琼玉膏加强顺氨氯铂对肺腺癌细胞株GLC-82培养抑制作用的实验研究

目的：观察琼玉膏对顺氨氯铂在肺腺癌细胞株GLC－82培养中对癌细胞增殖抑制的影响。方法：使用血清药理学,细胞形态学方法分别观察空白对照组（生理盐水）、化疗组（顺氨氯铂）、及联合组（顺氨氯铂加琼玉膏）细胞形态学的变化;使用活细胞计数方法记录各组癌细胞6d的生长情况并绘制其生长曲线;使用流式细胞等方法分析各组癌细胞株GLC－82的凋亡情况。结果：对照组癌细胞生长良好,化疗级副产品 基本不增长,联合组活癌细胞数则下降。流式细胞仪的分析结果表明,琼玉膏可明显加强化疗药物顺氨氯铂（DDP）诱发癌细胞的凋亡。结论：说明琼玉膏有加强化疗的抑制癌细胞分裂及诱发癌细胞凋亡的作用。     

琼玉膏对肺腺癌细胞珠GLC-82的细胞周期及凋亡的影响

目的：观察琼玉膏对顺氨氯铂在肺腺癌细胞株ＧＬＣ－８２培养中的细胞增殖抑制的影响。方法：用血清药理学,流式细胞等方法技术研究古方琼玉膏对肺腺癌细胞株ＧＬ－８２的细胞周期及凋亡的影响。结果：流式细胞仪的分析结果表明,琼玉膏可明显加强化疗药物顺氨氯铂（ＤＤＰ）延长癌细胞Ｇ１期,降低Ｓ期的作用;并且琼玉膏还可明显加强顺氨氯铂诱发癌细胞的凋亡。结论：说明琼玉膏有加强化疗的抑制癌细胞分裂及诱发癌细胞凋亡的作用     

麝香促进肺腺癌细胞增殖及凋亡效果的体外实验研究

目的:分析麝香抑制肺腺癌细胞株GLC-82细胞增殖及促进凋亡的作用,为肺腺癌的抗肿瘤治疗提供新的研究方向。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度麝香溶液处理GLC-82细胞后相应时间点的存活率,分别对其细胞形态学变化、细胞凋亡率进行观察,分析细胞增殖及凋亡状态变化。结果:MTT实验结果示,随着麝香溶液浓度的上升及处理时间的增加,GLC-82细胞存活率逐渐下降。倒置显微镜观察结果示,空白组肺腺癌GLC-82细胞贴壁生长,细胞间紧密连接,细胞形态呈舒展状,未见折光不均,细胞核较大且明显;200μg/m L麝香溶液处理后的GLC-82细胞体积减小、细胞间紧密连接消失,细胞核周围可见空泡样结构存在、核物质边集;麝香溶液浓度越高,GLC-82细胞核异常凝集、核固缩、凋亡小体形成等典型的细胞凋亡形态越为明显。流式细胞仪检测结果示,随着麝香溶液浓度的增加,细胞由早期凋亡为主转向晚期凋亡和继发性坏死。结论:麝香对肺腺癌细胞株GLC-82细胞增殖具有一定的抑制作用,且可促进GLC-82细胞凋亡,其抗肿瘤机理值得进一步深入研究。     

琼玉膏加强顺氨氯铂对肺腺癌细胞株GLC-82的体外抑制作用

目的：观察琼玉膏对顺氨氯铂抑制肺腺癌细胞株ＧＬＣ－８２增殖的影响。方法：使用血清药理学分别观察空白对照组（生理盐水）、化疗组（顺氨氯铂）及联合组（顺氨氯铂加琼玉膏）细胞形态学的变化;使用活细胞计数方法记录各组癌细胞６日的生长情况并绘制其生长曲线;使用流式细胞等方法分析各组癌细胞株ＧＬＣ－８２的调亡情况。结果：对照组癌细胞生长良好,化疗组癌细胞数基本不增长,联合组活癌细胞数则下降。流式细胞仪的分析结     

氧代克斑宁对人肿瘤细胞GLC-82、HL60增殖的影响

目的:探讨氧代克斑宁抗肿瘤作用。方法:以MTT法观察氧代克斑宁在不同浓度下对人肿瘤GLC-82、HL60细胞增殖的影响。结果:氧代克斑宁在100μM浓度时对肺腺癌GLC-82细胞株具有明显抑制作用,而对人白血病HL60细胞株在1μM浓度时即显示极强的抑制作用。氧代克斑宁对GLC-82,HL60的IC50分别为109.17、86.61μM。结论:氧代克斑宁可抑制人肿瘤细胞株GLC-82、HL60增殖。     

