Galectin-9基因转染诱导大鼠肾移植免疫耐受的实验研究

[目的]探讨半乳凝素-9(Galectin-9)在大鼠肾移植免疫耐受中的作用及意义。[方法]建立大鼠同种肾移植模型,分为Lentiviral-Galectin-9组、雷帕霉素组、对照组和Lentiviral组。lentiviral-Galectin-9组供肾移植前用含慢病毒lentiviral-Galectin-9的肾脏冷保存液经肾动脉灌注。分别观察肾功能测定、生存期,检测尿蛋白和血肌酐含量,移植肾病理检查并半定量评分,比较各组间的不同。[结果]Lentiviral-Galectin-9治疗组肾移植受体大鼠平均存活天数为30.2d,与对照组的存活时间比较差异显著。Lentiviral-Galectin-9治疗组的移植肾功能基本保持稳定。脾细胞增殖反应显示:Lentiviral-Galectin-9组和雷帕霉素组对供体脾细胞的刺激增殖反应显著低于对照组和Lentiviral组,Lentivi-ral-Galectin-9组对供体脾细胞的刺激增殖反应显著低于和雷帕霉素组,差异均有统计学意义。Lentiviral-Galectin-9组和雷帕霉素组的尿蛋白水平明显低于对照组和Lentiviral组,差异均有统计学意义(P﹤0.05);Lentiviral-Galectin-9组与雷帕霉素组差异有统计学意义(P﹤0.05),对照组和Lentiviral组差异无统计学意义(P﹥0.05)。第6周和第12周时,Lentiviral-Galectin-9组和雷帕霉素组的血肌酐浓度明显低于对照组和Lentiviral组,差异均有统计学意义(P﹤0.05);Lentiviral-Galectin-9组与雷帕霉素组差异有统计学意义(P﹤0.05),对照组和Lentiviral组差异无统计学意义(P﹥0.05)。移植术后12周时,Lentiviral-Galectin-9组和雷帕霉素组大鼠移植肾组织的间质炎症和纤维化、血管内膜增厚、肾小球硬化和小管萎缩等慢性损害明显轻于对照组和Lentiviral组,Lentiviral-Galectin-9组损害轻于雷帕霉素组,差异均有统计学意义(P﹤0.05);对照组和Lentiviral组差异无统计学意义(P﹥0.05)。[结论]慢病毒lentiviral载体可成功介导Galectin-9基因对大鼠肾脏的转染,并对移植肾起免疫保护作用、延长移植肾的存活时间。     

骨髓间充质干细胞对大鼠胰岛移植的影响

目的评价骨髓间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells,MSCs）对胰岛血管重建和改善胰岛功能的作用。方法随机将SD大鼠分成2组：联合移植组,胰岛和MSCs联合移植入受体糖尿病大鼠的肾包膜下;对照组,仅作单纯胰岛移植。采用细胞密度梯度分离（Percoll）法从同种供体SD大鼠骨髓中分离得到MSCs,并进行原代培养。进一步将MSCs和分离纯化的胰岛联合植入受体糖尿病大鼠的肾包膜下。胰岛的微血管密度（MVD）通过Lectin From Bandeiraea Simplicifolia（BS-1）的荧光染色来评估,胰岛功能通过测定血糖水平来评估。结果分离培养的原代MSCs在培养的第10天后细胞开始加快增殖,细胞排列成漩涡状。于术后14天,取出胰岛移植物,作荧光BS-1染色。荧光BS-1定位于血管内皮上。联合移植组的胰岛内MVD平均为20±1.9,明显大于对照组的14±1.8（p〈0.05）。联合移植组受体糖尿病大鼠的血糖缓解时间为10.5±4.1天,对照组为8.5±2.5天,两组之间无显著差异（p〉0.05）。结论大鼠MSCs在胰岛移植早期有助于增加移植胰岛内的血管密度,可作为改善胰岛移植效果的新策略。     

胰岛移植血管重建的研究进展

@@@@移植胰岛的血管重建速度关系到移植能否成功,其重要性体现在短期内使胰岛细胞快速恢复血供,不至因缺氧缺血而大量死亡,并且使移植的胰岛细胞尽快感知受体血糖产生胰岛素,血糖恢复正常;远期内由于移植胰岛成活率高,从而改善移植远期效果不佳的现状。因此,如何加速血管重建的进程是胰岛移植研究的重点,本文就血管重建过程研究的现状及几种加速其进程的方法作一综述。     

