嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠脑中嘌呤核苷酸含量的影响及机制研究

目的探讨外源性补偿嘌呤核苷酸对海洛因依赖大鼠嘌呤核苷酸含量的影响。方法将30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、海洛因组、海洛因＋嘌呤核苷酸组（HAG）。各组采用高效液相色谱法检测大鼠脑中GMP、AMP、GTP、ATP含量。结果海洛因组与对照组比较AMP、GTP含量明显降低（P〈0．01）,GMP、ATP含量改变不明显。补偿嘌呤核苷酸后,AMP含量比海洛因组升高明显（P〈0．01）。结论海洛因成瘾大鼠脑中存在嘌呤核苷酸缺失的现象,外源性补偿嘌呤核苷酸能够代偿体内嘌呤核苷酸缺失的状态。     

嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠嘌呤核苷酸代谢相关酶基因表达的影响

目的探讨外源性补偿嘌呤核苷酸对海洛因依赖大鼠嘌呤核苷酸代谢酶的影响。方法将50只雄性Wis-tar大鼠随机分为对照组、海洛因组、海洛因+AMP+GMP组、海洛因+AMP组、海洛因+GMP组。采用real-timePCR的方法检测大鼠脑皮质中腺苷脱氨酶(ADA)、黄嘌呤氧化酶(XO)、次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)、腺嘌呤磷酸核糖转移酶(APRT)和腺苷激酶(AK)mRNA的表达水平。结果海洛因组ADA、XO的mRNA比对照组明显升高(P0.05),而海洛因+AMP+GMP组、海洛因+AMP组、海洛因+GMP组与海洛因组相比明显降低(P0.05)。海洛因组HGPRT、APRT和AK的mRNA比对照组明显降低(P0.05),而海洛因+AMP+GMP组、海洛因+AMP组、海洛因+GMP组与海洛因组相比有不同程度升高,以HGPRT的升高程度尤为显著(P0.05)。海洛因+AMP+GMP组、海洛因+AMP组、海洛因+GMP组的各项指标差异无显著性。结论海洛因在大鼠基因水平上促进嘌呤核苷酸的分解代谢,降低合成代谢,而补偿嘌呤核苷酸可以抑制或拮抗海洛因的上述作用。     

嘌呤核苷酸对海洛因依赖及戒断大鼠垂体嘌呤核苷酸代谢关键酶基因表达的影响

目的研究嘌呤核苷酸对海洛因依赖及戒断大鼠垂体嘌呤核苷酸分解代谢关键酶腺苷脱氨酶(ADA)、嘌呤核苷酸补救合成关键酶次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)基因表达的影响,阐明海洛因对垂体嘌呤核苷酸代谢的损害及嘌呤核苷酸补偿的对抗作用。方法建立海洛因依赖及戒断大鼠模型,80只建模成功的雄性Wistar大鼠随机分成对照组(生理盐水)、核苷酸组(不给海洛因)、海洛因组、海洛因+核苷酸组(同时给药)、海洛因戒断3d组、海洛因戒断9d组、核苷酸3d组(海洛因停药后给核苷酸3d)及核苷酸9d组(海洛因停药后给核苷酸9d)(每组10只)。检测垂体组织内ADA及HGPRT基因表达的情况。结果与对照组比较,海洛因组、戒断3d组大鼠垂体ADA mRNA水平有所增高,但差异均无显著性(P>0.05)。垂体组织核苷酸组HGPRT mRNA水平高于对照组(P<0.05),其他各组与对照组比较,差异均无显著性(P>0.05)。结论海洛因有增强大鼠垂体组织ADA基因表达,减弱HGPRT的基因表达作用,但作用不显著;补偿嘌呤核苷酸保持海洛因依赖大鼠垂体ADA和HGPRT基因表达的相对稳定。     

海洛因对C6细胞嘌呤核苷酸分解代谢基因表达的影响

目的研究海洛因对C6胶质瘤细胞嘌呤核苷酸分解代谢关键酶基因表达的影响。方法海洛因作用于C6胶质瘤细胞12h、24h、48h、72h后,提取细胞总RNA,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测嘌呤核苷酸分解代谢的关键酶腺苷脱氨酶（ADA）和黄嘌呤氧化酶（XO）基因表达的变化,以β-actin为内标准。结果在转录物水平,浓度为20μg/ml的海洛因作用于C6细胞24h和48h时与对照组相比ADA、XO基因表达明显增强（P〈0.05）。结论在转录物水平海洛因能一定程度增强C6细胞嘌呤核苷酸分解代谢关键酶基因的表达,从而促进嘌呤核苷酸分解代谢。     