琼玉膏对实验肺癌小鼠化疗导致骨髓抑制的影响

目的 :观察琼玉膏对实验性肺癌小鼠化疗导致的骨髓抑制的影响。方法 :使用癌细胞接种的方法制造肺癌模型 ,分别观测空白对照组 (生理盐水 )、化疗组 (顺氨氯铂 )及联合组 (顺氨氯铂加琼玉膏 )小鼠的血常规及骨髓有核细胞计数变化。结果 :联合组及对照组的外周血红细胞、白细胞及血小板皆明显高于化疗组 (P<0 .0 1)。化疗组骨髓有核细胞数明显低于联合组与对照组 (P<0 .0 1)。而联合组与对照组相比 ,对照组又高于联合组 (P <0 .0 5 )。结论 :琼玉膏对实验性肺癌小鼠化疗所致骨髓抑制可能有明显的解除作用     

威麦宁体外杭肿瘤作用的实验研究浅探

目的:探讨威麦宁对人肺癌等6种不同肿瘤细胞株的体外抑制增殖作用及与化疗药物(顺铂)合用后的增效作用,并探讨其抗肺癌作用机制.方法:MTT法检测威麦宁单独及与顺铂(DDP)合用对不同肿瘤细胞体外增殖的影响;流式细胞术检测威麦宁对肺癌细胞株(PG、PAa)细胞周期的影响.结果:威麦宁对肺癌细胞株PG、PAa、A549、肝癌细胞株BEL-7402、胃癌细胞株MGC-803及黑色素瘤细胞株B16-BL6等均有不同程度的抑制作用(P＜0.01,0.001);并可明显加强化疗药物顺铂(DDP)抑制肿瘤细胞体外增殖作用(P＜0.001);可将PG、PAa细胞周期阻滞在S期.     

五海丸对体外培养肺癌细胞生长及诱导细胞凋亡的影响

目的观察中药五海丸对体外培养肺癌细胞生长的影响及其诱导肺癌细胞凋亡作用.方法应用血清药理学方法,对小鼠肺腺癌 LA795细胞株进行体外培养,予五海丸、环磷酰胺 (CTX)、顺铂 (DDP)进行干预,通过 MTTI法、流式细胞仪法、 DNA提取凝胶电泳法等对肺癌细胞生长及其凋亡指标进行测定.结果五海丸能够抑制体外培养肺癌细胞的生长,高剂量组杀伤率可达 (59 48± 9 87)%,并能够促进肺癌细胞凋亡;高剂量组凋亡指数为 (27 75± 4 15),与 CTX合用既可以降低其增殖指数,又可增加其凋亡指数.结论 五海丸能够抑制肺癌细胞生长,促进肺癌细胞凋亡,与化疗药物具有协同抑瘤作用.     

海绵提取物S1～S3抑制肝癌细胞和肺腺癌细胞增殖作用的实验研究

目的:用体外培养法研究海绵提取物S1～S3对肝癌7402细胞、肺腺癌GLC-82细胞和胃癌MCG-803细胞增殖的抑制作用.方法:采用MTT法进行研究.结果:海绵提取物S1、S2和S3分别处理肿瘤细胞48 h后,S3呈剂量依赖性抑制肺腺癌GLC-82和肝癌7402细胞增殖,测得IC50分别为2.714 μg/ml和2.598 μg/ml,而对胃癌MCG-803细胞增殖无明显抑制作用;S1和S2对3种肿瘤细胞增殖均无抑制作用.结论:海绵提取物S3对肝癌7402细胞和肺腺癌GLC-82细胞的增殖有抑制作用.     

蛇葡萄素钠协同卡铂体外抑制人肺腺癌GLC-82细胞增值的作用

目的:考察蛇葡萄素钠单用及与卡铂合用对人肺腺癌GLC-82细胞增值的抑制作用,初步探讨蛇葡萄素钠抑瘤作用机制。方法:应用MTT法考察蛇葡萄素钠单用及与卡铂合用对人肺腺癌GLC-82细胞的细胞毒作用;使用流式细胞仪检测凋亡相关基因Caspase-3的表达。结果:MTT实验结果表明,蛇葡萄素钠在浓度为12.5²00μg/ml的剂量范围内对GLC-82细胞的增殖有浓度依赖性的抑制作用;卡铂在浓度为3.13200μg/ml的剂量范围内对GLC-82细胞的增殖有浓度依赖性的抑制作用;卡铂在浓度为3.13¹00μg/ml的剂量范围内对GLC-82细胞的增值有浓度依赖性的抑制作用;25、50μg/ml的蛇葡萄素钠对卡铂25μg/ml抑制GLC-82细胞增殖的作用具有协同效应;流式细胞仪检测结果表明,12.5100μg/ml的剂量范围内对GLC-82细胞的增值有浓度依赖性的抑制作用;25、50μg/ml的蛇葡萄素钠对卡铂25μg/ml抑制GLC-82细胞增殖的作用具有协同效应;流式细胞仪检测结果表明,12.5⁵0μg/ml的蛇葡萄素钠与卡铂25μg/ml联合用药组作用于GLC-82细胞12 h后,Caspase-3表达上调,且有浓度依赖性。结论:蛇葡萄素钠单用对GLC-82细胞的增殖具有一定的抑制作用,与卡铂合用,对GLC-82细胞增殖具有协同抑制效应;蛇葡萄素钠诱导细胞凋亡的机制之一可能是通过激活细胞内的Caspase-3,从而促进凋亡的发生。     