肢体移植排斥反应中细胞凋亡及致死基因表达

目的探讨同种异体肢体移植急性排斥反应时细胞凋亡及致死基因Fas、Fas配体(FasL)表达的作用及其意义。方法建立近交系SD大鼠与wistar大鼠间原位异体肢体移植模型。实验观察组为异基因组，SD大鼠为供体，Wistar大鼠为受体；对照组为同基因移植组，在Wistar大鼠之间移植。分别进行左腿原位移植术。术后第1，3，5，7d分别取移植肢体组织进行病理学检查及电镜扫描，采用原位末端标记法(TUNEL)检测移植肢体中的凋亡细胞，免疫组化方法检测移植肢体中Fas、FasL表达的变化。结果实验组大鼠在术后发生由轻到重的急性排斥反应，对照组无明显排斥现象。实验组的移植物细胞凋亡数均明显高于对照组，凋亡细胞主要分布在血管内皮细胞及皮肤基底层细胞；术后第7d因严重排斥使小血管广泛栓塞。异基因肢体移植组的移植物中Fas／FasL表达增高，并与病理学检查及细胞凋亡程度一致。结论Fas、FasL介导的血管内皮细胞凋亡在大鼠异基因肢体移植急性排斥反应中发挥重要作用，可作为判断移植肢体预后及监测排斥反应的重要指标。     

缺血性脑卒中肠道微生物移植致菌群失调大鼠模型建立

目的 建立一种肠道菌群失调大鼠模型,为脑缺血损伤肠道菌群失调研究提供方法学支持.方法 将SPF级SD大鼠分为正常组、供体组和受体组,对供体组大鼠予以大脑中动脉栓塞术(MCAO),术后72 h取盲肠菌群作为移植物;对受体组大鼠灌胃硫酸链霉素消耗肠道微生物后,将供体组的盲肠菌群灌胃移植给受体组,1次/d,共3d.取3组大鼠...     

改良深板层角膜移植术治疗大鼠严重基质坏死型单纯疱疹病毒性角膜基质炎的临床效果

目的探讨改良深板层角膜移植术(DLKP)治疗大鼠严重基质坏死型单纯疱疹病毒性角膜基质炎(HSK)的临床效果。方法通过单纯疱疹病毒1型KOS毒株接种于SD大鼠角膜上建立大鼠严重基质坏死型HSK模型,雌性Wistar大鼠作为供体,SD大鼠作为受体。采用同种异体角膜移植的方法在SD大鼠上实施DLKP术。采用随机方法将模型眼分为单纯模型组和改良DLKP手术组,术后7 d、21 d参照奥朗德(Holland)排斥反应评分标准对每组角膜植片移植的免疫排斥反应进行评估。分别于7 d、21 d随机处死每组大鼠3只行苏木素伊红(HE)染色观察角膜情况。结果裂隙灯显微镜显示严重基质坏死型HSK造模后7 d大鼠出现角膜基质炎改变,14 d角膜浑浊程度到达高峰,伴有大量新生血管生成。DLKP术后7 d裂隙灯显微镜下角膜水肿减轻,轻度混浊,术后21 d角膜透明无混浊水肿。角膜植片组织病理学染色显示模型组角膜基质层胶原纤维排列紊乱,大量炎症细胞及新生血管浸润;术后7 d角膜植片基质层胶原纤维排列轻度紊乱,少量炎症细胞浸润;术后21 d角膜植片质层胶原纤维排列较规则,几乎无炎症细胞浸润。大鼠术后7 d、14 d角膜植片排斥指数低于模型组(均为P0.05)。结论应用改良DLKP术对大鼠严重基质坏死型HSK可达到治愈溃疡的目的。     

