骨关节炎患者关节软骨和滑膜金属蛋白酶-1和-3的表达

骨关节炎 (ＯＡ)的病理特征为关节软骨的进行性变性和破坏 ,但其确切的发病机制未明。近年研究提示 ,ＯＡ的这种病理改变与金属蛋白酶 (ＭＭＰｓ)对细胞外基质的降解作用可能有关[1] 。我们检测了ＭＭＰ 1、 3在ＯＡ软骨和滑膜组织中的表达状况 ,以探讨两者在ＯＡ发病中的作用。一、对象与方法1 实验对象 :膝ＯＡ病人均符合Ａｌｔｍａｎ等[2 ] 的ＯＡ诊断标准。正常对照组包括意外受伤截肢患者或意外死亡者。膝ＯＡ患者 14例 ,男 5例 ,女 9例 ,平均年龄 (5 8 2± 11 1)岁 ;正常对照组 11例 ,男 5例 ,女 6例 ,平均年龄 (5 1 3± 9 6 )岁。2 …     

IL-1β诱导软骨细胞培养金属蛋白酶/金属蛋白酶抑制剂水平及药物对其影响

目的　探讨体外培养的原代软骨细胞及加入白细胞介素 (IL) 1β诱导软骨细胞中金属蛋白酶 /金属蛋白酶抑制剂水平变化及四环素、强力霉素及中药骨碎补对其影响。方法　采用体外培养的兔软骨原代细胞为模型 ,分别加入含有 10 %四环素、强力霉素及骨碎补含药血清 ,实验组加入10ng/mlIL 1β ,诱导软骨细胞变性 ,均培养 4 8h分离上清液 ,采用酶联免疫方法测定各组培养液中基质金属蛋白酶 3(MMP 3)及金属蛋白酶组织抑制剂 1(TIMP 1)含量。结果　经 10ng/mlIL 1β诱导后 ,软骨细胞MMP 3/TIMP 1水平显著性升高 (P <0 0 1) ;对于加入IL 1β诱导的软骨细胞 ,与空白血清对照组比较 ,含骨碎补药物血清和含强力霉素药物血清均降低软骨细胞MMP 3/TIMP 1水平 ,且强力霉素含药血清组与空白对照组比较差异具有显著性 (P <0 0 1) ,而含四环素药物血清则升高软骨细胞MMP 3/TIMP 1水平 ,但与空白对照组比较差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;对于不加IL 1β诱导的软骨细胞来说 ,3种含药血清均可升高软骨细胞MMP 3/TIMP 1水平 ,且含骨碎补药物血清和含四环素药物血清与空白对照组比较差异均有显著性 (P <0 0 1)。结论　IL 1β可上调体外培养的原代软骨细胞MMP 3/TIMP 1水平 ,强力霉素和骨碎补可以下调经IL 1β诱导的软骨细胞MM     

不同浓度雌激素对软骨细胞金属蛋白酶mRNA表达的影响

目的；观察不同浓度雌激素对体外培养兔关节软骨细胞金属蛋白酶mRNA表达的影响。方法：体外培养雌兔关节软骨细胞，随机分为A、B两组，A组中加入17β雌二醇0、10^-6、 10^-7、10^-8、10^-9、10^-10、10^-11、10^-12mol/L干预72h；B组先用10mg/ml IL-1β干预24h， 随后分别加入0、10^-6-10^-12mol/L 17β＝雌二醇作用72h。采用RT－PCR方法观察软骨 细胞金属蛋白酶mRNA表达状况。结果：10^-6、10^-8、10^-9、10^-12mol/L雌二醇组，IL－1β＋雌二醇0mol/L组及IL－1βmRNA表达状况。结果：10^-6、10^-8、10^-9、10^-12mol/L雌二醇组，IL－1β^ 雌二醇0mol/L组及IL－1β＋雌二醇10^-11mol/L 表达MMP－1 mRNA；政党为软骨细胞不表达MMP－8mRNA,10^-8、10^-9、10^-12mol/L雌二醇组及IL－1β^＋雌二醇10^-6、10^-7、10^-10mol/L组表达MMP－8mRNA；所有软骨细胞均未表达MMP－13mRNA；正常软骨细胞不表达TIMP－1 mRNA,10^-6、10^-8、10^-10、10^-11mol/L雌二醇组及IL－1β 雌二醇10^-12mol/L组表达TIMP－1mRNA。结论：雌激素对关节软骨细胞 金属蛋白酶表达的调控作用随其浓度变化而不同。低于生理浓度的雌激素（10^-12mol/L）对延缓软骨退变较适宜。     