海洛因依赖对大鼠杏仁核神经元自发放电的影响

目的：观察海洛因依赖SD大鼠杏仁核神经元自发放电及伤害性刺激对神经元自发放电的影响。 方法：实验于2004-12／2005-02在贵阳医学院生理教研室完成。选择健康SD大鼠45只，随机分为海洛因依赖组（n=25）和对照组（n=20）。海洛因依赖组按剂量（13mg/kk曲逐日递增原则，2次／d，连续9d皮下注射海洛因，首日剂量3mg／kg。对照组以同样方法注射等量生理盐水。第10天用5mg／kg纳洛酮腹腔注射催促戒断，确定海洛因依赖模型的建立成瘾后的大鼠从第10天起，给予海洛因维持剂量27mg／kg，1次／d。对照组同样方法注射等量生理盐水。给药12d后用玻璃微电极细胞外记录两组大鼠杏仁核神经元自发放电及鼠尾伤害性刺激对自发放电的影响。 结果：纳入大鼠45只，实验组在建立模型过程中有2只死亡，另外随机选取大鼠补充，最终进入结果分析大鼠保持为45只。①海洛因依赖组记录到114个单位神经元放电，对照组记录到80个。②两组大鼠杏仁核神经元可观察到单个不匀、束簇状和混合型3种放电形式，海洛因依赖组和对照组杏仁核神经元自发放电均以单个不匀为主，对照组中束簇状（7．5％）和混合型（13．8％）放电所占比例高于海洛因依赖组（1．8％和7．0％），组间差异有显著性意义（P〈0．05）。③海洛因依赖组大鼠杏仁核自发放电以低频为主（57．9％），而对照组则以低频（46.3％）和中频（47．5％）为主（P〈0．05）。④给予伤害性刺激后，大鼠杏仁核神经元自发放电表现为激活、抑制和无影响3种效应。实验组大鼠杏仁核神经元中频放电以抑制（45％）和无影响（40％）为主，而对照组以无影响为主（70％）。组间差异有显著性意义（P〈0．05）。⑤伤害性刺激后两组大鼠杏仁核神经元低频放电无变化。 结论：海洛因对大鼠杏仁核神经元自发放电的形式和频率产生影响，海洛因对伤害性刺激后大鼠杏仁核神经元中频放电产生影响。     

海洛因依赖对大鼠杏仁核神经元自发放电的影响

目的:观察海洛因依赖SD大鼠杏仁核神经元自发放电及伤害性刺激对神经元自发放电的影响。方法:实验于2004-12/2005-02在贵阳医学院生理教研室完成。选择健康SD大鼠45只,随机分为海洛因依赖组穴n=25雪和对照组穴n=20雪。海洛因依赖组按剂量穴13mg/kg雪逐日递增原则,2次/d,连续9d皮下注射海洛因,首日剂量3mg/kg。对照组以同样方法注射等量生理盐水。第10天用5mg/kg纳洛酮腹腔注射催促戒断,确定海洛因依赖模型的建立成瘾后的大鼠从第10天起,给予海洛因维持剂量27mg/kg,1次/d。对照组同样方法注射等量生理盐水。给药12d后用玻璃微电极细胞外记录两组大鼠杏仁核神经元自发放电及鼠尾伤害性刺激对自发放电的影响。结果:纳入大鼠45只,实验组在建立模型过程中有2只死亡,另外随机选取大鼠补充,最终进入结果分析大鼠保持为45只。①海洛因依赖组记录到114个单位神经元放电,对照组记录到80个。②两组大鼠杏仁核神经元可观察到单个不匀、束簇状和混合型3种放电形式熏海洛因依赖组和对照组杏仁核神经元自发放电均以单个不匀为主,对照组中束簇状穴7.5%雪和混合型穴13.8%雪放电所占比例高于海洛因依赖组穴1.8%和7.0%雪,组间差异有显著性意义(P<0.05)。③海洛因依赖组大鼠杏仁核自发放电以低频为主(57.9%),而对照组则以低频(46.3%)和中频(47.5%)为主(P<0.05)。④给予伤害性刺激后,大鼠杏仁核神经元自发放电表现为激活、抑制和无影响3种效应。实验组大鼠杏仁核神经元中频放电以抑制(45%)和无影响(40%)为主,而对照组以无影响为主(70%)。组间差异有显著性意义穴P<0.05雪。⑤伤害性刺激后两组大鼠杏仁核神经元低频放电无变化。结论押海洛因对大鼠杏仁核神经元自发放电的形式和频率产生影响,海洛因对伤害性刺激后大鼠杏仁核神经元中频放电产生影响。     