雷公藤预处理后异体移植神经的形态学研究

[目的]研究大鼠异体坐骨神经段经雷公藤多甙(雷公藤提取物)预处理后异体移植的形态学变化。[方法]设实验组A组:异体坐骨神经段经雷公藤预处理后异体移植,B组:新鲜异体神经移植,术后口服雷公藤多甙5mg/(kg.d)5周,C组:自体右侧坐骨神经原位移植,D组:将供体直接移植于坐骨神经缺损模型。术后分时间段对移植神经片段进行形态学研究。[结果]术后2周,A、B组移植神经段早期急性排斥反应稍重于C组,但小于D组;至8周时A、B组移植段的炎性细胞浸润程度明显减轻,与C组相似,而D组炎性细胞浸润明显;术后14周时A、B、C3组移植神经段外膜构成完整,束膜、内膜厚度,分布及范围无明显差异,再生大量神经纤维,髓鞘完整,排列规则,再生有髓神经神经纤维的面积,总数和髓鞘厚度差异无统计学意义(P﹥0.05),而D组基本未见神经纤维再生。[结论]异体神经段经雷公藤多甙预处理后可降低免疫排斥反应,促进周围神经再生。     

C4d在大鼠慢性排斥反应移植肾组织中的表达及意义

目的探讨大鼠肾移植慢性排斥反应模型移植肾组织中补体裂解产物C4d沉积的表达及意义。方法分别采用封闭群W istar及SD大鼠为供、受体,建立大鼠肾移植慢性排斥反应模型,随机分为试验组(非治疗组)及对照组(霉酚酸酯治疗组),观察移植术后12周各组移植肾组织学变化及C4d在肾小管周围毛细血管的沉积情况。结果术后12周,试验组出现了明显的慢性排斥反应病理改变及广泛的C4d沉积,与对照组比较病理组织学变化及C4d沉积分差异均有统计学意义(P<0.01)。结论移植肾组织中C4d的沉积可作为诊断慢性排斥反应的有效指标。     

雷帕霉素调控PI3K-AKT-mTOR信号通路对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的探讨不同剂量的雷帕霉素通过调控PI3K-AKT-mTOR信号通路对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及心功能的影响,为慢性心力衰竭的防治提供科学依据。方法选取65只健康的雄性SD大鼠,随机选取10只作为空白组,其余采用缩窄腹主动脉术的方法建立心力衰竭模型。将造模成功的40只大鼠随机分为模型组(n=10)、低剂量组[n=10,雷帕霉素1 mg/(kg·d)]、中剂量组[n=10,雷帕霉素2.5 mg/(kg·d)]和高剂量组[n=10,雷帕霉素4.5 mg/(kg·d)]。雷帕霉素通过尾静脉连续给药4周。治疗结束后,应用超声心动图评价大鼠的心功能,检测各组大鼠血清脑钠肽(BNP)水平,观察心肌组织的病理变化和心肌细胞凋亡情况,检测大鼠心肌组织中PI3K-AKT-mTOR信号通路的蛋白激酶B(AKT)的磷酸化表达情况。采用SPSS 19.0软件进行单因素方差分析和LSD-t检验。结果与空白组比较,模型组大鼠心肌组织病理改变明显,左室舒张末径(LVIDd)、左室收缩末径(LVIDs)增加,左室射血分数(LVEF)、左室缩短率(LVFS)减低,BNP升高,细胞凋亡指数增加,AKT蛋白磷酸化表达增加,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。与模型组比较,不同剂量雷帕霉素模型组,心肌组织病理改变逐渐逆转,LVIDd、LVIDs、BNP、心肌细胞凋亡指数和AKT蛋白磷酸化表达均下降,LVEF和LVFS均增加,高剂量组改变更加明显,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论雷帕霉素抑制心力衰竭大鼠心肌细胞PI3KAKT-mTOR信号通路,减轻心肌细胞凋亡,改善心功能。     

脐带来源的间充质干细胞对人卵巢皮质异种移植模型血管生成的影响

目的：探讨脐带来源的间充质干细胞(UC-MSCs)对人卵巢皮质异种移植模型血管生成的影响。方法：对1例捐赠的卵巢皮质进行玻璃化冷冻保存。复苏后移植到重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠背部皮下,配对分为UC-MSCs组和对照组各10只。移植后3,7,14d观察移植物局部血管重建情况,比较各组的卵泡存活、凋亡、微血管密度和微循环血流量情况。结果：移植后7d和14d UC-MSCs组卵泡形态正常率较对照组明显升高(50.2%比38.5%,45.4%比34.0%),卵巢组织中凋亡卵泡占比低于对照组(19.0%比27.2%,31.5%比46.3%)(均P<0.05)。移植后3,7,14d UC-MSCs组的微血管密度均高于对照组(P<0.05)。移植后7,14d UC-MSCs组移植物局部的血流灌流量均高于对照组[(106.4±12.2)PU比(87.8±11.9)PU,(124.5±18.4)PU比(99.3±16.6)PU](P<0.05)。结论：UC-MSCs可加速卵巢移植后局部微血管的生成,降低移植后卵泡发生凋亡比率。     