清毒饮和养正片诱导L7212小鼠白血病细胞凋亡及其对Bcl-2、P53基因表达的影响

目的:探讨清毒饮和养正片抗白血病的作用机理。方法;采用L7212白血病小鼠模型,用原位末端标记法（TUNEL）观察清毒饮、养正片和化疗对其白血病细胞凋亡的影响。结果:清毒饮、养正片、化疗各组都可见较多白血病细胞凋亡。其中清毒饮组优于养正片组,合用化疗则更明显,凋亡指数均大于模型对照组（P<0.01）,证明清毒饮、养正片能诱导L7212白血病细胞凋亡,且以清毒饮较明显,并可提高化疗的促凋亡作用。用免疫组化法检测模型小鼠骨髓有核细胞中Bcl-2、P53基因的表达,其Bcl-2表达明显增高,予清毒饮、养正片处理后,Bcl-2有所下降,以清毒饮组较养正片组明显,合用化疗后下降更明显（P<0.05）;P53表达在L7212白血病细胞稍减低,经清毒饮、养正片、化疗处理后,表达阳性率及其强度均有所升高,但统计学处理差异无显著性意义（P>0.05）。结论:清毒饮、养正片确能下调Bcl-2表达,而对P53作用不够明显。     

癌宁诱导入胃腺癌细胞SGC-7901凋亡的形态学变化及末端标记

目的:探索癌宁对人胃癌细胞的诱导凋亡作用。方法:采用体外细胞培养技术,通过形态学、分子生物学方法,对中药复方癌宁和顺铂诱导胃癌细胞凋亡进行了深入研究。结果:经癌宁及顺铂处理后的细胞出现凋亡形态学改变;癌宁在1 g/L浓度对细胞的凋亡诱导率是46.36％,与25 mg/L顺铂对细胞的凋亡诱导率49.12％间无显著差异(P>0.05),两者均与空白对照组有显著差异(P<0.01)。结论:癌宁及顺铂对人胃癌细胞具有诱导凋亡作用,中药复方癌宁可望成为一种有前途的新的癌细胞凋亡诱导剂。     

补肾化瘀解毒方药对肺癌耐药细胞的耐药逆转及机制研究

目的 :探讨补肾化瘀解毒方对肺癌耐药细胞的耐药逆转和逆转机制。方法 :选择人肺腺癌 A5 4 9、A5 4 9/DDP细胞株 ,采用细胞毒试验 (MTT)和流式细胞仪法 (FCM) ,分别观察补肾化瘀解毒方荷瘤动物血清对A5 4 9/DDP细胞的细胞毒和耐药逆转作用 ,以及对 A 5 4 9/DDP细胞肺耐药蛋白 L RP- 5 6的表达、耐药细胞内游离Ca2 +浓度等指标的影响。结果 :补肾化瘀解毒方含药血清对肺癌 A5 4 9/DDP耐药细胞有细胞毒作用和增强A5 4 9/DD对顺铂 (DDP)的敏感性 ,并能显著抑制肺耐药蛋白 L RP的表达 (P<0 .0 1) ,降低细胞内 Ca2 +浓度(P<0 .0 0 1)。结论 :补肾化瘀解毒方药物血清对化疗药物具有增敏和化疗耐药逆转作用 ,其机制与抑制肺癌耐药细胞耐药基因表达 ,阻止肺癌耐药细胞内 ca2 +的内流或释放有密切的关系     

