDNF对鼠胚基底前脑胆碱能神经元发育生长的协同作用

目的：探讨神经营养因子ＮＧＦ、ＢＤＮＦ联合使用时对鼠胚基义离胆碱能神经元发育生长的协同作用。方法：实验分成ＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＧＦ＋ＢＤＮＦ和对照４组。采用细胞培养和脑内移植手段及ＡＣｈＥ组化染色、显微测量和图象分析等技术。检测各组胚基底前脑培养４天和８天时的ＡＣｈＥ阳性神经元数、胞体直径、胞体发出的突直数及最长突起长度以及胚基底前脑移植至脑内４．５个月时移植区内ＡＣｈＥ阳性元数、细胞面积和纤维密     

肺腺癌A549细胞株GDNF、BDNF、NT3和NT4的表达

目的探讨神经营养因子在肺腺癌细胞株A549中的表达及临床意义.方法体外培养肺腺癌A549细胞株,观察细胞形态变化.取代培养后3 d的A549细胞,用免疫组化检测神经营养因子GDNF、BD-NF、NT3和NT4在肺腺癌细胞株A549的表达.结果神经营养因子GDNF、BDNF、NT3和NT4在部分肺腺癌细胞株A549中表达.结论神经营养因子GDNF、BDNF、NT3和NT4可能在肺癌的增殖中发挥作用.     

稳定表达NGF、BDNF和NT3星形胶质细胞系的建立及其鉴定

目的：探讨星形胶质细胞直接作为转基因靶细胞进行目的基因的表达。 方法：克隆大鼠NGF、BDNF和NT3基因,构建真核表达载体;3种重组载体分别转染星形胶质细胞,G418筛选后获得阳性克隆细胞进行扩大培养;取基因修饰星形胶质细胞培养液上清培养PC12细胞或TrkB-PC12细胞;用Western blotting杂交或免疫组织化学方法检测基因靶细胞目的基因的表达及其水平。结果：经G418筛选后,转染NGF、BDNF和NT3基因修饰星形胶质细胞呈G418抗性;转染NGF和NT3基因条件培养液上清培养的PC12细胞,数量增多,突起明显变长,转染BDNF基因条件培养液上清培养的TrkB-PC12细胞,同样数量增多,突起明显变长。大部分G418抗性的基因靶细胞出现NGF、BDNF和NT3免疫染色阳性。Western blotting杂交显示有相应分子量大小的蛋白条带出现。 结论：星形胶质细胞直接作为基因靶细胞能有效地表达和分泌有生物学活性的NGF、BDNF和NT3。     

STREPTOMY.CIN IN THE TRFATMF,NT OF EXUDATIVE TUBERCULOUS PLEURISY A~lD PERITONITIS

Since 1944 streptomycin has made its advent and proved its efficacy in the treatment of certain forms of human tuberculosis (1, 2). Accumulated experiences with this drug however disclosed its limitations aruong which may be mentioned the drug resistance and toxicity deve- loped on prolonged administration* In China, streptomycin is still con- sidere as an expensive drug and economic burden to the patient adds another d.ifficulty in recomruending its use. In those cases of tuberculosis which do not require prolonged strepto''mycin therapy, these shortcomings would be minimized. .Streptomycin is moxe effective in acute forms of tuberculosis and in cases in which the number of tubercle bacilli is relatively small. Under these conditions the therapeutic effect of streptomycin usually precedes the development of toxicity or drug resistance.     

NT3基因的克隆、鉴定及高表达胚胎干细胞的构建与筛选

目的从小鼠肝脏组织中克隆神经营养因子NT3基因,在此基础上构建能稳定表达NT3的MESPU35细胞株.方法RT-PCR扩增目的基因,克隆入穿梭载体pExchange-1neo,酶切及测序鉴定.重组载体转染MESPU35胚胎干细胞株,G418长期筛选,RT-PCR检测转染细胞NT3水平.结果RT-PCR得到长度为777bp的基因片段,克隆后酶切鉴定正确,测序结果经BLAST对比,与GenBank中小鼠NT-3序列完全一致.成功构建了NT3真核表达载体及高表达细胞株.结论从小鼠肝脏组织中PCR克隆了正确的NT3基因,所获得的NT3稳定表达MESPU35-NT3细胞株为后续相关实验提供了保证.     

NGF、BDNF和NT3在AD大鼠海马中的分布及表达变化

目的 观察NGF、BDNF和NT3在Alzheimer disease（AD）大鼠海马中的分布及其表达变化。方法 采用海马注射Aβ淀粉蛋白的方法建立AD模型。10d后对大鼠进行灌注,取脑,冰冻切片,用NGF、BNDF和NT3抗体行免疫组织化学染色。对海马恒定视野内NGF、BDNF和NT3的阳性细胞进行记数并进行统计学分析。结果 AD组海马中的NGF阳性细胞较正常组显著增多（P〈0．01）．且染色增强。BDNF阳性细胞较正常组明显减少（P〈0．01）．染色强度减弱。而NT3的阳性细胞数及染色强度与正常组比较差异均没有统计学意义（P〉0．05）。结论 NGF、BDNF和NT3在AD的海马中发生了不同的变化,提示NGF、BDNF和NT3在AD中发挥了不同的作用．尤其是BDNF阳性细胞的减少可能与AD的神经功能减退有关。     

小鼠耳蜗组织NT3基因的克隆及其原核表达鉴定

目的：克隆小鼠耳蜗组织中重要神经营养因子NT3的基因,并对其进行原核表达鉴定,为进一步研究该基因对内耳听觉功能的影响以及对耳聋的基因治疗提供基础。方法：根据所设计的引物用RT－PCR方法扩增目的基因,克隆人pUC19载体,行酶切鉴定和测序;然后进一步克隆人原核表达载体pDH,温度诱导表达,SDS－PAGE检测表达产物。结果：RT－PCR得到长度为777bp的基因片段,克隆后酶切鉴定正确,测序结果经BLAST对比,与GenBank中小鼠NT－3序列完全一致。成功构建了原核表达载体,经温度诱导表达出NT3蛋白。结论：从耳蜗组织中能获得正确的NT3基因克隆以及稳定的原核表达,为后续实验提供了保证。     

偏头痛1号对偏头痛模型大鼠血浆NT、ANP和中枢5-HT的影响

目的:研究偏头痛1号对大鼠血浆神经降压素(Neurotensin,NT)、心钠素(atrialnatriuretic polypeptide,ANP)和脑组织中5-羟色胺(5-hydroxtryptamine,5-HT)含量的影响。方法:采用Csillik造模法造成实验性偏头痛大鼠模型,给予偏头痛1号灌胃6d后,采用放免法(radioimmanoassay,RIA)测定大鼠血浆中NT、ANP的含量,采用荧光光度法测定脑组织中5-HT的含量。结果:与空白组相比,模型组大鼠的NT和5-HT的含量显著下降(P<0．01), ANP的含量显著升高(P<0．01)。与模型组相比,偏头痛1号低剂量组大鼠血浆NT和5-HT的含量明显升高(P<0．05),ANP含量明显下降(P<0．05);高剂量组大鼠NT和5-HT含量非常明显升高(P<0．01),ANP含量非常明显下降(P<0．01)。结论:偏头痛1号可通过有效调节NT、ANP和5-HT的含量来达到治疗偏头痛的作用。