两种微囊化成猪胰岛移植疗效的比较

目的　通过对同一来源的成猪胰岛采用两种不同的免疫隔离材料进行微囊化包裹 ,并植入糖尿病大鼠腹腔内加以比较 ,以明确两种方法间的优劣。方法　将同一来源的成猪胰岛分成三组 :未微囊化组、海藻酸钠微囊组和琼脂糖微囊组。 2 4只糖尿病大鼠随机分为 4组 :对照组、未微囊化胰岛移植组、海藻酸钠微囊化胰岛移植组和琼脂糖微囊化胰岛移植组 ,分别进行腹腔内胰岛移植。结果　 4组糖尿病大鼠胰岛移植前血糖水平无显著差异 ,移植后 1周分别为 (2 2 6 7± 1 15)mmol/L ,(18 58± 2 6 2 )mmol/L ,(12 2 7± 1 36 )mmol/L和 (12 38± 2 6 8)mmol/L ,后 2组与前 2组相比均有显著差异 ,且生存期明显长于前 2组 ,但琼脂糖微囊化胰岛组的生存期明显短于海藻酸钠微囊化胰岛组 (分别为平均 57 10d和 145 17d)。结果　两种包膜材料制备的微囊化成猪胰岛均可存活于糖尿病大鼠体内并发挥生物功能 ,但海藻酸钠微囊化胰岛组较琼脂糖微囊化胰岛组的存活期明显延长。     

高脂饮食肥胖大鼠胰岛细胞凋亡与Mcl-1表达及意义

目的 通过建立高脂饮食诱导肥胖大鼠模型,研究肥胖大鼠胰岛细胞中线粒体途径抗凋亡蛋白髓样细胞白血病因子-1(Mcl-1)表达情况及其与β细胞凋亡的相关性,探究肥胖大鼠胰岛细胞损伤可能的机制。方法 SPF级3周龄雄性SD大鼠72只,随机分为普通饲料组和高脂饲料组 。在高脂喂养8、16、20、24周末筛选出符合肥胖标准的大鼠设为肥胖组,普通饲料组设为对照组。ELISA检测血清,游离脂肪酸(FFA)水平, 通过透射电镜观察胰岛β细胞微观结构改变,免疫组化SP法检测胰岛组织中Mcl-1蛋白的表达情况,并通过Real-Time PCR检测胰腺组织中Mcl-1的mRNA表达水平,原位末端标记法(TUNEL法)检测两组大鼠的胰岛细胞凋亡率。结果 1)高脂喂养20周,肥胖组大鼠血清FFA水平显著高于对照组(P<0.01);2)电镜结果显示,16周末肥胖组大鼠胰岛β细胞结构与对照组相比,出现凋亡样改变,且随时间推移有所加重;3)高脂喂养20周,肥胖组大鼠抗凋亡相关蛋白Mcl-1表达较对照组明显降低(P<0.05);4)RT-PCR结果显示, 高脂喂养16周,抗凋亡相关蛋白Mcl-1的mRNA水平明显降低(P<0.05);5)高脂喂养20周,与对照组大鼠相比,肥胖组凋亡率显著增加(P<0.01);6)大鼠胰岛细胞凋亡率与血清FFA水平呈正相关(r＝0.536,P<0.01),与Mcl-1基因的表达水平呈负相关(r＝-0.776,P<0.01)。结论 高脂饮食肥胖大鼠胰岛β细胞形态结构异常, 线粒体途径抗凋亡蛋白Mcl-1表达降低,胰岛细胞凋亡率与Mcl-1表达呈负相关。提示肥胖大鼠存在胰岛β细胞损伤,其机制与线粒体凋亡途径有关。     