基质金属蛋白酶与骨关节炎

骨关节炎(ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ,ＯＡ)为最常见的关节炎,其病理特点为关节软骨进行性变性和破坏及骨赘形成。多年研究提示ＯＡ与外伤、炎症、衰老、代谢和免疫等因素有关,但确切发病机制至今未明。近年发现,ＯＡ关节软骨细胞外基质合成与降解失衡是造成软骨变性的重要原因之一。其中基质金属蛋白酶(ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ,ＭＭＰｓ)可能起决定性作用。因此,近年来ＭＭＰｓ已成为研究ＯＡ发病机制的一个热点。本文将ＭＭＰｓ的分类、调节机制、生物学作用及其与ＯＡ的关系综述如下。1　ＭＭＰｓ的分类及…     

基质金属蛋白酶与骨关节炎

本文就与骨关节炎关系密切的几种基质金属蛋白酶对关节基质及软骨代谢的影响及其调控机制的研究进展作一综述,以阐明金属蛋白酶 关节炎的病理过程,认识金属蛋白酶在体内的调节过程,其含量的变化对临床有一定的提示作用,而其抑制剂剂的发明也成为今后骨关节炎治疗的方向之一。     

骨关节炎患者血清和滑液中金属蛋白酶-2和-9的研究

目的 探讨金属蛋白酶－2和－9与骨关节炎实验室指标和膝关节X线分级的相关必,以了解两者的骨关节炎发病中的作用。方法 应用酶谱分析法研究血清和滑液中金属蛋白酶－2和－9的活性,同时检查有关实验室指标及膝关节X线。实验对象为39例膝骨关节炎患者,对照组包括类风湿关节炎68例、强直性脊柱炎79例和反应性关节炎39例以及正常人14例。结果 在实验组和各关节炎对照组所有血清及滑液标本中金属蛋白酶－9和－2酶原活性均比正常对照组显著增强,骨关节炎滑液中金属蛋白酶－9酶原活性与其活性形式的活性呈正相关（r=0.656,P=0.038）。金属蛋白酶－2酶原及其活性形式与骨关节炎无相关。结论 金属蛋白酶－9酶原及其活性形式可能是反映关节局部炎症的标志物,与骨关节炎关节软骨破坏有关。     

一氧化氮对骨关节炎滑膜细胞转化生长因子-β表达的影响

目的 了解一氧化氮(NO)对骨关节炎(OA)滑膜细胞转化生长因子(TGF)-β表达的影响.并分析它们之间的相关性.方法 OA患者滑膜细胞培养,收集不同分组[空白组、脂多糖(LPS)组、氨基胍(AG)组、LPS+AG组]的滑膜细胞培养上清液,检测其NO、TGF-β含量并行统计分析.结果 LPS诱导下.滑膜细胞增加NO的表达,而TGF-β表达下调,AG可以抑制NO的表达,提高TGF-β的表达,NO与TGF-β存在负相关.结论 NO抑制OA滑膜细胞TGF-β的表达,TGF-β可能是OA的一种保护因子.     