有氧运动对海洛因依赖者康复的影响

目的　观察有氧运动对海洛因依赖者康复的影响。方法　 110例患者分为二组 ,运动组 6 0例 ,在美沙酮 (Met)撤药 2 4h进行有氧运动 6个月 ;对照组 5 0例 ,运动强度非常轻 ,相当于Borg指数 9～ 10。于脱毒前后 ,运动 6个月内对两组迁延戒断症状、Zung抑郁自评量表 (SDS)、Zung焦虑自评量表 (SAS)、分别进行测评 ;两组并随访 12个月 ,观其操守情况。结果　运动组与对照组迁延性戒断症状 ,停药 1～ 2周达到高峰 ,均渴求使用毒品 ,两组差异无显著性 (P >0 .0 5 )。随运动坚持 ,运动组较好缓解迁延性戒断症状 ,优于对照组。于运动第 12～ 2 4周运动组与对照组差异有非常显著性(P <0 .0 1)。两组脱毒后的抑郁、焦虑情绪有改善 ,较脱毒前差异有非常显著性 (P <0 .0 1) ,但仍有抑郁、焦虑倾向 ,两组间差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;运动开始至前 3周两组抑郁、焦虑情绪无明显差异(P >0 .0 5 )。随运动坚持 ,运动组能较好地改善抑郁、焦虑情绪 ,优于对照组 ,于运动第 16～ 2 4周 ,运动组与对照组差异有非常显著性 (P <0 .0 1)。运动组 1年操守率明显高于对照组 ,差异有非常显著性 (P <0 .0 1)。结论　长期有节律地有氧运动有利于海洛因依赖者的康复 ,对最终摆脱毒品有一定意义     

海洛因及补偿AMP和GMP对大鼠海马组织腺苷脱氨酶的影响

目的探讨海洛因及补偿AMP和GMP对海马组织嘌呤核苷酸分解代谢关键酶ADA的影响。方法剂量递增腹腔注射海洛因及嘌呤核苷酸,建立了海洛因及补偿AMP和GMP的给药与依赖大鼠模型,用试剂盒检测海马组织腺苷脱氨酶(ADA)的活性。提取海马组织总RNA,采用逆转录聚合酶链反应检测海马组织ADA mRNA的水平,以β-actin mRNA为内标。结果海马组织中ADA含量测定结果显示,与盐水对照组相比,核苷酸组和海洛因组的海马组织ADA含量明显升高(P0.05,n=10);与海洛因组相比,海洛因加核苷酸组、核苷酸3天组的海马组织ADA含量明显降低(P0.05,n=10),核苷酸9天组降低更为显著(P0.01,n=10)。海马组织中ADA mRNA的水平结果显示,与盐水对照组相比,海洛因组ADA mRNA的相对表达量明显增高(P0.05,n=3),其余各组与盐水对照组相比无统计学意义;与海洛因组相比,海洛因加核苷酸组、戒断3天组、戒断9天组、核苷酸3天组和核苷酸9天组ADA mRNA的相对表达量明显降低(P0.01,n=3)。结论海洛因通过影响海马组织ADA的活性,进而促进嘌呤核苷酸的分解代谢,嘌呤核苷酸和/或代谢产物可能通过某些机制影响海洛因对海马组织的作用,其机制有待进一步研究。     

护理干预对海洛因依赖者治疗依从性的影响

目的探讨护理干预对海洛因依赖者在美沙酮维持治疗中治疗依从性的影响。方法将100例在本门诊进行美沙酮维持治疗的海洛因依赖者随机分为对照组和观察组，各50例。对照组采用美沙酮维持治疗，观察组在美沙酮维持治疗的基础上对患者及家属实施为期24周的护理干预，对两组患者维持治疗率和尿检阳性率进行比较。结果第24周对照组和观察组的维持治疗率分别为62％、78％，干预期间尿检阳性率分别为22．9％、12．7％，两组比较有显著性差异（P〈0．05或〈0．01）。结论通过护理干预，增加了患者及家属对美沙酮维持治疗的认识、理解，提高美沙酮维持治疗中患者的治疗依从性。     

Analysis of purine nucleotides in muscle tissue by HPLC

Optimal conditions for simultaneous analysis of the purine nucleotides adenosine triphosphate (ATP), adenosine diphosphate (ADP), adenosine monophosphate (AMP), inosine monophosphate (IMP), inosine, adenosine, hypoxanthine, xanthine and uric acid in muscle samples by high-performance liquid chromatography (HPLC) were evaluated. A neutralized perchloric acid extract of freeze-dried human or rat skeletal muscle tissue was injected on to a reversed-phase silica column and eluted by a gradient composed of ammonium dihydrogen phosphate buffer and methanol. Good resolution for all the nucleotides was achieved within a retention time of about 20 min. Linearity for each of the nucleotides within the concentration intervals obtained in the samples was demonstrated. Purity of each peak was verified by use of the photo-diode array technique. Reproducibility for biological samples with variation coefficients below 3.6% for ATP, ADP, AMP, inosine and hypoxanthine and 6.7% for IMP was obtained.

The stability of the compounds after extraction was specifically addressed. Storing of frozen extracts at –20^oC for 24 h gave acceptable values, while storage for 7 days cannot be recommended. Storage of unfrozen extracts at 4 ^oC was acceptable for (up to) 7 h.