高海拔缺氧对链脲佐菌素致大鼠胰岛损害程度的影响

[目的]通过观察西宁（低海拔）、木里（高海拔）地区链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）糖尿病大鼠胰岛形态学特点,探讨高原缺氧环境对STZ糖尿病大鼠胰岛形态学影响。[方法]大鼠随机分成西宁、木里正常组;西宁、木里造模组。造模组大鼠空腹12h后腹腔注射STZ,以随机血糖≥16．7mmol/L为造模成功;采用免疫组织化学染色和原位末端转移酶标记技术（TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL）细胞凋亡检测分析胰岛面积、胰岛D细胞面积、平均光密度、平均累积光密度（integrated optical density,IOD）和胰岛细胞凋亡率。[结果]木里糖尿病组血糖水平低于西宁糖尿病组;糖尿病大鼠胰岛数量减少、萎缩、形状不规则,胰岛细胞变性,胰岛内β细胞分布稀少,胰岛染色颗粒较少,着色浅,凋亡细胞较正常组多;木里糖尿病组在β细胞面积、β细胞面积／胰岛面积和IOD上显著高于西宁糖尿病组。[结论]高海拔STZ糖尿病大鼠血糖较低;胰岛β细胞受损较轻;高原缺氧环境可能对STZ糖尿病大鼠胰岛β细胞有一定的保护作用。     

中华鳖卵对胰岛素抵抗大鼠糖代谢的影响

目的研究中华鳖卵对胰岛素抵抗模型大鼠糖代谢的影响。方法雄性SD大鼠以高脂饲料喂养4个月建立胰岛素抵抗模型,按照体重和空腹胰岛素水平分为模型对照组(insulin resistant control,IRC)和3个中华鳖卵实验组,另选以基础饲料喂养4个月的健康雄性SD大鼠作为空白对照组(negative control,NC)。实验组大鼠以灌胃方式给予不同剂量(0.5、1.5和4.5 g/kg bw)的中华鳖卵冻干粉(Chinese soft-shell turtle egg,TEP),IRC和NC组给予等体积溶剂灌胃。实验期间IRC及TEP各组继续喂饲高脂饲料,NC组喂饲基础饲料,实验周期8 w。于实验结束时进行口服糖耐量实验(OGTT),检测空腹血糖、胰岛素,计算胰岛素敏感指数,RT-PCR方法检测肝脏中胰岛素受体、胰岛素受体底物-1 mRNA的表达,并观察胰岛β细胞的超微结构改变。结果高脂饲料喂养4个月后大鼠空腹胰岛素水平升高,胰岛素敏感指数下降,成功建立胰岛素抵抗模型。实验结束时,与IRC组比较,各剂量TEP组大鼠空腹胰岛素水平明显下降,而胰岛素敏感指数明显升高;1.5和4.5g/kg bw TEP组大鼠空腹血糖水平明显降低,4.5g/kg bw TEP组大鼠OGTT中0.5h血糖水平和血糖曲线下面积明显降低;TEP各剂量组肝脏胰岛素受体和胰岛素受体底物-1 mRNA表达水平明显增高,同时胰岛β细胞的超微结构得到明显改善。结论 TEP对高脂饲料诱导的胰岛素抵抗大鼠糖代谢紊乱具有明显的改善作用。     

短期胰岛素强化治疗联合沙格列汀对2型糖尿病患者的有效性及胰岛功能的影响

目的 与单一短期胰岛素强化治疗相比,探究短期胰岛素强化治疗联合沙格列汀对2型糖尿病患者的有效性及胰岛功能的影响.方法 选取医院2019年3月—2021年3月收治的106例初发2型糖尿病患者,根据不同治疗方法,将患者分为对照组和观察组各53例,对照组行二甲双胍联合短期胰岛素强化治疗,观察组行沙格列汀治疗、二甲双胍联合短期...     

长期酒精摄入对大鼠胰岛素分泌功能的影响

目的:研究长期酒精摄入对大鼠血糖、血清胰岛素及胰岛素基因表达影响。方法:清洁级Wistar大鼠80只,雌雄各半,随机分为对照组和低、中、高剂量组,摄入酒精剂量分别为0、0.8、1.6和2.4g/(kgbw?d)。给予酒精18w后,进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),第19w末,断头处死,测定空腹血糖和血胰岛素水平,计算Homa-β功能指数(HBCI)。提取胰腺总RNA,半定量RT-PCR测定胰岛素mRNA表达水平。结果:雌性大鼠高剂量组空腹血糖升高、空腹血清胰岛素下降,中、高剂量组HBCI及胰岛素基因表达均降低;雄性大鼠OGTT高剂量组0和1.5h血糖升高,空腹血糖高剂量组升高,低、中剂量组空腹血胰岛素升高,随着剂量增加,HBCI及胰岛素基因表达先升高后降低。结论:长期高剂量酒精摄入可导致胰岛素mRNA基因表达改变,胰岛β细胞功能受损。     