艾拉莫德对骨关节炎滑膜成纤维样细胞特性的影响

目的观察骨关节炎(OA)滑膜成纤维样细胞(FLS)体外培养时生长、增殖特性,以及艾拉莫德(T-614)对其增殖能力的影响,探讨艾拉莫德的抗炎机制。方法噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪观察OA和滑膜正常者(NS)膝关节滑膜组织体外培养时FLS增殖能力和细胞周期的变化：用反转录-聚合酶链反应测定FLS的c-fos和COX-2表达情况,检测不同浓度T-614作用下FLS的细胞增殖、细胞周期和基因表达。结果OA和NS的FLS在体外培养时的生长活性、分化能力的差异无统计学意义。高剂量T-614对两种FLS的细胞存活分数(SF)的抑制作用差异无统计学意义,但与阴性对照组相比差异有统计学意义(P＜0．05)。OA-FLS中加入1000 ml/L T-614可诱导细胞凋亡并抑制c-fos和COX-2表达,200 ml/L T-614延长G_1期而缩短S期。结论无炎症介质激活时,OA-FLS在体外未表现出高增殖潜能：高剂量的艾拉莫德对OA-FLS的增殖分化及表达有直接抑制作用,并通过此机制对OA滑膜炎进行免疫调节。     

白芍总苷对骨关节炎成纤维样滑膜细胞的影响

目的 观察骨关节炎（OA）成纤维样滑膜细胞（FLS）体外培养时生长增殖特性，以及白芍总苷（TGP）对其增殖能力的影响。探讨白芍总苷的抗炎机制。方法 四甲基偶氮唑蓝（MTF）法和反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法观察OA和正常对照（Ns）膝关节滑膜组织体外培养时FLS增殖能力和c-fos表达情况,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测培养上清中的肿瘤坏死因子（TNF）-α、干扰素（IFN）-γ和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF），用流式细胞仪测定FLS细胞周期的变化。结果 OA和NS的FLS在体外培养时的细胞倍增时间差异无统计学意义。加入高剂量TGP对OA-FLS细胞存活分数（SF）的抑制作用较NS-FLS组更显著（P〈0，05），2000mg／L和400mg／LTGP降低培养液上清中TNF-α和bFGF的水平，升高IFN-γ含量（P〈0．05），并抑制FLS的c-fos mRNA表达（P〈0．05）。OA-FLS细胞周期测定表明加入2000mg／L的TGP可延长G1期而缩短S期，但与不加药对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 高浓度TGP对OA-FLS的增殖能力、细胞因子分泌及原癌基因表达的抑制程度大于对正常滑膜FLS的作用，表明TGP调节FLS增殖特性．有抑制OA滑膜炎的作用。     

骨关节炎患者基质金属蛋白酶和转化生长因子-β的检测及其临床意义

骨关节炎 (ＯＡ)为最常见的关节炎 ,其病理特点为关节软骨进行性变性和破坏及骨赘形成。ＯＡ患者关节软骨细胞外基质合成与降解失衡是造成软骨变性的重要原因之一 ,其中基质金属蛋白酶 (ＭＭＰｓ)可能起决定性作用。转化生长因子 β(ＴＧＦ β)影响软骨代谢的机制与促进金属蛋白酶组织抑制因子表达有关。有研究表明 ,ＴＧＦ β是促进ＯＡ软骨修复的机制之一。我们对临床诊断为骨关节炎的患者进行血清ＭＭＰ 9和ＴＧＦ β的测定 ,并与正常人对照 ,探讨ＭＭＰ 9和ＴＧＦ β的临床意义。对象与方法1.对象 :2 0 0 0年 9月～ 2 0 0 2年 1月我院…     

氨基葡萄糖对体外培养人软骨和滑膜细胞软骨寡聚基质蛋白分泌影响的比较

目的 比较氨基葡萄糖对体外培养软骨和滑膜细胞软骨寡聚基质蛋白(COMP)分泌的影响.方法 软骨细胞和滑膜细胞采自骨关节炎(OA)患者,采用分阶段酶消化法体外培养人软骨细胞和滑膜细胞,给予实验兔以氨基葡萄糖临床等效剂量灌胃后,抽取含药血清培养细胞.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测药物对体外培养的人软骨细胞和滑膜细胞培养上清液中COMP的浓度.结果 体外培养滑膜细胞分泌的COMP浓度[(41.6±0.4)ng/ml]显著高于软骨细胞[(5.5±3.0)ng/ml](19＜0.05).氨基葡萄糖可显著增加体外培养软骨细胞的COMP分泌[(20.3±3.6)与(5.5±3.0)ng/ml,P＜0.05];而对体外培养滑膜细胞的作用较弱,可轻度减少COMP分泌[(36.6±1.3)与(41.6±0.4)ng/ml].结论 氨基葡萄糖含药血清可以促进体外培养软骨细胞分泌COMP,而对体外培养滑膜细胞无明显作用.     