附子多糖对H22和S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用研究

目的 :研究附子粗多糖和酸性多糖对S180、H2 2荷瘤小鼠的抑瘤作用并探讨其作用机制。方法 :采用水提醇沉法得到附子粗多糖和酸性多糖 ,通过腹腔注射和灌胃两种途径给药 ,以肿瘤生长抑制率和存活延长率为指标观察附子多糖对荷瘤小鼠 (S180和H2 2 )的抑瘤作用 ,并通过检测淋巴细胞转化能力、NK细胞活性、肿瘤细胞凋亡率、癌基因和细胞增殖指数 (PI)等指标探讨其抗肿瘤作用机制。结果 :附子粗多糖和酸性多糖对H2 2荷瘤小鼠肿瘤有显著的抑瘤作用 ,灌胃给药的抑瘤率分别为 4 5 30 %和 5 9 36 % (P <0 0 1) ,腹腔给药的抑瘤率分别为 4 9 6 5 %和 6 9 2 8% (P <0 0 1)。两种多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤也有较显著的抑制作用。附子多糖对S180和H2 2荷瘤小鼠有延长存活时间的作用 (P <0 0 5或P <0 0 1)。两种多糖均明显增大了小鼠脾脏的重量 (P <0 0 1) ,提高了荷瘤小鼠的淋巴细胞转化能力 (P <0 0 5 )和NK细胞活性 (P <0 0 1) ,提高了抑癌基因p5 3和Fas的表达 (P <0 0 1) ,并且提高了肿瘤细胞凋亡率 (P <0 0 1)。结论 :附子粗多糖和酸性多糖有显著的抑瘤作用 ,其作用机制主要是增强机体的细胞免疫功能 ,诱导肿瘤细胞凋亡和调节癌基因的表达。     

温下方含药血清诱导A549/DDP细胞凋亡及对Bcl-2,Bax,p53蛋白表达的影响

目的:研究温下方含药血清诱导人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP凋亡及对Bcl-2,Bax,p53蛋白表达的影响。方法:制备温下方含药血清,高效液相色谱法(HPLC)定性检测含药血清中人参皂苷Rb1、大黄素和乌头碱。A549/DDP细胞分为DDP干预组,含药血清+DDP干预组,正常血清+DDP干预组。孵育24 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜检测Bcl-2,Bax及p53蛋白表达。结果:HPLC结果显示含药血清中含有人参皂苷Rb1、大黄素及乌头碱。含药血清作用后,与DDP干预组比较,含药血清+DDP干预组细胞凋亡率增高至(21.82±3.27)%(P<0.05);细胞内Bcl-2蛋白表达降低至2.81±0.02(P<0.05);Bax蛋白表达增高至2.90±0.08(P<0.05);p53蛋白表达增高至3.58±0.09(P<0.05)。结论:温下方含药血清明显诱导A549/DDP细胞凋亡,显著降低Bcl-2蛋白表达,提高Bax,p53蛋白表达,可能从诱导耐药细胞凋亡角度逆转耐药。     

虫草素通过抑制NF-κB途径增强A549细胞对顺铂的敏感性

 目的 通过研究虫草素和顺铂单用或联用对肺癌细胞A549的抗肿瘤效应,探讨其可能的作用机制,为临床肿瘤治疗提供新思路。方法 四甲基偶氮唑盐法检测不同浓度的虫草素与顺铂单用或虫草素与顺铂(3 μg·mL^-1)联用对A549的增殖抑制作用,并计算IC₅₀;采用Hoechst 33258染色法及流式细胞术检测虫草素与顺铂单用或联用诱导A549细胞凋亡情况;Western blot法检测不同处理组的细胞核内NF-κBp65及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达水平。结果 虫草素与顺铂联用对A549细胞的抑制作用显著增加,增强了顺铂对A549的敏感性; Hoechst 33258染色及流式细胞术显示,与虫草素和顺铂单独用药相比,联合用药能够明显增加顺铂诱导的细胞凋亡;Western blot结果显示,与对照组相比顺铂能够增加细胞核内NF-κBp65的活性,然而虫草素却能抑制NF-κBp65的活性,联合用药后NF-κBp65的活性明显下调;与顺铂单独用药相比,联合用药组能够使促凋亡蛋白Bax表达显著增高,而抗凋亡蛋白Bcl-2的表达则降低。结论 虫草素能够增强顺铂对肺癌细胞A549的敏感性,其作用机制是通过抑制NF-κB途径,调节下游信号分子 Bax和Bcl-2的表达而实现。     

苦参素与顺铂联合应用诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其机制

目的:探讨苦参素和顺铂联合应用诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其机制。方法:采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,应用金氏公式分析药物间的相互作用,RT-PCR方法检测fas和caspase-3基因mRNA表达水平。结果:与单药组相比,联合用药对肝癌SMMC-7721细胞增殖抑制率明显增高(P<0.05),细胞凋亡率显著增高(P<0.05),并表现明显的协同作用,细胞fas和caspase-3基因mRNA表达水平明显上升(P<0.05)。结论:苦参碱与顺铂联合应用能明显诱导肝癌SMMC-772 l细胞凋亡并有协同作用,其机制可能与上调细胞fas和caspase-3基因表达有关。