高脂饮食对SD大鼠肝脏及胰岛B细胞的损伤

目的分析长期过量摄入脂肪对大鼠肝脏及胰岛B细胞的影响。方法本研究采用24只雄性SD大鼠随机分为2组,对照组（NC）给予普通日粮,高脂组（HF）给予脂肪热量比为46.43%的高脂日粮,喂养16周后测定空腹血糖（FPG）、胰岛素（FINS）、游离脂肪酸（FFA）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）,胰岛素敏感性采用胰岛素敏感性指数（ISI）计算,ISI=Ln1/（FPG×FINS）,肝脏油红O染色观察脂肪沉积情况,胰岛、肝脏透射电镜分析超微结构改变,数据采用t检验统计分析。结果 HF组血清FINS、FFA、AST、ALT比对照组分别升高了22.63%、15.35%、11.94%、8.86%（P〈0.01）,ISI降低了8.25%（P〈0.05）,血糖水平与对照组差异无统计学意义（P=0.194）;HF组肝细胞线粒体增大、内室肿胀、嵴减少,细胞质内有大量脂滴;胰岛B细胞分泌颗粒增大,晕环明显增宽。结论长期高脂饮食导致大鼠肝脏脂肪沉积、肝细胞线粒体肿胀、肝功能降低,胰岛B细胞结构损伤,胰岛素敏感性下降。     

碘过量对小鼠胰岛β细胞形态的影响

目的 探索碘过量对小鼠胰岛β细胞形态的影响。方法 将60只体重为（18～22） g/只的雌性（BALB/c）小鼠随机分为6组,每组10只,在饮水中加入不同浓度的碘,对照组给予正常浓度碘（5 μg/L）的自来水。碘过量的暴露组采用在饮用水中加入碘酸钾的方法,给予分别含有300 μg/ L、600μg/ L、1 200μg/ L、2 400μg/ L和4 800 μg/ L碘的饮用水。饲养1个月,取小鼠胰腺组织,光镜和电镜下观察胰岛β细胞形态。结果 对照组小鼠胰岛β细胞形态结构正常,呈椭圆形,与周围细胞界限清楚。高浓度碘水饲养小鼠1个月后,光镜下可见,从B组（300 μg/ L）开始胰岛β细胞形态发生改变,细胞体积增大,胰岛增生、肥大,胰岛β细胞肿胀、形态不规则。在电镜下可见,从D组（1 200 μg/ L）开始细胞超微结构发生明显变化,线粒体数量减少,出现肿胀、变性,胰岛β细胞肿胀、纤维化和变性,甚至出现缺如,内质网扩张、增粗,线粒体嵴向基底部聚集甚至断裂或呈空泡状等。结论 碘过量对小鼠胰岛β细胞形态产生影响,可以损伤小鼠胰岛β细胞。     

Pancreatic islet insulin secretion and metabolism in adult rats malnourished during neonatal life

Pancreatic islets were isolated from rats that had been nursed by dams fed with a control or an 8.7% protein diet during the first 12 d of the lactation period. Glucose-induced insulin secretion from islets in the 8.7% protein group was reduced 50%. The islet insulin and DNA content were similar, whereas the pancreatic insulin content was reduced by 30 % in the rats fed 8.7 % protein. In order to elucidate the mechanism responsible for the attenuation of insulin secretion, measurements were performed of the activity of several islet enzymes that had previously been supposed to be involved in the coupling of glucose stimulation to insulin secretion. Islet glucose oxidation was unaffected, but glucose-stimulated hydrolysis of phosphatidylinositol was reduced by one-third in the islets of rats fed 8.7% protein. The activity of mitochondrial glycerophosphate dehydrogenase was similar in islets of rats fed the 8.7% protein diet and those fed the control diet. The activity of Ca-independent phospholipase A2 was increased fourfold in the islets of rats fed 8.7% protein. It is concluded that impairment of glucose-induced insulin secretion in rats fed a low-protein diet may be caused by attenuation of islet phosphatidylinositol hydrolysis, and it is tentatively suggested that the increased activity of Ca-independent phospholipase A2 in islets of rats fed a low-protein diet may participate in the stimulation of apoptosis.