基质金属蛋白酶和氧化应激在大鼠动脉粥样硬化中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶和氧化应激在动脉粥样硬化中的表达。方法利用高脂饮食诱发的大鼠动脉粥样硬化模型(AS组,n=6),与正常饮食大鼠模型(N组,n=6)作对照,用比色法检测外周血清中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,利用Zymography法检测外周血中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达情况,利用免疫组织化学法观察MMP-2及MMP-9在主动脉弓表达情况。结果动脉粥样硬化模型大鼠外周血中MDA、MMP-2、MMP-9表达均高于正常饮食组大鼠[(863.12±42.16)CNN/mm2和(484.92±7.90)CNN/mm2,(367.80±44.68)CNN/mm2和(259.00±42.29)CNN/mm2,(12.88±2.47)mmol/ml和(4.69±0.69)mmol/ml],但SOD则低于正常饮食组大鼠[(71.34±7.06)μN/ml和(168.90±6.85)μN/ml],免疫组织化学法显示MMP-2、MMP-9在主动脉弓内皮细胞及内皮细胞间质中表达,而且AS组表达强于N组。结论动脉粥样硬化形成可能与基质金属蛋白酶异常表达及氧化应激有关。     

血脂康在体外对巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶-2的抑制作用

目的：探讨血脂康的非调脂功能,方法：体外培养的巨噬细胞与血脂康或血脂康加甲羟戊酸（羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶产物）孵育,凝胶酶谱法检测上述细胞培养基中基质金属蛋白酶（matrix metallopro-teinases,MMPs)活性,Western Blot方法鉴定MMPs类型。结果：血脂康在体外抑制巨噬细胞分泌MMP－2的活性,这种抑制作用呈药浓度依赖。结论血脂康在体外抑制巨噬细胞分泌的基质金属蛋白酶－2的活性。     

膜型基质金属蛋白酶-1与肝细胞癌侵袭转移性的关系

目的 探索膜型基质金属蛋白酶－１（ｍｅｍｂｒａｎｅ－ｔｙｐｅ１ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ,ＭＴ１－ＭＭＰ）与肝细胞癌（ＨＣＣ）侵袭转移性的关系及以ＭＴ１－ＭＭＰ来判断肝细胞癌侵袭转移性的可能性和方法。方法 通过ＲＴ－ＰＣＲ对正常肝、ＨＣＣ及其癌旁组织、癌栓组织,裸鼠人肝癌高、低转移模型中的ＭＴ１－ＭＭＰｍＲＮＡ进行半定量研究,并与ＨＣＣ侵龚转移的病理指标进行统计分析,结果 正     

Interleukin-1 beta promotes matrix metalloproteinase expression and cell proliferation in calcific aortic valve stenosis

Calcific aortic valve stenosis (AS), the main heart valve disease in the elderly, is characterized by extensive remodeling of the extracellular matrix. Matrix metalloproteinases (MMPs) are upregulated in calcific AS and might modulate matrix remodeling. The regulatory mechanisms are unclear. As recent studies have suggested that calcific AS might result from an inflammatory process involving leukocyte invasion and activation, the present study aimed to elucidate the role of the pro-inflammatory cytokine interleukin (IL)-1β on MMP expression and cell proliferation in human aortic valves. Immunohistochemistry for leukocytes, IL-1β and MMP-1 was performed on aortic valves with (n=6) and without (n=6) calcification obtained at valve replacement or autopsy. Stenotic valves showed marked leukocyte infiltration and associated expression of IL-1β and MMP-1. In control valves only scattered leukocytes, low staining for MMP-1 and no staining for IL-1β were present. Double-label immunostaining localized IL-1β expression mainly to leukocytes and MMP-1 expression to myofibroblasts. Stimulation of cultured human aortic valve myofibroblasts with IL-1β lead to a time-dependently increased expression of MMP-1 and MMP-2 by Western blotting and zymography, whereas MMP-9 remained unchanged. Cell proliferation was increased by IL-1β as determined by bromodesoxyuridine incorporation. Thus, IL-1β may regulate remodeling of the extracellular matrix in calcific AS.     