This technique provides a sensitive, convenient and reliable method for simultaneous analysis of a large number of purine nucleotides in small skeletal muscle biopsies, provided that certain precautions are taken with respect to the instability of these metabolites.     

低强度氦氖激光血管内照射疗法对海洛因依赖者血液流变学的影响

目的　观察低强度氦氖激光血管内照射疗法(ILLLI)对海洛因依赖者血液流变学的影响。方法　将自愿入院治疗的海洛因依赖者随机分为ILLLI组和对照组,各50例,两组患者均采用我院药物替代疗法的常规戒毒方案治疗。ILLLI组在此基础上,加用ILLLI治疗。两组病人均于入院的次日及第11d清晨采空腹静脉血测血液流变学7项指标。结果　ILLLI组治疗后血液流变学的各项指标均低于治疗前水平。而对照组除红细胞压积(HCT)较治疗前差异有显著性(P<0.05)外,其余各项指标均无明显变化。结论　ILLLI能有效地降低海洛因依赖者的血液粘度,改善血液流变学性质。     

心理干预对海洛因依赖者家庭功能的影响

目的 探讨心理干预对海洛因依赖者家庭功能的影响.方法 将106例海洛因依赖者随机分为观察组和对照组各53例,两组均予以美沙酮治疗,疗程均为1年.在此基础上对观察组患者实施心理干预措施,每月1次,每次90 min左右.采用家庭功能评定问卷(FAD)对两组患者分别于心理干预前及干预结束时进行评定.结果 心理干预结束时,观察组患者的问题解决、沟通、角色、情感反应、情感介入、行为控制及总的功能分量表评分均显著低于对照组(t=2.14、2.83、3.32、2.47、2.01、2.27、2.71,P＜0.05或P＜0.01).结论 心理干预有助于提高海洛因依赖者的家庭功能.     

功能磁共振成像观察长期美沙酮维持治疗对海洛因依赖者抑制性控制功能的影响

目的 利用fMRI观察长期美沙酮维持治疗(MMT)对海洛因依赖者抑制性控制功能的影响.方法 根据MMT时间将34例接受MMT的海洛因依赖者分为短期治疗(SMMT)组(<2年,18例)和长期治疗(LMMT)组(≥2年,16例).利用GE 3.0T MR仪在被试执行事件相关go/nogo任务的同时进行fMRI,利用SPM8及SPSS 16.0软件进行fMRI和行为学数据处理.结果 两组患者反应时间、正确率、nogo错误率差异均无统计学意义(P均>0.05).相对于LMMT组,SMMT组背侧前扣带(dACC)激活程度显著升高;同时dACC激活程度与美沙酮维持总量呈负相关(r=-0.58,P=0.001).结论 长期MMT可能损伤海洛因依赖者的抑制性控制功能,这可能是导致MMT患者较高复吸率的相关因素之一.     

功能磁共振评价海洛因依赖者脑局部一致性改变

目的 采用局部一致性方法(ReHo)评价海洛因成瘾者静息态下脑局部神经元自发活动的改变,及其与用药时间和剂量的关系。方法 选择未接受美沙酮治疗的海洛因依赖者(HD组)17例和健康对照者(NC组)15名,通过EPI序列扫描获取静息态数据,比较两组ReHo差异,分析其与海洛因使用时间和剂量的关系。结果 与NC组相比,HD组ReHo值增大的脑区为左侧颞上回,减低的脑区为左侧颞下回、左侧前扣带回、左侧尾状核、左侧背外侧前额叶。左侧颞下回ReHo值与使用海洛因总剂量呈负相关(r=-0.558,P=0.048)。结论 海洛因成瘾者存在ReHo异常,主要涉及成瘾过程中的认知控制、情感调节、听觉等相关脑区。     

美沙酮维持治疗对海洛因依赖患者心理健康状况的影响

目的探讨美沙酮维持治疗对海洛因依赖患者心理健康状况的影响。方法将41例海洛因依赖患者设为研究组,给予美沙酮维持治疗1a,抽取社区35名一般资料与研究组相匹配的居民设为对照组。研究组入组时及治疗1a末采用症状自评量表评定心理健康状况,对照组于入组时进行评定。结果研究组经美沙酮维持治疗1a末,症状自评量表各因子分及阳性项目数均较入组时有显著下降,其中强迫症状、人际关系、焦虑、敌对、恐怖、精神病性因子分和阳性项目数均有显著或极显著性差异（P〈0．05或0．01）;入组时及治疗1a末症状自评量表各因子分及阳性项目数均显著高于对照组（P〈0．05或0．01）。结论海洛因依赖者存在诸多方面的心理健康问题,美沙酮维持治疗能使部分心理问题得以改善。