复元胶囊对大鼠膝骨关节炎模型软骨细胞凋亡及增殖的影响

目的观察复元胶囊对实验性大鼠膝骨关节炎(OA)模型软骨细胞凋亡及细胞核增殖抗原(PCNA)mRNA表达的影响,探讨其治疗骨关节炎的作用机制。方法 48只雄性SD大鼠随机分成正常组、模型组、壮骨关节丸组、复元胶囊组,每组12只。除正常组外,其余各组采用Hulth法建立膝OA动物模型。4 w后,壮骨关节丸组、复元胶囊组分别给与壮骨关节丸、复元胶囊灌胃,而正常组、模型组给予生理盐水。8 w后,通过肉眼观察、Mankin's评分评价复元胶囊治疗OA疗效,透射电镜、原位末端标记法(TUNEL法)检测软骨细胞凋亡,硝酸还原酶法测定关节液中一氧化氮(NO)水平,RT-PCR法检测PCNA mRNA的表达。结果复元胶囊Mankin评分、软骨细胞凋亡指数及关节液中NO水平均低于模型组(P<0.05),而PCNA mRNA的表达高于模型组(P<0.01)。结论复元胶囊能抑制OA软骨细胞的凋亡,促进软骨细胞PCNA的表达,延缓OA软骨退变过程。     

肝素对大鼠肝星状细胞生长、细胞外基质和基质金属蛋白酶基因表达的影响

目的 探讨肝素对ＨＳＣ生长、细胞外基质和基质金属蛋白酶基因表达的影响。方法 用肝素和不用肝素对活化的ＨＳＣ进行处理,以直接细胞计数和ＢｒｄＵ标记免疫细胞化学染色检测细胞的生长情况。用免疫细胞化学染色和细胞闰核酸分子杂交分别检测Ｉ、Ⅳ型前胶原蛋白、纤连蛋白和Ⅰ、Ⅳ型胶原、纤连蛋白、基质金属蛋白酶－２及膜型基质金属蛋白酶基因的表达,并用酶图法检测基质金属蛋白酶－２的活性。结果 肝素使血清所致的ＨＳＣ生     

兔前交叉韧带切断骨关节炎模型中MMP-1 MMP-13及TIMP-1的mRNA表达研究

目的；研究兔膝关节前交叉韧带切断（ACLT）骨关节炎模型关节软骨及滑膜中基质金属蛋白酶（MMP）－1，MMP－13及组织源性基质金属蛋白酶抑制剂（TIMP）－1在不同造模时期 的表达情况，探讨上述因子在骨关节炎（OA）发病过程中的作用。为该模型作OA防治研究提供理论依据。方法：实验组ACLT模型兔20史，分别于造模4周各处死10只，假手术对照组大白兔10只于术后8周处死。解剖显微镜下行股骨髁关节软骨退变的大体评分，取股骨内髁内侧退变软骨及邻近滑膜，用反转录－多聚酶链反应（RT－PCR）的方法检测MP－1，MMP－13及TIMP－1的mRNA表达。结果：ACLT术后4周即可见软骨退变，8周时退变进一步加重（P＜0．02），对照组无明显软骨退变。对照组软骨及滑膜中MMP－1及TIMP－1的检出率较低，造模4周时检出率明显增高（P＜0．05），部分阳性标本表达量有一定增高，造模8周时MMP－1仍有很高的检出率，表达量持续增高，而TIMP－1检出率较4周时下降；MMP－13在对照组滑膜中没有检测出，造模4周时有一定的检出率，8周时检出率明显增加（P＜0．002），软骨 中对照组MPP－13的表达及表达量都很低，造模4周时表达率明显增高（P＜0．05），8周时表达率却明显下降。结论：MMP－1、MMP－13及TIMP－1在骨关节炎软骨退变过程中起重要作用。其中MMP－1在造模4周和8周都有很高的检出率，且从阳性标本的电泳情况看，其表达量逐渐增高，适合作为OA防治研究中的评价指标。